Name: 조직 학적 분석을위한 돼지 CNS의 노출 : 목 베기, 두개골 열기위한 매뉴얼 및 뇌 제거 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-04-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 38 s
Description: 배우세요 돼지 뇌와 뇌하수체를 완전하게 적출하는 방법을. 두개골과 경막을 개방하여 조직학적 분석을 위한 표본 무결성을 유지하는 기술입니다. 이 방법은 신경과학 연구에 활용됩니다.

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저자는 감사로 부인 트린 W 미켈슨의 숙련 된 지원, 피팅 부인 리자 M. 및 Påskehøjgaard에서 직원을 인정합니다. 덴마크 의학 연구위원회 (Medical Research Council)의 룬드 벡 재단, 그리고 노보 노 디스크 재단은 재정적으로 연구를 지원했다.

동물 마취 및 euthanesia은 (NIH 간행물 번호 86-23, 1985 개정) 동물 연구 윤리에 대한 덴마크위원회의 승인을 &quot;실험 동물 관리의 원칙&quot;에 따라 수행되었다. 1. 악기 <ol><li> 악기 비디오에서 제시 및 재료의 표에 열거를 수집합니다. </li></ol> 2. 목 베기 주 : 마취 미다 졸람 5 ㎖ (5 ㎎ / ㎖) 및 5 mL의 케타민 (25 ㎎ / ㎖)의 근육 내 주사에 의해 유도 하였다. 동물을 깊게 마취 때 50-10 분 후에, 귀 정맥 삽관시키고, 나트륨 펜토 바르 비탈의 과량 치사 (체중 100 밀리그램 / kg)을 (200 ㎎ / ㎖)을 정맥 받았다. Ettrup 등에 의해 도시 된 바와 같이, 동물은 안락사 완전히 것을 보장하기 위해, 인터 통증 플렉스 시험 하였다. (2011) 20. 에 설명 된대로 전체 euthanization 확보했다Ettrup 등에 의해 입증 된 바와 같이하고, 등장 식염수 5 L와 transcardial 관류 하였다 위에 윤리 문. (2011) 20. 모든 입증 절차는 장기 마취 및 postprocedural 생존에 필요한 복지주의가 필요하지 않습니다, 사후을 수행한다. <ol><li> 다만 하악 각도 (도 1a) 아래 수술 메스를 사용하여, 높은 원형 자궁 절개하여 돼지 참살. </li><li> 뼈 척추가 약 craniocervical 접합의 수준에 도달 할 때까지 아직도 수술 메스, 후두 및 식도를 포함한 목의 부드러운 조직을 통해 전방 절개를 계속합니다. </li><li> (아틀라스 전치부 호 위의 craniocervical 접합의 전방 측으로부터 외과 용 메스로 절단을 향상하고, 전방 atlantooccipital 막을 통해하여 척추관 척수 노출그림 1B). 동시에 두개골베이스와 첫 번째 경추 사이의 접근을 용이하게하기 위해 돼지 머리에서 멀리 돼지 몸을 끌어 보조를 부탁드립니다. </li><li> 경막 주머니와 척수 (그림 1B)를 통해 수술 절개를 계속합니다. 척수의 전체 횡단면이 달성 될 수 있도록 특별한주의하십시오. 참고 : 잘린 프로세스의 다음 단계 동안 척수와 뇌에 불필요한 마찰이 발생할 수 있습니다 이전 단계를 수행하지 않으면. </li><li> 강제 섹션 레벨 (도 1C)에 접합 cranocervical 연장. 동시에, 후두부 관절 구 및 아틀라스의 상부 명료 프로세스 사이의 관절을 해제 섹션에 나머지 atlantooccipital 인대 외과 용 메스를 사용한다. 몸에서 돼지 머리를 분리합니다. </li></ol><img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/55511/55511fig1.jpg" style="font-size: 14px;" /> 그림 1 : 미니 피그의 참수. (A) 목 절개 (화살표 하악 각도). (; OC, 후두부 외과 C1, 아틀라스 전치부 호)에 atlantooccipital 인대 및 craniocervical 접합부 경질 둘러싸인 척수 (SC) 내지 (B) 절개. (C)가 atlantooccipital 관절의 후방 부분은 부 수준에서 강력한 확장 (화살표)에 의해 방출된다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55511/55511fig1large.jpg" style="font-size: 14px;" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 3. 해골 열기 <ol><li> 테이블에 돼지 머리를 놓습니다. </li><li> 의 후방 부분을 통해 피부와 머리의 정점에 걸쳐 주둥이의 뒷면에서 기본 부드러운 조직을 통해 수술 메스와 지느러미 세로 절개를, 아래로후두부. </li><li> 외과 용 메스 절개 초기에 측 방향 위치 연조직을 제거하여 두개골의 등쪽과 후방 부분을 노출시킨다. </li><li> 외과 용 메스와 두개골 (도 2A)로부터 임시 좌우 근육을 해제. 후방 뒤통수 뼈는 연부 조직의 청소되어 있는지 확인합니다. </li><li> Kerrison 뼈와 뼈 rongeurs 펀치와 후두부 뼈를 분리하고 경질 피복 소뇌 (도 2b)를 노출시키는 난원 매그넘의 후방 입구를 사용한다. </li><li> 바로 눈 앞에서, 두개골의 노출 전방 측에 돌아가서 정면 뼈의 엔트리 포인트를 선택합니다. 이 시점에서, 두개골을 관통하고 전두엽 부비동 (그림 2C)을 입력 망치로 뼈 조각도를 사용합니다. </li><li> 뼈 또는 뼈 rongeur 펀치 외 두개골 박판 dorsoposterior의 제거를 촉진 할 전두동의 범위를 사용하고, 내부 얇은 노출대뇌 (도 2D)를 덮는 박판 두개골 뼈. </li><li> 부드럽게 경질 피복 뇌 (도 2E)을 노출시키는 해머와 뼈 조각도와 전방 내부 뼈 두개골 박판을 연다. </li><li> 횡 경질 피복 대뇌 및 소뇌 (도 2F)에 이미 노출 된 부분 사이에 두개골의 최종 dorsoposterior 부분을 분리하기 위해 시간적 마루 뼈 통해 뼈 정 및 뼈 rongeur을 사용하여 골 삭제를 계속한다. 참고 :이 절차의 마지막 단계에서, 가능한 한 자주 하나가 문을 열어처럼 한쪽에서 열린 남아있는 후방 두개골 뼈를 파괴하기 위해 끌을 사용합니다. </li></ol><img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/55511/55511fig2.jpg" style="opacity: 0.9; font-size: 14px;" /> 도 2 : 미니 피그 두개골 개구. (A)가 노출되는 dorsoposterio후두 시간적 근육의 제거를 포함하여 R 두개골 표면. 후두골의 (B)를 제거 (CB, 경질 피복 소뇌, OB, 후두골, OC, 후두부 외과 및 SC 척수). (C) 망치 뼈 치즐 전방 두개골을 관통하고 눈의 수준에서 전두동를 입력하기 위해 사용된다. (D) 전방 공동 (FS)의 정도는 내부 얇은 뼈 박판 (2) 뇌를 덮는 노출 (1) 외측 두꺼운 두개골 뼈를 제거하기 위해 사용된다. 경질 피복 대뇌 (화살표)을 노출 얇은 뼈의 박판 (E) 제거. (F)는 마지막으로, 망치와 뼈 시추 좌우 전방 및 후방 두개골 개구를 연결하는 데 사용된다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55511/55511fig2large.jpg" style="font-size: 14px;" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 4. 뇌 Remov알 <ol><li> 경질을 들어 올려 미세 수술 메스 (그림 3A)를 사용하여 정맥 우수한 시상 동에 부드러운 절개 가까이를 만드는 수술 집게를 사용합니다. </li><li> 상기 뇌의 등쪽 표면을 덮는 경질를 열고 마이크로 가위 또는 경질 칼을 사용한다. 참고 : 소뇌 tentorium (그림 3B)에 해당하는 경질을 제거 할 때 특별한주의가 이후의 뇌 제거를 방지 할이 경막 잎의 보존으로,주의해야합니다. </li><li> 돼지 머리를 수직으로 (그림 3C)를 배치합니다. </li><li> 뇌 캐비티 (도 3d)의 경질 피복 층에서 후각 망울의 무딘 절개하여 대뇌 ventroanterior를 해제 뼈 정 또는 해부학자 사용. </li><li> 섹션에 노출 광학 chiasm (그림 3E)을 미세 수술 메스를 사용합니다. 뇌하수체 줄기와 안구 운동 신경을 노출하고 섹션을 참조하십시오. </li><li> 소호을 절편하여 복부 뇌간을 해제미세 수술 메스와 WER 뇌신경 (그림 3 층). 경막 소뇌 tentorium 완전히 (그림 3B) 절개 것을이 경막 잎 그렇지 않으면 해제 과정에서 뇌간을 통해 절단하므로, 확인합니다. </li></ol><img alt="그림 3" src="/files/ftp_upload/55511/55511fig3.jpg" style="font-size: 14px;" /> 그림 3 : 미니 피그 뇌 제거. 수술 집게와 경막 칼 (A) 경막 개방. (B) 관리는 완전히 대뇌 및 소뇌 사이에 경막 리프 (화살표), 절개주의해야한다. (C) 돼지 머리 두개골베이스 구조 나은 시각화 중력 뇌의 의도 용량을 지원하기 위해서는 수직으로 배치된다. (D)는 해부학자 또는 뼈 속이다은 경질 커버 ③에서 평활 수단에 의해 후각 망울을 완화하는 데 사용D 두개골베이스. (E)을 박리는 광학 chiasm (화살표), 줄기 누 두부 및 안구 운동 신경의 노출 단면에 대한 두개골베이스를 따라 후방 방향으로 계속된다. 그들은 뇌간의 복부 표면으로부터 출발로 (F) 뇌 릴리스 하부 뇌신경의 단면 완성된다 (, IV, 활차 신경, III, 눈 돌림 신경 V, 삼차 신경 및 VI를 외전 신경). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55511/55511fig3large.jpg" style="font-size: 14px;" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> 5. 뇌하수체 제거 <ol><li> 뇌하수체 줄기 두개골 층 (도 4a)의 주변 경막 잎합니다 (diapragma의 sellae)를 식별. </li><li> 미세 수술 용 메스 (도 4b)을 이용하여 뇌하수체 스토킹 경막 리프 횡 절개. </li><li> 구덩이를 해제하는 해부학자를 사용하여uitary 및 뇌하수체 포사 (그림 4C)에서 들어 올립니다. </li></ol><img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/55511/55511fig4.jpg" style="opacity: 0.9; font-size: 14px;" /> 그림 4 : 미니 피그의 뇌하수체 제거. (A) 뇌하수체 포사 (*)는 두개골 바닥에서 식별된다 (1, 후각 망울 2, 광학 chiasm 및 PF, 사후 뇌 포사 참조). (B) 경막 커버 (sellar diagphragm (화살표)) 측 방향으로 절개되어있다. (C)이 뇌하수체 (화살표)는 해부학자로 방출되어 뇌하수체 포사 밖으로 들어 올려진다. 스케일 바 (AC)는 10mm를 =. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55511/55511fig4large.jpg" style="font-size: 14px;" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

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<li>Bjarkam, C. R., Sørensen, J. C., Geneser, F. A. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/12625454">Distribution and morphology of serotonin-immunoreactive axons in the hippocampal region of the New Zealand white rabbit. I. Area dentata and hippocampus proper.</a> Hippocampus. 13 (1), 21-37 (2003).</li>
<li>Bjarkam, C. R., Glud, A. N., Orlowski, D., Sørensen, J. C., Palomero-Gallagher, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+telencephalon+of+the+minipig%2C+cytoarchitecture+and+cortical+surface+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Struct+Funct%22%5BJournal%5D)">The telencephalon of the minipig, cytoarchitecture and cortical surface anatomy.</a> Brain Struct Funct. , e-pub ahead of print (2016).</li>
<li>Boltze, J., Nitzsche, B., Geiger, K. D., Schoon, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathological+investigation+of+different+MCAO+modalities+and+impact+of+autologous+bone+marrow+mononuclear+cell+administration+in+an+ovine+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Stroke+Res%22%5BJournal%5D)">Histopathological investigation of different MCAO modalities and impact of autologous bone marrow mononuclear cell administration in an ovine stroke model.</a> Transl Stroke Res. 2, 279-293 (2011).</li>
<li>Jortner, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+return+of+the+dark+neuron.+A+histological+artifact+complicating+contemporary+neurotoxicologic+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicology%22%5BJournal%5D)">The return of the dark neuron. A histological artifact complicating contemporary neurotoxicologic evaluation.</a> Neurotoxicology. 27, 628-634 (2006).</li>
</ol>

저자가 공개하는 게 없다.

대부분의 실험 연구는 신경 같은 CNS에 대한 액세스가 얇은 skull- 및 경막의 두께에 의해 용이하게 마우스 및 래트와 같은 작은 동물 종에서 수행된다. 그러나, 돼지 1, 4, 8, 양 (32) 및 비 - 인간 영장류와 같은 큰 실험 동물에서 이러한 구조의 상당한 두께 두개골 뼈 제거를위한 강력한 도구 (재료의 테이블) 적절한 엔트리 포인트 (도면의 사용을 필요 2). 중추 신경계에 액세스 할 수 있습니다 전에 경막 잎 (그림 3과 4) 제한에 대한 지식이 필요하며 뇌를 안전하게 제거. 이 손상 기본 뇌를 보호하므로 두개골 뼈 제거하는 동안 그...

<html> 돼지 번역 상 신경 과학 연구는 지난 20 년 동안 점점 더 인기를 끌고있다. 돼지 뇌의 크기가 커서 기존의 임상 뇌 이미 저들과 직접 사용하여 인간 임상 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8에서 신경 외과 절차 및 장비 테스트의 사용을 가능하게한다. 지난 20 년 동안, 돼지, 특히 minipigs (예를 들어, 괴팅겐 미니 피그) 등 줄기 세포 이식과 같은 neuromodulatory 치료 방법을 검사하는 데 사용되었다; 바이러스 벡터 형질; 파킨슨 질환, 비만, 우울증, 알츠하이머 병 2, 6 향하는 깊은 뇌 자극,= &quot;외부 참조&quot;&gt; 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17. 이는 미니 피그 CNS 3, 18, 19, 20, 21을 조작 정위 수술 방법을 개발 하였다되었다. 제정 CNS의 변경 (PET 10, 13, 22, 24, 23 MR), 방광 내압 11, 12, 25 뇌 영상을 이용하여 살아있는 동물에서 평가되어, 보행 분석17, 신경 평가 9, 17, 및 조직학 분석 stereological 14, 15, 17, 26, 27, 31에 기초하여 사후 검사. 그러나 사후 분석은 두께, 뼈 두개골과 돼지 뇌를 둘러싸고 취재 섬유 경막로 노출 쉬운 일이 아니다 돼지 두뇌의 제거가 필요합니다. 이 종이와 교육 비디오의 목표는 사후 돼지 뇌와 뇌하수체 비 전동 수술 도구를 사용하여 15 ~ 20 분에 온전한 상태로 노출을 제거 할 수있는 방법을 설명하는 것입니다. 미니 피그 뇌하수체에 대한 해부학 적 연구에 사용 된 교육 비디오 및 사진 그림은 남성 minipigs (20-25kg : : 6 개월, 체중 세)를 보여줍니다.

<table><tbody><tr><td>무거운 메스 핸들 #4</td><td>FST (Fine Science Tools)</td><td>10008-13</td><td>피부 절개 및 연조직 제거에 좋음</td></tr><tr><td>비멸균 메스 블레이드 #23</td><td>FST&nbsp;</td><td>10023-00</td><td></td></tr><tr><td>메스 핸들 #7</td><td>FST&nbsp;</td><td>10007-12</td><td>경막 절개 및 정밀 작업에 최적</td></tr><tr><td>비멸균 메스 블레이드 #11</td><td>FST&nbsp;</td><td>10011-00</td><td></td></tr><tr><td>수술용 집게</td><td>FST&nbsp;</td><td>11024-18</td><td>수술용 집게의 끝은 단단한 그립을 보장합니다&nbsp;</td></tr><tr><td>Kerrison Bone Punch</td><td>Aesculap Neurosurgery</td><td>FF713R</td><td>은 견고해야 하며, 물린 크기는 3-5mm</td></tr><tr><td>입니다. Bone Rongeur</td><td>Aesculap Neurosurgery</td><td>MD615</td>는 <td>튼튼해야 하며, 물린 크기는 15 x 5mm</td></tr><tr><td>입니다. Bone Rongeur</td><td>Aesculap Neurosurgery</td><td>FO551R</td><td>은 튼튼해야 하며, 물린 크기는 25 x 15mm입니다.</td></tr><tr><td>뼈 끌</td><td>Lawton</td><td>67-0335</td><td>끌 머리의 크기는 20 mm를 초과해서는 안됩니다</td></tr><tr><td>. 망치 (망치)</td><td>Millarco</td><td>5624108</td><td>Weigth 300 g, 길이 30 cm, 머리 히트 영역 크기 2 x 2 cm</td></tr><tr><td>Micro-Scissor</td><td>FST&nbsp;</td><td>14002-14&nbsp; &nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>해부</td><td>Aesculap 신경외과</td><td>OL165R</td><td></td></tr><tr><td>G&ouml; ttingen minipigs</td><td>Ellegaard G&ouml; ttingen Minipigs A/S, 덴마크</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Euthanimal</td><td></td><td></td><td>펜토바르비탈</td></tr><tr><td>케타민</td><td>화이자</td><td></td><td></td></tr><tr><td>미다졸람&nbsp;</td><td>하멜른 제약</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

조직 학적 분석을위한 돼지 cns의 노출 : 목 베기, 두개골 열기위한 매뉴얼 및 뇌 제거

Exposure of the Pig CNS for Histological Analysis: A Manual for Decapitation, Skull Opening, and Brain Removal

돼지는 인간이 아닌 영장류에 대한 경제적, 윤리적으로 가능한 대안으로 대형 동물 번역의 신경 과학 연구에 점점 더 인기를 끌고있다. 돼지의 큰 뇌의 크기는 기존의 임상 뇌 이미 저와 인간의 병원에서 직접 사용 및 신경 외과 절차 및 장비의 테스트를 사용할 수 있습니다. 또한, 육안 및 조직 학적 분석은, 그러나, 돼지 중추 신경계 (CNS) 및 후속 뇌 제거 사후 노광을 필요로한다. 이것은 CNS는 두께, 뼈 두개골과 척추에 의해 캡슐화 된 돼지로 쉬운 일이 아니다. 이 종이와 교육 비디오의 목표는 노출과 사후 돼지 뇌와 이후의 거시 조직 학적 분석에 적합한 손상 상태에서 뇌하수체를 제거하는 방법을 설명하는 것입니다.

마르지 티슈 재료를 방지하기 위해,이 고정 제 또는 거시적 분석이 수행 된 직후에 등장 성 식염수로 채워진 병의 뇌 및 뇌하수체 제거를 저장하도록 권고한다. 조직 재료는, 등장 성 식염수에 보관 반면 년 동안 정착에 저장 될 수있다, 심지어 냉장고에, 시간과 함께 조직의 붕괴로 이어질 것입니다. 본래 돼지 뇌 직접 동결 28 너무 큰 반면 제거는 뇌하수체 직접 드라이 아이스 냉각 액체 -2- 메틸 부탄에 침지하여 고정 될 수있다. 대신, 이전 토토 동결 및 40 μm의 두께 섹션 5, 18에 저온 유지가-구분 될 수있다 9~15mm 두께의 병렬 관상 조직 석판에 28...

이 종이와 교육 비디오의 목표는 노출 이후 거시 및 조직 학적 분석에 적합한 손상 상태에 돼지 뇌와 뇌하수체 부검을 제거하는 방법을 설명하는 것입니다.

조직 학적 분석을위한 돼지 CNS의 노출 : 목 베기, 두개골 열기위한 매뉴얼 및 뇌 제거

Pigs have become increasingly popular in large-animal translational neuroscience research as an economically and ethically feasible substitute to ...

본 영상에서는 두개골과 경막을 절개하여 손상되지 않은 돼지 뇌와 뇌하수체를 노출시키고 적출하는 방법을 제시합니다. 윤리 성명: 동물 마취 및 안락사는 "실험 동물 관리 원칙"에 따라 수행되었으며, 덴마크 동물 연구 윤리 위원회의 승인을 받았습니다. 수컷 괴팅겐 미니피그의 마취는 미다졸람과 케타민의 근육 내 주사를 통해 유도되었습니다.5분에서 10분 후, 동물이 깊게 진정되면 귀 정맥에 캐뉼라를 삽입하고 치사량의 sodium pentobarbital을 정맥 주입하였다. 동물이 완전히 안락사되었는지 확인하기 위해, 이전에 제시된 방법대로 지간 통증 반사를 테스트하였다. 적절한 안락사 후, 동물들을 5L의 등장성 식염수로 경심장 관류하였다.따라서 시연된 모든 절차는 사후에 수행되었으며, 장기 마취 및 시술 후 생존에 필요한 복지 예방 조치는 제외되었습니다. 사용 기구: 4번 중량 메스 손잡이 및 23번 비멸균 메스 날.피부 절개 및 연조직 제거에 적합합니다. 7번 메스 핸들과 비멸균 11번 메스 날을 사용합니다. 경막 절개 및 정밀 작업에 최적입니다.단단한 고정을 보장하는 바이트가 있는 외과용 포셉. KAIRison 골 펀치. 바이트 크기가 3~5 mm이며 내구성이 뛰어나야 합니다.골 론저(Bone rongeur). 정밀한 골 작업을 위해 튼튼해야 하며 절단 크기가 약 5~15mm여야 합니다. 더 큰 크기의 골 론저.더 두꺼운 뼈 조각을 제거하기 위해 약 25 x 15 mm 정도의 절단 크기를 가진 골끌(Bone chisel)을 사용합니다. 헤드 크기는 20 mm를 초과하지 않아야 합니다.골 치즐(bone chisel)에 적합한 망치. 끝이 날카로운 미세 가위. 박리 도구(Dissector). 참수. 하악각 바로 아래에서 높은 원형 경부 절개를 통해 돼지의 머리를 분리합니다.목의 연부 조직을 통해 절개를 계속합니다. 뼈와 척주에 도달할 때까지 후두와 식도를 절단하십시오. 대략 두개-경추 접합부 높이까지 절개합니다.두개-경추 접합부의 전면에서 시작하여 전 환축후두막을 통해 절개를 진행합니다. 이를 통해 척수가 노출됩니다. 동시에 조수가 돼지의 몸통을 머리 반대 방향으로 당겨주면, 두개저와 제1경추 사이의 접근이 용이해집니다.두개-경추 접합부를 강하게 신전시켜 참수를 완료하기 전에, 척수가 완전히 절단되었는지 확인하십시오. 두개골 개방. 피부와 그 아래의 연조직을 따라 등쪽으로 종단 절개를 실시합니다.주둥이 뒷부분부터 머리의 정수리를 지나 후두부의 뒷부분까지 절개합니다. 초기 절개선 외측에 위치한 연부 조직을 제거하여 두개골의 등쪽과 뒷부분을 노출시킵니다. 측두근을 두개골에서 분리합니다.후두골 후면의 연조직을 제거하여 깨끗하게 합니다. 대후두공의 후방 지점을 이용하여 후두골을 제거함으로써 경막으로 덮인 소뇌를 노출시킵니다. 두개골의 전면으로 돌아와 눈 바로 앞쪽의 전두골에서 진입 지점을 선택합니다.이 단계에서 골치즐(bone chisel)을 사용하여 두개골을 관통하고 전두동(frontal sinus)으로 진입합니다. 전두동의 범위를 이용하여 나머지 두개골 층을 추가로 제거합니다. 그러면 대뇌를 덮고 있는 얇은 내측 두개골 층이 드러납니다.이 층판을 조심스럽게 열어 뇌의 전면부를 덮고 있는 경막을 노출시킵니다. 측두골과 두정골을 통해 외측으로 골 제거를 계속합니다. 이미 노출된 대뇌와 소뇌 사이의 두개골 마지막 부분을 제거하십시오.정과를 사용하여 문을 열 듯 한쪽 방향에서 남은 후두골을 깨뜨려 엽니다. 뇌를 제거합니다. 시상정맥동 근처를 조심스럽게 절개하기 위해 경막을 들어 올립니다.경막 절개 도구를 사용하여 뇌를 덮고 있는 경막낭을 추가로 제거합니다. 대뇌와 소뇌 사이에 위치한 경막을 제거할 때는 특히 주의해야 합니다. 이 경막 엽이 보존되어야 이후의 뇌 제거 과정을 방지할 수 있기 때문입니다.마지막으로, 소뇌와 하부 뇌줄기를 덮고 있는 경막을 절개합니다. 돼지 머리를 수직으로 위치시키고, 후각구와 경막으로 덮인 두개골 기저부를 둔성 박리하여 대뇌를 분리합니다. 노출된 시신경교차를 절개합니다.이어서 뇌하수체 경(pituitary stalk)과 동안신경(oculomotor nerves)을 노출시킨 후 절단합니다. 하부 뇌신경들을 절단하여 뇌줄기를 분리합니다. 치슬을 사용하여 두개저로부터 뇌를 분리합니다.뇌하수체 제거. 두개저에서 주변 경막 엽과 함께 뇌하수체 줄기를 확인합니다. 뇌하수체 줄기의 외측 경막 엽을 절개합니다.디섹터(dissector)를 사용하여 뇌하수체를 분리하고, 뇌하수체窩(pituitary fossa)에서 들어 올립니다. 결과 및 결론. 설명된 기술을 통해 사후 돼지의 뇌와 뇌하수체를 약 15분에서 20분 내에 안전하게 제거할 수 있습니다.얻어진 조직은 현미경 분석을 거친 후, 더 작은 뇌 슬랩으로 방향을 맞추어 절단할 수 있습니다. 이러한 슬랩은 화학적 분석이나 추가적인 조직학적 처리에 적합합니다.

exposure-pig-cns-for-histological-analysis-manual-for-decapitation

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