2017년 9월 27일
여기 신생아 capsaicin 치료 쥐 및 아 토 피 성 피부염에 포름알데히드 흡입의 효과 조사 하기 위해 증발된 포름알데히드의 노출에 아 토 피 성 피부염을 유발 하는 방법을 설명 합니다.
이 시술의 전반적인 목표는 신생아 캡사이신 치료를 통해 아토피 피부염과 유사한 증상을 유도하는 것입니다. 그리고 포름알데히드가 아토피 피부염과 유사한 증상에 미치는 영향을 측정합니다. 이 방법은 피부과 분야에서 아토피 피부염의 병태생리학적과 관련된 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.
이 기술의 가장 큰 장점은 아토피 피부염과 유사한 증상을 유도하고 증가와 함께 중요한 노출 시스템을 구축한다는 것입니다. 밀리리터 캡사이신 용액 5밀리그램을 준비하려면 15밀리리터 원뿔형 튜브에 Tween 80 1밀리리터, 100% 에탄올 1밀리리터, 캡사이신 50밀리그램을 추가합니다. 그런 다음 원뿔형 튜브에 8ml의 생리식염수를 추가합니다.
분리된 층이 보이지 않을 때까지 튜브를 덮고 세게 흔듭니다. 출생 후 12시간에서 48시간 사이에 캡사이신을 전달하는 것이 중요합니다. 캡사이신 용액을 신생아 Sprague Dawley Rat의 목 뒤쪽 정중선과 뒤쪽에 있는 피하 조직에 주입합니다.
캡사이신 주사로 인한 호흡 정지를 방지하기 위해 호흡이 정상이 될 때까지 신생아를 산소실에 두십시오. 필요한 경우 신생아의 가슴을 밀어 호흡을 촉진합니다. 먼저 거울이 장착된 플라스틱 챔버를 준비하여 볼 수 있도록 전체를 덮고 쥐가 숨을 쉴 수 있는 구멍을 준비합니다.
플라스틱 챔버에 쥐를 넣고 뚜껑이 열리지 않도록 무거운 물체로 챔버 천장을 덮습니다. 그런 다음 디지털 비디오 카메라를 설정하여 쥐의 거울 모습과 앞 모습을 동시에 녹화합니다. 그런 다음 한 시간 동안 쥐의 자발적인 행동을 기록하십시오.
비디오 클립을 재생하고 오른쪽에 있는 쥐가 보인 것과 같은 긁는 행동의 수를 세십시오. 그리고 중앙에 있는 쥐. 병변에 점수를 매기기 위해 마취된 쥐의 귀와 다른 부위에 있는 피부염의 정도와 중증도를 확인합니다.
피부 병변 범위의 단위 크기를 0.25cm 제곱으로 정의합니다. 그리고이 표를 사용하여 피부 병변의 중증도를 측정합니다. 반대쪽에 두 개의 커넥터가 있는 아크릴 유리 상자를 준비합니다.
포름알데히드 가스의 순환을 위해 환기구는 가스 흡입구보다 높게 배치해야 합니다. 튜브를 두 커넥터에 연결합니다. 가스 배출을 위해 환기 배출구 튜브를 순환 후드 또는 건물 외부로 연결하십시오.
그리고 다른 흡입 튜브를 의료용 산소 조절기에 연결합니다. 아크릴 유리 상자 안에 기존의 쥐 케이지를 놓습니다. 일주일 된 쥐를 케이지에 넣은 다음 가스 누출을 방지하기 위해 아크릴 유리 상자를 최대한 단단히 밀봉하십시오.
접착 필름을 적용하여 챔버를 감싸고 단단히 밀봉하기 위해 고무 뚜껑으로 챔버를 닫습니다. 의료용 산소 조절기에 연결된 가습기 병에 0.5%포름알데히드 용액을 추가합니다. 포름알데히드에서 작업하는 것은 매우 위험할 수 있다는 것을 잊지 마십시오.
그리고 이 절차를 수행하여 항상 마스크와 장갑과 같은 예방 조치를 취해야 합니다. 그런 다음 조절기를 켜고 유량을 분당 5리터로 설정합니다. 쥐를 포름알데히드 가스에 2시간 동안 노출시킵니다.
여기에 보이는 것은 캡사이신을 투여한 쥐의 피부 염증에 대한 대표적인 사진입니다. 캡사이신을 투여한 쥐의 피부염 발병을 연대순으로 보여주는 것이 여기에 나와 있다. 이 이미지는 캡사이신을 투여한 쥐의 긁는 행동의 연대순 발달을 보여줍니다.
이것은 캡사이신을 투여한 16주령 쥐의 재발성 피부 병변의 대표적인 이미지입니다. 혈청 IgE 수치는 캡사이신을 투여한 동물에서 유의하게 상승합니다. IL-4 mRNA 발현의 현저한 증가는 캡사이신을 투여한 동물에서도 관찰됩니다.
캡사이신을 투여한 동물에서 IL-13 mRNA 발현의 유의한 증가는 다음과 같습니다. 이 대표적인 사진들은 1.2ppm을 사용하여 치료 5주차 이후의 아토피 피부염을 보여줍니다. 그리고 0.8ppm 포름알데히드는 공기로 통제된 처리와 비교했습니다.
0.8ppm이 아닌 1.2ppm의 포름알데히드에 노출된 경우, 캡사이신으로 처리된 아토피 피부염 모델에서 소양증이 유의하게 악화되었다. 피부염을 측정했을 때도 유사한 결과가 관찰되었습니다. 1.2ppm의 포름알데히드 노출로 처리된 캡사이신 처리된 AD 랫트 모델에서 혈청 IgE 수치 증가가 관찰되었습니다.
이 절차에 따라 gylcol 용액과 같은 다른 재료를 사용하여 아토피 피부염에 대한 특정 물질의 영향과 관련된 추가 질문에 답할 수 있습니다. 이러한 발전 이후, 이 기술은 피부과 분야의 연구자들이 아토피 피부염의 발병기전에서 환경적 요인의 역할을 탐구할 수 있는 길을 열었습니다.
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본 논문은 신생 쥐에 캡사이신을 처리하여 아토피 피부염 유사 증상을 유도하고, 포름알데히드 흡입의 영향을 조사하는 방법을 설명합니다. 본 연구는 아토피 피부염의 병태생리에 대한 이해를 높이는 것을 목표로 합니다.
아토피 피부염의 환경적 유발 요인은 중개 피부과학 분야에서 여전히 중요한 미지의 영역으로 남아 있으며, 이는 치료제 개발을 위한 예측 신뢰도에 영향을 미칩니다. 본 쥐 모델은 포름알데히드와 같은 환경적 노출이 질환의 진행과 바이오마커 반응에 미치는 영향을 체계적으로 평가할 수 있게 합니다. 이러한 접근법은 기전적 리스크를 완화하고 피부과 파이프라인의 초기 단계 포트폴리오 결정에 정보를 제공합니다.
이 모델은 아토피 피부염 진행 과정에서 환경적 요인에 대한 제어된 가설 검증을 가능하게 함으로써 초기 발견과 전임상 검증 사이의 가교 역할을 합니다.