스테인레스 스틸 표면의 Uncleanliness 제약 업계에 확인 청소의 실패

이 작업의 전반적인 목표는 소분자, 치료용 단백질 및 항체에 대한 분석적 세척 방법 개발을 위한 모범 사례를 적용하여 스테인리스강 쿠폰 표면에서 제약 잔류물의 재현 가능한 높은 회수율을 얻는 것입니다. 이 방법은 제조 장비의 세척 검증이 실패하는 이유와 같은 제약 산업의 세척 검증 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 연구의 주요 장점은 분석 방법 검증에 사용되는 스테인리스강 쿠폰의 표면을 적절하게 청소하는 절차를 보여준다는 것입니다.

이 실험을 시작하려면 약물에 대한 세척 한계를 계산한 후 선택한 희석제에 용해된 약물의 샘플 용액을 준비합니다. 스테인리스 스틸 쿠폰은 물로 헹구고 10-15초 동안 표면을 두 번 닦아 청소합니다. 그런 다음 메탄올로 이 헹굼 및 닦기 단계를 반복하여 잔여 침전물을 제거합니다.

현장 세척 솔루션을 사용하여 고급 세척 방법을 수행하려면 쿠폰을 고성능 액체 크로마토그래피 또는 HPLC 등급의 물에 담그고 2분 동안 초음파 처리합니다. 쿠폰을 HPLC 등급의 물에 0.1% 알칼리성 세제 용액에 담그고 2분 동안 초음파 처리합니다. 쿠폰을 HPLC 물에 다시 담그고 2 분 초음파 처리를 반복합니다.

그런 다음 HPLC 물에 0.1% 산성 세제 용액을 담그고 2분 동안 초음파 처리합니다. HPLC 물에서 2 분 초음파 처리로 마무리합니다. 그런 다음 양면 테이프를 사용하여 250ml 플라스틱 비커 바닥에 스테인리스 스틸 쿠폰을 장착합니다.

시술 중에 비커를 잡고 스파이킹과 면봉을 용이하게 하고 사고를 방지합니다. 용적치환(positive displacement) 피펫을 사용하여 원하는 농도와 제형으로 정의된 약물 부피를 쿠폰 표면에 소용돌이 패턴으로 주입합니다. 쿠폰 표면이 마르면 2ml의 희석제가 든 바이알에 마른 면봉을 담근다.

면봉을 바이알 내부에 대고 눌러 과도한 용매를 제거합니다. 좌우로 균일하게 겹치는 스트로크를 사용하여 총 50제곱센티미터 테스트 영역이 닦일 때까지 젖은 면봉의 한쪽 면으로 쿠폰 표면을 단단히 닦습니다. 면봉의 같은 면을 사용하여 닦는 과정을 반복합니다.

쿠폰의 네 모서리를 각각 두 번씩 면봉으로 닦습니다. 쿠폰을 90도 회전하고 면봉의 반대쪽을 사용하여 닦는 방향을 90도 회전시킵니다. 면봉의 이쪽을 사용하여 같은 방식으로 청소를 반복하고 쿠폰의 네 모서리를 모두 두 번 닦아야 합니다.

표면을 닦은 후 가위를 사용하여 면봉 머리를 솔벤트 바이알로 자릅니다. 그런 다음 두 번째 면봉을 사용하여 전체 면봉 절차를 반복하면서 쿠폰을 이전에 선택한 방향과 같은 방향으로 90도 회전합니다. 다음으로, 두 개의 면봉 헤드가 들어 있는 바이알을 5분 동안 초음파 처리합니다.

그런 다음 10초 동안 바이알을 소용돌이칩니다. 마지막으로, 용액을 HPLC 바이알로 옮기고 작동 용액으로 라벨을 붙입니다. 샘플을 회수하려면 각 쿠폰 스파이크 또는 샘플 용액 200마이크로리터를 희석제 1, 800마이크로리터와 혼합하여 대조 용액을 준비합니다.

이러한 솔루션을 사용하여 텍스트 프로토콜에 따라 크로마토그래피를 실행할 수 있습니다. working and control solutions의 peaks 아래 상대적 면적을 기준으로 면봉 작업 용액의 회수량을 계산합니다. 3개의 쿠폰에 대해 이 프로세스를 반복하여 평균 회수율과 상대 표준 편차를 계산합니다.

쿠폰을 세척하기 전에는 활성 제약 성분 또는 API 부형제 비율, 다른 분석가 또는 동일한 분석가에 대한 다른 날짜에 관계없이 다른 스파이크 수준에 대한 회수 결과가 일관되지 않았습니다. 대부분의 회수 결과는 상대 표준 편차가 높았습니다. 회수에서 관찰된 변동성은 면봉 기술, 희석제, 스파이크 용매, 스파이크 및 희석제의 pH, 스파이크 기술 및 추출 기술을 포함한 여러 다른 매개변수를 조정했을 때 제거되지 않았습니다.

각 쿠폰 표면의 개별 회수율과 평균 회수율의 차이는 평균 회수율이 쿠폰 표면마다 다르다는 것을 보여주므로, 관찰된 변동성은 쿠폰 표면 간의 차이에서 비롯될 가능성이 매우 높습니다. 이 프로토콜에 설명된 쿠폰 세척을 따른 후, 회수 결과는 한 임상시험에서 다른 임상시험으로 재현 가능했으며, 쿠폰 간의 회수율 차이는 최소화되었습니다. 여기에서 수행된 쿠폰 세척은 회수율이 90% 이상으로 높았으며, 또한 각 스파이크 수준에 대한 상대 표준 편차 값이 허용 가능했으며 세척 전에 얻은 결과보다 작았습니다.

마스터하면 적절하게 수행하면 30분 이내에 쿠폰 청소를 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 관심 있는 분석을 잃지 않고 적절하게 스파이크 및 복구하는 방법을 기억하는 것이 중요합니다. 이 비디오를 시청한 후에는 스테인리스강 표면을 얼마나 적절하게 세척하여 잔류물의 재현성 있는 회수율을 높게 얻을 수 있는지 잘 이해하게 될 것입니다.

개발 후 이 기술은 제약 산업의 연구원들이 제조 공정에 대한 신뢰할 수 있는 세척 데이터를 제공할 수 있는 길을 열었습니다.