Name: 외상 성 뇌 손상 후 쥐에서 행동 적자를 감지 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-01-30T12:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 54 s
Description: 학습하세요 외상성 뇌손상 후 쥐에서 행동적자를 감지하는 방법을. 전지 및 후지 굴곡 테스트, 빔 균형 및 물 미로 테스트를 통해 운동 기능과 공간 기억을 평가합니다. 이 기법은 뇌손상 연구에서 치료 효과와 회복 과정을 이해하는 데 활용됩니다.

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우리는 그녀의 세심 한 편집에 대 한 과목과 섬 너 엘리자베스의 수술 준비에 대해이 안 굵은 감사합니다. 이러한 연구는 무디 프로젝트 변환 외상 성 뇌 부상 연구를 위한 자금 팀의 일환으로 완료 되었습니다.

<ol><li>Sell, S. L., Johnson, K., DeWitt, D. S., Prough, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+Behavioral+Deficits+in+Rats+after+Fluid+Percussion+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Persistent Behavioral Deficits in Rats after Fluid Percussion Injury.</a> J Neurotrauma. 34 (5), 1086-1096 (2017).</li>
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저자는 공개 없다.

모든 유형의 행동 테스트를 할 때, 그것은 일관 되 게 중요 한입니다. 이 세부 하 찮은 것 이지만 동물의 반응에 큰 영향을 미칠 많은 고려 사항이 포함 되어 있습니다. 간과할 수 없는 중요 한 단계는 어떤 실험 전에 그들의 가정-케이지/주택 상황에 동물의 새 환경 순응 이다. 이 준비는 행동의 결과18를 변경할 수 있습니다 동물의 생리 적 스트레스 반응의 효과 감소 시킨다. 마찬가지로, 그것은 절대적으로 필수적인 모든 노력 같은 방식으로 모든 동물을 처리 하기 위해 이루어집니다. 이 일관성 주택 앞에서 설명한 새 환경 순응 하 고도 처리 및 교통 교육 전에 방 사이 새 환경 순응으로 포함 되어 있습니다. 이 개념은 과장 된 수 없습니다. 부주의 동물 처리는 어떤 행동 테스트19를 비참 한입니다. 마찬가지로, 모든 노력 여부 그들의 어두운 또는 가벼운 주기 동안 하루 중 같은 시간에 동물을 테스트 할 필요가 있다. 여기서 설명 하는 테스트에 대 한 테스트 밝거나 어두운 단계는 허용, 테스트 지속적으로 수행 됩니다. 테스트 circadian 주기 동안 서로 다른 시간에 행동의 결과18,20변경 표시 되었습니다. 또한, 동물 뿐 아니라 처리기에에서 있어야 스트레스 무료, 진정 상태 결과의 정확도 극대화 하기 위해.
특히, Neuroscore의 경우 가양성은 일반적 이다입니다. 가양성 동물 처리 및 테스트를 완벽 하 게 길들여지지 않은 경우에 일반적으로 발생 합니다. 동물 관찰된 응답 재귀 및 근육 긴장 또는 공포 반응에서 강화 때문 이므로 완전히 편안 해야 합니다. 긴장 처리기 동물 스트레스를 전송 하 여 결과 좌우할 수 있다. 따라서, 너무 빡 빡 하거나 너무 느슨한 쥐를 잡고 수 둘 다 문제가 될. 또한,는 처리기가 긴장,이 쥐의 반응을 혼동 수 있습니다. 미숙한 관찰자 쥐의 응답을 오해 것 이다 위험 이기도 합니다. 좋은 교육 및 연습을 많이 성공 하는 Neuroscore의 일관성 필수적입니다.
일반적으로 이러한 테스트와 최고 관심사 큰 차이, 그리고 때로는 차이, 치료 그룹의 부족 이다. 이후 동물 다른 처리기, 소리, 시간, 및 잠재적으로, 시즌21에 다르게 반 작용할 수 있다, 모든 노력을 줄이기 위해 모든 가능한 혼동 요인 이루어져야 합니다.
여기에 표시 된 빔 균형과 빔 도보 작업의 결과 vestibulomotor 함수에서 적자를 감지 하는 부상 후 일찍 이러한 테스트는 유용한을 보여줍니다. 이 적자는 일반적으로 시간1,14에 확인. 이 모델에서 부상, 6 개월에 의해 부상 유발 적자는 해결. 6 개월 시간 포인트의 결과 나 이브, 가짜, 또는 부상된 쥐; 없습니다 차이 나타냅니다. 그러나, 모든 쥐 되었습니다 편안한 자신의 가정 새에 6 개월, 노화 및 무게를 얻고에 대 한. 따라서, 그들은 6 개월 후 수술 (또는 순진한 경우에 해당)에서 다시 테스트 하는 시간으로 그들은 본질적으로 되고있다 오래 되 고 지방, 고 따라서 그룹 뿐만 아니라 그들은 그들의 기준선 0에 비해 않았다 수행 하지 않으면 모든 결과.
또 다른 중요 한 고려 사항은 사용 동작 테스트 올바른 테스트입니다. 예를 들어 여기 고용 테스트 특정 뇌 영역의 기능을 표현 하기 위해 생각 된다. 한 예로 균형에 대 한 중요 한 vestibular 시스템 이다. Sensorimotor 피 질, 시상, corticospinal 뉴런, 기초 중추, nigro-가, 몇 가지 이름을 포함 하는 피 질 등의 sensorimotor 함수에 관련 된 뇌 영역 vestibulomotor 조정에 모두 포함 된다. 따라서, 광속 균형 또는 빔 도보에 적자가이 지역에 있는 잠재적인 적자를 나타냅니다. 또한, 전 두 엽 피 질과 해 마 학습 및 메모리 기능 테스트 작업 메모리 물 미로에서 포함 된다. 올바른 테스트를 선택 하는 경우에 고용 하는 테스트의 제한 마음에 보관 해야 합니다. 예를 들어 여기에 제시 하는 테스트의 분위기, 우울증, 불안, 공격 성, 의사 결정, 또는 충 동성 등 사회적 상호 작용 등 적자에 민감합니다. 거듭, 행동과 두뇌 영역을 평가 대 한 적절 한 테스트를 선택 하는 것이 필수적입니다.
해석 및 행동 데이터의 분석 주의를 접근 해야 합니다. 그것 좋습니다 별도로, 각 유형의 테스트의 전력 분석을 포함 하기 때문에, 자연, 미묘한 효과의 원유 측정은 신경 적자의 행동 결과 사용 하 여. 또한, 다른 테스트 통계 분석의 종류를 요구 한다. 예를 들어 설명 하는 Neuroscore 및 빔 분산 테스트 점수는 서 수 규모를 사용 하 여 동작을 훈련 된 관찰자의 해석에 따라 달라 집니다. 이러한 유형의 데이터 연속 하지 않으며 일반적으로 분산, 그래서 비패라메트릭 통계 사용 해야, Kruskal-월리스 테스트 같은 섹션 6.1 및 6.2 에서처럼. 또는 빔 산책 및 작업 메모리 물 미로 테스트 연속 데이터를 생산 하 고 일반적으로 분산, 그래서 파라메트릭 통계 사용할 수 있습니다, 일방통행 ANOVA 등 반복 측정 양방향 ANOVA, 섹션 6.3과 6.4에 설명 된 대로.
여기에 제시 된 행동 작업 시간의 시험을 섰다가 고 뇌 손상에 대 한 테스트 하는 행동의 많은 다른 방법 존재 한다 쥐, FPI 모델과 결합 하는 경우에 특히 재현 가능한 결과 제공. neuroscore 장비의 최소 수행 하는 짧은 평가입니다. 반사와 힘의 다른 검사 사용할 수 있으며 측면 pulsion 작업, akinesia 테스트, 경사진 평면 테스트 및 그립 강도 (후 지 모토 외. 참조 같은 신경학 상 평가에 통합 될 수 있는 22 와 골드 외. 23). 설명에 빔 균형과 빔 도보 작업 부상 후 vestibulomotor 적자의 조치는. Vestibulomotor 조정 총 운전 적자의 다른 측정 Rotarod, 회전 극를 포함 하 고 열 필드 활동 총 운동 동작에의 한 측정을 여겨질 수 있다. 수영, 수 물 미로 동안 수영 속도 측정은 또한 총 모터 조정22,23의 표시. 작업 메모리 물 미로 작업 완료 하 여 테스트가이 집합이 메모리 적자 (재판 1으로 표시)을 참조 하는 둘 다 감지 하 고 작동 메모리 적자 (재판 2 또는 시험 1과 시험 2의 차이 의해 표시 된). 인지 기능의 다른 측정 8 팔 방사형 미로, 반 즈 미로, 소설 개체 인식 테스트, 그리고 물 미로의 다른 유사 콘텐츠를 포함. 이 변이 원래 모리스 물 미로 등 Lashley III 미로 (다시 참조 후 지 모토 외. 22 와 골드 외. 23).이 배터리 테스트의 입증 유용한 다양 한 각도에서 그리고 부상 후 일찍 밖으로 상해1후 12 개월.
또한, 여기 시연 작업 다른 긴장, 섹스, 그리고 쥐;의 연령대와 함께 사용할 수 있습니다. 그러나, 서로 다른 크기와 더 큰 연 약함의 경우에서 만들 수 숙박 할 수 있습니다. 예를 들어, 오래 된, 무거운 쥐 빔 분산 작업과 세, 연약한 쥐에 대 한 더 넓은 빔 필요 미로 물에서 수영 시간의 짧은 기간 할 수 있습니다. 따라서,이 테스트에서 유연성 및 다른 상황 및 가설을 수용 하기 위해 새로운 테스트의 개발을 위한 잠재력 이다.

여기에 제시 된 방법은 쥐에 있는 TBI의 실험 모델에 의해 유도 된 특정 뇌 영역에 기능적인 적자를 검출 하기 위하여 설계 되었습니다. 4 개의 다른 동작 테스트를 설명 합니다. 첫째, 짧은 신경학 상 평가, neuroscore, 라고 하는 어떤 장비 전문 하지만 연습; 않아도 필요 없이 수행할 수 있습니다. 이 테스트는 반사에 적자를 감지합니다. 둘째, 광속 균형 테스트 균형 능력에 적자를 감지 합니다. 이 작업 처리기 쥐 서 수 규모에 따라 점수를 요구 하 고 처리기의 몇 가지 훈련이 필요 합니다. 빔 밸런스 테스트 필요 좁은 빔 이며 적자에 민감한 vestibular 시스템. 제 3의 시험 평가 vestibulomotor 조정 합니다. 이 테스트 빔 워크 작업으로 알려져 있으며 쥐의 사전 훈련 필요 하지만이 절차는 광선을 통과 하는 대기 시간 주관적인 점수에 의존 하지 않는 객관적인 측정으로 이전 2 보다 더 객관적. 이 차이 안전한 상자를 도달 하는 좁은 광속을 통과 하는 시간을 측정 하는 때문입니다. 빔-도보 테스트 빔 밸런스 뿐만 아니라 탈출 상자 보다 긴 빔을 필요합니다. 이 테스트 모터 조정 및 균형에서 적자가 고 따라서 모터 관련된 뇌 영역과 소 뇌 손상에 민감한입니다. 모리스 물 미로 (MWM-WM)의 작업 메모리 버전은 주로 hippocampal 기능과 통합 전 두 엽 피 질 또는 집행 기능을 테스트합니다. 표시 된 모리스 물 미로의 버전 참조 메모리1에서 적자를 검색 하기 위해 사용할 수 있습니다.
이러한 메서드는 문학에서 그들의 잘 설립 실적에 따라 선정 됐다. 각 연구의 수많은 년간 많은 손을 다른 실험실에서 쥐의 여러 변종에 효과가 있다. 그러나, 과거에 후 부상 부상 "만성" 시간 점 고려 되었다 후 2 주까지 측정 합니다. 따라서, 설치류에 있는 TBI의 만성 효과의 연구에 대 한 행동 기법 확립, TBI를 감지 하는 감도 대 한 평가 하는 데 필요한 이러한 잘 알려진 방법 부상 후 긴 시간 지점에서 적자 유발. 그러나 지금 TBI의 여러 설치류 모델, FPI 모델 중 가장 널리 사용 되 고이 연구에 적용 됩니다. 이 모델21950 년대 처음으로 출판 되었다 그리고 그 이후, 1000 명 이상의 논문 고용 FPI 쥐3. 상해의이 종류의 neuropathology4 와 다른 회사에 의해 잘 설명 되었습니다5,,67. 간단히, 해 마의 신경 상해는 표시 되었습니다 복용량 의존 플 루 오로 옥 부상, 즉, 24-48 h; 후 짧은 시간에 얼룩을 사용 하 여 심한 위축 및 현상의 내부 캡슐과 피 질을 포함 하 여 보고 되었습니다 부상6,7후 1 년.
뇌 기능의 가장 의미 있는 표현 실험적인 뇌 손상 후 행동 결과 측정을 사용 하 여 평가 됩니다. 그러나, FPI 실험 행동의 결과 사용 하는 대부분 확인 조치 비교적 일찍 일반적으로 14 일 부상 후 1. 메서드를 사용 하 여 설명 여기, 몇 가지 행동 적자 부상1후 12 개월 밖으로 검출 될 수 있다. 신경 기능, 총 vestibulomotor 기능 및 정밀한 모터 조화 짧은 신경학 상 평가 사용 하 여 수술 후 후 부상 일 (Pid) 1-3, 3, 6, 12 개월에 평가 했다 (Neuroscore; Schallert8에서 수정), 빔 밸런스 작업, 그리고 빔 도보 작업9,,1011. 참조 및 작업 메모리 모리스 물 미로1,,1213의 작업 메모리 버전을 사용 하 여 평가 됐다.

<table><tbody><tr><td>Sprague-Dawley 쥐</td><td>Charles Rivers Laboratories 251 Ballardvale St Wilmington, MA 01887-1096 전화: 800-522-7287</td><td>CD-IGS 쥐, 변형 코드 001</td><td>남성, 알비노, 도착 시 300-350g</td></tr><tr><td>Name</td><td>Company<</td><td>strong>카탈로그 번호</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Beam-Balance</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Beam</td><td>가정용</td><td></td><td>목재, 25" l x 1" h x 3/4" w 폴리우레탄 바니시로 밀봉</td></tr><tr><td>C-클램프</td><td>Home Depot</td><td>1422-C</td><td>2 1/2"</td></tr><tr><td>barrier</td><td>Home Depot</td><td></td><td>스티로폼, 18" x 17 1/2"</td></tr> <tr><td>테이블 (BB & BW)</td><td>일반 사무용품</td><td></td><td>37" h x 30" w x 60" l</td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>카탈로그 번호</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Beam-Walk</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Beam</td><td>home built</td><td></td><td>나무 38-1/2" L x 1-3/4" H x 1" W 폴리우레탄 바니시로 밀봉 (~ 37" 바닥에서 벗어남)</td></tr> <tr><td>탈출 상자</td><td>집에 지어진</td><td></td><td>Woodpainted Black 12 1/2 " L x 9" H x 7-1/4" W</td></tr><tr><td>못 (못)</td><td></td><td></td><td>2"</td></tr> <tr><td>힌지</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>클램프</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>백색 소음 기계</td><td>San Diego Instruments 9155 Brown Deer Rd, Suite 8 San Diego, CA 92121 전화: (858)530-2600</td><td></td><td>http://www.sandiegoinstruments.com/libraries/misc/datasheets/whitenoise.pdf</td></tr><tr><td>light</td><td>Home Depot</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>카탈로그 번호</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Morris Water Maze</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>fiberglass 수영장</td><td>제조사 미상</td><td></td><td></td></tr><tr><td>(SDI에서 만든 것과 유사)</td> <td>San Diego Instruments</td><td>7000-0723</td><td>72" 지름 x 30" 깊이 (~ 500 갤런)</td></tr> <tr><td>플렉시글라스 플랫폼</td><td>Maggie Parsley</td><td></td><td>가 수작업으로 제작직경 10cm, 높이 26인치, 그립 표면을 제공하기 위해 플랫폼 표면에 실리콘이 적용됨</td></tr><tr><td>(SDI에서 만든 것과 유사)</td><td>SDI</td><td>7500-0272</td><td></td></tr><tr><td>플렉시글라스 동물 상자 w/ 뚜껑</td><td>UTMB 기계 공장</td><td></td><td>2 상자, 10" w x 16" L x 9"</td></tr><tr><td>h 스포트 라이트/ 열 램프</td><td>Home Depot</td><td></td><td>3 수영장 주변, 동물을 말리기 위해 2 이상 상자</td></tr><tr><td>AnyMaze</td><td>San Diego Instruments 9155 Brown Deer Rd, Suite 8 San Diego, CA 92121 전화: (858)530-2600</td><td>/9001</td><td>http://www.sandiegoinstruments.com/any-maze-video-tracking/</td></tr></tbody></table>

외상 성 뇌 손상 후 쥐에서 행동 적자를 감지

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

모두 민간 및 군사 집단에서 외상 성 뇌 손상 (TBI)의 증가 부각 TBI 지금 고려 된다 만성 질환; 그러나, 몇 가지 연구 TBI의 설치류 모델에서 상해의 장기적인 효과 조사 했습니다. 여기에 표시 된 행동 조치 확고 TBI 연구에서 초기 2 주, 2 달까지 같은 부상 후 시간에 대 한 있습니다. 이러한 방법 중 일부는 이전 사용 되었습니다 부상 후 최신 시간에서 최대 1 년, 그러나 아주 몇몇 실험실에 의해. 방법을 테스트 하는 짧은 신경학 상 평가 반사, 광속 균형 균형, 빔 도보 및 모터 조정, 균형과 적자에 민감한 수 있는 모리스 물 미로의 작업 메모리 버전 테스트 테스트 운항 시연 메모리를 참조 합니다. 남자 쥐 처리 했다 균형 미리 신경, 훈련 및 모터 조정 parasagittal 유체 타악기 부상 (FPI) 또는 가짜 부상을 받기 전에 테스트. 쥐 짧은 신경학 상 평가 (neuroscore), 광속 균형에 시험 될 수 있다 고 빔 도보 여러 번 물 미로에 테스트 하는 동안 할 수 있습니다 한 번. 이 차이점은 쥐 같은 동물에 시도 테스트 반복 결과 따라서 혼동 작업을 기억할 수 있기 때문에. 1 부상 후 3 일-테스트, 큰 차이가 모든 3 개의 비 인지 작업에서 검색 됩니다. 그러나, 빔 워크 작업에서 차이 없었습니다 나중 시간 지점에서 감지 (3 개월) 후. 적자 빔 균형에서 3 개월에 고는 neuroscore에서 6 개월에서 발견 했다. 작동 메모리 적자, 부상 후 12 개월 밖으로 검색 하 고 참조 메모리에 적자 처음 12 개월에서 나타났다. 따라서, 표준 행동 테스트 FPI 후 지속적인 행동 적자의 유용한 조치를 수 있습니다.

여기에 제시 된 행동 테스트의 목표는 쥐에 외상 성 뇌 손상 후 기능적인 적자를 검출 하기입니다. 4 특정 테스트 시간에 부상 후 1 년 연장 하는 특정 뇌 영역에 손상을 반영 하는 행동에 적자를 감지 표시 됩니다.

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

여기에서 제시하는 행동 테스트의 전반적인 목적은 외상성 뇌 손상을 입은 쥐의 기능적 결손을 탐지하는 것입니다. 신경학적 또는 인지적 기능의 결손을 탐지하는 네 가지 서로 다른 테스트가 제시될 것입니다. 이러한 방법들은 손상 후 뇌의 어느 영역이 손상되었는지 또는 실험적 치료가 효과적인지 여부와 같이 뇌 손상 연구 분야의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.이러한 기술들의 주요 장점은 많은 실험실에서 이미 잘 확립되어 재현성이 입증되었을 뿐만 아니라, 폭발성 손상 및 뇌졸중과 같은 다양한 유형의 뇌 손상에 민감하게 반응한다는 점입니다. 이러한 기술들은 외상성 뇌 손상이 신경 및 인지 기능에 어떤 영향을 미치는지에 대한 이해를 높이고, 쥐를 대상으로 한 실험적 치료법을 테스트하는 데 기여합니다. 일반적으로 이 방법에 익숙하지 않은 개인들은 불충분한 쥐 핸들링 경험이나 훈련 및 테스트 전 쥐의 적응 시간을 충분히 갖지 않아 어려움을 겪게 됩니다.이는 테스트 시간을 더 효율적으로 만들기 위해 쥐를 진정시키기 위해 필요합니다. 쥐의 꼬리를 잡아 테이블 표면에서 약 6~12인치 높이로 유지하며 전지 굴곡 테스트로 훈련을 시작하십시오. 쥐가 전지를 펴는지 또는 굽히는지 관찰하십시오.굴곡이 있으면 점수표에 1점을, 없으면 0점을 기록하십시오. 다음으로, 후지 굴곡 테스트를 위해 쥐의 꼬리를 다시 들어 올려 테이블 표면에서 약 6~12인치 높이로 유지하십시오. 쥐가 후지를 펴는지 또는 굴곡시키는지 관찰하고, 굴곡이 있으면 1점을, 없으면 0점을 기록하십시오.다음 테스트를 위해 쥐의 꼬리를 들어 올려 코가 테이블 가장자리에서 약 10 cm 거리에 올 때까지 천천히 내립니다. 수염이 가장자리에 닿지 않게 주의하며 쥐를 가장자리 쪽으로 천천히 이동시킵니다. 쥐가 테이블을 향해 앞발을 뻗어 도달하는지 관찰하십시오.앞발을 뻗는지 여부를 점수화합니다. 다음으로, 접촉 유발 배치 테스트(contact triggered placing test)를 위해, 몸과 손이 테이블 가장자리와 평행하도록 쥐를 잡고 앞다리는 자유롭게 둡니다. 한쪽의 수염이 테이블 가장자리에 닿을 때까지 쥐를 테이블 가장자리 쪽으로 천천히 내립니다.수염이 테이블에 닿자마자, 테이블에 닿은 수염과 같은 쪽의 앞다리를 테이블 가장자리 방향으로 뻗는지 관찰하십시오. 테이블 쪽으로 뻗는 동작의 유무를 기록하십시오. 마지막으로, 뒷발 파지 반사 테스트를 위해 엄지와 검지로 앞다리 아래 가슴 부위를 잡아 쥐고 쥐를 한 손으로 고정하십시오.각 뒷발의 손바닥 부분을 검지로 부드럽게 터치합니다. 쥐가 검지를 잡는지 관찰하고, 잡기 반응의 유무를 점수화합니다. 수술 24시간 후, 쥐를 빔 위에 올리고 타이머를 시작하여 빔 균형 테스트를 시작합니다.60초 동안 쥐를 면밀히 관찰하고 워크시트에 점수를 기록하십시오. 실험자의 팔 위나 홈 케이지에서 쥐가 시도 사이에 잠시 쉴 수 있도록 합니다. 먼저 쥐를 목표 상자(goal box)에 1분 동안 둡니다.1분 후, 쥐를 꺼내고 빛과 백색 소음을 켜서 실험을 시작합니다. 쥐를 목표 상자와 가장 가까운 페그 구멍 위치의 빔 위에 놓아 쥐가 목표 상자로 들어가게 합니다. 쥐의 앞발이 목표 상자의 경계선을 넘으면 즉시 빛과 소음원을 꺼서 해당 회차의 실험이 종료되었음을 기록합니다.각 시도 사이에 쥐가 goal box에서 30초 동안 휴식을 취하게 합니다. 각 peg 위치와 시작 지점에서 beam-walk 훈련을 한 번씩 반복합니다. 구멍에 peg를 삽입하고, peg가 설치된 상태에서 beam-walk를 한 번 완주합니다.그런 다음, 스톱워치를 사용하여 각 시도 시간을 측정하며 쥐가 5초 이내에 세 번의 시도를 완료할 때까지 반복합니다. 수술 24시간 후, 핀이 설치된 전체 빔을 사용하여 쥐의 빔 보행(beam-walk) 능력을 테스트합니다. 쥐가 숨겨진 플랫폼의 위치를 학습하고 기억할 수 있도록 방 주변에 시각적 단서를 배치합니다.비디오 추적 소프트웨어를 열고 플랫폼 위치가 포함된 수중 미로 지도, 수영 거리, 시험 횟수, 동물 수 및 처리군이 포함된 정확한 프로토콜을 로드하여 첫 번째 시험을 시작하십시오. 플랫폼을 지정된 위치에 배치하고 소프트웨어의 지도와 일치하는지 확인하십시오. 그런 다음, 쥐를 지정된 위치에서 벽을 향하게 하여 수조에 넣고 즉시 추적 프로그램의 타이머 및/또는 스톱워치를 시작하십시오.쥐가 플랫폼을 찾을 때까지 120초의 시간을 줍니다. 쥐가 플랫폼을 찾으면 스톱워치를 멈추고 워크시트에 시간을 기록합니다. 참고로, 쥐가 플랫폼을 찾지 못할 경우 손으로 플랫폼까지 안내하고 120초로 기록합니다.시행 사이에 쥐가 플랫폼 위에 15초 동안 머물게 합니다. 두 번째 시행 후에는 쥐를 가열된 인클로저에 4분 동안 둡니다. 마지막으로, 플랫폼을 두 번째 위치로 이동시키고 소프트웨어의 지도와 일치하는지 확인합니다.네 가지 모든 시작 위치와 플랫폼 쌍의 실험이 완료될 때까지 시험 1과 2의 절차를 반복합니다. 뉴로스코어(neuroscore) 절차의 결과는 수술 전인 0일 차에 위양성이 나타날 가능성과 함께, TBI 그룹의 미세한 차이를 감지하는 이 테스트의 민감도를 보여주며, 이에 따라 0일 차는 1일, 2일 및 3일 차와 차이가 납니다. 빔-밸런스(beam-balance) 결과는 부상 직후 및 부상 후 더 긴 시간이 경과한 시점의 결손을 감지하는 빔-밸런스 테스트의 민감도를 보여줍니다.빔-워크 테스트 결과, 부상 초기에는 결손이 나타났습니다. 하지만 부상 6개월 후에는 그룹 간에 유의미한 차이가 없었으며, 이는 부상 그룹에서 회복이 일어났음을 시사합니다. 또한, 부상 3개월 후에는 작업 기억의 결손이 나타났으며, 부상 12개월 후에는 작업 기억과 참조 기억 모두에서 결손이 관찰되었습니다.쥐를 핸들링에 적응시키고 neuroscore, beam-walk 및 beam-balance 테스트를 위한 사전 훈련을 실시하는 것이 중요합니다. 숙달되고 나면, 짧은 신경학적 평가는 전문 장비 없이도 신속하게 수행할 수 있습니다. neuroscore, beam-balance 및 beam-walk 절차 이후에는 학습 및 기억과 관련된 추가적인 질문에 답하기 위해 다양한 버전의 water maze나 novel object recognition test와 같은 다른 행동 패러다임을 사용할 수 있습니다.이 영상을 시청한 후, 행동 측정법을 사용하여 신경학적 및 인지적 결핍을 검출하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다. 핸들링에 대한 순응, 사전 훈련, 그리고 행동 실험 수행 시의 일관성은 모두 매우 중요합니다.

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연구

JoVE Journal

Behavior

행동

수정된 체중 감량 기법은 어린 쥐에서 가벼운 외상성 뇌 손상을 유도하는 데 사용되는 쉽고 비용 효율적인 절차입니다. 이 새로운 기술은 경미한 외상성 뇌 손상(mTBI) 및 뇌진탕에 대한 연구를 발전시킬 임상적으로 관련된 증상을 생성합니다.

청소년 쥐에 대한 가벼운 외상성 뇌 손상의 소설 모델

우리는 쥐의 모터 피 질에서 microelectrode 주입 하면 즉각적이 고 지속적인 모터 적자는 나타났습니다. Microelectrode 이식 수술 및 3 설치류 행동 작업 모터 피 질에 주입 한 손상 때문에 또는 총 모터 기능에 잠재적인 변화를 명료 하 게 하는 방법 여기 개요 제안.

설치류 쥐 모터 피 질에서 Microelectrode 주입으로 인 한 기능적 적자를 평가 하기 위해 테스트 행동

이 절차의 전반적인 목표는 가벼운 외상성 뇌 손상을 가진 쥐에 해마의 양적 미세 구조 정보를 얻는 것입니다. 이것은 파라메트릭 확산지도의 고급 확산 가중 자기 공명 영상 프로토콜 및 관심 영역 기반 분석을 사용하여 수행됩니다.

가벼운 외상성 뇌 손상을 가진 쥐의 해마에 있는 향상된 확산 화상 진찰

이 연구의 목적은 1-90 후 중뇌 동맥 폐색 / 재관류 (MCAO / R) 후 뇌 경색 및 감각 운동 기능을 테스트하여 뇌 허혈의 회복 및 후유부단계에서 연구를위한 동물 모델을 확립하고 검증하는 것입니다. 쥐에서 일.

쥐에서 급성 뇌졸중 후 뇌 회복을 평가하는 전임상 모델

외상성 뇌 손상 (TBI) 일반적으로 메모리 손상과 관련 된. 여기서는 메트릭 작업을 통해 TBI 후 공간 작업 메모리를 평가하는 프로토콜을 제시합니다. 메트릭 테스트는 TBI 후 공간 작업 메모리 장애를 연구하는 유용한 도구입니다.

외상성 뇌 손상 다음 성인 쥐에서 공간 작업 메모리를 평가 하기 위한 메트릭 테스트

현재 프로토콜은 수액 타악기로 인한 외상성 뇌 손상의 쥐 모델을 설명하고 지배적이고 복종적인 행동의 발달을 이해하기 위한 일련의 행동 테스트를 설명합니다. 이 외상성 뇌 손상 모델을 특정 행동 테스트와 함께 사용하면 뇌 손상 후 사회적 장애를 연구 할 수 있습니다.

외상성 뇌 손상 후 성인 쥐의 우성 복종 행동 평가

여기에서는 해마의 시냅스 가소성에 대한 반복적인 경미한 외상성 뇌 손상(r-mTBI)의 영향을 조사하기 위해 깨어 있는 폐쇄두부 손상 모델을 사용할 수 있는 방법을 보여줍니다. 이 모델은 환자에서 r-mTBI의 중요한 특징을 복제하고 시험관 내 전기생리학과 함께 사용됩니다.

경미한 외상성 뇌 손상의 깨어 있는 폐쇄 두부 손상 모델을 사용하여 시냅스 가소성의 변화 평가

사회적 식민지 케이지 환경 내에서 스스로 시작한 개별 행동 세션에서 데이터를 획득하는 시스템이 제시됩니다. 이 시스템의 효율성은 자동화된 숙련 도달 범위 평가를 사용하여 입증되었으며, 이를 통해 뇌졸중 후 운동 장애, 동기 부여와 관련된 잠재적 행동 변화, 일주기 변동 및 기타 혁신적인 종속 변수의 특성을 파악할 수 있습니다.

뇌졸중 후 결핍을 특성화하기 위해 자가 주도적인 쥐 행동 데이터 수집

여기에서는 급성 및 아급성 단계의 행동 징후와 관련하여 인간 mTBI와 현저한 유사성을 나타내는 폐쇄형 머리 경증 외상성 뇌 손상(mTBI) 쥐 모델과 검증을 제시합니다.

폐쇄 머리 경미한 외상성 손상의 쥐 모델 및 그 검증

이 프로토콜은 폐쇄성 두부 손상(CHI) 방법을 통해 유도된 반복적인 경미한 외상성 뇌 손상(rmTBI)의 수정된 마우스 모델을 제시합니다. 이 접근법은 두개골 창과 유체 타악기를 사용하여 수막 노출로 인해 일반적으로 발생하는 염증을 줄이고 설치류의 rmTBI 모델링에서 재현성 및 정확도를 향상시킵니다.

얇아진 두개골 창과 유체 타악기를 통합한 반복적인 경미한 외상성 뇌 손상의 수정된 마우스 모델

학습하세요 외상성 뇌손상 후 쥐에서 행동적자를 감지하는 방법을. 전지 및 후지 굴곡 테스트, 빔 균형 및 물 미로 테스트를 통해 운동 기능과 공간 기억을 평가합니다. 이 기법은 뇌손상 연구에서 치료 효과와 회복 과정을 이해하는 데 활용됩니다.

외상 성 뇌 손상 후 쥐에서 행동 적자를 감지

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