Name: 비 투 열 방법을 통해 복 부 피하 지방 조직 생 검에 대 한 기술 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-09-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 1 s
Description: 학습하세요 복부 피하 지방 조직 생검을 위한 비투열 수술 기법을 통해 안전하고 효과적인 조직 채취 방법을. 국소 마취 하에 115건의 시술에서 합병증 발생률이 2.61%에 불과하여 연구 및 임상 환경에서 신뢰할 수 있는 기법임을 확인했습니다.

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이 작품 (612547 및 319010 계약 번호 부여) 프로그램 유럽 연합의 지평선 2020 (부여 계약 번호 645710)와 7 프레임 워크에서 자금을 받았다. 저자 생 검 절차와 지원에 대 한 박사 경관을 Sourli-Chasioti 감사 하 고 싶습니다. 저자는 또한 비디오의 준비에서 그의 귀중 한 도움 씨 해당 Paterakis를 감사합니다.

연구 헬싱키의 선언에 의해 설정 된 표준 규격에 맞 췄 고 티 살 리의 대학, 운동 과학, Βiοethics 위원회에 의해 승인 되었다.
 1. 수술 장비 및 소모품의 준비 <ol><li>4 륜 수술 메이 요 서에 소독된 수술 필드 위치.</li>
	<li>4 륜 수술 메이 요 서에는 다음 소모품 및 수술 장비 위치: 
	바로 운영가 위 (15 cm)의 한 쌍 한 메스 (번호 11) 한 메스 핸들 곡선된가 위 (14 cm)의 한 쌍 한 모기 겸 자 Kocher 핀셋 한 켤레 한 외과 족집게 Povidone-요오드 (에 대 한 살 균 거 즈) 한 봉합 (4.0) 직선 위 (11 cm)의 한 쌍 한 바늘 홀더 (15 cm) 5 살 균 gauzes 한 접착제 멸 균 거 즈 소독된 바늘으로 한 10 mL 주사기 2 %xylocaine (아드레날린)의 10 mL 하나 소독된 외과 장갑의 쌍</li> <li>별도 벤치에 다음 자료 위치: 두 microcentrifuge 튜브 10% 포 르 말린의 5 mL를 포함 하는 1 개의 관 -190 ° c.에 액체 질소의 50-100 mL를 포함 하는 하나의 작은 컨테이너 </li></ol> 2. 참가자의 준비 <ol><li>참가자 따라 생 검 절차 전에는 8 h 빠른 15.</li>
	<li>있고 참가자 자제 운동, 과도 한 스트레스, 알코올, 그리고 액티브 간접 흡연 72 h 이전 생 16 , 17.</li>
</ol> 3. 피하 지방 조직 생 검을 수행 <ol><li>부정사 위치에 수술 침대에 참가자를 위치.</li>
	<li>절 개 povidone-요오드를 사용 하 여 영역을 소독.</li>
	<li>천천히 그리고 꾸준히 2 %xylocaine (아드레날린)의 10 mL를 주사 취 역할을 선택한 지역에 18.</li>
	<li>절 개 영역을 제외한 참가자의 시체를 충당 하기 위해 지역 무 균 수술 필드 위치.</li>
	<li>적어도 3-5 분 나중에, 로컬 마 취의 영역에 핀셋의 쌍을 가진 압력을 적용 하 고 그 느낌 그 취를 달성을 보장 하기 위해 모든 고통을 19 참가자에 게 물어.</li>
	<li>11 호 메스 메스 핸들 연결.</li>
	<li>배꼽의 오른쪽 또는 왼쪽에 3-5 cm, 길이 2-2.5 cm의 절 개를 만듭니다.</li>
	<li>스트레이트 15 cm가 위를 운영 한 켤레와 피하 조직을 제거.</li>
	<li>지방 조직 밝혀 일단 한 쌍의 족집게와 곡선된 14 cm가 포착.</li>
	<li>잘라 약 1g의 지방 조직 제거.</li>
	<li>조직 제거, 다음 놓고 살 균 gauzes hemostasis 달성 하기 위해 절 개.</li>
	<li>Hemostasis 확인 될 때 캡처 14 cm 바늘 4.0 봉합 및 피부 외과 핀셋의 쌍을 가진 피하 조직 표시 될 때까지.</li>
	<li>피하 조직으로 이동 하는 피부 및 피하는 밀접 하 게 정렬 하는 동안 피부에 봉합 바늘을 삽입.</li>
	<li>봉합 바늘, 피하 조직까지 피부 외부 구동으로 연속 지그재그 기법을 따라. 피부 절 개를 닫힐 때까지 계속.</li>
	<li>외부 봉합 넥타이.</li>
	<li>절 개 식 염 수의 영역을 청소 하 고 접착제 메 마른 거 즈로 그것을 커버.</li>
</ol> 4. 조직의 <ol><li>3 개의 조각으로 수집 된 지방 조직을 구분: 150, 350, 및 500 mg.</li>
	<li>Microcentrifuge 튜브 샘플 조직 150와 350 mg 조각 위치.</li>
	<li>-80에서 냉장고에 최종 증 착까지-190 ° C에 액체 질소로 작은 용기에 담가 두 microcentrifuge 튜브 ° C. 
	참고: 사전에 사용 하 여 무 균 바늘-190에서 액체 질소에 microcentrifuge 튜브의 침수 동안 컵 오류를 방지 하려면 microcentrifuge 튜브에 작은 구멍을 찌를 ° c.</li>
	<li>담가 샘플 조직 500mg 조각-조직학 분석을 위해 사용 될-10% 포 르 말린의 5 mL를 포함 하는 튜브에. 
	주: 수술 중 과도 한 출혈의 경우에만 모기 겸 자 사용. 이러한 경우 하 선 고 hemostasis 달성 될 때까지 닫습니다 모기 집게와 선박 포착.</li>
</ol>

<ol><li>Bruening, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+review%3A+comparative+effectiveness+of+core-needle+and+open+surgical+biopsy+to+diagnose+breast+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Systematic review: comparative effectiveness of core-needle and open surgical biopsy to diagnose breast lesions.</a> Ann Intern Med. 152, 238-246 (2010).</li>
<li>Beynen, A. C., Katan, M. B. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/4025201">Rapid sampling and long-term storage of subcutaneous adipose-tissue biopsies for determination of fatty acid composition.</a> Am J Clin Nutr. 42, 317-322 (1985).</li>
<li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://file.scirp.org/pdf/JDM20110300002_53765035.pdf">Muscle and adipose tissue biopsy in older adults with type 2 diabetes .</a> J Diabetes Mellitus. 1, 27-35 (2011).</li>
<li>Mutch, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Needle+and+surgical+biopsy+techniques+differentially+affect+adipose+tissue+gene+expression+profiles%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Needle and surgical biopsy techniques differentially affect adipose tissue gene expression profiles.</a> Am J Clin Nutr. 89, 51-57 (2009).</li>
<li>Ikeda, S., Sekijima, Y., Tojo, K., Koyama, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+value+of+abdominal+wall+fat+pad+biopsy+in+senile+systemic+amyloidosis%5BTitle%5D)+AND+%22Amyloid%22%5BJournal%5D)">Diagnostic value of abdominal wall fat pad biopsy in senile systemic amyloidosis.</a> Amyloid. 18, 211-215 (2011).</li>
<li>Alderete, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+biopsy+method+to+increase+yield+of+subcutaneous+abdominal+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Obes%22%5BJournal%5D)">A novel biopsy method to increase yield of subcutaneous abdominal adipose tissue.</a> Int J Obes. 39, 183-186 (2015).</li>
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<li>Kral, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+surgical+treatment+of+the+metabolic+syndrome+on+liver+fibrosis+and+cirrhosis%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Effects of surgical treatment of the metabolic syndrome on liver fibrosis and cirrhosis.</a> Surgery. 135, 48-58 (2004).</li>
<li>Fitzgerald, J. E., Malik, M., Ahmed, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single-blind+controlled+study+of+electrocautery+and+ultrasonic+scalpel+smoke+plumes+in+laparoscopic+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Endosc%22%5BJournal%5D)">A single-blind controlled study of electrocautery and ultrasonic scalpel smoke plumes in laparoscopic surgery.</a> Surg Endosc. 26, 337-342 (2012).</li>
<li>Memon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+Diathermy%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Hosp+Med%22%5BJournal%5D)">Surgical Diathermy.</a> Br J Hosp Med. 52, (1994).</li>
<li>Tomita, Y., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7027028">Mutagenecity of smoke condensates induced by CO-laser irradiation and electrocauterization.</a> Mutat Res. 89, 145-149 (1989).</li>
<li>Brandon, H., Young, L. <a target="_blank" href="https://www.surgimedics.com/Research%20Articles/Electrosurgical%20Plume/Characterization%20And%20Removal%20Of%20Electrosurgical%20Smoke.pdf">Characterisation and removal of electrosurgical smoke.</a> Surg Serv Manag. 3, 14-16 (1997).</li>
<li>Attner, P., Hemlin, C., Soderman, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligasure+versus+diathermy+scissors+tonsillectomy%3A+A+controlled+randomized+study%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Otolaryngol%22%5BJournal%5D)">Ligasure versus diathermy scissors tonsillectomy: A controlled randomized study.</a> Acta Otolaryngol. 130, 1180-1184 (2010).</li>
<li>Ecker, T., Carvalho, A. L., Choe, J. H., Walosek, G., Preuss, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemostasis+in+thyroid+surgery%3A+harmonic+scalpel+versus+other+techniques--a+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngol+Head+Neck+Surg%22%5BJournal%5D)">Hemostasis in thyroid surgery: harmonic scalpel versus other techniques--a meta-analysis.</a> Otolaryngol Head Neck Surg. 143, 17-25 (2010).</li>
<li>Campbell, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pilot+study+of+sampling+subcutaneous+adipose+tissue+to+examine+biomarkers+of+cancer+risk%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Prev+Res%22%5BJournal%5D)">A pilot study of sampling subcutaneous adipose tissue to examine biomarkers of cancer risk.</a> Cancer Prev Res. 2, 37-42 (2009).</li>
<li>Jamurtas, A. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+a+single+bout+of+exercise+on+resting+energy+expenditure+and+respiratory+exchange+ratio%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">The effects of a single bout of exercise on resting energy expenditure and respiratory exchange ratio.</a> Eur J Appl Physiol. 92, 393-398 (2004).</li>
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<li>Jurevic, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+levels+of+2%25+lidocaine+with+1%3A100%2C000+epinephrine+with+young+children+undergoing+dental+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Prog%22%5BJournal%5D)">Plasma levels of 2% lidocaine with 1:100,000 epinephrine with young children undergoing dental procedures.</a> Anesth Prog. 45, 87-90 (1998).</li>
<li>Kale, S. S., Yende, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Aging+on+Inflammation+and+Hemostasis+through+the+Continuum+of+Critical+Illness%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Dis%22%5BJournal%5D)">Effects of Aging on Inflammation and Hemostasis through the Continuum of Critical Illness.</a> Aging Dis. 2, 501-511 (2011).</li>
</ol>

저자 들은 아무 경쟁 금융 관심사 선언 합니다.

이 연구의 목적은 복 부 피하 지방 조직 생 검, 건강 한 남성에서 비 투 열 방법으로 국 소 마 취 아래 수행에 대 한 수술 기법을 표준화 했다. 투 열은 일반적으로 수술 실;에 사용 그러나, 가능한 부작용 (즉, 플래시 화재 및 환경 독성)9 와10 치유 지연이 발생할 수 있습니다. 투 열 요법의 이러한 원치 않는 효과 운영 직원과 환자/참가자에 대 한 건강 위험을 생성할 수 있습니다. 따라서, 피하 지방 조직 생 검에 대 한 수술 비 투 열 방법 보증 된다.
우리 참가자 중 3 2 일 수술 후 출혈 과도 한 관찰 합니다. 이 세 개인 보고 절 개의 지역에 통증. 이러한 경우 치료에 피부 절 개의 지역 재개 했다, 어떤 과잉 혈액 제거 및 식 염 수와 위에서 설명한 동일한 기술을 사용 하 여 닫힌 지역의 청소 했다. 아니 합병증, 그 후 보고 되었다 그리고 연속적인 일에 관찰...

지방 조직 생 검 조직 샘플을 분석, 시 대사 및 질병 메커니즘의 통찰력이 개요를 제공할 수 있습니다 제공 합니다. 예를 들어, 그들은 유 방 암 종양 식별1, 지방산 조성 시험2및 중요 한 대사와 호르몬 질병 경로3에 대 한 연구에 사용 됩니다. 복 부 지역에 피하 지방 조직 생 검, 연구자와 의사는 수술 또는 바늘 기반 기술을 사용 합니다. 그러나, 수술 피하 지방 생 검 조직 샘플 [예를 들어, 메신저 ribonucleic 산 (mRNA) 식, 조직학 분석, 등] 복잡 한 생물 학적 메커니즘의 포괄적인 개요를 제공할 수 있습니다 제공할 수 있는4 . 그들은 건강 한 성인4 에서 이전에 사용 하 고 침대5에서 안전 하 게 수행할 수 있습니다.
생 검 바늘 기반 기술 조직의 무결성을 파괴 수 있습니다 강렬한 지방 흡입 필요 하 고 일반적으로 적은 양의 조직 (100-500mg)6을 검색 합니다. 이러한 조직 샘플 복잡 한 조사 연구에 적합 하지 않을 수 있습니다. 또한, 바늘 기반 기술에 비해, 수술 피하 지방 biopsies 제공할 수 있습니다 (예를 들어, B와 T 세포 신호); 여러 염증 성 지표의 더 완전 한 그림을 그릴 수 있습니다 조직 샘플 골격 규정; 세포질 통로; 지질, 탄수화물, 아미노산;의 대사 경로 그리고 산화 인 산화 통로4. 바늘-기반 기술 조직4,7,8 거리 영역에 대 한 약간의 정보를 제공 하면서 수술 한4, 보다 혈액 세포 오염에 대 한 높은 위험을 포함 하는 또한, .
일반적으로, 수술 지방 조직 생 검 투 열 치료9과도 한 출혈 방지 하기 위해 혈관을 cauterizing에 대 한 포함 되어 있습니다. 투 열 또한 구울 조직 신생 및 사마귀 질환9에 의해 감염 되는 조직에 의해 영향을 파괴 하는 데 사용 됩니다. 이 기술은 특히 신경외과 눈 수술9에 적용 됩니다.
투 열 요법의 과도 한 사용은 괴 사 성 조직, 감염을 일으키는 원인이 되 고 치유 과정10지연의 형성으로 이어질 수 있습니다. 실제로, 플래시 화재 등 조직 병 변 피부 부작용 투 열9를 다음 보고 되었습니다. 또한, 우려 참가자/환자와 운영 직원9에 의해 흡입 수 있습니다 수술 환경에 투 열에 의해 발표 외과 연기의 독성에 대해 제기 되고있다. 실제로, 투 열 요법의 사용 흡연 6 담배11 에 의해 생산에 동일 수술 실에서 어 독성을 일으킬 수 있습니다 그리고 비록 수술 일반적으로 좋은 환기 시스템, 오염 수 마지막 적어도 20 분12 . 그러나, 환자는 편도 선 수술 수술 사업, 투 열 메서드는 표시13 비-중요 한, 수술 후 통증 및 출혈14 클래식 결 찰 hemostasis 방법 보다 덜. 전반적으로, 수술 후 통증에 차이 및 건강 한 개인에서 지방 조직 생 검 후 요금을 거의 출혈 증거 존재 합니다. 투 열 요법의 부작용 및 증거의 부족을 감안할 때, 지방 조직 생 검에 대 한 비 투 열 방법의 표준화가 보증 된다. 따라서,이 연구의 목표는 복 부 피하 지방 조직 생 검, 건강 한 남자의 비 투 열 메서드를 사용 하는 국 소 마 취 아래 수행에 대 한 수술 기법을 표준화 했다. 또한, 우리는 조직 컬렉션 mRNA 표정 및 단백질 농도 결정 하 고 조직학 분석을 수행 하는 절차를 설명 합니다.

<table><tbody><tr><td>&nbsp; 소독된 수술 분야&nbsp;</td><td>Hartmann</td><td>23516-00</td><td></td></tr><tr><td>스테인레스 스틸 악기 스탠드 (외과용 Mayo)</td><td>Medical Device Depot Inc.</td><td>32000</td><td></td></tr><tr><td>작동 가위 스트레이트 15cm</td><td>Karl Storz</td><td>791903</td><td></td></tr><tr><td>메스 No 11&nbsp;</td><td>Swann-Morton</td><td>203</td><td>Bipolar, 카탈로그 번호</td></tr><tr><td>429011 Scarpel 핸들 No 3</td><td>Karl Storz</td><td>488090</td><td></td></tr><tr><td>가위는 곡선형 14cm</td><td>Karl Storz</td><td>511514, 752918</td><td></td></tr><tr><td>모기 집게</td><td>Karl Storz</td><td>535012</td><td></td></tr><tr><td>Tweezers Kocher&nbsp;</td><td>Karl Storz</td><td>530416</td><td>Bipolar, 카탈로그 번호 830316</td></tr><tr><td>수술용 핀셋</td><td>Karl Storz</td><td>793216</td><td>Bipolar, 카탈로그 번호 831016</td></tr><tr><td>Povidone-iodine&nbsp;</td><td>다양한</td><td>비적용 봉</td><td></td></tr><tr><td>합사 4.0 Vicryl</td><td>Johnsons</td><td>V4970H&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>가위 스트레이트 11cm</td><td>Karl Storz</td><td>512511 DS</td><td></td></tr><tr><td>바늘 홀더 15cm</td><td>Karl Storz</td><td>515515</td><td>바이폴라, 카탈로그 번호 213015</td></tr><tr><td>&nbsp; 멸균 거즈</td><td>Hartmann</td><td>3021</td><td></td></tr><tr><td>&Alpha; 고착 멸균 거즈&nbsp;</td><td>Digas 의료 장비</td><td>2889</td><td></td></tr><tr><td>10 mL 주사기와 소독 바늘</td><td>알파 의료 솔루션</td><td>10310-55-0010</td><td></td></tr><tr><td>2%-xylocaine (아드레날린 없음)</td><td>다양한</td><td>적용 불가</td><td></td></tr><tr><td>멸균 수술 장갑&nbsp;</td><td>Sempermed</td><td>10001</td><td></td></tr><tr><td>Eppendorf 튜브</td><td>Kartell</td><td>16283</td><td></td></tr><tr><td>10% 포르말린&nbsp;</td><td>알파 의료 솔루션</td><td>11016-30-2909</td><td></td></tr><tr><td>튜브 120 mL</td><td>디가스 의료 장비</td><td>9025</td><td></td></tr><tr><td>액체 질소 -190°C; C</td><td>Revival</td><td>해당 없음</td><td></td></tr></tbody></table>

비 투 열 방법을 통해 복 부 피하 지방 조직 생 검에 대 한 기술

A Technique for Subcutaneous Abdominal Adipose Tissue Biopsy via a Non-diathermy Method

지방 조직 생 검 조직 샘플을 분석, 시 대사 및 질병 메커니즘의 통찰력이 개요를 제공할 수 있습니다 제공 합니다. 복 부 지역에 피하 지방 조직 생 검, 연구자와 의사는 수술 또는 바늘 기반 기술을 사용 합니다. 그러나, 수술 피하 지방 biopsies 백색 지방 조직에 생물학적 지표의 복합성의 더 포괄적인 개요를 제공할 수 있는 조직 샘플을 제공할 수 있습니다. 일반적으로, 수술 지방 조직 생 검 투 열 치료 cauterizing 혈관 과도 한 출혈을 방지 하기 위해 포함 되어 있습니다. 그럼에도 불구 하 고, 플래시 화재와 조직, 피부 장애 등의 부작용 투 열 후 보고 되었습니다. 따라서, 우리는 표준화 비 투 열 방법을 사용 하 여 로컬 마 취 아래 수행 수술 복 부 지방 조직 생 검 목적입니다. 우리는 건강 한 남성 비 투 열 복 부 수술 생 검 메서드를 사용 하 여 115 피하 지방 조직 생 검 실시. 우리의 결과 115 작업 (2.61%)에서 출혈 과도 한 사후 작업의 세 가지 경우를 보여주었다. 결론적으로, 우리의 표준된 피하 복 부 지방 조직 수술 생 검 투 비 열 방법을 사용 하 여 최소한의 부작용으로 머리 맡에 건강 한 사람에 게 안전 하 게 적용할 수 있습니다.

참가자의 특성은 표 1에 제공 됩니다. 스티치 절 개의 영역에서 다음 8-12 일 이내 떨어졌다. 우리는 건강 한 성인 남성 비 투 열 복 부 수술 생 검 방법을 사용 하 여 115 피하 지방 조직 biopsies의 총 완료 (나이: 35.2 ± 6.9 년; 신체 질량 지 수: 27.3 ± 4.4; 및 체 지방 비율: 27.0 ± 9.0%). 세 가지 경우에서 관찰 되었다 과도 한 출혈 후 생 검 (보급: 2.61%)는 수술 후 2 일. 3 개인 과도 한 출혈을 경험 했다 아무 부작용 경험 들 보다 더 오래 된 [t(113)=-2.115, p = 0.037], 그리고 다른 차이 (즉, 몸 대량 색인 및 신체 지방 비율) (p를 관찰 했다 &#62; 0.05) 두 그룹 사이의. 마지막으로, 각 작업 후 3 개월 우리의 참가자의 아무도 어떤 부작용 (를 포함 하 여 피부 상처) 보고.
<p class=...

우리는 복 부 지방 조직 생 검 국 소 마 취 아래 수행 비 투 열 방법을 사용 하 여 표준화. 세 가지 경우의 과도 한 후 115 작업 (2.61%)에서 출혈 발생 했습니다. 우리는 복 부 지방 조직 수술 생 검 투 비 열 방법을 사용 하 여 적용할 수 있는 안전 하 게 건강 한 사람에 게 결론.

Adipose tissue biopsies offer tissue samples that, upon analysis, may provide insightful overviews of mechanisms relating to metabolism and disease. To ...

피하 지방 조직 생검은 질병과 관련된 지방 조직의 메커니즘을 밝힐 수 있기 때문에 연구와 보건 분야에서 매우 중요합니다. 본 논문에서는 복부 부위에서 피하 지방 조직 생검 샘플을 얻는 기술을 설명합니다. 이러한 샘플을 얻기 위해 연구자와 의사는 바늘 기반 기술 또는 외과적 수술 기반 기술을 사용합니다.하지만, 바늘 기반 기술은 오진의 가능성이 있는 반면, 수술 기법은 백색 지방 조직의 생물학적 지표에 대해 더 완전한 개요를 제공한다는 점에 유의하는 것이 중요합니다. 이는 예를 들어, 연구와 보건 목적 모두에 필수적인 조직학적 분석의 경우에도 마찬가지입니다. 전반적으로, 수술 기법은 남성과 여성 모두에게 시행되었으며 병상 옆에서 안전하게 수행될 수 있다는 점이 중요합니다.수술적 지방 생검을 받는 대상자는 8시간 동안 금식해야 하며, 생검 절차 전 72시간 동안 운동, 과도한 스트레스 요인, 알코올 섭취 및 능동적·수동적 흡연을 금해야 합니다. 이러한 예방 조치는 백색 지방 조직 샘플 분석 시 결과가 왜곡될 위험을 최소화하기 위한 것입니다. 먼저 지방 조직 생검 절차에 필요한 재료들을 준비합니다.바퀴가 달린 수술용 마요 스탠드(Mayo stand) 위에 멸균 수술 포를 깝니다. 마요 스탠드 위에 다음의 재료들을 배치합니다. 15 cm 길이의 직선형 수술 가위 한 쌍.11번 메스 1개. 메스 핸들 1개. 곡선형 가위(14 cm) 1개.모스키토 포셉 1개. 코허 핀셋 1쌍. 외과용 핀셋 1개.멸균 거즈에 적신 포비돈 요오드. 4.0 봉합사 1개. 11cm 직선 가위 1개.니들 홀더 1개, 15 centimeters. 멸균 거즈 5개. 접착식 멸균 거즈 1개.소독된 바늘이 장착된 10 mL 주사기 1개. 아드레날린이 포함되지 않은 2% Xylocaine 10 mL. 그리고 소독된 수술용 장갑 한 쌍.별도의 벤치에서 조직 수집에 필요한 다음 재료들을 준비합니다. Eppendorf 튜브 두 개를 준비합니다. 멸균 바늘을 사용하여 각 Eppendorf 튜브 캡에 작은 구멍을 뚫습니다.이는 -190 °C의 액체 질소에 Eppendorf 튜브를 담글 때 캡이 파손되는 것을 방지하기 위함입니다. 10% 포르말린 5 mL를 넣은 튜브 하나와 -190 °C의 액체 질소가 담긴 작은 용기 하나를 준비합니다. 최종 보관 전까지 조직의 무결성을 보장하기 위해, 조직이 들어 있는 Eppendorf 튜브를 즉시 담가야 하므로 이 과정이 필요합니다.모든 재료와 소모품의 준비가 완료되면, 환자를 수술대 위에 앙와위로 눕힙니다. 외과의는 수술대의 한쪽 측면에 위치합니다. 외과의는 먼저 절개 지점을 중심으로 주변 15cm 범위의 복부 영역을 포비돈 요오드를 사용하여 소독합니다.국소 마취를 위해 2% Xylocaine(아드레날린 무첨가) 10 mL를 절개 부위에 주입합니다. 그 다음 해당 부위에 멸균 수술 포를 배치합니다. 이 과정이 완료되면 국소 마취가 되었는지 확인합니다.이 과정에는 약 3~5분이 소요됩니다. 그 후, 외과 의사는 11번 메스를 메스 손잡이에 연결하고, 하부 지방 조직이 드러날 때까지 피부와 피하 조직을 절개합니다. 절개 길이는 약 2~2.5cm이며, 배꼽에서 3~5cm 떨어진 지점에서 수행합니다.그 후, 15cm 직형 수술 가위를 사용하여 외과 의사가 피하 조직을 제거합니다. 지방 조직이 드러나면 핀셋과 14cm 곡형 가위로 이를 잡습니다. 그런 다음 지방 조직을 준비하여 절제합니다.제거되는 지방 조직의 총량은 수행할 분석 내용에 따라 달라집니다. 경험에 비추어 볼 때, 대부분의 조직학 및 유전자 발현 분석 목적으로는 약 1g의 지방 조직이면 충분합니다. 지방 조직을 제거한 후, 외과의는 지혈을 확실히 하기 위해 절개 부위에 멸균 거즈를 약 30초 동안 압박합니다.지혈이 확인되면, 외과의는 14cm 바늘이 달린 4-0 봉합사와 수술용 핀셋을 사용하여 피하 조직이 보일 때까지 피부를 잡습니다. 봉합 바늘을 피부에서 피하 조직 방향으로 삽입한 후, 피부와 피하 조직을 서로 밀착시킵니다. 그 후 봉합 바늘을 피하 조직 내에서 지그재그 방식으로 계속 통과시켜 바늘이 피부 바깥으로 나올 때까지 진행합니다.피부 절개 부위가 폐쇄될 때까지 이 과정을 반복합니다. 마지막으로, 외부에서 봉합사를 묶어 마무리합니다. 일반적으로 봉합사는 8~12일 이내에 자연스럽게 탈락하며, 이 전체 기술을 통해 피부의 수술 후 흉터 가능성을 줄일 수 있습니다.그 후 외상 부위를 식염수로 세척하고, 접착성 멸균 거즈로 덮어줍니다. 저희가 모스키토 포셉(Mosquito tweezers)을 사용하지 않은 것을 눈치채셨을 것입니다. 이 기구는 혈관에서 출혈이 발생하는 경우에 사용됩니다.그렇다면, Mosquito 핀셋으로 혈관을 잡아 지혈이 될 때까지 결찰하여 폐쇄합니다. 본 실험 목적상 수집한 샘플의 무게는 약 1g이었다는 점을 기억하십시오. 수집된 조직은 세 조각으로 절단되었으며, 각각 350mg, 150mg, 500mg의 무게였습니다.350 mg 샘플은 Eppendorf 튜브에 넣어 단백질 수준 분석에 사용하며, 150 mg 샘플은 다른 Eppendorf 튜브에 넣어 mRNA 발현 분석에 사용합니다. 이 두 Eppendorf 튜브는 샘플의 무결성을 보장하기 위해 -190 °C의 액체 질소가 담긴 소형 용기에 즉시 담근 후, 최종적으로 -80 °C 냉동고에 보관합니다.마지막으로, 500 milligram 샘플을 10% formalin 5 mL가 들어 있는 튜브에 담가 조직학적 분석에 사용합니다. 본 기술은 비전기 소작법(non-diathermy method)을 기반으로 합니다. 수술 후 흉터와 같은 피부 손상의 위험을 제거하기 위해 멸균 거즈를 사용하여 지혈을 수행합니다.전반적으로, 본 연구의 비전기소작법은 부작용이 미미했습니다. 실제로, 본 연구에서 총 115건의 생검을 수행하였으며, 과다 출혈은 단 3건만 발생했습니다. 이러한 사례들은 생검 절차 후 2일째에 발생했습니다.우리는 해당 개체들의 외상 부위를 다시 열고, 배농한 후, 지혈을 실시하고 수술용 스테이플러로 봉합하여 처치하였습니다. 이후 추가적인 합병증은 관찰되지 않았으며, 며칠 후 정상적인 치유가 이루어졌습니다. 마지막으로, 모든 피험자에 대해 각 생검 절차를 시행하고 3개월이 지난 시점에서 피부 흉터를 포함한 어떠한 부작용도 관찰되지 않았음을 밝힙니다.본 연구의 비전기소작 수술적 생검 기법은 부작용이 매우 적었으며, 백색 지방 조직의 생물학적 지표에 대한 전반적인 검토가 필요한 경우에 사용하도록 제안됩니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

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