Name: 콜드 통각에 대한 소설 분석 초파리 애벌레 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-04-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 52 s
Description: 학습하세요 Drosophila 애벌레를 이용한 냉각 통각 분석 방법입니다. Peltier 프로브로 정밀한 냉 자극을 가하고 행동 반응을 정량화하여 통각 유전자와 분자 메커니즘을 연구할 수 있습니다.

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우리는 비판적 원고를 읽기 위해 차가운 프로브 분석, 플라이 주식에 대한 블루밍턴 초파리 증권 센터 및 Galko 실험실 구성원의 초기 단계 개발을위한 사라 우 및 카밀 그레이엄합니다. 이 작품은 NIH NRSA HNT에 (NIH F31NS083306)에 의해 NIH R01NS069828, R21NS087360 및 MJG에 대한 기초 연구에서 텍사스 MD 앤더슨 클라크 원정대의 대학에 의해 지원되었다.

애벌레의 제조 1 <ol><li> 25 ºC 배양기에서 주식이나 유전 십자가를 올립니다. <ol><li> 십자가를 배양하는 경우, 20 ~ 25 명 처녀 여성과 일반 옥수수 가루 플라이 미디어를 포함하는 바이알 당 15 ~ 20 명의 남성을 사용합니다. 여성은 음식의 새로운 유리 병에 전송하기 전에 약 48 시간 동안 알을 낳기 할 수 있습니다. </li></ol></li><li> 4-5 일 분 계란 바닥 후, 부드럽게 약해서 식품 및 유충에 물 스트림을 분출하여 원하는 유전자형 3 차 령 유충을 수집하고, 중소 깨끗한 페트리 접시에 내용물을 부어 (60mm X 15 mm). </li><li> 다음 부드럽게 테스트되는 큰 &quot;방황 3 차 령&quot;또는 작은 병약 유충 크기 배제하여 집게 나 붓 유충 정렬. 원하지 않는 유전자 마커 또는 분산을 포함 폐기 유충. </li><li> 실험자 전에 &quot;블라인드&quot;가 될 수 있도록 분류 유충이 배치됩니다 동료 실험실 구성원 레이블 요리 또는 용기를 가지고perimental 조건 또는 해당되는 경우 유충의 유전자형. 실험자들은 실험실 부재에 의해 생성 된 키를 이용하여 상기 실험 후 수집 된 데이터를 복호화하여 라벨을 적용 할 수있다. </li><li> scoopula를 사용하여 (35mm X 10mm 또는 60mm X 15mm)을 실온에서 물과 깨끗한 라벨 페트리 접시 가득 반쯤로 신선 식품의 다임 크기 양 옮긴다. </li><li> 집게 또는 붓을 사용하여 조심스럽게 음식에 정렬 된 유충을 이동 (시험이 20 분을 예상하는 경우 기아 또는 탈수를 방지하기 위해). </li></ol> 2. 콜드 프로브 분석 <ol><li> 이 원하는 온도로 냉각 할 수있는 몇 분을 허용 차가운 프로브 유닛을 켭니다. 낮은 온도로 설정하는 경우, 결로 가능성이 프로브를 따라 형성됩니다. </li><li> 실험실로 초과 수분을 닦아은 유충에 적용하기 전에 닦아주십시오. 즉시 사용, 장소는 모두 보온에 프로브에 뚜껑을 절연하고 깨끗한 팁을 유지하고 손상을 방지하기 위해하지 않는 경우. </li><li> 어두운 가동 비닐의 박편 상으로 중간의 제 3 령 유충을 배치 명 시야 현미경 (일반적으로, 노트북 바인더로부터 절단 작은 조각을 사용). 콘트라스트 시각화하고, 프로브와 올바르게 정렬 건드리지 않고 유충을 이동시키는 검은 비닐 AIDS. </li><li> 대비를 너무 빨리 건조되는 유충을 방지하기 위해 현미경 (자재 표 참조)과 중간 휘도 (50-75 %의 최대 휘도)로 광 유닛 (자재 표 참조)를 조정한다. </li><li> 그들은 결과를 혼동 수 있기 때문에 첫 정상 연동 운동을 나타내지 않는 유충을 폐기하십시오. 물을 페트리 접시 달리 유충 정상적인 운동을 억제 비닐로 버티로부터 유충 습윤되어야한다. 물은 유충의 주위에 웅덩이 안된다. </li><li> 고전으로 유충을 이동 비닐을 사용하여, 전후 몸통 축에 90도 각도로 충 향해 손에 프로브를 사전RECT 위치 (도 1A 참조). </li><li> 동양은 프로브의 팁은 부드럽게 프로브 현미경 단계에 약 45도 각도 유충의 중간 지느러미 표면을 가로 질러 누워있다. </li><li> 프로브 접촉시, 실험실 타이머를 시작합니다. 계속 전진 또는 후진시키면서 약간 애벌레 표피의 표면을 들여 충분한 하향 압력을 적용한다. </li><li> 최대 10 초 동안 또는 냉간 유발 행동 반응이 관찰 될 때까지 자리에 프로브를 잡고 - 둘 중 먼저 발생. 그런 다음 프로브를 제거합니다. </li><li> 관찰 된 행동 응답 및 응답 대기 시간을 기록합니다. 10 초 내에 응답하지 않는 애벌레는 &quot;비 반응자&quot;로 간주됩니다. 지연은 또한 대응 대해 응답 내성 / 진폭의 변화를 측정하는데 사용될 수있다. </li><li> 유충을 취소하고 다음을 준비합니다. </li><li> 시험 유충의 원하는 개수 (N 3 개 세트에 도달 할 때까지 반복 단계 2.3-2.11 = 20-40 유충 U이었다) 여기에 나오지도. </li></ol>

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</ol>

미국 특허 출원 (CL)은 차가운 프로브의 설계에 보류 중입니다. 차가운 프로브 부품 번호 및 건설의 세부 사항에 대한 추가 정보와 도구 디자인에 대한 자세한 상담은 요청에 따라 제공됩니다.

여기에 설명 된 분석은 정 성적 및 정량적으로 여러 유전 배경, 환경 적 영향들, 및 / 또는 손상을 유도 조건에서 통각 유충 또는 통각 과민을 평가하는데 사용될 수있다. 이 분석은이 도구 냉 자극의 초점 응용이 가능하기 때문에 하나의 특히 저온에 응답 말초 감각 뉴런의 서브셋의 기능을 평가할 수있다. 흥미롭게도,이 추위 유발 행동은 열 (7), (11)에 의해 활성화보다 감각 뉴런의 다른 클래스를 활용하는 것,하지만 전체 열 통각 회로는 아직 완전히 이해되지 않습니다. 다른 많은 지역의 침해 분석과 마찬가지로이 분석은 추위 프로브의 응용 프로그램에 따라 사용자 사이에 약간의 변화에 ​​따라 달라질 수 있습니다. 그러나, (머리와 꼬리를 피할 수) 중반 몸에 감기 프로브의 특정 위치는 significa이 표시되지 않습니다차가운 반응 7 NT에 미치는 영향. 연습과 ...

초파리는 새로운 보존 유전자와 복잡한 행동을 기초 신경 회로의 식별을위한 매우 유용한 것으로 입증되었습니다. 파리 정교한 유전 툴킷 통각 5, 6, 7의 세포 및 분자 염기 해부 정확한 유전 적 신경 조작 1,2,3,4 허용 간략화 신경계를 제공한다. 유충 부드러운 촉감 8, 9, 10, 유해한 열 11, 12, 13 및 유해 자극 (4)의 기계적 감각에 대한 행동 분석 주어진 이러한 분석에 특히 유용 </sup&gt; 11은 이미 설립 투명 유충 표피는 표피와 하부 감각 뉴런의 라이브 영상 또는 고정을 허용하고있다. 최근 유해 감기위한 분석은 또한 우리는 여기에서 더 상세히 설명 7 개발되었다. 벌금, 원뿔 스쳐 차가운 프로브를 사용하여, 우리는 표시하거나 거친 기계적 또는 고온 자극 (7), (8) 후, 11 초파리 애벌레 전시 부드러운 터치 다음 정상 운동 동안 관찰 행동, 구별 차가운 별 반응 일련의 행동, 그 . 차가운 특정 행동은 강력한 전신 수축 (CT), U 자형 (미국)에 후방 세그먼트 (PR) 및 전방의 동시 인상 및 후방 세그먼트의 45-90º 인상을 포함한다. 이러한 행동의 유병률은 감소 온도 만의 각 피크 증가살짝 다른 추운 온도. 최근 연구는 CT의 응답이 유해 열이나 강한 기계적 자극 (7)에 응답 것보다 다른 주변 감각 신경에 의해 매개되는 것을 의미한다. 많은 척추 통각 수용기 같은 초파리 다수의 돌기 (MD) 말초 감각 신경 세포는 표피 (1) 위에 arborize 수지상 복합 구조를 갖는다. MD 뉴런 복부 신경 코드 (14)에 자신의 축삭을 투영 모든 유충 바디 부분에 존재한다. MD 감각 신경 돌기의 형태에 기초하여 네 개의 서로 다른 클래스 (I-IV)로 분리하고, 감각 기능 4, 9, 10, 15, 16, 17을 변화 하였다. 클래스 IV 뉴런은 유충 횡 체 롤 응답 요구되지만고온 또는 열악한 기계적 자극 4 클래스 III 뉴런 부드러운 터치 응답 (9), (10)에 필요한 단지 초기 활성화되지 않고, 또한 냉간 유발 행동 반응 (7)에 요구한다. 모두 클래스 III 및 IV 클래스 신경 자극 9, 10, 17, 19 7, 11, 18, 유해하고 비에 유해한 행동 반응을 촉진하기 위해 이산 일시적 수용체 전위 (TRP) 채널을 사용한다. 또한, 애벌레 통각은 20 세포 및 행동 수준 12, 21, 다음과 같은 부상을 민감합니다. 여기에 설명 된 분석은 허용 quantificatio보통, 하나의 잠재적 인 N은 상온 (18-22 ºC)에 유해 냉기 (10 ≤ ºC)까지 저온, 무해한 차가운 (11-17 ºC)로 행동 반응을 변경. 이 분석에 사용되는 저온 직접 클래스 III 감각 뉴런을 활성화하고 질적 양적 7을 분석 할 강력한 재현성 칼슘 증가 냉간 유발 행동 반응을 유도 할 수있다. 이 분석은 초기 통각, 통각 과민 또는 통각 소성 영향 유전 적 및 환경 두 인자를 결정하는 다양한 환경 조건에 노출 된 유충 (변경 영양, 부상되는 약물)에뿐만 아니라 거의 모든 유전형의 유충에 적용될 수있다. thermosensation 여러 종에 걸쳐 유비쿼터스 것을 감안할 때,이 분석은 통각의 연구를위한 유용한 도구를 제공하며, 새로운 유전자 대상 또는 개선 신경 세포의 상호 작용을 발견 할 수있다척추 동물의 통각에 대한 우리의 이해. 맞춤 제작 된 콜드 프로브 (콜드 프로브, 소재의 표 참조)를 통한 열 전도 알루미늄 샤프트와 원추형 팁을 냉각시키는 펠티에 소자를 제어 폐쇄 루프 온도를 이용한다. 서미스터는 알루미늄 원추형 팁 내부에 내장되고, 제어부의 실시간 온도를보고한다. 히트 싱크 팬 (열 제어 유닛 자재 표 참조)를 얻을 수있는 펠티에 효과의 열 부하 (QC)이므로 (22-0 °의 C)의 바람직한 온도 범위를 조절하는 열전 모듈에 부착된다. 콜드 프로브 팁의 유해 냉 자극 전후방 단부로부터 등거리 세그먼트 (들), 등쪽 정중선에 손으로 적용되는 유충 (약 A4 세그먼트,도 1a 참조). 차가운 자극에 대응하여, 유충은 일반적으로 10 초 컷오프에서 세 냉간 유발 행동 중 하나를 생산 : 몸 전체를수축 (CT), U 자형 (US) 또는 (결과 설명) 후부 세그먼트 (PR)의 인상에 전방 및 후방 세그먼트의 45-90º 인상. 이러한 행동의 아무도는 정상적인 연동 운동이나 먹이를 찾아 다니는 행동 중에 수행되지 않습니다. 이러한 동작은 부드러운 촉감 응답 및 높은 온도 또는 유해한 기계적 자극에 대한 반응 혐오 압연에서 구별된다.

<table><tbody><tr><td>Cold Probe</td><td>Pro-Dev Engineering</td><td>주문형</td><td>맞춤형 부품 번호 및 구성 세부 사항은 요청 시 제공 가능</td></tr><tr><td>열 제어 장치</td><td>TE Technology</td><td>맞춤형 인클로저</td><td>부품 번호 및 구성 세부 사항은 요청 시 제공 가능</td></tr><tr><td>Zeiss Stemi 2000 현미경</td><td>Zeiss</td><td>NT55-605</td><td></td></tr><tr><td>Fiber-Lite MI-150 고강도 조명기</td><td>돌란-제너 산업.</td><td>A20500</td><td></td></tr><tr><td>Schott 듀얼 구즈넥 23인치 광섬유 라이트 가이드</td><td>Schott North America, Inc.</td><td>Schott A08575</td><td></td></tr><tr><td>집게</td><td>FST</td><td>FS-1670</td><td>유충을 분류하고 처리하는 데 사용됩니다. 애벌레가 실수로 구멍을 뚫거나 다칠 위험을 낮추기 위해 집게 끝을 약간 매끄럽고 뭉툭하게 하십시오</td></tr><tr><td>Paintbrush</td><td>Dick Blick Art Materials</td><td>06762-1002</td><td>유충을 분류하고 취급하는 데 사용됩니다. 붓이 damp 사용 중.</td></tr><tr><td>35mm x 10mm 폴리스티렌 페트리 접시</td><td>Falcon</td><td>351008</td><td></td></tr><tr><td>60mm x 10mm 폴리스티렌 페트리 접시</td><td>Falcon</td><td>351007</td><td></td></tr><tr><td>검은 비닐 조각(최소 2인치 x 2인치)</td><td></td><td></td> <td>콜드 프로브에 대비를 제공하고 유충의 방향을 지정하는 데 사용</td></tr><tr><td>Fisherbrand Scoopula 주걱</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-357Q</td><td>음식을 옮기는 데 사용</td></tr><tr><td>Kimtech Science Kimwipes</td><td>Fisher Scientific</td><td>06-666A</td><td>수분이 과잉인 경우 유충 및 콜드 프로브를 건조하는 데 사용</td></tr></tbody></table>

콜드 통각에 대한 소설 분석<em&gt; 초파리</em&gt; 애벌레

Novel Assay for Cold Nociception in Drosophila Larvae

어떻게 생물 감지하고 여전히 제대로 이해 유해 온도에 반응한다. 또한, 말초 신경 병증 또는 손상 유발 과민성 발생한 환자와 같은 감각 기계 과민성, 기본 메커니즘은 잘 특징 아니다. 유 전적으로 취급 용이 초파리 모델은, 유해한 열 감지에 필요한 세포의 유전자를 연구하는 데 사용 된 이는 관심의 여러 보존 유전자를 산출했다. 약간은 세포 및 유해 차가운 ​​감지에 대한 중요한 수용체에 대해 그러나 알려져있다. 초파리는 낮은 온도 (≤10 ° C)에 장시간 노출 살아남을하지 않으며, 유해 차가운 자극을가 감지 방법 행동 선호도 분석에 따뜻한 온도를 선호 멋진 피하고 가능한 피할 것,하지만 최근 조사되었다. 여기에 우리가 설명하고의 첫 번째 유해 감기 (≤10 ° C) 행동 분석의 특징초파리. 이 도구 및 분석을 사용하여, 우리는 질적 및 양적 차가운 침해 행동을 평가하는 방법 조사관을 보여줍니다. 이 질병, 부상 또는 감작의 맥락에서 아마도 일반 / 건강한 문화 조건에서 수행, 또는 할 수 있습니다. 또한,이 분석은 thermosensation 통증 또는 통각 과민에 영향을 줄 수있는 원하는 유전자형 선정 유충에 적용될 수있다. 고통이 더 가능성이 척추 동물을 포함한 다른 종, 통증 프로세스의 중요한 이해를 수집합니다 것입니다 열 통각을 연구하기 위해이 분석을 사용하여, 고도의 보존 과정 감안할.

가끔 일시, 머리 회전 및 방향 (22)의 변화를 포함하는 연동 모션 초파리 유충 이동. 그러나 초점 유해 냉 자극 프로그램, 유충 전시 유해한 열 및 기계적 자극에 혐오 횡 롤 달리 고유 일련의 행동에 응답. 이러한 동작은 부드러운 촉감 8, 9, 10 또는 실온 프로브의 접촉에 응답도 다르다. U 자을 수축 (CT) 공기에 그 전방 및 후방 세그먼트 (약 45-90 °)의 상승에 몸의 중심을 향해 자신의 전방 및 후방 세그먼트을 신축 다음과 같이 초기 유발 행동은 (US)을 형성하거나 공기 (PR) (도 1)에 그들의 후방 세그먼트 (약 45-90 °)를 제기. 실험자이러한 행동 설명은 오히려 양적 컷 오프보다는...

여기에서 우리는 초파리 유충의 차가운 통각을 연구하는 새로운 분석을 보여줍니다. 이 분석은 초점 유해 냉 자극을인가 할 수있는 맞춤식 펠티에 프로브를 이용하여 정량화하고 초기 특정 행동을 초래한다. 이 기술은 차가운 통각의 추가 세포 및 분자 해부를 허용합니다.

How organisms sense and respond to noxious temperatures is still poorly understood. Further, the mechanisms underlying sensitization of the sensory ...

이 유해 냉각 분석의 전반적인 목표는 무해한 냉각에서 유해한 냉각 감지로의 변화를 정량화하고 평가하는 것입니다. 이 방법은 질환 또는 부상 시 통증 반응의 조절제 및 보존된 새로운 냉각 통각 수용 유전자의 식별을 용이하게 하는 등, 통각 수용 분야의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 다양한 환경 및 유전적 맥락에서 유해 냉각 자극을 정밀하게 조작하고 냉각 유발 반응을 정량화할 수 있다는 점입니다.일반적으로 이 방법을 처음 접하는 연구자는 실험을 시작하기 전 프로브를 일관되게 적용하는 연습이 필요합니다. 저희는 초파리 유충이 유해한 열에 반응한다는 사실을 발견했을 때 이 방법의 아이디어를 처음 얻었으며, 유해한 냉기에도 동일하게 반응하는지 궁금해졌습니다. 25 °C 인큐베이터에서 초파리 계통 또는 유전적 교배종을 사육하십시오.교배 실험을 위해 배양하는 경우, 일반 옥수수 가루 초파리 배지가 들어 있는 바이알당 처녀 암컷 20~25마리와 수컷 15~20마리를 넣고, 파리를 새로운 먹이 바이알로 옮기기 전까지 약 48시간 동안 배양하십시오. 배양 시작 5일 후, 무른 먹이와 유충에 물줄기를 조심스럽게 뿌려 원하는 유전자형의 3령 유충을 수집하십시오. 그런 다음 내용물을 중간 크기의 깨끗한 페트리 접시에 쏟아내십시오.다음으로, 핀셋을 사용하여 크기별로 유충을 조심스럽게 분류하며, 크기가 너무 크고 돌아다니는 3령 유충이나 작고 병약한 유충이 실험에 포함되지 않도록 합니다. 원치 않는 유전적 마커나 밸런서(balancer)를 가진 유충은 폐기하십시오. 실험자가 유충의 실험 조건이나 유전자형을 알 수 없도록(blind) 다른 실험실 구성원이 분류된 유충을 넣을 용기에 라벨을 붙이도록 합니다.스쿠풀라를 사용하여 소량의 신선한 먹이를 상온의 물이 절반 정도 채워진 깨끗하고 라벨이 부착된 페트리 접시에 옮깁니다. 마지막으로, 테스트 시간이 20분 이상 소요될 것으로 예상되는 경우, 유충이 굶주리거나 건조해지는 것을 방지하기 위해 핀셋을 사용하여 분류된 유충을 먹이 위로 조심스럽게 옮깁니다. 먼저 콜드 프로브 유닛의 전원을 켜고 원하는 온도까지 냉각될 때까지 몇 분간 기다립니다.실험실용 와이프로 프로브에 묻은 과잉 수분을 닦아냅니다. 즉시 사용하지 않을 때는 프로브에 절연 캡을 씌워 절연 상태를 유지하고 팁의 청결을 유지하며 손상을 방지하십시오. 다음으로, 대비 시각화와 프로브 정렬을 돕기 위해 짙은 색의 가동성 비닐 조각 위에 3령 중기 유충을 놓습니다.그 다음, 유충이 놓인 이 비닐 조각을 명시야 현미경 아래에 둡니다. 대조도를 확보하고 유충이 너무 빨리 마르는 것을 방지하기 위해 현미경과 조명 장치를 중간 밝기로 조절하십시오. 젖은 붓을 사용하여 유충이 페트리 접시의 물로 인해 촉촉하게 유지되어 비닐에 달라붙지 않도록 하고, 주변의 과잉 수분은 KimWipe를 사용하여 제거하십시오.비닐을 사용하여 유충을 올바른 위치로 이동시키면서, 전후 체축과 90도 각도가 되도록 프로브를 유충 방향으로 수동으로 전진시킵니다. 그런 다음 프로브 팁이 현미경 스테이지와 약 45도 각도가 되도록 조절하여 유충의 등쪽 중앙 표면에 부드럽게 놓이도록 배치합니다. 프로브가 접촉하는 즉시 타이머를 시작합니다.전후 이동이 가능할 정도로 유지하면서, 유충 큐티클 표면이 약간 들어갈 정도로 충분한 하향 압력을 가합니다. 다음으로, 최대 10초 동안 또는 저온 유발 행동 반응이 관찰될 때까지 프로브를 해당 위치에 유지합니다. 그 후, 프로브를 제거합니다.관찰된 행동 반응과 반응 잠복기를 기록합니다. 무반응 개체 또는 10초 이내에 반응하지 않는 유충을 기록하십시오. 마지막으로, 해당 유충을 폐기하고 다음 유충을 준비합니다.원하는 수의 테스트 유충 수가 확보될 때까지 이 절차를 반복합니다. 냉각 프로브와 접촉한 후, 본 실험 결과에 따르면 유충은 다음과 같은 냉각 유발 행동을 보입니다: 전단과 후단 마디를 몸 중심 방향으로 수축시키는 CT(contraction), 전단과 후단 마디를 모두 공중으로 들어 올려 U자 모양을 만드는 US(U-Shape), 후단 마디만 공중으로 들어 올리는 PR(posterior raising)입니다. 또한, 각 행동은 서로 다른 냉각 범위에서 정점을 보이는데, PR과 US는 3~8 °C에서 정점에 도달하는 반면, CT는 약 9~14 °C에서 정점에 도달합니다. 마지막으로, 서로 다른 냉각 행동의 잠복기를 비교했을 때, 이 데이터는 CT 반응이 3 °C와 10 °C에서는 PR 및 US와 유의미하게 달랐으며, 20 °C에서는 US와 유의미하게 달랐음을 보여줍니다.이 기술을 숙달하면 유충 30마리 한 세트를 대상으로 약 30분에서 40분 내에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 수행할 때는 유충의 비정상적인 운동 능력, 수분 상태, 그리고 냉각 프로브를 유충에 접촉시키는 압력과 위치에 유의하는 것이 중요합니다. 냉각 프로브를 부적절하게 적용하면 용량 반응 곡선이 달라지거나 냉각 반응 행동이 나타나지 않을 수 있으므로, 이 방법의 시각적 시연이 매우 중요합니다.이 절차 이후에 형광 광학 이미지 촬영, 유전자 발현 분석 및 행동 분석과 같은 다른 방법들을 사용할 수 있습니다. 이러한 방법들은 모두 저온 노출이 세포 활동, 형태, 유전자 발현 또는 기타 행동에 어떤 영향을 미치는지 결정하게 됩니다. 이 기술은 저온 통각 수용 분야의 연구자들이 초파리(drosophila)에서의 유전적, 환경적 및 질병 관련 영향을 연구할 수 있는 길을 열어줍니다.이 영상을 시청한 후, 여러분은 cold probe 도구와 분석법을 사용하여 냉각 유발 반응을 분석하고, 냉각 통각 수용의 세포 및 유전적 메커니즘을 이해하는 방법에 대해 충분히 파악하게 될 것입니다.

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연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 비디오를 문서에서, 우리는 안정적이고 제어 형상과 odorant의 그라디언트의 건설을 허용하는 새로운 방법을 설명합니다. 우리는 간단히 다음과 그라디언트가 후각 결함 (전체 및 부분 후각 상실증)의 화면으로 사용할 수있는 방법을 설명하고 chemotaxis 행동보다 미묘한 기능을 연구하기 위해 서요.

Drosophila의 유충에서 냄새 기반 행동의 고해상도 측정

이 문서에서 우리는 assays가 열 nociception 공부를...

에서 열 Nociception를 평가 지역 및 글로벌 방법<em&gt; Drosophila</em&gt; 애벌레

초파리 유충은 잠재적으로 해로운 열 자극에 대한 반응이 동물의 혐오적 또는 소위 "통각" 행동을 유발하는 전용 감각 뉴런(통각 수용기)을 가지고 있습니다. 이 비디오는 열 프로브를 큐티클에 국부적으로 적용한 것에 대한 반응으로 유충 행동을 기록하여 열 통각을 평가하는 방법을 설명합니다. 따라서 이 방법을 국소 열 프로브 분석이라고 합니다.

국소 열 프로브 분석: 초파리 유충의 고온 통각을 평가하는 방법

이 비디오 문서에서는, 우리는 초파리 비행 성인 과일의 후각에 의존 식품 검색 행동에 대한 배고픔이나 포만감의 효과를 측정 할 수있는 자동화 된 분석을 설명합니다.

먹이 찾아 돌아다 행동에 대한 단일 비행 분석에 초파리

염증성 세포 신호 분자인 산화질소(NO)의 수준은 일반적으로 Griess 시약을 사용하여 분석합니다. 이 프로토콜에서는 간단하고 정량화할 수 있으며 반복 가능한 방법으로 NO의 분비를 검출하기 위해 살아있는 초파리 뇌 조직을 사용하여 변형된 Griess 분석을 만들었습니다.

Drosophila Neuroinflammatory Response에서 산화질소 수치의 새로운 전체 조직 정량 분석

여기, 우리는 연속 열 그라디언트를 사용 하 여 초파리 애벌레의 기본 환경 온도 결정 하는 프로토콜 제시.

초파리 애벌레의 열 환경 설정을 결정 하는 온도 분석 결과

이 프로토콜의 목표는 Drosophila 애벌레에서 기계적 고치에 대한 향상된 분석법을 수행하는 방법을 보여주는 것입니다. 우리는 기계적 과민성 (알로디니아 및 과민증)이 Drosophila 애벌레에 존재한다는 것을 보여주기 위하여 여기에서 분석기를 이용합니다.

드로소필라 애벌레의 기계적 고치절 측정을 위한 향상된 분석 및 도구

이 논문은 CsChrimson 및 GtACR2를 활용하여 특정 뉴런을 활성화하고 침묵시키는 Drosophila melanogaster의 광유전학적 조작 방법을 제시합니다. 광유전학을 활용하여 열택 및 미각 행동을 탐구하고 이러한 과정을 제어하는 기본 신경 메커니즘에 대한 통찰력을 제공하는 네 가지 실험이 설명됩니다.

Drosophila melanogaster에서 신경 회로의 광유전학적 조작을 위한 행동 분석

의 유충과 pupae에 chordotonal 장기 immunostain하고 시각화하는...

의 Proprioceptors의 시각화<em&gt; Drosophila</em&gt; 애벌레와 Pupae

Drosophila의 애벌레는 gustatory 보상과 냄새 자극을 연결 할 수 있습니다. 여기 appetitive 연관 후각 학습의 분석을 할 수있는 간단한 행동 패러다임을 설명합니다.

에 Appetitive 연관 강한 학습<em&gt; Drosophila</em&gt; 애벌레

학습하세요 Drosophila 애벌레를 이용한 냉각 통각 분석 방법입니다. Peltier 프로브로 정밀한 냉 자극을 가하고 행동 반응을 정량화하여 통각 유전자와 분자 메커니즘을 연구할 수 있습니다.

콜드 통각에 대한 소설 분석

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