Assay to Measure Nucleocytoplasmic Transport in Real Time within Motor Neuron-like NSC-34 Cells

Tom Shani; Moshe Levy; Adrian Israelson

doi:10.3791/55676

모터 뉴런과 유사한 NSC-34 세포 내에서 실시간으로 핵 세포질 수송을 측정하는 분석

JoVE Journal
Neuroscience

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Assay to Measure Nucleocytoplasmic Transport in Real Time within Motor Neuron-like NSC-34 Cells

모터 뉴런과 유사한 NSC-34 세포 내에서 실시간으로 핵 세포질 수송을 측정하는 분석

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08:53 min

May 16, 2017

DOI: 10.3791/55676-v

Tom Shani¹, Moshe Levy¹, Adrian Israelson^1,2

¹Department of Physiology and Cell Biology, Faculty of Health Sciences,Ben-Gurion University of the Negev, ²The Zlotowski Center for Neuroscience,Ben-Gurion University of the Negev

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 프로토콜은 NLS-NES-GFP 단백질의 핵 임포트에서 실시간 변화를 정량화함으로써 모터 뉴런과 유사한 NSC-34 세포 내에서 핵 세포질 수송 속도를 민감하게 측정하는 방법을 설명합니다.

이 분석의 전반적인 목표는 잠재적인 수송 속도 억제 분자의 부재 또는 존재 시 세포의 핵세포질 수송 속도의 미세한 변화를 실시간으로 검출하는 것입니다. 이 방법은 핵세포질 수송에 부정적인 영향을 미치는 것으로 제안된 ALS와 같은 특정 신경 유전 질환에 대한 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 몇 가지 장점은 민감도가 높고 정량적이며, 핵세포질 수송 속도의 미세한 변화를 실시간으로 분석할 수 있다는 것입니다.

이 절차를 시연하는 사람은 제 연구실의 대학원생인 Tom Shani입니다. 섭씨 37도의 수조에서 액체 질소 저장고에서 여섯 번째 마우스 신경모세포종 척수 세포를 약 10배로 약 1회 해동하는 것으로 시작합니다. 세포가 완전히 해동되면 원심분리로 세포를 수집하고 펠릿을 1ml의 신선한 배지에 재현탁합니다.

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