2018년 1월 30일
여기에 제시 된 행동 테스트의 목표는 쥐에 외상 성 뇌 손상 후 기능적인 적자를 검출 하기입니다. 4 특정 테스트 시간에 부상 후 1 년 연장 하는 특정 뇌 영역에 손상을 반영 하는 행동에 적자를 감지 표시 됩니다.
여기에 제시된 행동 테스트의 전반적인 목표는 외상성 뇌 손상 후 쥐의 기능적 결함을 감지하는 것입니다. 신경 학적 또는인지 기능의 결함을 감지하는 4 가지 테스트가 제시됩니다. 이러한 방법은 뇌 손상 연구 분야의 주요 질문, 예를 들어 손상 후 뇌의 어느 영역이 손상되었는지 또는 실험적 치료가 효과적인지 여부와 같은 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.
이러한 기술의 주요 장점은 많은 실험실에서 잘 확립되어 있고 재현 가능한 것으로 입증되었을 뿐만 아니라 폭발 손상 및 뇌졸중과 같은 다양한 유형의 뇌 손상에 민감하다는 것입니다. 이러한 기술은 외상성 뇌 손상이 신경 및 인지 기능에 미치는 영향에 대한 이해와 쥐의 실험적 치료 테스트에 기여합니다. 일반적으로 이 방법을 처음 접하는 개인은 쥐 다루기 경험이 부족하고 훈련 및 테스트 전에 쥐에 적응할 수 있는 충분한 시간을 허용하지 않기 때문에 어려움을 겪을 것입니다.
이것은 테스트 시간을 더 효과적으로 만들기 위해 쥐를 진정시키는 데 필요합니다. 앞다리 굴곡 테스트로 훈련을 시작하여 쥐의 꼬리를 들어 올려 테이블 표면에서 약 6-12인치 높이로 잡습니다. 쥐가 앞다리를 펴거나 구부리는지 관찰하십시오.
굴곡의 존재를 1로 점수 매기거나 굴곡의 부재를 점수 시트에서 0으로 점수를 매깁니다. 다음으로, 뒷다리 굴곡 테스트를 위해 꼬리를 잡고 쥐를 다시 들어 올리고 테이블 표면에서 약 6-12인치 높이를 유지합니다. 쥐가 뒷다리를 펴거나 구부리는지 관찰하고 굴곡의 존재를 1로 점수를, 굴곡의 부재를 0으로 점수를 매깁니다.
다음 테스트를 위해 쥐의 꼬리를 들어 올리고 코가 가장자리에서 약 10cm 떨어질 때까지 테이블 가장자리쪽으로 천천히 내립니다. 수염이 가장자리에 닿지 않도록 쥐를 가장자리 쪽으로 천천히 움직입니다. 쥐가 테이블을 향해 앞발을 뻗어 내밀는지 관찰하십시오.
앞발을 뻗는 유무를 점수화합니다. 다음으로, 접촉 유발 배치 테스트를 위해 몸과 손이 테이블 가장자리와 평행하고 앞다리가 자유롭게 되도록 쥐를 잡습니다. 한쪽의 수염이 테이블 가장자리에 닿을 때까지 쥐를 테이블 가장자리 쪽으로 천천히 내립니다.
쥐가 수염이 닿자마자 테이블에 닿는 수염과 같은 쪽의 앞다리를 테이블 가장자리 쪽으로 뻗어 있는지 관찰하십시오. 테이블을 향해 손을 뻗는 유무를 평가합니다. 마지막으로, 뒷발 잡기 반사 테스트를 위해 엄지와 검지로 앞다리 아래 가슴을 한 손으로 쥐를 잡습니다.
집게손가락으로 각 뒷발의 손바닥을 부드럽게 만집니다. 쥐가 집게손가락을 잡는지 관찰하고 집게손가락의 유무를 평가합니다. 수술 후 24시간이 지나면 쥐를 빔에 올려놓고 타이머를 시작하여 빔 밸런스 테스트를 시작합니다.
60초 동안 쥐를 자세히 관찰하고 워크시트에 점수를 기록합니다. 쥐가 실험 사이에 실험자의 팔이나 집 케이지에서 잠시 휴식을 취하도록 합니다. 쥐를 1분 동안 골 상자에 놓는 것으로 시작합니다.
1 분 후 쥐를 제거하고 조명과 백색 소음을 켜서 시험을 시작하십시오. 골 박스에서 가장 가까운 못 구멍 위치에 있는 빔에 쥐를 놓고 쥐가 골 박스에 들어갈 수 있도록 합니다. 쥐의 앞발이 골 박스의 문턱을 넘으면 즉시 빛과 소음원을 꺼서 한 번의 시도가 끝났음을 알립니다.
각 시도 사이에 30초 동안 쥐를 골 상자에서 쉬게 합니다. 각 페그 위치와 시작 위치에서 한 번씩 빔 워크 훈련을 반복합니다. 구멍에 못을 삽입하고 못을 제자리에 놓고 한 번의 완전한 빔 워크를 실행합니다.
그런 다음 스톱워치를 사용하여 각 시도의 시간을 정하고 쥐가 5초 이내에 3번의 시도를 완료할 때까지 반복합니다.수술 후 24시간 후, 못이 있는 완전한 빔을 사용하여 빔 워크에서 쥐를 테스트합니다. 시각적 단서는 쥐가 숨겨진 플랫폼의 위치를 배우고 기억할 수 있는 랜드마크를 제공하기 위해 방 주변에 위치합니다.
비디오 추적 소프트웨어를 열고 플랫폼 위치, 수영 길이, 시도 횟수, 동물 수 및 치료 그룹이 포함된 물 미로 지도를 포함한 올바른 프로토콜을 로드하여 첫 번째 실험을 시작합니다. 플랫폼을 할당된 위치에 배치하고 소프트웨어의 지도와 일치하는지 확인합니다. 그런 다음 지정된 위치에서 벽을 향한 탱크에 쥐를 놓고 즉시 추적 프로그램 및/또는 스톱워치의 타이머를 시작합니다.
쥐가 플랫폼을 찾을 때까지 120초 동안 기다립니다. 쥐가 플랫폼을 찾으면 스톱워치를 중지하고 워크시트에 시간을 기록합니다. 쥐가 플랫폼을 찾지 못하면 손으로 플랫폼으로 안내하고 120초를 기록하십시오.
실험 사이에 쥐가 15초 동안 플랫폼에 머물도록 합니다. 두 번째 시도 후 쥐를 가열된 인클로저에 4분 동안 넣습니다. 마지막으로 플랫폼을 두 번째 위치로 이동하고 소프트웨어의 지도와 일치하는지 확인합니다.
4개의 시작 위치 및 플랫폼 페어링이 모두 완료될 때까지 1번 및 2번 시도 절차를 반복합니다. 신경점수 절차의 결과는 수술 전인 0일차에 위양성 가능성과 TBI 그룹의 작은 차이를 감지하기 위한 이 테스트의 민감도를 모두 보여줍니다. 빔 밸런스 결과는 부상 직후와 부상 후 더 긴 시점의 결함에 대한 빔 밸런스 테스트의 민감도를 보여줍니다.
빔 워크 테스트의 결과는 부상 후 초기에 결함을 나타냈습니다. 그러나 부상 후 6개월이 지났을 때 두 그룹 간에 유의미한 차이는 없었으며, 이는 부상 그룹에서 치유가 이루어졌음을 시사합니다. 또한, 작업 기억의 결핍은 부상 후 3개월에 나타나는 반면, 작업 기억과 참조 기억 모두 부상 후 12개월에 결핍을 보였습니다.
쥐를 다루는 데 적응하고 신경 점수, 빔 워크 및 빔 균형 테스트를 위해 사전 훈련하는 것이 중요합니다. 일단 숙달되면 간단한 신경학적 평가는 특수 장비 없이 신속하게 수행할 수 있습니다. 신경 점수, 빔 균형 및 빔 워크 절차 후에는 학습 및 기억과 관련된 추가 질문에 답하기 위해 새로운 객체 인식 테스트와 같은 다른 행동 패러다임뿐만 아니라 다양한 버전의 물 미로를 사용할 수 있습니다.
이 비디오를 시청한 후에는 행동 측정을 사용하여 신경학적 및 인지적 결함을 감지하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 취급에 대한 적응, 사전 훈련, 행동 실험을 수행할 때의 일관성이 모두 중요합니다.
이 기사는 외상성 뇌 손상(TBI) 이후 흰쥐의 기능적 결손을 감지하도록 설계된 행동 검사를 소개합니다. 신경학적 및 인지 기능을 평가하기 위한 네 가지 특정 검사가 자세히 설명되어 있어, 시간이 지남에 따른 TBI의 영향에 대한 통찰력을 제공합니다.
Behavioral assessment in rodent models of traumatic brain injury provides critical data for target validation and mechanistic de-risking in CNS drug development. Longitudinal detection of neurological and cognitive deficits enables evaluation of therapeutic efficacy across acute and chronic phases of injury. These assays support predictive confidence in lead identification by translating functional outcomes to clinical relevance.
These behavioral assays integrate into the discovery continuum from early target validation through preclinical efficacy testing, supporting hypothesis-driven screening and mechanism-based lead optimization.