Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA <em>In Situ</em> Hybridization

Xiao Xu; Yinwei You; Long Zhang

doi:10.3791/55924

RNA에 의한 Locust Antenna 내의 악취 수용체 유전자의 국산화 현장에서 하이브리드 화

JoVE Journal
Neuroscience

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Localization of Odorant Receptor Genes in Locust Antennae by RNA In Situ Hybridization

RNA에 의한 Locust Antenna 내의 악취 수용체 유전자의 국산화 현장에서 하이브리드 화

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09:30 min

July 13, 2017

DOI: 10.3791/55924-v

Xiao Xu¹, Yinwei You^1,2, Long Zhang¹

¹Department of Entomology,China Agricultural University, ²Bio-tech Research Center,Shandong Academy of Agricultural Sciences

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 논문은 digoxigenin (DIG) 표지 또는 바이오틴 표지 프로브를 사용하는 곤충 안테나에서 특히 낮은 수준으로 발현 된 Odorant Receptor (OR) 유전자 및 기타 유전자에 대해 상세하고 매우 효과적인 RNA in situ hybridization 프로토콜을 설명합니다.

이 절차의 전반적인 목표는 digoxigenin 표지 또는 비오틴 표지 프로브를 사용하여 곤충 더듬이의 다른 유전자뿐만 아니라 낮은 수준으로 발현되는 냄새 수용체 유전자를 국소화하는 것입니다. 이 절차를 시작하려면 활동적이고 더듬이가 손상되지 않은 새로운 털갈이 성체 메뚜기를 선택한 다음 멸균 면도기를 사용하여 더듬이를 2-3mm 조각으로 자릅니다. 다음으로, 동결 마이크로톰 홀더에 OCT 화합물을 바르고 화합물에 샘플을 수평으로 놓습니다.

홀더를 섭씨 영하 24도의 동결 마이크로톰으로 옮겨 화합물이 얼어붙을 때까지 평형을 이룹니다. 그런 다음 홀더를 꺼내 약간의 화합물로 샘플을 덮습니다. 홀더를 섭씨 영하 24도의 동결 마이크로톰에 다시 최소 10분 동안 옮긴 다음 냉동 샘플을 12마이크로미터 두께의 조각으로 자릅니다.

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