새로운 방법으로 자유롭게 움직이는 신생아 쥐의 뇌파 기록

여기서는 자유롭게 움직이는 신생아 간질 강아지에게 뇌파 검사 (EEG)를 기록하고 그 절차, 특징 및 적용을 설명하기 위해 고안된 새로운 기술을 소개합니다. 이 방법으로 1 주일 이상 뇌파를 기록 할 수 있습니다.

이 방법의 전반적인 목표는 일주일 이상 안정적인 새로운 전극을 사용하여 자유롭게 움직이는 신생아 새끼의 EEG를 기록하는 것입니다. 이 방법은 신경 과학 분야의 주요 질문에 대한 답을 제공하고 신생아 간질 연구에 도움이 될 것입니다. 이 기술을 사용하면 더 긴 시간 동안 고품질의 안정적인 EEG 신호를 기록할 수 있습니다.

다양한 신경 병리학적 장애의 진단에 도움이 될 것입니다. 일반적으로 이 방법을 처음 접하는 개인은 p8에서 p15의 신생아 쥐는 다루기가 매우 어렵고 세심한 주의가 필요하기 때문에 어려움을 겪을 것입니다. 전극은 통신 장치와의 신호 인터페이스로 기능하기 위해 갈래 접점이 필요합니다.

컴퓨터 핀 lo sai가 이 역할을 채웁니다. 펜치를 사용하여 컴퓨터 핀에서 암수 핀을 조심스럽게 분리하십시오. 그런 다음 암수 핀을 함께 연결하여 전극을 형성하고 시아노아크릴레이트로 연결을 고정합니다.

그러한 전극을 여러 개 만드십시오. 결합이 굳어지면 전극을 증류수를 채운 비커에 10분 동안 넣습니다. 그런 다음 초음파 세척기에 넣어 전극을 청소하십시오.

그런 다음 비커를 섭씨 45도로 설정된 오븐에 옮기고 30분 동안 가열합니다. 마지막으로 30분 UV 노출로 전극을 살균합니다. 생물 안전 후드에 먼저 멸균된 수술 도구와 수술을 위한 멸균된 정위 기구를 설정합니다.

그런 다음 2 포인트 5 퍼센트 이소 플루란을 사용하여 신생아 쥐 새끼를 마취합니다. 강아지가 완전히 마취되면 이소플루란을 1%로 줄입니다. 계속하기 전에 발가락 꼬집음을 사용하여 마우스가 충분히 마취되었는지 확인하십시오.

다음으로, 입체 장치에 강아지의 머리를 고정합니다. 이어바를 외이도에 놓고 바를 부드럽게 조입니다. 주의: 신생아 두개골은 매우 부드럽습니다.

이제 두개골을 15mm 정도 정중선으로 절개합니다. 그런 다음 집게로 두피를 부드럽게 당겨 절개 부위를 넓힙니다. 절개 부위를 열어 두려면 식염수에 적신 솜 한 조각을 사용하십시오.

이제 브레그마와 람다를 찾아 연필로 표시하십시오. 다음 전극 이식 단계는 매우 중요하며 정확하게 실행해야 합니다. 먼저 26게이지 바늘을 사용하여 브레그마에서 2mm 앞쪽, 정중선에서 5mm 이내의 영점 이내에 있는 전전두엽 피질에 버 구멍을 만듭니다.

다음으로, 브레그마에서 8mm 뒤쪽의 한 지점과 정중선에서 5mm 측면의 0점에 해마에 버 구멍을 만듭니다. 바늘은 뇌 손상을 최소화하기 위해 피질 표면 아래 2mm 이상을 관통해서는 안 됩니다. 이제 겸자를 사용하여 참조 전극을 피질 구멍에 삽입하고 기록 전극을 해마 구멍에 삽입합니다.

그런 다음 전극 주위에 에리스로마이신 연고를 바르고 시아노아크릴레이트로 전극을 제자리에 고정합니다. 접착제가 접착되는 동안 끈적하고 점성이 있는 농도로 치과용 시멘트를 준비합니다. 치과 시멘트의 점도는 매우 중요합니다.

치과용 시멘트가 너무 얇으면 전극 아래에 원치 않는 절연층이 형성될 수 있습니다. 시멘트가 너무 조밀하면 과도한 질량으로 인해 전극이 더 쉽게 분리됩니다. 시멘트를 바르기 전에 두개골과 전극을 완전히 말리십시오.

그런 다음 치과 용 시멘트로 전극을 두개골에 고정합니다. 그런 다음 전극에 약간의 피크르산을 바르고 전극에 또 다른 보호막을 추가합니다. 이제, 입체성 프레임에서 동물을 제거하고 10% 포도당 용액 300마이크로리터를 피하에 주입합니다.

그런 다음 동물을 가열된 담요로 옮겨 보행할 수 있을 때까지 섭씨 37도로 유지합니다. 보행이 가능해지면 수술 후 통증을 완화하기 위해 부프레노르핀을 투여하고 강아지를 댐이 있는 집 우리로 옮깁니다. 임플란트를 사용하기 전에 강아지가 회복할 때까지 최소 이틀을 기다리십시오.

회복 기간이 끝나면 강아지가 환경에 익숙해질 수 있도록 약 10분 동안 녹음을 할 수 있도록 강아지를 혼자 수용합니다. 전극을 앰프에 연결하고, 앰프를 컴퓨터에 연결된 AD 컨버터에 연결합니다. 이러한 연결이 엉키지 않도록 주의하십시오.

다음으로, 데이터 수집 장치에서 기록을 위해 최소 10, 000 헤르츠의 샘플링 속도를 선택하고 적절한 데이터 전송을 확인하십시오. 기준선 녹음을 수집합니다. 기준선 기록을 한 후 강아지에게 카이닉산을 복강내 주사하여 간질 발작을 유발합니다.

주사 후 15분 후에 간질 분비물을 관찰하고 기록합니다. 디지털화된 데이터를 저장하고 신호 처리 소프트웨어를 사용하여 분석합니다. 파워 스펙트럼 분석을 사용하여 신생아 EEG에서 다양한 주파수 구성 요소의 파워 레벨을 밝힙니다.

EEG 대역인 1에서 100헤르츠까지의 평균 제곱근 진폭을 찾아 1분 시간대의 전력을 계산합니다. kainic acid 주입 후 10분 후, 반복적인 interictal 및 ictal EEG 배출 패턴이 기록되었습니다. 기록된 가장 흔한 발작은 긴장성 간대성 발작형이었다.

익탈 토닉 지속시간은 약 15초 동안 지속되었다. 또한 긴장제 방전 후에 간대성 폭발이 뒤따르는 것이 관찰되었습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 전극을 이식하고 p8에서 p15 신생아 쥐 새끼까지 고품질 EEG 기록을 얻는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.

일단 소집되면 경추 이식은 수술의 복잡성에 따라 10분 이내에 완료될 수 있습니다.