Name: 연결 간 파티션과 무대 Hepatectomy (ALPPS) 절차에 대 한 포털 정 맥 결 찰의 쥐 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: 학습하세요 쥐에서 문맥 정맥 결찰과 실질 절개를 결합한 ALPPS 수술 모델을 통해 급속한 간 비대를 유도하는 방법을. 이 기법은 재생 의학 연구와 치료제 평가에 활용됩니다.

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저자 아무 승인 있다.

이 프로토콜에서 모든 실험 취리히, 스위스의 구획의 수의 당국에 의해 승인 했다 (60/2014 번). 또한, 모든 실험 단계 수행한 동물 실험에 대 한 지침의 엄격한 준수 스위스 아카데미 의료 과학 (SAMS) 및 지침의는 연맹의 유럽 실험실 동물 과학 협회 (FELASA) .
1. 축산, 수술 실 장비 및 악기, 마 취
<ol><li>12/12 h 명암 주기에서 표준 병원 체 자유로운 조건에서 통풍이 연습장에 250-300 g의 무게로 남성 Wistar 쥐를 유지. 게 동물 무료로 음식과 물 22 ±의 온도에서 1 ° c.</li>
	<li>Isoflurane 30 5 vol %로 플러시는 상자에서 마 취 유도 s (그림 1A), 동물 깊은 마 취 될 때까지 3 vol %의 isoflurane 농도 옵니다. 발가락-핀치 반사에 의해 마 취의 수준을 확인 합니다.</li>
	<li>0.02 mg/kg 매 12 h 48 h에 대 한 수술 후 단계에서 다음 과적 동안 buprenorphine (0.01 mg/kg)를 적용 하는 진통 피하 사용 하 여 제공 합니다.</li>
	<li>동물 들은 자발적으로 호흡 가스 혼합물의 산소에서 1.0-2.5 집 %isoflurane 노출 작업 장소에 전송 (흐름: 600 mL/min).</li>
	<li>동물의 눈을 닫고 연 고를 사용 하 여 눈을 보호 합니다. 5 mL 식 염 수를 피하 주사, 복 부의 각 측에 그것의 뒤에 0.1 mg 아트로핀.</li>
	<li>수술 방에 미세 수술 현미경을 사용 하 여 수행 합니다.</li>
	<li>쥐의 주 둥이 통해 푸시됩니다 라텍스 막 (그림 1B)의 구성 된 환기 마스크를 사용 하 여 휘발성 마 취 동물 유지. 수정 테이프 (그림 1B)와 사지.</li>
	<li>옆 테이블에 살 균 방식에서 수술 악기 배치: 염 분 및 Betadine 젖은 스폰지 (그림 2A), 복 부 복 부 벽 및 칼가 위, Adson의 철회에 대 한 3-0 봉합 뿐만 아니라 견인 기 (그림 2B) 벽 집게, 바로 팁 microforceps 좋은 곡선 및 미리 결 찰 절차 (그림 2C)에 대 한 6-0 실크 넥타이 잘라.</li>
	<li>간 실질의 transection 튀어나와 비 바이 폴라 microforceps를 사용 합니다. 복 벽과 피부 SH 1 바늘과 5-0 슨 (그림 2D) 3-0 비단 봉합을 사용 하 여 닫습니다. 바이 폴라 집게를 사용 하 여 hemostasis에 대 한.</li>
</ol>2입니다. 수술의 시작
<ol><li>성 기에 있는 칼에서 작은 동물 머리 깎기로 동물의 복 부는 중간의 2 cm 지역 측면을 면도. 철저 하 게 머리를 제거 합니다.</li>
	<li>3 번 betadine 젖은 스폰지와 함께이 지역 소독.</li>
	<li>중간 절 개는 피부에 대 한 메스를 사용 하 여 수행 하 고 복 부를 수술가 위를 사용 하 여.</li>
	<li>오른쪽 및 왼쪽된 복 부 벽과 3-0 비단 봉합 (그림 3A)와 칼을 철회.</li>
	<li>위, 결 장 및 작은 창 자 작은 와이어 견인 기 (그림 3B)와 쥐의 hepatoduodenal 인 대에서 철회.</li>
</ol>3. 포털 정 맥 결 찰 (PVL)
<ol><li>복 부와 작은 창 자 (그림 3B)의 측면 철회 하 여 포털 정 맥 및 그것의 분 지를 액세스할.</li>
	<li>microforceps와 함께 복을 따기와 천천히 medially 필 링 퉁 명 스럽게 포털 정 맥을 해 부.</li>
	<li>
다음 순서로 (그림 3C) 밖으로 문맥 분 지 부: (1) 바로 후부 지점, (2) 왼쪽 측면 왼쪽된 중간 지점, 그리고 (3) 꼬리가 지점.
	<ol>
<li>첫째, 복 범위에서 직접 실행 하는 간 엽에 작은 동맥 가지를 찢 어 하지 않도록 작은, 너무 활기찬 움직임으로 복을 벗기다.</li>
		<li>일단 주요 포털 정 맥 걸치기 느린 앞으로 밀기와 분기를 둘러싸 자 고 확산 움직임 그리고 풀 6-0 실크의 1 cm 조각 각각 포털 정 맥 분기 주위 넥타이 그것을 위하여.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
바로 후부 엽 분 지 선 (그림 3C) 바로 후부 분기의 기술적인 어려움 바로 후부 엽 하 동맥 바로 후부 문맥 분 지에 걸쳐 실행 하는 사실에서 이루어져 있다.
	<ol>
<li>Cranially 곡선된 microforceps와 오른쪽 문맥 분 지를 폭로 복 함께 동맥을 당겨.</li>
		<li>위하여 사전 커트로 바로 후부 엽 지점 6-0 실크 넥타이. 바로 후부 엽 포털 정 맥 출혈은 일단 눈에 띄게 창백한 돈다.</li>
		<li>주위를 돌고 있는 동안 저항에 대 한 추진 하지 마십시오 동맥 또는 포털 정 맥을 찢 어 방지 하기 위해. 출혈의 경우 멸 균 면봉으로 1 분 이상에 대 한 압력을 적용 하 고 재평가. 출혈이 멈추지 않으면, 동물을 희생.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
(내 인생을 사랑) 왼쪽된 측면 (LLL) 및 왼쪽된 중간 엽 선 분기. 이 가지는 하나의 일반적인 트렁크. (그림 3C)입니다. 왼쪽된 중간 엽 지점 문맥은 LLL의 실질 내에서 발생합니다.
	<ol>
<li>내 인생 지점 사용 하 여 함께 사전 컷 6-0 실크 넥타이 LLL와도 사랑에 지도 문맥 선</li>
		<li>LLL로 이어지는 동맥에 부상을 방지 하 고 복 층 내에서 실행 하는 내 인생을 사랑. 로 복은 벗 겨 다시 신중 하 게, 그들은 그대로 있어. 내 인생 돌아 가시 사랑과 LLL 가지 출혈 되 면 창백.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
꼬리가 엽 지점 (그림 3C) 선 쥐에 별도 꼬리가 돌출부 다소로 이어지는 문맥 걸립니다 주요 문맥에서 distally medially 주요 포털 정 맥에서 오른쪽 엽 분기의 이륙 (하지 엄격히 inferiorly 에서처럼 인간이 나 큰 동물).
	<ol>
<li>그것을 밖으로 해 부하 고 복 플러스 담 즙 덕트와 동맥 주요 포털 정 맥에서 위로 들어올려 둘러싸 자.</li>
		<li>옆에서 오는 곡선된 microforceps와 꼬리가 문맥 분기를 둘러싸십시오. 두 개의 꼬리가 돌출부 꼬리가 엽 지점 6-0 실크로 출혈은 일단 눈에 띄게 창백 하 고, 설정 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>이 3 개의 문맥 분 지 매 이끌어 낸다 독점 문맥 관류의 오른쪽 중간 엽 (RML), 오른쪽과 왼쪽 중간 엽 간의 뚜렷한 경계선으로 표시 됩니다.</li>
</ol>4. 포털 정 맥 결 찰 Transection (PVL + T)와
<ol><li>RML 사이 분계선 따라 transection 수행 하 고 PVL (그림 3D) 후 내 인생을 사랑.</li>
	<li>아주 좋은 신경외과 팁과 비 고정 양극은 집게를 사용 하 여 휴전선 1 mm 열화 스트립 만드는 간 조직 precauterize.</li>
	<li>가 위를 사용 하 여 precauterized 조직을 조심 스럽게 잘라. transection의 깊이 제대로 평가 하기 매우 어렵습니다. 목표는 쥐에 intrahepatically 실행 가능한, 베 나 카바에 가까운 얻는 것입니다. 베 나 정 맥의 상해는 일반적으로 멈출 수 없어 광범위 한 출혈에 의해 동반 됩니다.</li>
	<li>부상의 경우에 면봉을 사용 하 여 부드러운 압력을 적용 하지만 경우에 출혈이 멈추지 않으면 3-4 분 이내, 동물을 희생. 베 나 카바 봉합을 사용 하 여 복구 시도 일반적으로 성공 하지. 쥐 색 전 증, 때때로 발생 하 고 심장 마비로 이어질 수 있는 공기에 매우 민감합니다.</li>
</ol>5. 자가 측정 문맥 압력 및 볼륨 흐름
<ol><li>압력 모니터 (그림 4A)에 연결 된 G30 바늘으로 직접 cannulation에 의해 문맥 압력을 평가 합니다.</li>
	<li>2 m m 볼륨 흐름 프로브 옆으로 배치를 사용 하 여 포털 볼륨 흐름 2 분 이상 (그림 4B)의 직접 측정에 대 한 흐름 장치에 연결 합니다. 컴퓨터 디스플레이에 표시 된 대로 안정적인 측정 품질만 레코드 데이터입니다.</li>
	<li>즉 3 개의 문맥 분 지 또는 3 개의 문맥 분 지 떨어져 매 플러스 parenchymal transection 수행의 매 해당 프로시저를 정의 하는 단계의 그룹 후 문맥 흐름과 압력을 별도로 평가 사랑과 RML 사이 내 인생.</li>
</ol>6. 마지막 단계는 수술의
<ol><li>작은 창 닫기 전에 복 부 구멍에 제대로 배치는 다는 것을 확인 하십시오.</li>
	<li>SH-1 바늘으로 복 막과 복 벽 3-0 비단 봉합을 닫습니다.</li>
	<li>마지막으로 슨 5-0를 사용 하 여 피부 봉합.</li>
	<li>다시 피부를 소독.</li>
	<li>적용 다시 5 mL 염 피하 피하 조직 측면으로는 복 부.</li>
</ol>7. 간 Volumetry 쥐 작은 동물 CT를 사용 하 여
<ol><li>첫 번째 CT 영상 이전 24 시간 G26 정 맥 카 테 터를 통해 꼬리 정 맥에 대조 대리인의 200 μ를 삽입할.</li>
	<li>마이크로 CT를 사용 하 여 쥐를 스캔. 전신 마 취를 유도 하는 유리 상자에 동물을 배치 (처음 30 5 vol %로 플러시 s, 뒤에 2-3 vol %의 isoflurane 농도 동물 마 취 튜브 시스템을 통해 스캔을 통해 그것을 유지). 최적의 이미지 품질에 대 한 동물의 호흡으로 CT 스캔을 동기화 합니다.</li>
	<li>디지털 이미징 및 통신 의학 (DICOM) 파일에 내보내고 이미징 플랫폼 OsiriX 8.0 공개 소프트웨어를 사용 하 여 분석. "닫힌된 다각형" 도구를 사용 하 여 간에서 나노 대비의 radiodensitiy에 따라 엽 테두리를 그릴 관심 (ROI) 메뉴의 영역을 사용 하 여 부분 간 볼륨 (Schadde 외. 그림 2A 참조 계산을 17)</li>
	<li>표준 모델에 간 3 일 이상 성장과 볼륨 증가 평가 하기 위해 CT 검사를 매일 얻을 수 있습니다.</li>
</ol>

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</ol>

저자는 공개 없다.

이 프로토콜 PVL + T, 그 대략 PVL 혼자에 비해 3 일 이내 볼륨 증가 두 배로 의해 유도 된 그것의 급속 한 비 대와 ALPPS의 동물 모델을 제공 합니다. 17 오른쪽 중간 간 엽 중간 간 엽 그림 1 에서 같이 왼쪽 및 오른쪽 측면, 두 개의 별도 포털 혈관에 의해 공급 한 연속 parenchymal 질량은 때문에 성장에 대 한 모델 간 엽으로 사용 되는 최근 게시 된 작품입니다. 17 다른 보고서에 비해, 모델 몇 가지 장점을 제공 합니다. 해부학, 최고의 중간 엽의 선택 있도록 transection 및 그로 인하여 부수적인 흐름의 말살 한 연속 parenchymal 질량으로 인간의 간을 나타냅니다. 왼쪽된 중간 엽을 포털 정 맥의 분기 (내 인생을 사랑) 내 왼쪽된 측면 엽 (LLL) 수 사랑의 결합된 결 찰에 대 한 내 인생과 LLL.
<p class="jove_c...

간 잔해의 크기는 간 종양의 resectability를 제한합니다. 1 일반 때 보다 25% 간 조직에 남아, 환자는 전체 유기 체 ("너무 작은 크기 증후군")에 대 한 대사 기능 부족으로 인해 급성 간부에서 죽음의 위험이 증가 합니다. 2 이 게시물-hepatectomy 간부 간 절제 후 가장 치명적인 합병증 이다. 따라서 임상 포털 정 맥의 흐름을 조작 하 여 간 절제술 전에 간 재생을 유도 하려고 합니다. 3 그것은 발견, 포털 정 맥 차단 되 면 문맥 흐름과 나머지 부분 느린 속도로 성장 하기 시작 크기에 최대 60%까지 증가 수 있습니다. 4 수술 결 찰5 또는 중재 포털 정 맥 폐색 둘 다 임상으로 설립 되었습니다. 4 볼륨 및 간 기능에 증가 신뢰할 수 있는, 하지만 간 포털 폐색 되 면 약 1/5만의 성장 율 부분 hepatectomy 후 나머지 간의 성장에 비해. 6
간 절제 후 훨씬 더 빠른 속도로 재생할 수 있습니다 비록 간 성장 하는 데 필요한 시간 주에 달입니다. 따라서, 간 그것의 부분의 제거 후 정상 기능을 다시 성장 하는 유일한 기관입니다. 7 유사한 속도로 간 재생을 유도 하는 부분 hepactectomy 개발 되었다 후 외과 의사의 그룹에 의해 누가 폐색 사이 transection 추가 발견 하 고 간 비 가려진 부분 유도 간 새로운 절차. 간 절제 후 하지만 절제술 이전에와 같은 성장 속도로 비 대. 9 절차는 주 내에서 광범위 한, 주로 unresectable, 간 종양의 절제를 수 있는 미래에 간 주 남은 내 80%의 급속 한 비 대를 시작 합니다. 프로시저를 호출할 "상연 hepatectomy 위한 관련 시키기 간 파티션 및 포털 정 맥 결 찰 ALPPS =" 전 세계에 걸쳐 급속 하 게 인기가 되었다. 10 여러 보고서는 새로운 기술,11 동안 복잡 한 수술은 또한 그것의 높은 합병증 비율에 대 한 비판에 의해 달성 경계선 불과하다 간 종양의 resectability의 확장을 지원 합니다. 12 , 13
쥐의 개발 및도 느리고 급속 한 비 대의 대형 동물 모델에 약물 효과 테스트를 더 나은 조직학 특성화 및 메커니즘의 이해 하 고 2012 년에 ALPPS의 출간 이후 시도는 동물에서 간 조직의 다른 성장 속도입니다. 첫 번째 동물 모델 개발 쥐 모델이 이었습니다. 이 모델에서 오른쪽 중간 엽의 왼쪽된 부분 사이의 parenchymal transection 후 급속 한 비 대 오른쪽 중간 엽의 재생을 가속. 14 다른 모델 마우스의 뒷부분에 소개 되었다. 이 모델에서는 왼쪽된 측면 엽 절제 했다 그리고 문맥 분 지 왼쪽된 중간 엽 제외 하 고 간 모든 엽을 연결 했다. 15 한편 돼지에서 ALPPS의 대형 동물 모델가지고 설명 뿐만. 16
흐름 변경 및 문맥, 관류 및 간 조직에의 산소 압력 같은 생리 적 메커니즘의 연구에 대 한 쥐 모델 쥐에서 ALPPS의 모델에 우량 하다. Murine 모델 쥐의 또 다른 장점은 쥐 모델에는 왼쪽된 측면 엽, ALPPS의 간 절제술의 효과 오염 시킬 수 있습니다15 의 절제에 대 한 필요성입니다. 쥐 모델에 반대로 감소 하지 않습니다 간 세포 질량. 돼지 모델 성장 엽으로 바로 후부 엽을 사용 하지만 돼지 간은 매우 lobulated. 따라서, 그것은 바로 후부와 오른쪽 앞쪽 엽 사이 이미 얇은 조직 브리지 transection 비행기를 만들 어렵다. 대조적으로, 쥐에서 중간 엽 포털 정 맥 각에서 별도로 제공 하는 두 부분으로 구성 하 고 parenchymal transection 비행기 microsurgical 기술을 사용 하 여 두 사이 쉽게 만들 수 있습니다. 작은 동물 컴퓨터 단층 촬영 (CT) 또는 자석 공명 영상 (MRI)의 유용성 수 혼자 포털 정 맥 결 찰 및 포털 정 맥 결 찰 및 추가 transection 사이 체적 증가의 매우 정확한 정량화는 중요 한 대 한 어떤 급속 한 간 비 대 모델의 유효성 검사.
여기에 제시 된 프로토콜 수술 기법 및 체적 검증 및 포털 정 맥 결 찰과 함께 transection, 포털 정 맥 결 찰 후 느리고 급속 한 비 대의 모델의 생리 적 특성에 사용 되는 절차에 설명 합니다. 쥐에서 각각.

<table><tbody><tr><td>이소플루란, 250 mL 병</td><td>Attane, Piramal, Mumbai, India</td><td>LDNI 22098</td><td>표준 수의사 장비</td></tr><tr><td>Tec-3 Isofluorane Vaporizer</td><td>Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL</td><td>더 이상 사용할 수 없음</td><td>표준 수의사 장비&nbsp;</td></tr><tr><td>부프레노르핀 (Temgesic)</td><td>Indivior, Baar, 스위스</td><td>7680419310353</td><td>GTIN-number</td></tr><tr><td>Vitamine A 연고</td><td>Bausch& Lomp, Zug, 스위스</td><td>7680223980247</td><td>GTIN 번호</td></tr><tr><td>아트로핀 황산염 0.5 mg/mL</td><td>Sintetica SA, Mendrisio, 스위스</td><td>7680565330045</td><td>GTIN 번호</td></tr><tr><td>미세 수술 현미경</td><td>Olympus, Tokio, Japan</td><td>SZX10</td><td>표준 수의사 장비</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Mundipharma, Basel, 스위스</td><td>7680342821377</td><td>GTIN 번호</td></tr><tr><td>스폰지</td><td>Carl Roth GmbH, 칼스루에, 독일</td><td>NK83.1</td><td>미니 스폰지</td></tr><tr><td>복벽 견인기</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>종이 클립과 Q-Tips</td></tr><tr><td>3-0 실크로 자체 제작&nbsp;</td><td>Ethicon, Sommerville, NJ</td><td>K872H</td><td>표준 수술</td></tr><tr><td>용 가위&nbsp;</td><td>World Precision Instruments(WPI), Sarasota, FL</td><td>503371</td><td>Standard microsurgical</td></tr><tr><td>Adson 집게</td><td>World 정밀 기기(WPI), Sarasota, FL</td><td>501244-G</td><td>표준 미세 수술</td></tr><tr><td>미세 팁 마이크로 집게</td><td>World 정밀 기기(WPI), Sarasota, FL</td><td>501976</td><td>팁은 정기적으로 연마해야 합니다</td></tr><tr><td>곡선형 미세 팁 미세 집게</td><td>세계 정밀 기기(WPI), 플로리다주 새러소타</td><td>504513</td><td>문맥 가지를 돌아다니는 데 필수&nbsp;</td></tr><tr><td>6-0 LOOK 블랙 브레이디드 실크</td><td>Surgical Specalities Corporation, 와이오미싱, 펜실베니아&nbsp;</td><td>SP114</td><td>스풀, 시술 전 미리 절단</td></tr><tr><td>2-0 실크 봉합</td>사 <td>Ethicon, Sommerville, NJ</td><td>K833</td><td>표준 수술</td></tr><tr><td>5-0 맥슨 봉합사</td><td>Covidien, Dublin, Ireland</td><td>6608-21</td><td>표준 수술</td></tr>용 <tr><td>양극 미세집게</td><td>Sutter, Freiburg, Germany</td><td>780148SGS</td><td>실질 절편에 필수</td></tr><tr><td>Q-tips small</td><td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, 독일</td><td>EH11.1</td><td>표준 수술</td></tr>용 <tr><td>Q-tips big</td><td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany</td><td>XL54.1</td><td>표준 수술</td></tr>용 <tr><td>G30 바늘&nbsp;</td><td>테루모, 도쿄, 일본</td><td>NN-3013R&nbsp;</td><td>표준 마취 장비</td></tr><tr><td>2mm 부피 유량 프로브&nbsp;</td><td>Transonic Systems, Ithaca, NY</td><td>MA-2PS</td><td>HAT-311 플로우 미터용 가장 작은 프로브</td></tr><tr><td>Transonic 플로우 미터 Transonic</td><td>Systems, Ithaca, NY</td><td>HAT-311 Transsonic 플로우 QC 미터</td> 중 <td>하나&nbsp; 수술용 첫 세대 플로우 미터</td></tr><tr><td>ExiTron nano 12,000&nbsp;</td><td>Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germany</td><td>130-095-698</td><td>간과 비장을 불투명하게 하는 나노몰로에큘러 조영제</td></tr><tr><td>G26 정맥 카테터</td><td>Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ</td><td>391349</td><td>표준 마취 장비</td></tr><tr><td>Quantum FX MicroCT&nbsp;</td><td>Perkin Elmer, Waltham, MA</td><td>N/A</td><td>Z&uuml 대학교 생리학 연구소의 표준 소동물 CT 스캐너; rich</td></tr><tr><td>OsiriX 8.0</td><td>Pixmeo Sarl, 제네바, 스위스</td><td>N/A</td><td>퍼블릭 도메인 소프트웨어 : www.pixmeo.com</td></tr></tbody></table>

연결 간 파티션과 무대 hepatectomy (alpps) 절차에 대 한 포털 정 맥 결 찰의 쥐 모델

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

최근 임상 데이터 기본 및 전이성 간 종양에 대 한 적극적인 수술 접근을 지원합니다. 대 장 간 전이, 같은 일부 표시에 대 한 간 조직의 양을 남기고 후 간 절제술의 큰 resectability 또는 여러 간 종양의 주요 제한 요인이 되고있다. 기능 조직의 최소한의 금액은 게시물 hepatectomy의 심각한 합병증을 피하기 위해 필요 높은 사망률 및 사망에는 간 경화. 절제술 전에 예비 잔해의 간 성장 유도 간 수술, 중재 방사선에 의해 문맥 색전술의 형태로 또는 포털 정 맥 결 찰 절제술 전에 몇 주의 형태로 더 설립 되는. 최근에, 그것은 보이지 않고 간 재생 더 광범위 하 고 급속 한, parenchymal transection 포털 정 맥 결 찰 첫 번째 단계에서 그리고, 대기, (연결 간 파티션 두 번째 단계에서 수행 하는 절제의만 1 주일 후에 추가 될 때 그리고 무대 hepatectomy 위한 포털 정 맥 결 찰 = ALPPS). ALPPS는 급속 하 게 인기 끌고있다, 전세계 하지만 그것의 높은 수술 사망률에 대 한 비판을 받아왔다. 이 절차에 의해 유도 된 가속 및 광범위 한 성장의 메커니즘 잘 이해 하지는. 동물 모델에서 ALPPS 가속된 간 재생의 생리 및 분자 메커니즘을 탐구 개발 되었습니다. 이 프로토콜 가속된 중생의 기계적 탐사를 허용 하는 쥐 모델을 제공 합니다.

두 개의 다른 수술 절차 포털 정 맥 결 찰 (PVL) 및 PVL transection (PVL + T) 결과 분명히 다른 성장 속도 론. PVL 유도, 3 일 이내 중간 볼륨 증가 반면 PVL + T에 훨씬 더 큰 오른쪽 중간 엽 (RML) 수 본 (그림 5). 이 매일 volumetry에 의해 확인할 수 있습니다. RML의 볼륨 PVL, 3 일 이내 PVL + 토니17 세 배 하는 동안 대략 복식
포털 정 맥에서 흐름 측정 공개는 PLV에 또한 PVL + T 감소 흐름 영역에도 불구 하 고 안정적인 흐름 (Schadde 외. 그림 3A 참조 17). 이것...

상연 hepatectomy에 대 한 연결 간 파티션 및 포털 정 맥 결 찰을 사용 하 여 빠른 간 비 대를 유도 (ALPPS) 경계선 불과하다 간 종양의 절제에 대 한 제안 되었습니다. 이 모델 급속 한 비 대에 관여 하는 메커니즘을 명료 하 고 홍보 또는 중생의 가속을 차단 하는 약물의 테스트 있습니다.

연결 간 파티션과 무대 Hepatectomy (ALPPS) 절차에 대 한 포털 정 맥 결 찰의 쥐 모델

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

이 수술적 개입의 전반적인 목표는 문맥 결찰과 간 실질 절제를 통해 쥐 간의 빠른 비대 성장을 유도하는 것입니다. 이 모델을 통해 빠른 간 재생에 대한 상세한 생리학적 및 분자적 평가가 가능합니다. 간은 문맥 결찰 후 재생됩니다.우리는 간 재생을 가속화하기 위해 문맥 결찰 외에 실질을 절단하는 방법을 발견했습니다. 이 방법은 가속화된 간 재생 모델을 제공합니다. 이는 경계성 절제 가능 간종양 환자를 위한 인간 수술에 사용되는 방법입니다.동물이 완전히 마취되어 수술 준비가 완료되면, 소동물용 이발기를 사용하여 검상돌기부터 생식기까지 복부 중앙선을 따라 털을 깎습니다. 중앙선에서 2 cm 이내의 털을 철저히 제거합니다. 피부를 소독한 후, 복벽을 통해 절개합니다.그 다음, 3-0 silk 유지 봉합사로 양측 벽과 검상돌기를 견인합니다. 이어서 자체 제작한 소형 와이어 견인기를 사용하여 위, 결장 및 소장을 간십십이지장인대에서 멀어지도록 견인합니다. 이를 통해 문맥에 접근합니다.이제 문맥을 둔성 박리합니다. 미세 포셉으로 복막을 들어 올리고 서서히 내측으로 벗겨냅니다. 다음 순서에 따라 문맥 분지들을 박리하십시오.첫째로 우측 후분지, 둘째로 좌측 외측 및 좌측 중앙분지를 함께, 그리고 셋째로 미분지 순으로 진행합니다.다음으로, 바로 아래로 지나가는 간엽의 작은 동맥 가지들이 찢어지지 않도록 세밀한 움직임으로 복막을 조심스럽게 벗겨냅니다. 주간문맥이 노출되면, 천천히 앞으로 밀고 벌리는 동작으로 가지들을 둘러쌉니다. 동맥이나 정맥이 찢어지는 것을 방지하기 위해 저항이 느껴지는 방향으로 밀지 않도록 주의하십시오.이 단계는 절차에서 매우 중요한 부분입니다. 저항이 느껴지는 방향으로 무리하게 밀어 넣지 않도록 주의해야 합니다. 하지만 보통 복막 표면을 제거하고 나면, 마이크로서지컬 라이트 앵글(microsurgical right angles)이 문맥 분지 주위로 상당히 쉽게 미끄러져 들어갑니다.출혈이 발생한 경우, 멸균 면봉으로 최소 1분 동안 압박한 후 상태를 재평가하십시오. 필요에 따라 이 과정을 여러 번 반복하십시오. 출혈이 멈추지 않으면 동물을 희생시키십시오.다음으로, 우후엽 분지를 박리합니다. 먼저 엽 분지를 가로질러 주행하는 동맥을 조심스럽게 이동시킵니다. 그런 다음 곡선형 미세 핀셋을 사용하여 복막과 함께 동맥을 두측으로 당겨 우문맥 분지를 노출시킵니다.이제 6-0 silk를 사용하여 우후엽 분지를 결찰합니다. 우후엽을 관찰하십시오. 결찰 후에는 색이 창백해질 것입니다.다음으로 LLL 및 LML 분지를 박리합니다. 이들은 공통 분절을 공유합니다. 이들 분지로 이어지는 복막층 내의 동맥이 손상되지 않도록 주의하십시오.동맥들이 손상되지 않도록 복막을 조심스럽게 벗겨냅니다. 그런 다음 약간 분리되어 있는 미상엽 분지를 박리합니다. 이 부위로 이어지는 문맥은 주문맥의 우엽 분지보다 원위부이자 내측에서 분지됩니다.이는 분지가 엄격하게 하측에 위치하는 대형 동물과는 다릅니다. 담관과 주간문맥에서 뻗어 나오는 동맥들이 포함된 간십이지장인대를 들어 올려 꼬리엽 분지를 박리하고 둘러쌉니다. 곡선형 마이크로 포셉을 사용하여 엽의 외측에서 접근하십시오.그 후 6-0 silk를 사용하여 결찰합니다. 이 엽 또한 결찰 후에 창백하게 변할 것입니다. 이제 우측과 좌측 정중엽 사이에 뚜렷한 경계가 나타나는 것을 관찰하십시오.이는 RML로만 독점적인 문맥 혈류가 공급되기 때문에 형성됩니다. 문맥 결찰 모델의 경우 여기서 수술을 중단할 수 있습니다. 절제를 계속 진행하려면 매우 미세한 신경외과용 팁이 달린 비접착성 바이폴라 실버 포셉을 사용하십시오.먼저 경계선을 따라 짧은 소작대를 만들어 조직을 사전 소작합니다. 그다음 가위를 사용하여 사전 소작된 조직을 조심스럽게 절개합니다. 간 내부에 위치한 대정맥에 최대한 가깝게 닿을 수 있도록 충분히 깊게 절개하십시오.대정맥을 손상시키면 일반적으로 동물을 희생시켜야 하므로 각별히 주의하십시오. 실질을 절단하기 위해 다양한 기술이 사용되어 왔습니다. 저희는 끝이 가는 은제 핀셋을 사용하여 간 조직을 미리 소작한 후 가위로 절단하는 방법이 출혈을 최소화하는 데 가장 효과적이라는 것을 확인했습니다.절단 후 복부를 가볍게 닦아 건조시키고 출혈이 없는지 확인합니다. 동물을 봉합하기 전, 소장이 올바른 위치에 있는지 확인하십시오. 그런 다음 SH-1 바늘과 3-0 silk 봉합사를 사용하여 복막과 복벽을 봉합합니다.마지막으로, 5-0 Maxon을 사용하여 피부를 봉합합니다. 수술 후, 절제 없이 진행한 PVL과 절제를 동반한 PVL(ALPPS로도 알려짐) 사이에는 뚜렷하게 다른 성장 역학이 나타납니다. 간의 일일 부피 측정 결과, 3일째에 PVL 후에는 부피가 100% 증가한 반면, ALPPS 후에는 부피가 200% 증가한 것으로 나타났습니다.이 영상을 시청한 후에는 문맥 유입의 75%를 실질 내로 결찰하고 절단하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다. 숙달되면 이 절차는 45분 이상 소요되지 않습니다. 이 절차를 시도할 때는 마취과 의사와 휘발성 마취에 경험이 많은 외과 의사가 모두 배석하는 것이 중요합니다.본 절차의 일반적인 흐름을 따라 다른 유형의 절단 기술을 시도해 볼 수 있습니다. 예를 들어, 부분 절단, 결찰 또는 고주파 소작술을 통해 어느 정도의 양이나 어떤 유형의 절단이 급격한 비대를 유도하는 데 중요한지 확인할 수 있습니다. 설치류의 경우, 수술 후 통증 상태를 평가하고 충분한 진통제를 투여하는 것이 중요하다는 점을 잊지 마십시오.

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

쥐의 Orthotopic 간 이식은 생명 의학 연구에 필수적인 실험 모델입니다. 여기 50 % 부분 이식을 사용하여 간장 동맥 재건과 orthotopic 쥐의 간 이식에 대한 수술 절차를 제시한다.

간 간선 재건과 부분 Orthotopic 간 이식의 쥐 모델에 대한 외과 절차

보조 간 이식은 실패 간 재생 될 때까지, 급성 간부전에 임시 지원을 제공합니다. 포털 정맥 arterialization (PVA)와 이소성 보조 간 이식 (HALT)는 충분한 간 기능을 렌더링합니다. 우리는 이식의 형태와 기능에 대한 포털 정맥 arterialization의 영향을 조사하기 위해, 쥐에서 유사한 기술을 개발했다.

이소성 보조 쥐 간 이식 급성 간 장애에 포털 정맥 Arterialization를 유량 조절

여기, 다시 arterialized 쥐 부분 간 이식 관련 프로토콜 제공 됩니다. 특히, 70% 간 선박 지향 hepatectomy의 업데이트 기술을 사용 하 여 절제 vivo에서 했다. 간 동맥은 엔드-투-사이드 방식으로 개축 되었다. 팔목 기술 infrahepatic 베 나 정 맥 문 합 시간을 수정 했습니다.

다시는 vivo에서 선박 지향 70% 쥐 부분 간 이식 Arterialized Hepatectomy

이 연구의 목표는 쥐 정형 소 간 이식 모델을 수정하여 인간의 간 이식을 더 잘 나타내고 수령인 생존을 개선하는 것입니다. 제시된 방법은 기증자 간동맥을 수령인 간동맥에 연결하여 간 동맥 유입을 재확립합니다.

직교 간 이식의 쥐 모형에 있는 동맥 재연결 후에 감소된 합병증

수많은 연구에서 해부학 적 절제술의 장점이 입증되었습니다. 그럼에도 불구하고 해부학적 절제가 R0 절제율을 증가시킬 수 있는지 여부는 여전히 논란의 여지가 있습니다. 결과적으로, 본 연구는 수술 후 재발 및 전이를 줄일 수 있는 복강경 간 절제술에서 해부학적 절제술과 결합된 en bloc 개념을 포함하는 혁신적인 절차를 설명합니다.

복강경 간 절제술에서 해부학적 절제술과 결합된 En Bloc 개념의 적용

단계적 간절제술(ALPPS)을 위한 간 분할 및 문맥 결찰술의 연관성은 1단계 수술 후 몇 주 후에 놀라운 간 재생을 초래하는 것으로 나타났습니다. ALPPS를 받은 동물 모델은 잠재적인 간 재생 능력을 탐색하고 유리한 임상 결과를 달성하기 위해 개발되었습니다.

현미경 검사의 도움을 받은 병기 간절제술 절차를 위한 연관 간 분할 및 문맥 결찰의 마우스 모델

여기에 설명된 쥐 이소성 보조 간 이식 프로토콜은 간 동종이식 거부 반응의 메커니즘을 탐색하기 위한 실용적인 조사 도구를 제공합니다. 이 모델은 쥐의 정형소 간 이식의 수술 장애물과 동물의 스트레스를 완화하는 데 도움이 됩니다.

동종이식 거부 반응 연구를 위한 간절개술을 활용하는 이주제 보조 전체 간 쥐 이식 모델

부분 2/3(66%) 간절제술의 마우스 모델은 문헌에 잘 설명되어 있지만, 간 이식 후 소형 증후군을 모방한 더 확장된 간절제술은 거의 사용되지 않았습니다. 우리는 건강한 마우스에서 약 50%의 수술 후 치사율을 초래하는 마우스 모델에서 확장된 78% 간 절제술 절차에 대해 설명합니다.

마우스 수술 모델에서 확장된 78% 간절제술

우리는 오른쪽 간정맥 절단을 통해 하우간정맥과 S6 구간을 보존하는 해부학적 S7+S8d 절제술을 위한 복강경 기법을 제시합니다. 수술 중 초음파 없이 세밀한 해부학적 랜드마크에 의존하는 이 접근법은 특히 고급 탐색 자원이 제한된 환경에서 등쪽에 위치한 오른쪽 간 종양에 대해 정밀하고 실질을 보존하는 옵션을 제공합니다.

복강경 해부학 S7+S8D 절제, 하우간정맥 보존 및 S6 우간정맥 절단

인간 패혈증 연구에 유용한 도구로 cecal 내고 주사의 마우스 모델입니다.

Cecal 내고의 찔린 절차

학습하세요 쥐에서 문맥 정맥 결찰과 실질 절개를 결합한 ALPPS 수술 모델을 통해 급속한 간 비대를 유도하는 방법을. 이 기법은 재생 의학 연구와 치료제 평가에 활용됩니다.

연결 간 파티션과 무대 Hepatectomy (ALPPS) 절차에 대 한 포털 정 맥 결 찰의 쥐 모델

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