Name: 신생아 Hypoxic-허 혈 성 뇌 손상의 마우스 모델에서 Neurobehavioral 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-11-24T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: 배우세요 신생아 저산소-허혈성 뇌손상 마우스 모델에서 단측 경동맥 결찰술과 신경행동학적 평가 방법을. 이 기법은 운동 및 인지 기능 장애를 연구하는 데 활용됩니다.

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이 연구는 국립 연구 재단 (NRF 2014R1A2A1A11052042; 2015M3A9B4067068), 과학의 부 및 기술, 한국, 한국 건강 기술 R & D 프로젝트 (HI16C1012), 건강의 교육부에서 교부 금에 의해 지원 되었다 & 복지, 한국, 그리고 연세대 학교 의과대학 (6-2016-0126)의 "동화" 교수 연구 지원 프로그램

모든 동물 시설 평가 및 인증의 실험실 동물 배려 (AAALAC)에 대 한 협회에 의해 신임 된 주어진 음식에에서 대 한 표준 케이지 (27 × 22.5 × 14 cm3)에서 지 내게 및 광고 libitum 번갈아 12 h 빛/어둠 아래 물 사이클입니다. 저자 뒤 동물 보호 규정, 그리고 실험적인 절차는 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 연 세 대학 대학의과 대학에 의해 승인 되었다 (IACUC No. 2010-0252; 2013-0220).
1. 마우스 모델 신생아이 뇌 손상의
<ol><li>Isoflurane와 강아지 anesthetize<ol>
<li>Anesthetizing 상자에 강아지 (5 미만)을 놓고 뚜껑을 닫습니다.</li>
		<li>약 15 분; anesthetizing 시스템 설정 가스 및 isoflurane 테이블 상단 마 취 기계를 사용 하 여 조정 합니다. 1.5 L/분 조절 마 취의 유도 대 한 3-5 %isoflurane 기화 기에 산소 유량을 조정 합니다.</li>
		<li>15 분 후 마 취의 유지 보수에 대 한 1-2 %isoflurane 기화 기를 조정 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>해 부 현미경 (복 부 연구원 직면) 완전히 마 취 강아지를 테이프와 함께 그것을 확보.</li>
	<li>소독된가 위를 사용 하 여 목에 절 개를 ~0.7-mm을 확인 합니다.</li>
	<li>조심 스럽게 소독된 집게를 사용 하 여 지방 조직을 제거 하 고 일방적인 오른쪽 경 동맥을 노출.</li>
	<li>5-0 흡수 봉합으로 일방적인 오른쪽 경 동맥 선</li>
	<li>5-0 봉합 사로 봉합 목에 절 개.</li>
	<li>복구에 대 한 1 시간 37 ℃ 따뜻한 hypoxic 챔버에 각 강아지를 배치 합니다. 챔버 뚜껑을 닫지 마십시오.</li>
	<li>수술 후, 1 h 새끼 완전히 깨어 있을 때 산소 챔버 뚜껑 닫고 hypoxic 조건 (8% O2 와 92% N2) 확립 가스 수준을 감소.</li>
	<li>산소의 90 분 후에 그들의 감 금 소에 강아지를 반환 합니다.</li>
	<li>1 주일이 뇌 손상 후 1 단계를 반복 합니다.<ol>
<li>마 취, 후 소독된가 위와 오른쪽 뇌의 posterolateral 영역에서 뇌 병 변 식별에 집게 사용 두 피에 절 개를 확인 합니다. 참고:이 치료는 강아지에서 hypoxia를 유도합니다. 존재와 모든 쥐에서 뇌 손상의 정도 반투명 두개골을 통해 육안으로 시각적으로 부과 됩니다. 크기 또는 변색 (즉, 뇌 병 변)의 볼륨에 따라, 새끼 그룹으로 분류 됩니다. 보이는 대뇌 피 질의 상해 없음 경우 마우스 "대뇌 피 질의 부상" 그룹으로 분류 됩니다. 보이는 대뇌 피 질의 부상 (즉, 오른쪽 뇌에 병 변을) 있는 경우에, 마우스 "대뇌 피 질의 부상" 그룹으로 분류 됩니다. 뇌 샘플의 형태학 희생1,2,3의 때에 명확 하 게 정의 그룹화 수정할 수 있습니다 때문에 그룹으로 쥐의 분류는 수술 후 1 주, 4.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55838/55838fig1v3.jpg"> 그림 1: 신생아이 뇌 손상 생쥐에서 모델링. (A) 7-하루-오래 된 마우스 강아지 수술 하 고 일방적인 오른쪽 경 동맥 출혈 했다. (B) 새끼는 8% O2 와 92% N290 분의 산소 챔버에 배치 했다. (C, D 및 E) 신생아이 부상으로 두뇌 손상의 다양 한 심각도 그리고 손상의 정도에 따라 분류 했다. 14 주, 두뇌를 가져온, 그리고 병 변의 시각화 했다. (C)는 "대뇌 피 질의 상해 없음"으로 분류 하는 두뇌의 이미지. 둘 다 (D) 및 (E) "대뇌 피 질의 부상" 그룹으로 분류 했다. (F, G 및 H) (C)의 대표적인 MRI (D), 및 (E) 쥐, 각각. (F) 해 마에 피해는 노란색 화살표가 표시 되 고 오른쪽 뇌 병 변 (G 및 H) 노란색 화살표도 표시 됩니다. 스케일 바 1 mm = <a href="http://cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55838/55838fig1v3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
2. 신생아 행동 테스트
참고: 여기, 행동 테스트 나이의 6 주에 수행 했다.
<ol><li>
수동 제거 작업입니다. 참고: 메모리 기능 학습 및 혐오 자극의 제거에 따라 평가, 팻 단계를 통해 2 구획 이어야 한다 실시13,14,,1516.<ol>
<li>유리 야 셔틀 상자 (41.5 × 21 × 35 cm3) 팻 기구의의 밝은 구획에 마우스를 놓습니다.</li>
		<li>30 후 s, 단두대 문을 열고 어두운 구획으로 이동 하려면 마우스에 대 한 대기 시간을 기록 (최대 300 s).</li>
		<li>마우스의 모든 4 개의 사지는 완전히 어두운 구획 안에 단두대 문을 닫습니다.</li>
		<li>전기 발 충격을 관리 (0.5 mA) 2 s 및 그것의 감 금에 반환 마우스.</li>
		<li>전기 발 충격 후 24 h 밝은 칸에 마우스를 교체 합니다.</li>
		<li>단두대 문 10 s 후 마우스는 완전히 밝은 칸에 열고 어두운 구획으로 이동 하려면 마우스에 대 한 대기 시간을 기록 (최대 300 s).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
사다리 워킹 테스트 합니다. 참고: 사다리 가로 대 걷는 작업 질적 결합 하 여 모터 기능의 미묘한 소요와 숙련 된 걷는17,18의 정량 분석 사이 차별에 대 한 허용 됩니다.<ol>
<li>비디오 카메라를 켭니다.</li>
		<li>사다리의 시작 패널에 마우스를 놓고 즉시 녹화를 시작 합니다.</li>
		<li>마우스 팔 다리에 초점을 맞추고 비디오를 기록 합니다.</li>
		<li>마우스는 사다리의 마지막 패널에 닿을 때 녹음을 중지 합니다. 뒤로-및-앞뒤 여행 4 번 반복 합니다.</li>
		<li>비디오 녹화를 분석 하 고 수동으로 각 forelimb의 수를 다음과 같이 계산:<ol>
<li>느린 속도로 컴퓨터에 비디오 녹음 재생 (0.1 x) 단계를 수동으로 계산 하 고.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>
그립 강도 테스트 합니다. 참고: 그립 강도 테스트 푸시 풀 스트레인 게이지를 포함 하는 그립 강도 측정기를 사용 하 여 수행 됩니다.<ol>
<li>아크릴 패널에 그립 강도 장치를 수정 합니다.</li>
		<li>아크릴 패널에 마우스를 놓고 꼬리를 개최 합니다.<ol>
<li>마우스에 도달할 수 있도록 꼬리를 들고 손과 그립 기구의 금속 와이어를 이동 합니다.</li>
		</ol>
</li>
		<li>마우스 그립 금속 와이어 (직경에서 2mm);의 삼각형 조각 때까지 여러 실험을 허용 피크 힘 기구에 의해 그램에 자동으로 등록 됩니다. 참고: 3 개의 시험의 평균 피크 힘을 사용 하 여 분석19,,2021.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Yager, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+hypoxic-ischemic+brain+damage+in+the+newborn%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Pediatr+Neurol%22%5BJournal%5D)">Animal models of hypoxic-ischemic brain damage in the newborn.</a> Semin Pediatr Neurol. 11 (1), 31-46 (2004).</li>
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<li>Cho, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astroglial+Activation+by+an+Enriched+Environment+after+Transplantation+of+Mesenchymal+Stem+Cells+Enhances+Angiogenesis+after+Hypoxic-Ischemic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Astroglial Activation by an Enriched Environment after Transplantation of Mesenchymal Stem Cells Enhances Angiogenesis after Hypoxic-Ischemic Brain Injury.</a> Int J Mol Sci. 17 (9), 1-15 (2016).</li>
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</ol>

저자 아무 경쟁 관심사 있다.

이 연구에서 우리 신생아 P7-10 CD-1 마우스에이 뇌 손상을 유발 하 고 관련 인식과 모터 적자와 함께 뇌 병 변 확인. 이 절차 동안, 일방적인 오른쪽 경 동맥의 폐색 중요 했다. 이 단계에서는 동맥 손상 고 해체 될 수 있습니다. 동맥 눈물을 경험 대부분 새끼 죽 었 다. 반대로, 연구원은 일방적인 오른쪽 경 동맥 대신 다른 혈액 정 맥 출혈, 강아지의 뇌만 약간 손상, 그리고 아무 중요 한 표현 형24관찰 될 수 있었다.
이 연구, 쥐 및 병 변 볼륨, 두뇌에 있는 변이 때문에 (그림 1 C H) 여러 그룹으로 분류 했다. 가벼운 부상된 두뇌와 여러 쥐 해 마에만 대뇌 피 질의 영역 (그림 1 층)13에 손상을 했다. 반대로, 심각 하 게 손상 된 두뇌 우 반구는 외피가의 손실된 대부분 심각 했다 여러 생쥐 (...

신생아이 뇌 손상 초기 아 동기 (어린이 1000 당 약 2 명의 환자)1,2,3,,45발생합니다. 신생아이 뇌 손상에 관한 연구는 중요 한, 그리고는 설립된 신생아 안녕 뇌 부상 마우스 모델을 사용 하 여이 뇌 손상에 vivo에서 전 임상 연구를 촉진할 수 있다.
전통적인이 모델 성인 쥐6에 사용 됩니다. 신생아 모델에 대 한 쌀 있습니다 메서드는 P7 쥐7,8에 주로 사용 됩니다. 그러나, 때문에 쥐와 생쥐 약간 다른9,10, 비록 그들은 둘 다 설치류, 우리 수행 수정된 쌀 있습니다 방법 p 7-10, p 7-10 기간은 보여준 이전의 연구에 따라 CD-1 강아지에 특징 미 숙 oligodendrocytes, 인 간에 게 해당 용어 P011,12. 신생아이 마우스 모델 p 7-10 새끼에 모두 일방적인 경 동맥의 결 찰 및 8% 산소와 산소를 쥐의 노출을 통해 설정 됩니다.
쥐 오른쪽 반구의 posterolateral 영역에서 뇌 병 변의 다양 한 학위를 보여주 하는 절차를 거쳐야 합니다. 인식과 모터 적자, neurobehavioral 평가 팻에 따라 식별, 사다리, 테스트 및 그립 강도 테스트 수행 했다. 비 운영 (즉, 일반)와 쥐의 차이점 분석 되었다. 이 일이 마우스 모델에 대 한 기본 정보를 제공합니다. MRI 이미지에는 다른 고기, 모터 및 인지 테스트를 사용 하 여 뇌 손상의 심각도 따라 보여 줍니다.

<table><tbody><tr><td>저산소챔버</td><td>Jeung Do Bio & Plant Co</td><td>Experimental Builder</td><td></td></tr><tr><td>PAT 기구</td><td>양도바이오 & Plant Co</td><td>Experimental Builder</td><td></td></tr><tr><td>사다리 가로대 걷기</td><td>Jeung Do Bio & Plant Co</td><td>Experimental Builder</td><td></td></tr><tr><td>SDI 그립 강도 시스템</td><td>San Diego Instruments Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>그립 강도 측정기</td><td>Ugo Basile</td><td>47200</td><td></td></tr><tr><td>하버드 장치 플루오박 마취 시스템&nbsp;</td><td>Harvard Apparatus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Anesthetizing box</td><td></td><td></td><td>acryl box</td></tr><tr><td>I-Fran Liquid (Isofluorane)</td><td>Hana Pharm. Co., Ltd.</td><td></td><td>전신 마취제 (이소 플루란 100ml)</td></tr> <tr><td>CD-1 마우스</td><td>동양 주식회사</td><td></td><td></td></tr><tr><td>블루 나일론 모노 Non-Absorbbable 봉합사 5-0 50cm</td><td>Ailee Co., Ltd.</td><td>NB 521</td><td></td></tr><tr><td>IBM SPSS 통계</td><td>IBM</td><td>버전 23</td><td></td></tr></tbody></table>

신생아 hypoxic-허 혈 성 뇌 손상의 마우스 모델에서 neurobehavioral 평가

Neurobehavioral Assessments in a Mouse Model of Neonatal Hypoxic-ischemic Brain Injury

우리 신생아 hypoxic-허 혈 성 (HI) 모델을 만들려면 CD-1 마우스에 일방적인 경 동맥 폐색을 수행 하 고 비 운영 (즉, 에 비해 이러한 마우스 neurobehavioral 함수를 공부 하 여 신생아이 뇌 손상의 영향을 조사 일반) 쥐입니다. 연구 기간 동안 쌀 있습니다 방법은 출생 후 하루 7-10 (p 7-10) 쥐에 신생아이 뇌 손상 유발 하 사용 되었다. 이 작업은 일방적인 경 동맥 결 찰 및 hypoxia (8% O2 와 90 분의 92% N2 )에 노출에 의해 새끼에서 수행 되었다. 수술 후, 1 주일 손상 된 두뇌 반투명 두개골을 통해 육안으로 평가 되었다 고 부재 ("대뇌 피 질의 부상" 그룹) 또는 피 질 손상의 존재 ("대뇌 피 질의 부상" 그룹)에 따라 하위 그룹으로 분류 했다 오른쪽 반구에 병 변을 등 주 6 일에 다음 neurobehavioral 테스트를 수행한 인식과 모터 기능을 평가 하기: 수동 회피 작업 (PAT), 사다리, 테스트 및 그립 강도 테스트. 이러한 행동 테스트 신생아이 뇌 손상의 효과 결정 하는 데 도움이 되 고 신경 퇴행 성 질환의 다른 마우스 모델에서 사용 됩니다. 이 연구에서 신생아 안녕 뇌 부상 쥐 우 반구 손상에 대응 하는 모터 적자를 보여주었다. 행동 테스트 결과 인간의 신생아이 환자, 뇌성 마비 등 신생아 뇌졸중 환자에서에서 관찰 하는 적자와 관련이 있습니다. 이 연구에서 신생아이 뇌 손상의 마우스 모델 그리고 설립 되었다 모터 적자와 비 운영 쥐에 비해 인지 장애의 다른 정도 보여주었다. 이 일이 마우스 모델에 기본 정보를 제공합니다. MRI 이미지 다른 고기, 모터 및 인지 테스트 구분 뇌 손상의 심각을 보여줍니다.

모든 데이터는 평균 ± 표준 오차 (SEM) 의미의로 표현 됩니다. 두 그룹 사이의 변수 비교 독립 또는 쌍 t를 사용 하 여 실시 했다-SPSS 통계 소프트웨어에 대 한 테스트. P-값 < 0.05 통계적으로 중요 하 게 고려 되었다.
신생아이 부상으로 두뇌 손상의 다른 심각도 그리고 그러므로 분류 했다 (그림 1 c-E). 두뇌 주 14에서 가져온 하 고 병 변 시각화 했다. 그림 1C 는 "대뇌 피 질의 부상" 두뇌, 그림 1D 로 분류 하는 두뇌 두뇌 가벼운 부상으로 분류 고 그림 1E 심각 하 게 손상 된 두뇌를...

우리는 출생 후 하루에 일방적인 경 동맥 폐색을 수행 7-10 CD-1 신생아 hypoxic-허 혈 성 (HI) 모델을 만드는 새끼 마우스와 뇌 손상의 영향을 조사. 우리는 운영 되지 않은 정상 쥐에 비해 이러한 마우스 neurobehavioral 함수 공부.

신생아 Hypoxic-허 혈 성 뇌 손상의 마우스 모델에서 Neurobehavioral 평가

We performed unilateral carotid artery occlusion on CD-1 mice to create a neonatal hypoxic-ischemic (HI) model and investigated the effects of neonatal HI ...

인지 및 운동 능력 테스트가 수반되는 신생아 저산소-허혈성 뇌 손상 수술의 전반적인 목표는 이러한 손상 및 관련 뇌 손상을 연구하기 위한 마우스 모델을 구축하는 것입니다. 이 방법은 신생아 저산소-허혈성 뇌 손상이 운동 및 인지 기능에 어떤 영향을 미치는지와 같은 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 잘 알려져 있으며 일반적으로 널리 사용된다는 점입니다.또한 이는 뇌성마비 및 신생아 뇌졸중의 전임상 모델이기도 합니다. 일반적으로 이 방법에 익숙하지 않은 사람들은 우측 경동맥을 단독으로 식별하기 어렵기 때문에 어려움을 겪을 수 있습니다. 시연 과정에는 저와 더불어 저희 실험실의 대학원생인 신윤겸 님이 함께할 예정입니다.최소 다섯 마리의 P7 마우스 새끼를 마취시킨 후, 해부 현미경 아래에 복부가 위로 향하도록 배치합니다. 그다지 목 부위를 알코올로 소독합니다. 수술을 시작하기 위해 가위를 사용하여 목에 0.7 mm 절개를 넣습니다.그 다음, 포셉을 사용하여 단측 우측 경동맥이 노출될 때까지 지방 조직을 조심스럽게 제거합니다. 이어서 5-0 봉합사를 사용하여 단측 우측 경동맥을 결찰합니다. 이제 5-0 나일론으로 목의 절개 부위를 봉합하고, 해당 부위를 멸균 처리합니다.그런 다음, 뚜껑을 열어둔 37°C 저산소 챔버에서 새끼 쥐가 약 한 시간 동안 회복되도록 합니다. 수술 조작을 받은 다른 생쥐를 저산소 챔버에 넣어 회복시킵니다. 새끼 쥐들이 모두 완전히 깨어나면, 챔버 뚜껑을 닫고 가스 농도를 낮추어 저산소 상태를 조성합니다.90분간의 저산소증 처리 후, 뇌 손상을 입은 새끼 쥐들을 케이지로 되돌려 보냅니다. 일주일 후, 이전과 동일하게 수술을 준비하여 손상 증거를 확인합니다. 두피를 절개하여 우반구의 후외측 영역에 있는 뇌 병변을 확인합니다.반투명한 두개골을 통해 피질 손상 및 해마 손상 증거가 있는지 확인하십시오. 이에 따라 새끼 쥐를 손상군 또는 비손상 대조군으로 분류하십시오. 확인 후, 봉합사로 두피를 닫고 절개 부위를 소독하십시오.마우스가 6주령이 되었을 때, 혐오 자극의 학습 및 회피 정도를 바탕으로 기억력을 평가합니다. 이 과제에는 상용 2구획 단계 통과 수동 회피 장치를 사용합니다. 우선, 마우스를 상자의 밝은 구획에 30초 동안 둡니다.그 다음, 구획 사이의 문을 열고 동물이 어두운 구획으로 들어갈 때까지의 잠복기를 기록합니다. 과제를 수행하는 시간은 최대 300초까지 허용합니다. 마우스의 네 발이 모두 어두운 구획 안으로 완전히 들어가면 문을 닫습니다.그 다음, 2초 동안 1/2 mA의 전기 발 충격을 가한 후, 마우스를 케이지로 돌려보냅니다. 24시간 후에 테스트를 반복합니다. 이번에는 마우스가 암실로 이동할 수 있도록 충분히 300초의 시간을 주되, 마우스에게 충격을 가하지는 않습니다.질적 및 양적 분석을 모두 사용하여 운동 기능의 미세한 장애를 구분하기 위해 6주령 생쥐를 대상으로 래더 워킹 테스트를 수행합니다. 먼저 래더 장치를 설치한 다음, 장치 위에서 생쥐의 사지 움직임을 기록할 비디오 카메라를 설정합니다. 다음으로, 생쥐를 시작 패널에 놓고 비디오 카메라로 녹화를 시작합니다.비디오에서 다리 부분이 선명하게 초점이 맞았는지 확인하십시오. 마우스가 사다리 장치의 마지막 패널에 닿으면 녹화를 중단하십시오. 그런 다음 마우스를 다시 시작 패널로 옮기고, 마우스가 장치를 다시 통과하는 모습을 녹화하십시오.각 실험 날짜에 마우스 한 마리당 총 4회 반복 수행하십시오. 이후 비디오를 분석할 때, 비디오를 1/10 속도로 재생하며 각 사지에서 발생한 미끄러짐 횟수를 수동으로 측정하십시오. 사지가 바(bar) 사이로 미끄러지는 경우를 미끄러짐으로 간주합니다.마우스가 6주령이 되었을 때, 악력을 측정합니다. 패널에 고정된 지름 2 mm의 삼각형 와이어가 장착된 푸시/풀 스트레인 게이지를 사용하십시오. 마우스의 꼬리를 잡고 패널 위에 위치시킵니다.그다음, 마우스가 앞발로 금속 와이어에 닿게 합니다. 마우스가 와이어를 잡는 즉시, 잡고 있던 것을 놓을 때까지 꼬리를 부드럽게 당깁니다. 장비가 와이어에 가해진 최대 힘을 g 단위로 기록합니다.마우스에게 휴식을 주기 전에 이 테스트를 5회 반복하십시오. 악력 테스트 중에는 정확한 수행 능력을 나타내는 눈에 띄는 움직임들이 관찰됩니다. 마우스의 근육 피로를 줄이기 위해 최소 1분 동안 휴식을 취하게 하기 전, 5번의 시도 동안 이러한 움직임들을 확인하십시오.마우스가 최소 1분 동안 휴식을 취한 후, 5회 시도 시리즈를 다시 반복합니다. 그 다음, 마우스에게 다시 휴식 시간을 주고 해당 테스트 일의 마지막 시리즈를 수행합니다. 수집된 데이터에서 분석을 위해 한쪽 앞발 또는 양쪽 앞발의 상위 3개 점수의 평균값을 사용합니다.14주령의 저산소-허혈성 손상 동물의 뇌를 적출한 후, 형태학적으로 피질 손상이 없거나, 경미한 손상이 있거나, 또는 심각한 손상이 있는 것으로 평가하였습니다. 동일한 동물들을 일주일 전에 MRI로 스캔하였으며, 이 결과 또한 매우 유용했습니다. 형태학적으로 정상인 뇌조차 해마에서 경미한 손상을 보였습니다.생후 6주 및 손상 후 5주가 되었을 때, 마우스들을 대상으로 다양한 행동 과제를 통해 평가를 진행하였습니다. 저산소-허혈성 손상을 입은 마우스들은 24시간 수동 회피 과제에서 인지 기능 저하를 보였습니다. 우측 뇌반구만 손상되었기 때문에, 마우스들은 편마비성 운동 기능을 나타냈습니다.이는 각 앞다리의 사다리 가로 가로대에서 발생한 미끄러짐 비율의 차이로 확인되었습니다. 또한, 파지력은 뇌의 운동 피질과 관련되어 있으므로, 정상군과 피질 손상군 사이에 파지력 차이가 나타났습니다. 정상 대조군과 범주적으로 손상되지 않은 생쥐 사이에는 차이가 관찰되지 않았으나, 손상된 생쥐들은 분명한 기능 저하를 보였습니다.이 영상을 시청한 후, 신생아 저산소-허혈 생쥐 모델을 생성하기 위해 오른쪽 총경동맥을 일측성으로 결찰하는 방법과 후속 행동 분석을 수행하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다. 손상 7일 후 대뇌 피질에 눈에 보이는 손상이 없더라도 MRI 상에서는 해마 손상이 나타날 수 있다는 점에 유의하십시오. 또한, 새끼 생쥐를 조심스럽게 다루고 수술을 가능한 한 빠르게 완료하는 것이 중요합니다.새끼들은 피부가 매우 약하고 얇으므로 각별히 주의하십시오.

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Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

hypoxic - 허혈성 뇌 손상에 대한 출생 후의 쥐 모델은 인간의 신생아 hypoxic 허혈성 뇌증 (히에)의 잘 설립 모델입니다. 이 문서에서는, 우리는 포스트 나탈 쥐 새끼의 히에의 모델을 설명합니다.

Perinatal 국소 빈혈의 Hypoxic 허혈성 뇌증 모델

우리는 periventricular leukomalacia (PVL), periventricular 흰색 물질 병변을 특징으로 조기 유아의 지배 뇌 손상의 마우스 모델을 만들었습니다. 와 / 전신 감염없이 Hypoxia / 국소 빈혈은 PVL의 주요 원인입니다. 일방적 경동맥 내고과 lipopolysaccharide 주입없이 /로 hypoxia 노출 P6 생쥐의 PVL과 같은 병변을 만듭니다.

Periventricular Leukomalacia의 마우스 모델

이 비디오는 신생아 저산소성-허혈성 뇌 손상을 연구하기 위한 마우스 모델을 만드는 절차를 보여줍니다. 외과적으로 허혈을 유도하고 동물에게 저산소증을 가하여 뇌 손상을 악화시키는 단계를 설명합니다. 마지막으로, 결과로 생성된 뇌 병변을 평가하는 방법을 보여주어 마우스 모델이 추가 과학적 조사를 위해 준비되었는지 확인합니다.

신생아 저산소성-허혈성 뇌 손상의 마우스 모델 확립

출처: Ouyang, Y., et al. 마우스 뇌 저산소증-허혈 중 동시 PET/MRI 영상. J. Vis. Exp. (2015)이 비디오는 동시 양전자 방출 단층 촬영(PET) 및 자기 공명 영상(MRI)을 통해 뇌 저산소증 손상을 평가하는 기술을 보여줍니다. 마취된 쥐는 총경동맥(CCA) 결찰술을 받아 한쪽 뇌 반구로 가는 혈류를 감소시키고 저산소증으로 인한 손상에 걸리기 쉽습니다. PET 및 MRI 영상은 저산소증 중 포도당 대사 및 구조적 변화를 평가합니다. MRI는 제한된 수분 확산을 감지하는 반면, PET는 포도당 흡수 감소를 나타내어 저산소증으로 인한 세포 스트레스 및 대사 장애를 나타냅니다.

마우스 모델에서 뇌 저산소증-허혈에 의해 유도된 뇌 손상 이미징

주산기 질식에 따른 저산소성 허혈성 뇌병증은 동물 모델을 사용하여 연구할 수 있습니다. 우리는 신생아 저산소성-허혈성 뇌병증의 새끼 돼지 모델을 확립하는 데 필요한 절차를 보여줍니다.

신생아 저산소 - 허혈성 뇌증의 돼지 모델

Presented는 마우스 신생아 운동 테스트의 간결한 배터리입니다. 이러한 검사를 사용하면 다양한 신생아 운동 장애에서 신생아 운동 결손을 입증할 수 있습니다. 표준화된 테스트 세트를 통해 서로 다른 연구의 결과를 비교할 수 있으므로 그룹 간에 더 우수하고 정확한 보고가 가능합니다.

뇌성 마비의 신생아 마우스 모델에서 모터 테스트의 배터리

우리는 실리콘으로 코팅된 봉합사를 사용하여 중대뇌동맥의 폐색에 의해 유도된 뇌졸중의 마우스 모델을 설명합니다. 이 프로토콜은 영구적인 폐색 또는 일시적인 허혈을 유도한 후 재관류를 유도하는 데 적용할 수 있습니다.

경색 지역의 중간 동맥 폐색 기술 및 시각화를 사용하여 마우스의 허혈성 뇌졸중 및 허혈 - 재관류 유도

본 원고는 저산소증-허혈을 앓고 있는 신생아 마우스의 다중 깊이 전극을 이용한 연속 비디오 EEG 레코딩방법을 설명합니다.

신생아 쥐의 저산소증-허혈 중 연속 비디오 뇌전도

소아 뇌진탕은 생리적, 심리적 혼란을 동반한 장기적인 후유증을 초래할 수 있습니다. 이 소아 뇌진탕 마우스 모델은 장기적인 신경 염증, 백질 변화 및 행동 기능 장애를 동반한 신경 변형을 초래합니다. 이 모델은 수명 변화를 평가하기 위해 차등 충격 위치 또는 반복되는 뇌진탕에 맞게 조정할 수 있습니다.

생쥐의 소아 뇌진탕 모델: 장기 장애를 동반한 폐쇄성 두부 손상(CHILD) 

여기에서는 신생아 마우스에서 다양한 산소 농도로 통제된 환경에서 투여하여 저산소증을 유도하는 프로토콜을 제시합니다. 출생 시 산소 변화에 노출된 마우스 모델은 자폐증과 같은 행동 표현형 변화의 유도에 관여하는 miRNA의 발현을 지속적으로 변화시켰습니다.

저산소증은 마우스에서 자폐증 스펙트럼 장애의 비멘델 유전과 관련된 miRNA 수준을 변경합니다.

배우세요 신생아 저산소-허혈성 뇌손상 마우스 모델에서 단측 경동맥 결찰술과 신경행동학적 평가 방법을. 이 기법은 운동 및 인지 기능 장애를 연구하는 데 활용됩니다.

신생아 Hypoxic-허 혈 성 뇌 손상의 마우스 모델에서 Neurobehavioral 평가

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