Name: 신생 전염병 병원체 제거를위한 손씻기의 효능을 시험하는 방법 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-06-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 2 s
Description: 배우세요 다양한 손씻기 방법의 효능을 비교 평가하는 실험실 프로토콜을 사용하여 대체 미생물로 감염병 예방을 위한 위생 효과를 정량적으로 분석하는 방법입니다.

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이 작업은 미국 국제 재난 지원 센터 (AID-OFDA-A-15-00026)에 의해 지원되었습니다. 말린 울프 (Marlene Wolfe)는 국립 과학 재단 (National Science Foundation)의 후원을 받았습니다 (부여 0966093).

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저자는 경쟁적인 금전적 이해 관계가 없다고 선언합니다.

여기에 설명된 방법은 통제된 실험실 환경에서 손 씻기 효능을 테스트하기 위한 접근 방식을 제공합니다. 이 방법은 인간 지원자와 대리, 비감염성 유기체의 사용을 강조합니다. 이 방법을 사용하여 1) 손 씻기 방법의 효능과 2) 헹굼수에서 유기체의 지속성의 차이를 입증할 수 있었습니다. 이 프로토콜을 제시하는 목적은 전염병과 관련된 광범위한 대리 유기체 및 손 씻기 방법을 테스트하는 데 적용할 수 있는 일반적인 프레임워크를 제공하는 것입니다.
이 방법을 사용하는 동안 두 가지 주요 데이터 품질 권장 사항이 중요한 것으로 언급되었습니다. 첫째, 접종제는 테스트 라운드 전반에 걸쳐 가능한 한 유사하게 손실을 최소화하는 방식으로 적용되어야 합니다. 이는 통계적으로 유의미한 결과를 얻을 수 있도록 충분한 접종액이 손에 적용되도록 하기 위한 것입니다. 둘째, 이전 연구에서 첫 번째 세척과 후속 세척 사이에 상당한 차이가 있을 가능성이 있지만 클렌징 라운드29<...

손씻기는 설사 및 호흡기 질환을 포함하여 대변 또는 구강 경로로 전염되는 질병의 확산을 막기 위해 널리 권장됩니다 1 . 놀랍게도 비누와 물 (HWWS)로 손을 닦기, 알코올 기반 손 소독제 (ABHS)로 손에서 생물을 제거하는 것과 같은 손씻기 방법의 효능에 대한 비교 가능한 증거는 거의 없다. 초기 연구에 따르면 손씻기 방법과 달리 손씻기의 기계적 작용이 대부분의 유기물 제거에 영향을 줄 수 있습니다. 또한 손씻기 방법이 가장 효과적인 비교 증거는 거의 없습니다. 비공식 문헌 검토에서 비누와 손 소독제의 효능을 유기체 제거에 비교 한 14 개의 연구가 확인되었다. 이 연구들 중 5 명은 ABHS가 더 효과적이라는 것을 발견했습니다 4 , </7 명은 HWWS가 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 로 더 효과적이라는 것을 발견하였고 2 명은 방법 16 과 17 사이에 유의 한 차이가 없음을 발견했다. 이러한 발견은 일관성이없고 손씻기 후 헹굼물에 잔류하는 유기체의 질병으로 인한 지속적인 위험을 언급하지 않습니다. 전반적으로, 감염성 질병을 유발하는 병원균 제거를위한 손씻기 방법의 비교 효능에 대한 증거는 제한적이다. 이러한 제한된 증거로 인해 어떤 방법이 질병 발생 상황에 가장 적합한 지에 대한 불확실성이 제기되었습니다. 예를 들어2013 년부터 2016 년까지 서 아프리카의 에볼라 바이러스 질병 (EVD) 발병 기간 동안 몇몇 대규모 국제 대응자가 HWWS, ABHS 또는 0.05 % 염소 솔루션에 대한 모순 된 권장 사항을 제시했습니다. 세계 보건기구 (WHO)가 HWWS 또는 ABHS (손이 눈에 보이지 않는 경우)를 권장하는 반면, Médecins Sans Frontières (MSF)는 0.05 % 염소 용액을 사용하여 손씻기를 권장합니다. WHO는 염소 요구량이 피부 18 , 19 , 20 , 21 , 22 로 인해 다른 방법보다 덜 효과적이므로 다른 옵션을 사용할 수 없다면 염소를 사용해서는 안된다는 것을 밝히고있다. 또한, 염소 용액은 일반적으로 하이 테아 차아 염소산염 (HTH), 국부적으로 생성되고 안정화 된 차아 염소산 나트륨 (NaOCl) 및 염소산 나트륨(NaDCC)이다. 서 아프리카에서의 EVD 발생에 대한 응답으로 WHO가 의뢰 한 체계적인 검토는 최근 염소로 손씻기의 비교 효능을 조사한 4 개의 연구만을 발견했다. 이 연구들은 또한 상반되는 결과를 가져 왔으며,이 연구들 중 어느 것도 에볼라 바이러스 10 , 24 , 25 , 26 , 27 과 유사한 손씻기 또는 조사 미생물에 대해 0.05 %의 권장 염소 농도를 사용하지 않았습니다. 따라서 권장 사항은 증거에 기반한 것으로 밝혀지지 않았고 어떤 권장 사항이 가장 효과적 이었는지 분명하지 않았습니다. 손씻기 중재는 전염병 전파를 예방하는 중요한 도구이기 때문에 감염 병원체의 확산을 막기위한 손씻기 접근법을 비교하기 위해서는 추가 연구가 필요합니다. 이 h세탁 권고는 증거에 근거해야합니다. 따라서 대리모 또는 비 감염성 병원체를 사용하여 실시한 손씻기 효능 및 헹굼 물 지속성을 테스트하는 방법이 개발되었습니다 2 , 28 , 29 . 에볼라 바이러스의 대리인으로 Phi6을 사용하고 일반적인 지시 생물로 대장균 을 사용하는 샘플 결과가 여기에 제시됩니다. 이 프로토콜에서는 손씻기 효능 및 헹굼 수 지속 테스트가 제공됩니다.

<table><tbody><tr><td>비누 바</td><td>: Dove</td><td>White Beauty Bar 비누</td><td></td></tr><tr><td>알코올 기반 손 소독제</td><td>Purell</td><td>Advanced Instant Hand Sanitizer with 70% Ethyl Alcohol</td><td></td></tr><tr><td>HTH Powder</td><td>Acros Organics</td><td>300340010</td><td></td></tr><tr><td>NaDCC Powder</td><td>Medentech</td><td>Klorsept granules</td><td></td></tr><tr><td>NaOCl Solution</td><td>Acros organics</td><td>419550010</td><td></td></tr><tr><td>전기 염소</td><td>처리기 AquaChlor</td><td></td><td></td></tr><tr><td>요오드 메트릭 적정기</td><td>Hach</td><td>1690001</td><td></td></tr><tr><td>소 혈청 알부민</td><td>MP Biomedicals</td><td>NC0117242</td><td></td></tr><tr><td>Tryptone</td><td>Fisher</td><td>BP1421-100</td><td></td></tr><tr><td>소 뮤신</td><td>EMD Milipore</td><td>49-964-3500MG</td><td></td></tr><tr><td>0.22 &micro; m 필터</td><td>EMD Milipore</td><td>GVWP04700</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Fisher</td><td>BP358-1</td><td></td></tr><tr><td>피부 pH 프로브</td><td>Hanna Instruments</td><td>H199181</td><td></td></tr><tr><td>대형 Whirlpak 샘플 백</td><td>Nasco</td><td>B01447WA</td><td></td></tr><tr><td>소형 Whirlpak 샘플 백</td><td>Nasco</td><td>B01323WA</td><td></td></tr><tr><td>깔때기 병</td><td>Thermo Scientific</td><td>3120850001</td><td>병 뚜껑에 적절한 크기의 구멍을 뚫어 적절한 유속으로 물을 분배하는 깔때기를 만들 수 있습니다.</td></tr><tr><td>에탄올</td><td>ThermoScientific</td><td>615090010</td><td>물과 혼합하여 70% 에탄올</td></tr><tr><td>스프레이 병</td><td>Qorpak</td><td>PLC06934</td><td></td></tr><tr><td>E. coli</td><td>ATCC</td><td>25922</td><td></td></tr><tr><td>LB Broth</td><td>Fisher BioReagents</td><td>BP1426-2</td><td></td></tr><tr><td>LB 한천</td><td>Fisher BioReagents</td><td>BP1425-500</td><td></td></tr><tr><td>멸균 루프</td><td>글로브 사이언티픽</td><td>22-170-204</td><td></td></tr><tr><td>Phi6</td><td>HER</td><td>102</td><td></td></tr><tr><td>영양 육수</td><td>BD Difco</td><td>BD 247110</td><td></td></tr><tr><td>GeneQuant 100 분광 광도계</td><td>General</td><td>Electric 28-9182-04</td><td></td></tr><tr><td>티오황산나트륨</td><td>피셔 케미컬</td><td>S445-3</td><td></td></tr><tr><td>멤브레인 필터(47mm, 0.45 &마이크로; m)</td><td>EMD Millipore</td><td>HAWP04700</td><td></td></tr><tr><td>m-ColiBlue24 육수 매체</td><td>EMD Millipore</td><td>M00PMCB24</td><td></td></tr><tr><td>페트리 접시 패드 포함(47mm)</td><td>Fisherbrand</td><td>09-720-500</td><td></td></tr><tr><td>진공 매니폴드</td><td>Thermo Scientific/Nalgene</td><td>09-752-5</td><td></td></tr><tr><td>필터 깔때기</td><td>Thermo Scientific/Nalgene</td><td>09-747</td><td></td></tr><tr><td>Pseudomonas syringae</td><td>HER</td><td>1102</td><td></td></tr><tr><td>Phosphate Buffered Saline</td><td>Thermo Scientific</td><td>10010031</td><td>Solution은 기본 레시피에 따라 원료 화합물에서 혼합할 수도 있습니다</td></tr></tbody></table>

신생 전염병 병원체 제거를위한 손씻기의 효능을 시험하는 방법

A Method to Test the Efficacy of Handwashing for the Removal of Emerging Infectious Pathogens

감염성 질병 전파를 예방하기 위해 손씻기가 널리 권장됩니다. 그러나 일반적으로 손씻기 방법의 효능에 대한 비교 가능한 증거는 거의 없다. 또한 손씻기 방법을 비교하여 감염성 병원체를 제거하는데 가장 효과적인 방법을 결정하는 증거는 거의 없다. 전염병 발생시 사용할 수있는 손씻기에 대한 다양한 접근법에 대한 증거를 제공하기위한 연구가 필요합니다. 여기에는 손에서 미생물을 제거 할 때의 손씻기 방법의 효과와 헹굼 수의 지속성을 평가하는 실험실 방법이 설명되어 있습니다. 자원 봉사자의 손에 시험 생물을 먼저 넣고 손으로 씻는 방법으로 씻어 낸다. 일반적으로 대리 미생물은 질병으로부터 사람 피험자를 보호하기 위해 사용됩니다. 세척 후 자원 봉사자의 손에 남아있는 생물의 수는 변형 된 &quot;장갑 주스&quot;방법을 사용하여 시험합니다 : 손은 elu미생물을 부유시키고 멤브레인 여과 (박테리아) 또는 플라크 분석 (바이러스 / 박테리오파지)에 의한 분석에 사용할 수 있도록 스크러빙됩니다. 손씻기에서 생성 된 헹굼 수는 분석을 위해 직접 수집됩니다. 손씻기의 효능은 손씻기 후에 채취 한 시료와 손씻기가없는 시료의 대수 감소 값을 비교하여 계량화합니다. 헹굼 물 지속성은 다양한 손 씻기 방법에서 씻어 낸 물 시료를 물로 손씻기 후에 수집 한 시료와 비교하여 계량화됩니다. 이 방법은 인간 자원 봉사자의 안전을 지키기 위해 대리 조직을 사용할 필요가 있기 때문에 제한적이지만 체외 연구에서 복제하기 어려운 손씻기의 양상을 파악하고 손씻기 효과 및 헹굼에서 감염 생물의 지속성에 대한 연구 틈을 메운다 물.

여기에서 프로토콜 ( 그림 1 )은 18 명의 자원 봉사자와 함께 완료되었으며 각각은 E.coli 와 Phi6를 사용하여 테스트되었습니다. 토양 부하가 있거나없는 대장균 과 토양 부하가있는 Phi6 ( 그림 2 및 그림 3 )과의 손 세척 결과간에 유의 한 차이가 발견되었습니다. 토양 부하가없는 대장균의 경우, HTH, NaDCC 및 안정화 된 NaOCl을 사용한 손씻기는 모두 물로 손을 씻는 것보다 훨씬 더 큰 로그 감소를 가져왔다 (F (6,102) = 2.72, p = 0.034). 토양 부하로, HTH는 물 만, HWWS 및 ABHS (F (6,102) = 3.94, p &lt;0.001)보다 대장균의 대폭 감소를 가져왔다. 토양 부하가없는...

감염성 질병 전파를 예방하기 위해 손씻기가 널리 권장됩니다. 그러나 어떤 손씻기 방법이 전염병 병원균을 제거하는데 가장 효과적인지에 대한 증거는 거의 없다. 우리는 미생물 제거시 손씻기 방법의 효능을 평가하는 방법을 개발했습니다.

Handwashing is widely recommended to prevent infectious disease transmission. However, little comparable evidence exists on the efficacy of handwashing ...

본 실험의 전반적인 목표는 특정 표적 미생물을 실험적으로 접종한 손을 대상으로 다양한 손 씻기 방법의 상대적 효능을 테스트하는 것입니다. 이 방법은 연구자가 특정 표적 미생물에 대한 손 씻기의 효능을 조사할 수 있게 함으로써, 감염성 질환 예방에 도움이 되는 핵심 질문들에 대한 정보를 제공할 수 있습니다.이 기법의 주요 장점은 유연성이 뛰어나 다양한 유기체를 조사하는 데 맞게 조정할 수 있다는 것입니다. 저희는 에볼라 대응 현장에서 손 씻기용으로 염소 용액이 사용되고 있었지만 당시에는 그 효능에 대한 근거가 없다는 점을 깨닫고 이 방법의 아이디어를 처음 떠올렸습니다. 적격 피험자를 모집하고 텍스트 프로토콜에 따라 손 씻기 용액을 준비한 후, 비병원성 E.Coli 균주를 LB agar 플레이트에 스트리킹하여 박테리아를 준비하고, 37 °C에서 24시간 동안 배양하여 단일 콜로니를 얻습니다.실험 시작 하루 전, 멸균 루프를 사용하여 플레이트에서 단일 콜로니를 채취하고 10 milliliters의 LB broth에 접종합니다. 배양액을 37 degree celsius에서 진탕 배양하며 하룻밤 동안 배양합니다. 실험 당일 아침, 하룻밤 배양한 배양액 1 milliliter를 20 milliliters의 신선한 LB broth에 추가합니다.밀리리터당 10⁸ CFU 이상의 균 밀도에 도달하도록 배양물을 약 2시간 30분 동안 배양합니다. 그 다음, 분광광도계를 사용하여 배양물의 농도를 추정합니다. 테스트 직전에 박테리아 또는 바이러스 현탁액 68%와 염화나트륨 또는 토양 하중 32%로 구성된 접종액을 준비합니다.회전시키거나 가볍게 볼텍싱하여 혼합합니다. 텍스트 프로토콜에 따라 피험자 준비를 마친 후, 검지와 중지 사이의 물갈퀴 공간에 평면 팁 피부 pH 프로브를 배치하여 각 피험자의 피부 pH를 측정합니다. 전극이 피부에 밀착되었는지 확인하고 pH 측정값을 기록합니다.다음으로, 자원자가 양손을 모으게 합니다. 그런 다음, 손을 오염시키기 위해 각 손바닥에 접종액 750 microliters를 조심스럽게 피펫으로 분주합니다. 자원자의 손을 오염시킬 때 접종액을 흘리지 않는 것이 중요합니다.자원봉사자들에게 이 과정이 중요하다는 점을 상기시키고, 절차를 시작하기 전 물로 연습할 기회를 줍니다. 자원봉사자들이 마찰을 최소화하면서 손의 모든 표면에 접종물이 도포될 때까지 손을 부드럽게 서로 문지르게 합니다. 접종물이 마를 수 있도

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Research

연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

Source: Holt-Torres, P. S. et al. Evaluation of Antimicrobial Activities of Nanoparticles and Nanostructured Surfaces In Vitro. J. Vis. Exp. (2023)This video demonstrates the use of the focused-contact exposure method to evaluate the antibacterial activity of nanostructured surfaces. It outlines the steps involved in establishing direct contact between bacteria and the nanostructured surface, incubation, bacterial collection, and colony counting to assess viability.

Assessing the Antibacterial Activity of Nanostructured Surfaces Using a Focused-Contact Exposure Method

이 비디오는 페그 플레이트를 사용하여 생물막을 효율적으로 제거하는 항균 화합물을 스크리닝하는 분석을 보여줍니다. 이 방법론은 항균 화합물로 처리한 후 생물막의 대사 상태를 모니터링하여 최소 생물막 박멸 농도를 쉽게 측정할 수 있습니다.

항균제 스크리닝을 위한 Peg Plate Biofilm Assay

항균 시너지 테스트 조합에 사용 되는 두 개 이상의 항생제의 효과 평가 하는 데 사용 하 고는 일반적으로 두 가지 방법 중 하나에 의해 수행: 바둑판 배열 또는 시간 죽 일 분석 결과. 여기, 우리는 자동화 된, 잉크젯 프린터 기반 바둑판 배열 시너지 기술 및 고전적인 시간 죽이기 시너지 연구 제시.

잉크젯 프린터 기반으로 테스트 자동화 된 바둑판 배열 및 수동 시간 죽 일 방법 항균 시너지

시민 과학 프로젝트는 SARS-CoV-2에 대한 환경 샘플을 수집하기 위해 샌디에고 주민을 모집하도록 설계되었습니다. 다국어 웹 기반 플랫폼은 사용자 친화적인 모바일 장치 인터페이스를 사용하여 데이터 제출을 위해 만들어졌습니다. 실험실 정보 관리 시스템은 실시간 결과 추적을 통해 지리적으로 다양한 수천 개의 샘플을 수집할 수 있도록 했습니다.

도시 환경 면봉 - 환경 저수지에서 SARS-CoV-2의 샘플링 및 검출을 위한 파이프라인

중증 급성 호흡기 증후군 코로나바이러스 2(SARS-CoV-2) 대유행에 대응하여 천 안면 가리개, 면 스크럽 및 데님 바지의 온수 세탁의 바이러스 소독 효능을 테스트하기 위한 실험실 프로토콜이 개발되었습니다. Phi6 바이러스(박테리오파지)를 소독 효능을 시험하기 위한 유기체로 사용하였다.

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실험실 환경에서 일반적으로 사용되는 영역을 프리온 오염 및 효과적인 오염 제거를 평가하는 방법은 부족합니다. 여기에 설명된 프로토콜은 특정 실험실의 개별 요구 사항을 충족하도록 쉽게 수정할 수 있는 실험실 프리온 안전 스와이프 테스트를 구현하기 위한 핵심 기본 사항을 제공합니다.

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카테고리의 감지 세균성 병원균에 대한 &#39;발광 생물&#39;리포터 파지

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