Name: 진공 혈액 수집 시스템으로 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액 컬렉션 반복 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 12 s
Description: 배우세요 비취쥐 꼬리정맥 채혈법을 진공추출 시스템으로 반복 수집하는 방법입니다. 이 기술은 혈액 오염 위험을 줄이고 동물 스트레스를 최소화하여 신경과학 및 생리학 연구에 활용됩니다.

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저자 게 아무 승인 있다.

모든 절차는 동물 관리 위원회의 Huazhong 대학의 과학 및 기술 (중국 우한)에 Tongji 의학 대학 위원회에 의해 승인 되었다. 원고는 도착에 따르면 준비 했다 (동물 연구: Vivo에서 실험의 보고) 지침6.
1입니다. 축산
<ol><li>Sprague-Dawley (SD) 쥐를 사용 하 여 (n = 20, 10 남성 8 주 오래 된, 261 291 g 무게 의미 = 272.85 ±9.07 g) 소의 실험 동물 센터 과학 기술 대학에서 관리 및 활용에 대 한 가이드에 따라 쥐를 유지 하 고 실험실 동물은 미국 국립 보건원 (NIH 간행물 링 돤 85 호-23, 개정 1996)에 의해 게시</li>
	<li>식품 및 식 수와 표준 조건 하에서 집. 계속 쥐 나무-면도 530 cm2 장에 침구. 각 감 금 소에 두 쥐 집. (마이크로 격리 또는 통풍이 caging) 룸 환경에 모든 새 장 열어</li>
	<li>실험 프로토콜에 관련 된 직원은 정기적으로 쥐를 처리할 확인 하십시오.</li>
	<li>21 ° C와 23 ° C 사이 실내 온도 유지 요금 일반 소금 다이어트 줄 (0.3 %NaCl) 연구를 통해.</li>
</ol>2. 혈액 수집 절차
참고: 진공 혈액 수집 시스템 및 구성 됩니다 이중 지적 바늘 [22 G (0.7 m m x 25 m m)], 플라스틱 홀더, 고무 마 개 (그림 1)와 진공 튜브 (2 mL)의 시리즈.
<ol><li>플라스틱 금지 홀더에 쥐를 놓고 어떤 보이는 흙 이나 배설물을 제거 하려면 따뜻한 (20-30 ° C) 물으로 꼬리를 세척 합니다. 보조 확장된 위치에 꼬리를 보유 하면서 70% 에탄올, 꼬리를 닦 고 취소 정 맥을 거 즈로 청소.</li>
	<li>위치에서 측면 꼬리 정 맥 (약 5mm) 중 하나에 22 G 나비 바늘 팁을 삽입 (그림 2) 약 20 °의 각도에서 꼬리의 끝에서 약 2-3 cm. 진공 혈액 컬렉션 튜브 (그림 3)에 나비 바늘의 고무 끝을 삽입 하 여 진공 컬렉션 튜브에 혈액을 수집 합니다. 참고: 최대 컬렉션 혈액 볼륨 1.2 mL7입니다.</li>
	<li>혈액 수집 후 바늘을 제거 하 고 부드럽게 혈액의 흐름을 중지 하려면 15-30 s 거 즈와 펑크 사이트에 압력을 적용 합니다. 그런 다음, 플라스틱 금지 홀더에서 쥐를 놓고 그것의 감 금 소에는 쥐를 반환.</li>
	<li>항 응고 제를 수집 혈장으로 EDTA를 포함 하는 튜브를 사용 합니다. 부드럽게 반전 튜브 여러 번 혈액 응고 제를 혼합 하 여 얼음 샘플을 수직으로 배치.</li>
	<li>혈액 샘플 컬렉션 튜브 플라스마 또는 혈 청을 10 분 2000 x g에서 냉장된 원심 분리기에 원심</li>
	<li>혈장/혈 청, 빨간색과 흰색 혈액 세포 층을 방해 하지 않도록 주의 복용의 압축을 풉니다. 혈액 혈 청 수집, 응고 제 없이 튜브를 사용 합니다. 두 가지 유형의 샘플 즉시 사용할 하거나 최대 1 년-80 ° C에 저장 될 수 있습니다. 참고: 성공적인 혈액 컬렉션 때마다 1.2 mL 혈액을 얻기로 정의 했다. 최대 펑크 시간 설정 3 재판에 전체 혈액 볼륨 세 번째 찔린 후 1.2 mL 보다 낮은 경우 정의 된 실패 한 혈액 컬렉션으로. 샘플링 기간 꼬리 정 맥 빵 꾸에서 혈 후 나비 바늘의 제거를 시작합니다.</li>
	<li>
2 주7이내 두 번 피를 수집 합니다.
	<ol>
<li>테스트 하 고이 방법의 타당성을 확인,이 혈액 컬렉션 프로토콜을 수행 하기 전에 두 학생 (초보자) 2 h에 대 한 훈련. 20 쥐를 사용 하 고 2 경험 있는 사람들 (실험 그룹)에 의해 10 쥐에서 그리고 2 의료 학생 들 (초급 그룹) 10 쥐에서 혈액을 그립니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 통계 분석
<ol><li>평균값이 ± 표준 편차로 데이터 및 SPSS 통계 17 분석. Α 값이 0.05 선정 되었다, 따라서 p < 0.05 통계적으로 중요 하 게 고려 되었다.</li>
</ol>

<ol><li>Brown, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+collection+from+the+tail+of+a+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Blood collection from the tail of a rat.</a> Lab Anim (NY). 35 (8), 24-25 (2006).</li>
<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).</li>
<li>Staszyk, C., Bohnet, W., Gasse, H., Hackbarth, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+vessels+of+the+rat+tail%3A+a+histological+re-examination+with+respect+to+blood+vessel+puncture+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Blood vessels of the rat tail: a histological re-examination with respect to blood vessel puncture methods.</a> Lab Anim. 37 (2), 121-125 (2003).</li>
<li>Lee, G., Goosens, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sampling+blood+from+the+lateral+tail+vein+of+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Sampling blood from the lateral tail vein of the rat.</a> J. Vis. Exp. (99), (2015).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22WHO+Guidelines+on+Drawing+Blood%3A+Best+Practices+in+Phlebotomy+WHO+Guidelines+Approved+by+the+Guidelines+Review+Committee%22">WHO Guidelines on Drawing Blood: Best Practices in Phlebotomy WHO Guidelines Approved by the Guidelines Review Committee</a>. , (2010).</li>
<li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+bioscience+research+reporting%3A+ARRIVE-ing+at+a+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Anim. 44 (4), 377-378 (2010).</li>
<li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood%2C+including+routes+and+volumes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Toxicol%22%5BJournal%5D)">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> J Appl Toxicol. 21 (1), 15-23 (2001).</li>
<li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+device+for+collecting+cord+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">A new device for collecting cord blood.</a> Obstet Gynecol. 86 (5), 850-852 (1995).</li>
<li>Reynolds, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+a+new+device+for+blood+sampling+in+cats+with+a+vacuum+tube+collection+system+-+plasma+biochemistry%2C+haematology+and+practical+usage+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Feline+Med+Surg%22%5BJournal%5D)">Comparison of a new device for blood sampling in cats with a vacuum tube collection system - plasma biochemistry, haematology and practical usage assessment.</a> J Feline Med Surg. 9 (5), 382-386 (2007).</li>
<li>Wiwanitkit, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+blood+specimens+from+plain+and+gel+vacuum+blood+collection+tubes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Med+Assoc+Thai%22%5BJournal%5D)">Comparison of blood specimens from plain and gel vacuum blood collection tubes.</a> J Med Assoc Thai. 84 (5), 723-726 (2001).</li>
<li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter%5BTitle%5D)+AND+%22Acad+Emerg+Med%22%5BJournal%5D)">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Acad Emerg Med. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li>
</ol>

저자 공개할 게 없다

현재 보고서 쥐에서 배우기 쉬운 혈액 수집 방법을 설명합니다. 우리의 결과이 방법은 쥐에서 반복적으로 많은 양의 혈액을 수집에 대 한 가능을 보여주었다. 또한,이 방법은 단기 학습 곡선와 함께 쉽게 마스터 수 수 있습니다. 이 절차는 비 취 쥐에서 수행할 수 있습니다 고만 동물에 되도록 최소한의 스트레스.
혈액은 다양 한 위치에서 쥐에서 수집할 수 있습니다. 꼬리 정 맥 혈액 샘플링4우수한 위치 이다. 그러나, 그것은 항상 쉽지 않다를 쥐의 얇고 낮은 혈액 흐름 꼬리 정 맥에서 충분 한 혈액 볼륨. 진공 혈액 수집 시스템으로 매일 임상 연습에 있는 환자에서 혈액 샘플을 수집 하기 위해 사용 됩니다. 이 진공 혈액 수집 시스템은 오랜 시간8,,910에 대 한 환자와 연구 동물에서 사용 되었습니다. 실리콘 코팅된 내부 관 벽과 나비 바늘 진공 혈액 컬렉션 튜브가이 시스템에 의하여 이루어져 있었다. 그것은 진공 부정 압력 원리에 근거 했다 하 고 또한 오염 및 용 혈11의 기회를 감소 시키는 혈액 수집의 위험 없이 혈액의 연속 그림을 수 있습니다. 카 테 터에서 혈액 샘플의 볼륨은 약 0.3 mL. 꼬리 정 맥에서 바늘을 철수, 후 카 테 터에 차단 혈액 수집 진공 튜브 진공 때문에 흐름 것입니다. 이 메서드는 또한 작은 바늘 바늘의 사용 미만 100 g 무게 쥐에서 혈액을 수집 적용 됩니다.
이 혈액 수집 방법에는 여러 가지 장점이 있습니다. 이 절차만 되도록 최소한의 부상 쥐 혈 마 취약의 사용 없이 실행 될 수 있다, 따라서 혈액 샘플에는 스트레스 반응 및 마 취약의 영향을 피할 수 있습니다. 우리의 관측 보여주었다 쥐 절차 동안에 플라스틱 금지 홀더 조용 했다 고이 실험 동안 아무 죽음이 있었다. 둘째, 모든 하나는 혈액 컬렉션을 반복 또는 이틀 가능, 다양 한 연구 목적에 대 한 적절 한 볼륨으로 혈액의 자주 샘플링 수 있습니다. 마지막으로,이 메서드는 쉽게 배울 수 이며 쉽게 지배 되었다 초보자가 짧은 (2 시간) 학습 기간 후,이 보고서에서 실험 및 초급 그룹 사이 펑크 시간과 비슷한 성공률에 표시 된 대로. 이전 보고서에서 리 외. 쥐4의 측면 꼬리 정 맥에서 혈액 샘플링의 유사한 방법 설명. 우리의 방법은 보고 리 외 보다 간단 4 우리가 직접 삽입 바늘 바늘 꼬리 정 맥 그리고 튜브의 다른 쪽 끝에 직접 연결 되어 여분의 주사기의 사용과 혈액의 수동 포부 없이 고의 필요 없이 혈액을 수집 하기 위한 진공 튜브 ' 우유 ing' 혈액 흐름을 촉진 하기 위하여 정 맥. 이 닫힌 시스템 피를 수집 혈액 오염의 위험을 줄여줍니다. 플라스틱 금지 소유자의 사용 또한 쥐에는 스트레스를 감소 하 고 꼬리의 고정을 용이 하 게.
다음 두 단계는이 방법의 성공적인 응용 프로그램에 대 한 중요 합니다. 1) 꼬리 고 꼬리;의 움직임을 방지 2) 천천히 정 맥을 정 맥을 통해 펑크를 피하기 위해 정 맥에 바늘 바늘을 계속 20 °의 각도에서 찔린 합니다.
결론적으로, 쥐에서 채택 된 진공 혈액 수집 방법, 가능 하 고, 안전 하 고 쉽게 연습입니다. 이 메서드는 적절 한 혈액 볼륨 비 취 쥐에서 얻은 혈액의 자주 샘플링을 수 있습니다.

쥐에서 혈액 샘플링은 다양 한 실험 연구에 대 한 필요 합니다. 쥐에서 혈액 컬렉션에 대 한 기술은 펑크는 심장의, 복고풍 궤도 총, 경 정 맥, saphenous 정 맥, 꼬리 혈관, 경 동맥, 복 부 대동맥, 베 나 정 맥을 포함 한다. 대부분 기술 (제외 saphenous 정 맥 및 꼬리 혈관 빵 꾸) 마 취1,2필요합니다. 쥐 꼬리의 혈관은 정기적으로 혈액 샘플링 및 혈관 주입 구멍을. 따뜻한 물으로 꼬리, 치료 후 혈관 쥐 마 취3경우에 잘 열려진 조작에 적합 하 고 있습니다.
작은 실험실 동물2에서 혈액 샘플을 얻기 위해 새롭고 향상 된 기술 개발에도 불구 하 고 그것은 항상 쉽게 작은 동물에서 샘플링 하는 경우 충분 한 혈액을 얻을. 쥐의 꼬리 정 맥 혈액 샘플링4우수한 위치 이다. 그러나, 꼬리 정 맥은 얇은, 따라서 가끔 펑크 하드 이며 그것의 낮은 혈액 흐름으로 인해 충분 한 혈액을 얻을 하는 데 시간이 오래 걸릴 것 이라고. 혈액 컬렉션 튜브 진공 추출 시스템을 통해 매일 임상 연습에서 전형적인 방법은. 이 닫힌된 시스템 피 수집에 대 한 혈액에 직접 노출의 위험을 감소 하 고 단일 venipuncture5에서 여러 개의 샘플을 쉽게 했다. 현재 보고서에는 비 취 쥐 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 간단한 꼬리 정 맥 혈액 샘플링 방법을 설명 합니다. 이 방법은 쉽게 마스터 하 고 쥐에서 반복적으로 혈액의 큰 볼륨을 가져오는 데 사용할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>이중 뾰족한 바늘</td><td>Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td><td>22G&nbsp;</td><td>(0.7&times; 25mm)</td></tr> <tr><td>진공관</td><td>Wuhan Zhi Yuan, Medical Science and Technology co., LTD, 중국</td><td>2ml</td><td></td></tr><tr><td>쥐 구속 홀더&nbsp;</td><td>상하이 강 농 의료 기기 co., LTD, 중국</td><td>250g 쥐 hoder 모델</td><td></td></tr><tr><td>쥐</td><td></td><td></td>를 위한 일반 소금 다이어트 <td>쥐는 연구 전반에 걸쳐 일반 소금 다이어트(0.3% NaCl)를 받았습니다</td></tr>. 통계 <tr><td>분석을 위한 SPSS 소프트웨어</td><td>SPSS Inc,&nbsp; 시카고; 미국&nbsp;</td><td>버전 17.0.&nbsp;</td><td></td></tr></tbody></table>

진공 혈액 수집 시스템으로 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액 컬렉션 반복

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

혈액은 샘플링 위치 수에 쥐에서 수집할 수 있습니다. 예를 들어, 꼬리 정 맥 혈액 샘플링에 대 한 우수한 위치 이다. 그러나, 꼬리 정 맥은 얇은 펑크 때로는 어렵다. 또한, 꼬리 정 맥 낮은 혈액 흐름이 고 충분 한 혈액을 얻을 수 있는 긴 샘플링 시간을 요구 한다. 현재 보고서는 간단한 혈액 샘플링 방법을, 여기 쥐 비 취를 위해 사용 하는 환자에서 혈액 샘플을 얻기 위해 일반적으로 사용 되는 진공 혈액 수집 방법에 설명 합니다. 22 G 나비 바늘 팁 하나 약 20 °, 그리고 혈액의 각도에서 꼬리의 끝에서 약 2-3 cm는 버지니아에 나비 바늘의 고무 끝을 삽입 하 여 진공 컬렉션 튜브에 수집 된 측면 꼬리 정 맥에 삽입 된 cuum 혈액 컬렉션 튜브입니다. 현재 실험 결과 성공률은 실험적인 그룹에서 95%와 90% 초급 그룹에 표시 됩니다. 성공 속도 펑크 번 두 그룹 사이 유사 했다. 샘플링 기간 실험 그룹 초급 그룹에 비해 상당히 짧은 했다. 결론적으로, 비-마 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액을 순차적 샘플링에 대 한이 진공 혈액 수집 방법 이며 가능한 쉽게 배우기, 하 수도 역할을 통상 혈액 샘플링 기법을 사용 하는 다른 신뢰할 수 있는 대안 쥐입니다.

샘플링 기간, 몸 질량, 및 두 그룹의 혈액 컬렉션 볼륨 혈액은 각 그룹에서 2 주 이내에 두 번 10 쥐 (5 남성)에서 수집 되었다. 두 그룹의 평균 몸 질량 유사 했다 (272.00 ±9.66 g와 273.70 ±8.87 g). 실험 그룹 초급 그룹에 비해 상당히 짧은 했다 샘플링 기간 (3.28 ±0.83 분, p 대 2.77 ±0.53 분 < 0.05) (표 1).
성공 속도 두 그룹의 펑크 성공률은 실험적인 그룹에서 95% (19/20) 및 초보자 그룹에서 90% (18/20) (p > 0.05). 펑크 시간 두 그룹 사이 크게 다른 되지 않았습니다 (1.50 ±0.61 분 대 1.85 ± 0.75 분, p > 0.05) (표 2). 이 결과이 방법은 쉽게 배울 수 이며 기술 2 h에 대 한 훈련 후 마스터 수 나타냅니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig1.jpg"> 그림 1 : 2 mL 진공 혈액 컬렉션 튜브 (왼쪽), 22 G 나비 바늘 (센터), 플라스틱 금지 홀더 (오른쪽). <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig2.jpg"> 그림 2 : 바늘 팁 측면 꼬리 정 맥 (약 5 m m)에 위치에서 삽입 된 대략 20 °의 각도에서 꼬리의 끝에서 약 2-3 cm. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55852/55852fig3.jpg"> 그림 3 : 성공적인 venipuncture. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/55852/55852fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="5">실험 그룹</td>
			<td></td>
			<td colspan="5">초급 그룹</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>성별</td>
			<td>몸 무게 (g)</td>
			<td>수집 된 혈액 양 (mL)</td>
			<td>샘플링 기간 (분)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>성별</td>
			<td>몸 무게 (g)</td>
			<td>수집 된 혈액 양 (mL)</td>
			<td>샘플링 기간 (분)</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
			<td></td>
			<td>B1-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E1-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>291</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B1-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>282</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.18</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.3</td>
			<td></td>
			<td>B2-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.73</td>
		</tr>
<tr>
<td>E2-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>276</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.37</td>
			<td></td>
			<td>B2-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>264</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.47</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>267</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.73</td>
			<td></td>
			<td>B 3-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.52</td>
		</tr>
<tr>
<td>E3-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>267</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.88</td>
			<td></td>
			<td>B3-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.41</td>
			<td></td>
			<td>B4-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.32</td>
		</tr>
<tr>
<td>E4-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>263</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B4-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>289</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.62</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.61</td>
			<td></td>
			<td>B5-1</td>
			<td>남성</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.48</td>
		</tr>
<tr>
<td>E5-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>265</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B5-2</td>
			<td>남성</td>
			<td>277</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.12</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.33</td>
			<td></td>
			<td>B6-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>274</td>
			<td>0.9</td>
			<td>4.87</td>
		</tr>
<tr>
<td>E6-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>285</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.03</td>
			<td></td>
			<td>B 6-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>274</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.37</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.82</td>
			<td></td>
			<td>B7-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>268</td>
			<td>1.0</td>
			<td>3.93</td>
		</tr>
<tr>
<td>E7-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>271</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.42</td>
			<td></td>
			<td>B7-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.82</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.93</td>
			<td></td>
			<td>B8-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.07</td>
		</tr>
<tr>
<td>E8-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>268</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.05</td>
			<td></td>
			<td>B8-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>262</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.67</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.52</td>
			<td></td>
			<td>B9-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.38</td>
		</tr>
<tr>
<td>E9-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>273</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.17</td>
			<td></td>
			<td>B9-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>281</td>
			<td>1.2</td>
			<td>4.57</td>
		</tr>
<tr>
<td>E 10-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>1.82</td>
			<td></td>
			<td>B10-1</td>
			<td>여성</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.53</td>
		</tr>
<tr>
<td>E10-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>261</td>
			<td>1.2</td>
			<td>3.25</td>
			<td></td>
			<td>B10-2</td>
			<td>여성</td>
			<td>275</td>
			<td>1.2</td>
			<td>2.28</td>
		</tr>
<tr>
<td>평균</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>2.77</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>3.28</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">엉-1: 첫 번째 혈액 컬렉션에 대 한 실험적인 그룹에 있는 쥐의 일련 번호입니다.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">엉-2: 두 번째 혈액 컬렉션에 대 한 실험적인 그룹에 있는 쥐의 일련 번호입니다.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Bn-1: 첫 번째 혈액 컬렉션에 대 한 초보자 그룹에서 쥐의 일련 번호입니다.</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="11">Bn-2: 두 번째 혈액 컬렉션에 대 한 초보자 그룹에서 쥐의 일련 번호입니다.</td>
		</tr>
</tbody></table>표 1: 혈액의 결과 실험적인 그룹 초급 그룹에 수집.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td>혈액 컬렉션 시간</td>
			<td>평균 펑크 시간</td>
			<td>한 번 빵 꾸</td>
			<td>두 번 펑크</td>
			<td>세 번 펑크</td>
			<td>실패</td>
			<td>성공률</td>
		</tr>
<tr>
<td>실험 그룹</td>
			<td>20</td>
			<td>1.50 ±0.61</td>
			<td>11</td>
			<td>8</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>95%</td>
		</tr>
<tr>
<td>초급 그룹</td>
			<td>20</td>
			<td>1.85 ± 0.75</td>
			<td>7</td>
			<td>9</td>
			<td>2</td>
			<td>2</td>
			<td>90%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">한 번 빵 꾸: 첫 번째 찔린 후 성공적인 혈액 컬렉션 쥐의 수</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">두 번 펑크: 성공적인 혈액 컬렉션 두 번째 펑크 후 쥐의 수</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">세 번 펑크: 성공적인 혈액 컬렉션 3 찔린 후 쥐의 수</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5">실패: 실패 한 혈 세 번째 찔린 후 쥐와 수</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
</tbody></table>표 2: 펑크 시간과 초보자 그룹과 실험 그룹의 성공률의 비교.

여기, 비 취 쥐 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 간단한 꼬리 정 맥 혈액 샘플링 방법을 설명 합니다. 이 방법은 혈액에 직접 노출의 위험을 감소 하 고 단일 venipuncture에서 여러 샘플을 채 취하고 단순화 합니다.

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

본 보고서는 진공 채혈관 시스템을 이용한 비마취 랫드의 단일 꼬리 정맥 혈액 채취 방법을 설명합니다. 우선 랫드를 고정하고 꼬리를 세척한 후 70% ethanol로 닦아냅니다. 그런 다음, 확장된 외측 꼬리 정맥 중 하나에 버터플라이 바늘 팁을 삽입하고, 버터플라이 바늘의 고무 끝단에 연결된 진공 채혈관에 혈액을 수집합니다.마지막으로 바늘을 제거하고 혈액 천자 부위를 지혈합니다. 이 채혈 기술의 핵심은 진공 채혈관 시스템을 사용하는 것입니다. 이를 통해 혈액에 직접 노출될 위험을 줄일 수 있으며, 한 번의 정맥 천자로 여러 개의 시료를 더 쉽게 채취할 수 있습니다.이 절차는 저희 실험실의 구성원인 Yanyang Cheng과 Zhong Peng이 시연할 것입니다. 먼저, 플라스틱 홀더, 고무 마개가 달린 진공 튜브, 이중 뾰족 바늘(double pointing needle)을 준비하십시오. 이 재료들을 멸균된 표면에 놓으십시오.다음으로, 앞발과 뒷발이 편안한 위치에 있고 호흡에 제한이 없는지 확인하며 쥐를 플라스틱 보정기에 넣습니다. 그런 다음 보정기를 단단한 작업 표면 위에 놓습니다. 꼬리는 실험대 가장자리 밖으로 길게 늘어뜨립니다.혈액 샘플을 채취하기 위해, 꼬리를 20~30 °C의 온수로 씻어 눈에 보이는 오염물을 제거합니다. 70% ethanol로 닦아 꼬리 혈관을 확장시킵니다. 그다음, 혈액 채취를 위해 동맥의 측면에 위치한 좌측 또는 우측 꼬리 정맥의 위치를 확인합니다.꼬리 하단부의 정맥 절편을 채취합니다. 샘플 수집 과정 동안 꼬리가 곧게 유지되도록 꼬리 끝부분 근처를 부드럽고 단단하게 잡습니다. 이제 22g 버터플라이 바늘 팁을 꼬리 끝에서 약 2~3cm 떨어진 위치의 외측 꼬리 정맥 중 하나에 약 20도 각도로 약 5mm 깊이로 삽입합니다.정맥에 천자되면 혈액이 바늘로 흘러 들어옵니다. 이때 버터플라이 바늘의 고무 끝부분을 진공 채혈관에 신속하게 삽입하십시오. 그러면 혈액이 진공 채혈관으로 천천히 흘러 들어갑니다.계획된 채혈량은 매회 1.2 mL입니다. 적절한 샘플 양이 수집되면 정맥에서 바늘을 제거하고, 지혈을 위해 삽입 부위를 짧게 압박합니다. 혈장(blood plasma)을 수집하려면 항응고제로 EDTA가 포함된 튜브를 사용하십시오.튜브를 여러 번 천천히 뒤집어 혈액을 혼합하고 응고를 방지합니다. 그리고 샘플을 얼음 위에 수직으로 세워 둡니다. 혈장과 혈청을 분리하기 위해 전혈 샘플 채취 튜브를 냉장 원심분리기에서 10분 동안 회전시킵니다.적혈구와 백혈구 층이 섞이지 않도록 주의하며 혈장을 용출합니다. 혈청을 수집하려면 항응고제가 없는 튜브를 사용하십시오. 두 종류의 시료 모두 즉시 사용하거나 -80 °C 이하에서 최대 1년 동안 보관할 수 있습니다.본 방법의 타당성을 테스트하고 검증하기 위해, 초보자 그룹으로서 의대생 2명이 이 채혈 프로토콜을 수행하기 전 2시간 동안 교육을 받았습니다. 그리고 숙련된 펠로우 2명이 실험군으로 참여하였습니다. 결과에 따르면 성공률은 실험군에서 95%, 초보자 그룹에서 90%로 나타났습니다.성공률과 천자 시간은 두 그룹 간에 유사했습니다. 채혈 소요 시간은 초보자 그룹에 비해 실험군에서 유의미하게 짧았습니다. 이 채혈 기술은 쥐의 반복적인 혈액 수집에 간단하고 효율적이며, 매회 충분한 혈액량을 확보할 수 있었습니다.또한, 이 방법은 습득하기 쉬우며 마취하지 않은 쥐에게 시행할 수 있어 동물에게 가해지는 스트레스가 최소화됩니다. 진공 혈액 채취법을 채택하면 진공과 압력으로 인해 혈액 접촉의 위험 없이 지속적인 채혈이 가능하며, 이는 오염 및 용혈의 가능성 또한 낮추어 줍니다.

repeated-blood-collection-from-tail-vein-non-anesthetized-rats-with

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

혈액 샘플은 생체 내 생리학적 상태나 질병의 바이오마커를 평가하는 데 유용합니다. 여기에서는 쥐의 측면 꼬리 정맥에서 혈액을 샘플링하는 방법론을 설명합니다. 이 방법은 최소한의 통증과 침습성으로 빠른 샘플을 제공합니다.

쥐의 측면 꼬리 정맥에서 혈액을 샘플링

여기, 선물이 쥐 하 정 맥에서 혈액 샘플을 수집 하는 프로토콜.

쥐에서 혈액 샘플 컬렉션의 대체 방법으로 빵 꾸 하 정 맥

이 연구 보고 안경 돋보기와 진공 추출 튜브 시스템을 사용 하 여 쥐에서 꼬리 정 맥에서 혈액 샘플링 합니다. 우리의 방법은 연습을 쉽게 이며 쥐에 반복 혈액 샘플링에 사용 될 수 있었다.

진공 혈액 수집 시스템 및 안경 돋보기와 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈 수정된

본 프로토콜은 쥐의 쇄골 하 정맥으로부터 혈액을 수집하는 간단하고 효율적인 방법을 기술한다. 마취 없이 빠르고 시기적절하며 쉽게 식별할 수 있는 샘플링이 가능하며 반복적인 샘플 수집을 통해 고품질 혈액을 얻을 수 있습니다.

의식 쥐의 쇄골 하 정맥에서 반복적 인 혈액 샘플링

여기에서 우리는 쥐 모델에 대해 빠르고 쉽고 신뢰할 수 있는 채혈 대안을 제공하는 프로토콜을 제시합니다. 우리는 문맥에 따라 세 가지 다른 혈액 샘플링 방법을 설명합니다: 마취 또는 의식이 있는 동물에 대한 꼬리 정맥 천자, 마취 하에 등쪽 음경 정맥 천자.

쥐 모델에서 혈액 샘플링을 위한 수정된 꼬리 정맥 및 음경 정맥 천자

이 프로토콜은 지속적인 비디오 뇌전도(EEG) 모니터링과 병행하여 수행된 간질 쥐의 반복적인 뇌척수액 및 혈액 수집을 보여줍니다. 이는 다양한 체액 분자의 변화와 발작 활동 사이의 가능한 연관성을 탐구하는 데 도움이 됩니다.

EEG 기록 중 쥐의 측면 꼬리 정맥에서 뇌척수액 및 혈액 샘플링

여기에서는 마취 없이 쥐에서 빠르고 안전하며 반복적인 채혈을 가능하게 하는 효과적인 쥐 제한과 쇄골하 정맥 천자 방법의 조합을 제시합니다.

의식이 있는 쥐의 쇄골하 정맥 혈액 샘플링

이 비디오는 여러 스토리지 형식으로 인간의 췌장을 처리를위한 해부 절차를 보여줍니다. 해부 학적 방향이 지역의 섬 조성 및 밀도의 정의를 허용하도록 췌장 영역에 걸쳐 유지됩니다.

인간의 췌장을위한 컬렉션 프로토콜

바이오 마커는 질병이나 건강의 직접 측정 한 생물학적 지표입니다. 인구 및 사회 과학, 바이오 마커, 전송을 쉽게 얻을 수 있으며, 분석 할 필요가있다. 말린 혈액 스팟 (DBS) 컬렉션이이 요구 사항을 충족, 높은 응답 속도로 현장에서 수집하고 생체의 다양한 분석 할 수 있습니다.

건강 바이오 마커의 혈액 스팟 컬렉션 인구 연구에의 참여를 극대화하기 위해 건조

자궁경부에서 림프구와 단핵구를 채취하기 위해 사이토브러시 샘플링을 사용하는 것은 여성 생식기 면역 분석을 위한 샘플을 제공하는 최소 침습 기술입니다. 이 프로토콜에서는 유세포 분석 분석을 위한 cytobrush 샘플 수집 및 면역 세포 분리에 대해 설명합니다.

컬렉션, 격리, 인간 자궁 경부 샘플의 유세포 분석

배우세요 비취쥐 꼬리정맥 채혈법을 진공추출 시스템으로 반복 수집하는 방법입니다. 이 기술은 혈액 오염 위험을 줄이고 동물 스트레스를 최소화하여 신경과학 및 생리학 연구에 활용됩니다.

진공 혈액 수집 시스템으로 비 취 쥐의 꼬리 정 맥에서 혈액 컬렉션 반복

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