January 23rd, 2018
행동 테스트 질병 또는 동물의 웰빙에 대 한 치료의 phenotypic 효과 평가 하기 위해 전 임상 시험에 사용 됩니다. 세계적으로 모터 기능 평가, 우리는 일반적인 운동, 근 력, 및 조정에 대 한 테스트를 선택: 오픈 필드 테스트, 메쉬 테스트 및 rotarod 테스트, 각각.
이 행동 테스트 배터리의 전반적인 목표는 생쥐의 일반적인 운동, 근력 및 협응력을 관찰하는 것입니다. 이러한 방법은 생쥐의 운동성에 대한 치료 결과의 이점과 같은 여러 전임상 시험에서 다양한 치료법의 구현에 대한 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 움직임의 여러 측면과 차원이 이 행동 테스트 배터리에 의해 측정되고 평가된다는 것입니다.
이 절차를 시연하는 것은 우리 연구실의 석사 학생인 Meera가 맡을 것입니다. 오픈 필드 테스트 프로그램을 켜고 컴퓨터를 카메라 또는 오픈 필드 박스에 연결하여 시작합니다. Open Field 아이콘에서 선택적 SmartWare 소프트웨어를 시작합니다.
확인을 선택합니다. 해당하는 경우 카메라 옵션에서 디지털 아날로그 변환기 소스를 선택합니다. 지침에 따라 열린 필드 상자를 덮을 수 있는 적절한 치수를 만듭니다.
다음으로, 소프트웨어의 적절한 부분을 보정하여 열린 필드의 범위 내에서 마우스가 감지되고 있는지 확인합니다. 클릭 시간을 사용하여 마우스를 테스트할 시간을 미리 설정합니다. 이 경우 5분을 설정합니다.
클릭하고 파일의 적절한 이름을 작성하여 제목을 입력합니다. 예를 들어, 1단계, 세션 1이 있습니다. 그런 다음 열린 필드 중앙에 마우스를 놓고 시작 아이콘을 클릭하여 프로그램에 녹음을 시작하라는 메시지를 표시합니다.
5분 후 프로그램이 자동으로 다음 주제로 이동하는 것을 관찰합니다. 이 경우 테스트를 완료 한 마우스를 제거하고 다음 피험자를 프로그램의 열린 필드에 놓습니다. 그런 다음 시작을 클릭합니다.
마지막으로 데이터를 분석하려면 화면 오른쪽 상단에 있는 분석 아이콘을 클릭합니다. 분석을 다시 클릭한 다음 요약 보고서를 클릭합니다. 먼저 메시의 중앙에 마우스를 놓습니다.
그리고 투명한 용기 위 20cm 높이에서 메쉬를 뒤집습니다. 반전되면 타이머를 시작합니다. 마우스가 메시에서 떨어지는 대기 시간을 기록합니다.
마우스가 60초 이내에 떨어지지 않으면 60초의 점수를 부여하고 더 이상 시도하지 마십시오. 그런 다음 마우스를 최소 5분 동안 쉬게 합니다. 다음으로 로타로드와 컴퓨터를 켭니다.
그리고 데이터 기록을 위해 제대로 연결되어 있는지 확인하십시오. 가속 프로토콜을 실행하려면 키패드의 코드를 사용하여 로타로드에서 원하는 시간을 300초로, 레인 수를 5로, 시작 및 종료 속도를 각각 분당 4회 및 40회로, 램프 시간을 300초로 설정합니다. 그런 다음 장치를 마우스 앞으로 모드로 설정합니다.
시험을 시작하기 전에 모든 자화 레인이 균형을 이루고 있는지 확인하고 로타로드의 각 레인에 한 개의 마우스를 배치합니다. 그런 다음 시작을 눌러 프로그램을 시작합니다. 쥐가 떨어지면 다른 차선에 걸려 넘어지지 않도록 즉시 차선에서 제거하십시오.
마지막으로, 생쥐를 10분 동안 재판 간 간격 동안 쉬게 합니다. 이 간격 동안 다음 마우스 세트에 대한 시험을 시작합니다. 이 데이터는 처리된 마우스가 정상적인 이형접합 마우스와 비교하여 어떻게 행동하는지 확인하기 위한 수단으로 로타로드를 사용하는 것을 보여줍니다.
40주에 두 그룹의 발산은 정상 대조군에 비해 치료 그룹의 조정력 감소가 시작되었음을 나타냅니다. 월별 행동 테스트를 통해 처리된 마우스는 정상 이형접합 대조군, 개방장 테스트, 로타로드 및 메쉬 테스트와 유사한 성능을 보였습니다. 12주가 되었을 때, 치료된 동물은 개방 필드 테스트에서 시간 이동 시간과 메쉬 테스트에서 떨어지는 대기 시간에서 처리되지 않은 동물보다 성능이 우수합니다.
이 기술을 마스터하면 적절하게 수행되면 2시간 30분 안에 완료하여 프로토콜을 통해 20마리의 마우스를 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 마우스와 케이지 전체에 오염 가능성을 방지하기 위해 각 마우스의 시험 사이에 장치를 청소하는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 이 절차에 따라, 생체내 분포 분석, 효소 활성 분석, 조직학 분석 또는 기억 및 학습 검사와 같은 치료 효율성에 관한 추가 질문에 답하기 위해 추가 행동 및 생화학적 분석과 같은 다른 방법을 수행할 수 있습니다.
개발 후, 이 기술은 심리학 분야의 연구자들과 나중에 신경 과학 분야의 연구자들이 다양한 치료법과 상태가 모델 유기체에 미치는 영향을 탐구할 수 있는 길을 열었습니다. 비디오를 시청한 후에는 일반적인 운동 근력 및 협응력에 대한 행동 테스트를 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 생쥐와 함께 작업하는 것은 위험할 수 있음을 잊지 마십시오., 이 절차를 수행하는 동안 항상 적절한 개인 보호 장비 착용과 같은 예방 조치를 취해야 합니다.
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이 문서는 마우스의 일반적인 이동, 근력 및 조정을 평가하도록 설계된 행동 검사의 배터리에 대해 논의합니다. 이러한 검사는 전임상 시험에서 치료 효과를 평가하는 데 매우 중요합니다.