Name: SH SY5Y 세포의 포도 당 부족 유발 부상에 대 한 신경 보호 요원으로 대기압 플라즈마 제트의 새로운 응용 프로그램 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-09T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 34 s
Description: 배우세요 저선량 대기압 플라즈마 제트를 이용한 SH-SY5Y 세포의 포도당 결핍 유발 손상 신경보호 기법. 이 방법은 헬륨 플라즈마로 세포 손상을 줄여 허혈성 뇌 질환 치료에 새로운 가능성을 제시합니다.

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이 작품은 베이징 신경외과 학회 (2014-11), 중국 (No. 11475019와 81271286)의 국가 자연과학 기초 및 베이징 자연 과학 재단 (No. 7152027)의 혁신 기금에 의해 지원 되었다.

1. APPJ 장치의 준비 주의: 사용 하기 전에 모든 관련 물질 안전 데이터 시트 (MSDS)를 참조 하십시오. 증기 두건 및 개인 보호 장비 (보호 안경, 보호 장갑, 랩 코트, 등)의 사용을 포함 하 여 모든 실험을 수행할 때 적절 한 안전 관행을 사용 하십시오. 프로토콜 처리 기술 (살 균, 세포 복구, 셀 뿌리고, 세포 동결, 셀 얼룩, 등) 표준 셀 필요.
<ol><li>1 m m 내부 직경 석 영 튜브를 선택 하 고 외부 직경 3 m m.의 부드러운 연마 호 일을 사용 하 여 양 끝 횡단면.</li>
	<li>1.0 m m의 직경을 가진 니켈 도금된 스테인리스 바늘을 사용 하 여 고전압 전극으로. 0.05 m m의 곡률 반경에 팁을 갈기.</li>
	<li>포장 알루미늄 호 일 (폭에서 2 m m) 주위에 1 cm에서 석 영 튜브 석 영 튜브에서 노즐. 알루미늄 호 일의 다른 쪽 끝에서 1 cm에서 스테인리스 스틸 바늘 포인트를 수정. 알루미늄 포 일 반지를 사용 하 여 낮은 전압 전극으로.</li>
</ol> 2. 제트기의 수집 <ol><li>는 AC 신호를 제공 하는 기능 신호 발생기 전원 공급 장치는 고압 전력 증폭기 연결. 높은 전압 전극에 인가 전압의 파형을 기록, 디지털 오실로스코프에 고전압 프로브의 한쪽 끝을 연결 하 고 전원 공급 장치를 다른 쪽 끝을 연결 합니다. 회로 보호 하려면 2 k &#8486; 보호 저항으로 저항. 그림 2와 같이 회로 연결. 
	주의: 높은 전압 라인을 만지지 마십시오.</li>
	<li>지속적으로 석 영 튜브를 통해 헬륨 (볼륨 분수, 99.999%)을 통과 하 고 안정적인 1.4 표준 리터 당 분 (SLM)에서 가스 유량 제어. 
	참고: 우리가 사용 하지 마십시오 필터 셀 문화를 치료 하기 전에. 실험에 사용 하는 헬륨의 볼륨 분수 99.999% 이며 대부분 미생물이이 조건 하에서 살 수 없다.</li>
	<li>는 오실로스코프, 신호 발생기, 고압 전력 증폭기의 전원을 켭니다. 5 kHz에 주파수 조절 손잡이 회전 합니다. 점차적으로 증가 6의 피크-피크 값 전압 kV. 
	참고: 제트기는 충분히 (약 3cm) 때 바늘에 적용 하는 전압의 피크-피크 값은 약 6 kV.</li>
</ol> 3. SH SY5Y 세포의 준비 <ol><li>RPMI 1640에서 25 cm 2 플라스 크에 성장 SH-SY5Y 인간 신경 파생 셀 라인 매체 15% 태아 종 아리 혈 청 (FBS)와 보충. 포함 된 37에서 5% CO 2와 95% 공기 습도 인큐베이터에 셀 유지 ° c.</li>
	<li>때 셀 85% 합류에 도달, 신중 하 게 문화 미디어를 발음 하 고 셀에 1 mL 0.25 %trypsin + 0.1 %EDTA 추가.</li>
	<li>후 15의 보육 실내 온도에, 신중 하 게는 트립 신을 발음 하 고 추가 2 mL 15% 포함 된 RPMI 1640 무력화 FBS.</li>
	<li>부드럽게 아래로, 플라스틱 SH SY5Y 단층 완전히 분리 될 때까지, 우물의 바닥 세척.</li>
	<li>는 hemocytometer를 사용 하 여 셀을 계산 하 고 RPMI 1640 중간 + 15를 추가 하 여 2 x 10 5 셀/mL로 세포 농도 조정 %FBS, 그리고 96 잘 접시의 각 음에 세포 현 탁 액의 전송 100 µ L.</li>
	<li>APPJ 치료 전에 셀 인큐베이터에 12 h에 대 한 연결을 세포 허용.</li>
</ol> 4. SH-SY5Y의 APPJ 치료 <ol><li>조정 석 영의 노즐 사이의 거리 튜브와 96 잘 접시 배치 될 위치에 3 cm. 플랫폼 빔 문화 매체의 표면을 만질 수 있는 보장. 
	참고: 거리는 플레이트의 하단에서 측정 하지 됩니다. 그것은 먼저 석 영 튜브의 노즐 및 96 잘 접시를 사용 하는 플랫폼 간의 3 cm 조정.</li>
	<li>APPJ 치료 하기 전에 변경 제어 웰 스 제외 하 고 각 잘 배양 RPMI 1640 포도 당 매체 없이.</li>
	<li>APPJ 노즐 아래 접시 놓고 제트기 각 우물에 수직으로 쏠 수 있다 확인 하십시오.</li>
	<li>0 APPJ와 함께 별도 우물에서 치료 세포 s, 1의 2 s, 4 s, 8, 및 12 s. 
	참고: APPJ ( 그림 1) 헬륨 이온화에 의해 생성 됩니다. 4 세포 포도 당 부족으로 부상 처리 됩니다 셀에 헬륨의 영향을 제거 하는 8 s 헬륨 흐름과 s. 모든 치료는 3 중에서 수행 되어야 합니다.</li>
</ol> 5. 세포 생존 능력 분석 결과 참고:이 단계에서 매체를 변경 하지 마십시오.
<ol><li>APPJ 치료 후 세포 배양 기에서 1 시간에 대 한 셀을 품 어.</li>
	<li>각 잘 셀 계산 키트-8 (CCK-8) 솔루션의 추가 10 µ L.</li>
	<li>품 어 4 h. 위해 37 ° C에서 셀 
	참고: SH-SY5Y 셀 라인은 포도 당 부족 조건 12에 민감합니다. 세포 생존 능력은 pharmacodynamics 연구에 대 한 최적의 세포 생존 조건이 1 시간 포도 당 부족 후 거의 50% 감소 합니다. CCK-8 셀에 아무 세포 독성 있으며 셀은 APPJ 치료 세포 생존 능력을 확인 후 CCK-8 시 포도 당 부족 조건에서 다른 4 h와 인 큐베이 팅. 8 h 포도 당 부족 APPJ 처리 후에, APPJ의 보호 효과 때문에 포도 당 부족의 긴 기간 SH SY5Y 세포의 심한 손상을 주도 크게 감소 되었다. 24 시간 포도 당 부족 11 후 살아있는 세포의 증거가 없었다.</li>
	<li>450에서 흡 광도 측정 microplate 리더 nm.</li>
</ol>

<ol><li>Yang, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alternative+mitochondrial+electron+transfer+for+the+treatment+of+neurodegenerative+diseases+and+cancers%3A+Methylene+blue+connects+the+dots%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Alternative mitochondrial electron transfer for the treatment of neurodegenerative diseases and cancers: Methylene blue connects the dots.</a> Prog. Neurobiol. , (2015).</li>
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SH SY5Y 세포는 인간의 신경 파생 셀 라인 고 neurotoxicity 또는 neuroprotection12에 생체 외에서 연구에 대 한 적절 한 셀 모델로 서 널리 이용 된다. SH SY5Y 셀 라인 포도 당 부족 조건에 민감 했다. 세포 생존 능력은 pharmacodynamics의 연구에 대 한 최적의 세포 생존 조건이 1 시간 포도 당 부족 후 거의 50% 감소. 또한, CCK-8 시 약은 아무 세포 독성 세포 및 셀 APPJ 치료 세포 생존 능력을 확인 후 포도 당 부족 조건에서 다른 4 h CCK-8 시와 incubated 했다. 현재 연구에서 우리 SH SY5Y 세포의 포도 당 부족 유발 부상에 APPJ의 신경 보호 응용 프로그램에 관한 자세한 생체 외에서 치료 프로토콜을 제공합니다.
수정 및 문제 해결 CCK-8 부 화 시간이 짧은 각 색 잘 크게 변경...

성인 두뇌는 거의 독점적으로 정상적인 생리 적인 조건 하에서 에너지 대사에 대 한 기판으로 포도 당을 사용합니다. 인간의 뇌는 몸 무게의 2%만 하지만 바디1내 총 포도의 약 25%를 소비 한다. 그것은 잘 문서화 되어있다 그 포도 당 대사 장애는 주요 학적 변화 중 허 혈 성 뇌졸중 및 Alzheimer의 질병 (광고), 파 킨 슨 병 (PD) , 헌팅턴의 질병 (HD) 등 다양 한 신경 퇴행 성 질환 2,3. ATP 생산에 직접 영향을 줄 수 및 더 신경 부전, 제안 그 유지 세포 생존 능력의 위험을 증가 시킬 수 있습니다 신경 세포 죽음을 유도 포도 당 및 손상된 포도 당 통풍 관 또는 산화 인 산화의 부족 또는 지연 셀 부상 후 포도 당 부족이이 질병 치료에 대 한 합리적인 접근 될 수 있습니다. 포도 당 변조, 항 염증 제 대리인, 이온 채널 변조기, 자유 래 디 칼 청소부, neurotrophic 요인에 초점을 통해 신경 보호 효과의 조사 등 관심 되었습니다. 그러나, 임상 연습에 벤치에서 이러한 신경 접근의 번역 성공4되지 않았습니다.
대기압 플라즈마 제트 (APPJs)는 최근 몇 년 동안에서 여러 분야에서 많은 연구자의 관심을 끌고있다 대기 저온 가스 방전 기술의 새로운 종류. APPJs 암 세포 치료, 세균 비활성화, 혈액 응고, 상처 치유, 구두 약, 등5,6, 여러 종류의 그것의 방출 때문에 다양 한 생물 의학 응용 프로그램에 수십 년 동안 사용 되었습니다. 반응 질소 종 (RNS) 및 반응성 산소 종 (선생님) (그림 1)의7. 이전 플라즈마 바이오 의학 응용 프로그램은 주로 박테리아, 세포, 조직과8에 산화 그리고/또한 nitrative 스트레스에 집중 했다. 그러나, RNS과 선생님은 많은 생리 적 및 병 태 생리 과정9와 관련 된 중요 한 세포내 신호 분자는 APPJ 또한 "양날의 검" 될 수 있습니다. 질소 산화물 (NO) 생물학 과정의 넓은 범위를 제어 하 고 인체, 특히 중앙 신경 시스템 (CNS)에 이중 역할을 한다. 낮은 레벨의 그들의 신경 활동 모두 나타났습니다 생체 외에서 그리고 vivo에서 여러 신호 경로10통해. 우리의 이전 연구는 그 헬륨에 처음 보고 된 APPJ 유도 아니 생산 산화 스트레스 유발 부상11에 대 한 APPJ의 신경 보호 효과에 참여 했다. 그러나, 다른 상해에 APPJs의 효과 되지 보고 되었습니다. 따라서, 현재 연구의 목표 SH SY5Y 세포에 포도 당 부족 유발 부상에는 체 외에서 치료 프로토콜 헬륨 APPJ의 신경 보호 응용 프로그램에 대 한 제공 하는 것입니다. 이전 연구에서 다른, 우리의 프로토콜 부상의 과도 한 플라즈마 유도, APPJ 치료 잠재적으로 소설 "기증자 약으로 사용 될 수를 나타내는 결과 없이 신경 보호 응용 프로그램에 대 한 낮은 복용량 플라즈마 처리를 사용 "미래 연구 및 임상 번역에도. 이 프로토콜은 또한 다른 장애가 있는 다른 세포 유형 대 한 cytoprotective 응용 프로그램으로 사용할 수 제안 하지만 APPJ 치료 조건 다시 조정 해야 하며 치료 복용량 상대적으로 낮은 되어야 합니다.

<table><tbody><tr><td>SH-SY5Y 세포주</td><td>중국 유형 배양 센터 컬렉션</td><td>3111C0001CCC000026</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640 배지</td><td>Thermo Scientific</td><td>21875091</td><td>4°°C에 보관; C</td></tr><tr><td>RPMI 1640 매체 무포도</td>당 <td>Thermo Scientific</td><td>11879020</td><td>4°C에서 보관됨; C</td></tr><tr><td>태아 송아지 혈청</td><td>Thermo Scientific</td><td>16000044</td><td>-20 &deg에서 보관됩니다. C</td></tr><tr><td>tripsin-EDTA 솔루션</td><td>Solarbio</td><td>T1300</td>은 <td>4°C에 저장되었습니다. C</td></tr><tr><td>96 웰 플레이트</td><td>corning</td><td>3599</td><td></td></tr><tr><td>세포 계산 키트 -8 (CCK-8)</td> <td>Dojindo Laboratories</td><td>CK04</td><td>4 &deg에 저장; C</td></tr><tr><td>마이크로플레이트 리더</td><td>Tecan</td><td>M200 Pro</td><td>450nm High에서 흡광도 측정</td></tr><tr><td>&ndash; 전압 전력 증폭기</td><td>Trek</td><td>PD06087</td><td>전력</td></tr><tr><td>기능 신호 발생기</td><td>증폭 MaZe Electronics Science& 특정</td><td></td> 신호 High &ndash<td>를 제공하기 위한</td>기술</tr><tr><td>AT30120; 전압 프로브</td><td>Tektronix</td><td>P6015A</td><td>고전압 감지용</td></tr><tr><td>디지털 오실로스코프</td><td>Tektronix</td><td>DPO4104B</td><td>신호 표시를 위한</td></tr></tbody></table>

sh sy5y 세포의 포도 당 부족 유발 부상에 대 한 신경 보호 요원으로 대기압 플라즈마 제트의 새로운 응용 프로그램

New Application of an Atmospheric Pressure Plasma Jet as a Neuro-protective Agent Against Glucose Deprivation-induced Injury of SH-SY5Y Cells

대기압 플라즈마 제트 (APPJ)는 자사의 배출량 반응성 질소 종 (RNS) 및 반응성 산소 종 (선생님)의 여러 종류를 포함 하기 때문에 최근 몇 년 동안에서 여러 분야에서 많은 연구자의 주목을 받고 있다. 우리의 이전 연구는 산화 스트레스 유발 부상에 대 한 APPJ의 cytoprotective 효과 보이고 있다. 현재 연구의 목표는 SH-SY5Y 세포에 포도 당 부족 유발 부상에 헬륨 APPJs의 신경 보호 응용 프로그램에 관한 자세한 생체 외에서 치료 프로토콜을 제공 하는입니다. SH SY5Y 인간 신경 파생 셀 라인 보완 15% 태아 종 아리 혈 청 RPMI 1640 매체에 유지 되었다. 문화 매체 APPJ 치료 전에 포도 당 없이 RPMI 1640 다음 변경 되었습니다. 셀 인큐베이터에서 1 h 부 화, 후 세포 생존 능력 셀 계산 키트 8를 사용 하 여 결정 했다. 결과, 보여주었다 포도 당 부족 그룹에 비해, APPJ로 치료 하는 세포 전시 크게 증가 세포 생존 복용량 의존 방식에서 8 s/잘 최적의 복용량으로 관찰. 한편, 헬륨 흐름이 했다 포도 당 부족-유도 된 세포 손상에 영향을 주지 않습니다. 우리의 결과 APPJ 잠재적으로 포도 당 부족에 관련 된 중추 신 경계에에서 질환에 대 한 치료 방법으로 사용 될 수 표시. 이 프로토콜도 사용할 수 cytoprotective 응용 프로그램으로 다른 장애가 있는 다른 셀에 대 한 하지만 세포 배양 및 APPJ 치료 조건을 재조정 해야, 그리고 치료 복용량은 상대적으로 낮은 되어야 합니다.

데이터는 적어도 3 개의 독립적인 실험의 평균 ± SD로 표현 됩니다. 그룹 결과 ANOVA를 사용 하 여 분산에 대 한 분석 했다. 모든 분석은 통계 분석 소프트웨어 프리즘 및 p를 사용 하 여 수행 했다 &lt; 0.05 통계적 의미에 대 한 임계값을 했다.
세포 생존 능력은 CCK-8 보육의 4 h 후 측정 했다. 그림 3에서 보듯이, 포도 당 부족 통제 그룹에 비해 44.1 ± 2.6%에 SH-SY5Y 세포의 생존 감소 (일반적으로 15% 포함 된 RPMI 1640 매체에 경작 하는 세포 FBS). APPJ 치료는 크게 8 s, 잘의 최적 복용량에 복용량 의존 방식에서 세포 생존 능력을 증가 하 고 세포 생존 능력 도달 62.27 ± 3.1%. 가스 흐름이 했다 포도 당 부족-유도 된 세포 손상 (표 1)에 영향을 주지 않습니다.

<p class="jove_conten...

포도 당 부족 유발 SH-SY5Y 상해에 낮은 복용량 대기압 플라즈마 처리의 신경 보호 응용 프로그램에 대 한 프로토콜.

SH SY5Y 세포의 포도 당 부족 유발 부상에 대 한 신경 보호 요원으로 대기압 플라즈마 제트의 새로운 응용 프로그램

The atmospheric pressure plasma jet (APPJ) has attracted the attention of many researchers from multiple disciplines in recent years because its emissions ...

이 치료 방법의 전반적인 목표는 SH-SY5Y 세포의 포도당 결핍으로 인한 손상에 헬륨 대기압 플라즈마 제트의 신경 보호 적용을 위한 상세한 체외 치료 프로토콜을 제공하는 것입니다. 이 방법은 혈장 의학과 같은 혈장 응용 분야의 핵심 질문에 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 일관된 치료를 위해 이전 방법에 비해 상대적으로 낮은 혈장 처리 역할을 한다는 것입니다.그리고 우리 각자는 과도한 혈장으로 인한 부상을 예방할 수 있습니다. 이 기술의 의미는 허혈성 뇌 사례의 치료로 확장되는데, 이는 불충분한 포도당 공급이 이 질병의 일반적인 특징이기 때문입니다. 이 방법은 플라즈마의 새로운 의료 응용 분야에 대한 통찰력을 제공할 수 있지만 심혈관 시스템과 같은 다른 시스템에서도 사용할 수 있습니다.일반적으로 이 방법을 처음 접하는 개인은 다른 플라즈마 장치에 대해 치료 매개변수를 재조정해야 하기 때문에 어려움을 겪을 수 있습니다. 먼저 고전압 전력 증폭기를 AC 신호를 제공하는 전원 공급 장치 역할을 하는 기능 신호 발생기에 연결합니다. 적용된 전압의 파형을 기록하려면tage 전극, 고전압 프로브의 한쪽 끝을 디지털 오실로스코프에 연결하고 다른 쪽 끝을 전원 공급 장치에 연결합니다.대기압 플라즈마 제트 장치의 석영 튜브에 헬륨을 지속적으로 통과시키고 분당 1.4 표준 리터의 안정적인 가스 유량을 제어합니다. 그런 다음 오실로스코프, 신호 발생기 및 고전압 전력 증폭기를 켭니다. 주파수 조정 손잡이를 5킬로헤르츠로 돌립니다.그런 다음 전압을 6 킬로 볼트의 피크 값으로 점차적으로 높입니다. SH-SY5Y 인간 신경모세포종 유래 세포주를 성장시킨 후 세포가 85% 합류점에 도달하면 세포 배지를 조심스럽게 흡인합니다. 0.1%EDTA를 함유한 0.25%트립신 1ml를 세포에 첨가합니다.실온에서 15초간 배양한 후 트립신을 조심스럽게 흡인하고 15%FBS가 함유된 RPMI 1640 2ml를 첨가하여 중화합니다. SH-SY5Y 단층이 완전히 분리될 때까지 각 웰의 바닥을 위아래로 부드럽게 피펫으로 세척합니다. 그런 다음 혈구계로 세포를 계수하고 15%FBS를 함유한 RPMI 1640 배지를 추가하여 세포 농도를 조정합니다.그런 다음 100마이크로리터의 세포 현탁액을 96웰 플레이트의 각 웰로 옮깁니다. 석영 튜브의 노즐과 96웰 플레이트가 배치될 플랫폼 사이의 거리를 3cm로 조정하여 빔이 배양 매체 표면에 닿을 수 있도록 합니다. 처리 전에 각 웰의 배양 배지를 포도당 배지가 없는 RPMI 1640으로 변경합니다.이제 대기압 플라즈마 제트 노즐 아래에 플레이트를 놓습니다. 그런 다음 별도의 웰에서 0초, 1초, 2초, 4초, 8초, 12초 동안 세포를 처리합니다. 처리 후 섭씨 37도의 세포 배양기에서 1시간 동안 세포를 배양합니다.배양 후 각 웰에 10마이크로리터의 세포 계수 키트 8 용액을 추가합니다. 그런 다음 섭씨 37도에서 4시간 동안 세포를 배양합니다. 마지막으로 마이크로플레이트 리더로 450나노미터에서 흡광도를 측정합니다.포도당 결핍은 대조군에 비해 SH-SY5Y 세포의 생존율을 44.1% 플러스 마이너스 2.6%로 감소시켰다. 대기압 플라즈마 제트 처리는 웰당 8초의 최적 용량으로 용량 의존적 방식으로 세포 생존율을 크게 증가시켰습니다. 그리고 세포 생존율은 62.27 플러스 마이너스 3.1%에 도달했으며, 가스 흐름은 포도당 결핍으로 인한 세포 손상에 영향을 미치지 않았습니다.이 기술을 마스터하면 제대로 수행하면 30시간 안에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 사용하기 전에 모든 물질안전보건자료(MSDS)를 참조해야 한다는 점을 기억하는 것이 중요합니다. 개발 후 이 기술은 혈장 의학 분야의 연구자들이 다른 종류의 뇌 손상에 대한 새로운 응용 분야를 탐색하고 새로운 손상 모델을 만들 수 있는 길을 열었습니다.이 비디오를 시청한 후에는 새로운 실제 응용 분야에 대기압 플라즈마 제트를 사용하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다. 고전압 전력 증폭기로 작업하는 것은 매우 위험할 수 있으며 이 절차를 수행할 때 항상 고전압 라인을 건드리지 않는 것과 같은 예방 조치를 취해야 한다는 것을 잊지 마십시오.

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Research

연구

JoVE Journal

Engineering

공학

소설 충동 세포 가압 실험은 폭발 - 유도 외상성 뇌 손상의 분자 / 세포 메커니즘을 조사하기 위해 Kolsky 바 장치를 사용하여 개발되었습니다.

외상성 뇌 손상 연구를위한 Neuronal 셀의 충동 가압

레이저로 인한 눈의 시신경 유두에 손상을 입은 마우스를 예로 들어 보겠습니다.손상은 신경에 공급하는 혈관에서 내피 세포 손상과 혈전 형성을 일으켜 혈류를 감소시키고 허혈을 유발합니다.허혈은 시신경 유두의 망막 신경절 세포 축삭에서 산소를 빼앗습니다.RGC 세포체에서 이러한 파괴는 미토콘드리아 기능을 손상시키고 활성 산소종 생성을 증가시킵니다.그 결과 산화 스트레스는 세포사멸 신호 전달 경로를 활성화하여 RGC 손상을 초래합니다.마우스를 가압 챔버에 놓고 산소가 풍부한 환경에 노출시킵니다.고농도에서 산소는 혈장에 용해되어 허혈성 신경으로 확산됩니다.이에 대한 반응으로 RGC의 항산화 효소가 활성화되어 ROS를 중화합니다.항세포사멸 유전자 발현이 증가하여 RGC 생존율이 향상됩니다.또한 강화된 산소는 혈전을 용해시키는 혈관의 효소를 활성화합니다.산소는 또한 혈관 확장을 유발하여 신경으로의 혈류를 회복시킵니다.

 전방 허혈성 시신경병증에 대한 신경 보호 전략으로서의 고압산소 요법

이 비디오는 저온 대기 플라즈마를 활용하여 신경 줄기 세포에서 분화를 유발하는 방법을 제시합니다. 이것은 자외선과 반응성 분자를 생성하여 신경 세포가 돌기를 생성하도록 자극하여 신경 세포 분화를 나타냅니다.

Cold Atmospheric Plasma Treatment를 이용한 신경줄기세포 분화 자극

출처: Yan, X., et. al., SH-SY5Y 세포의 포도당 결핍으로 인한 손상에 대한 신경 보호제로서 대기압 플라즈마 제트의 새로운 적용. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 산화 스트레스를 조절하고 세포 생존력을 향상시켜 포도당이 결핍된 신경모세포종 세포에서 저선량 대기압 혈장 치료의 신경 보호 활성을 보여줍니다.

포도당이 결핍된 신경모세포종 세포에서 대기압 혈장 치료 평가 

허 혈 성 뇌졸중 공부 하기 어려운 어떤 영향을 받는 뇌 영역에 이다의 구체적인 기여 산소 포도 당 부족 (지도부)에 노출 하는 복잡 한 이벤트입니다. 이 문서는 고립 된 이다 그들의 반응성 및 확산 지도부 조건 하에서 연구 하는 방법론을 소개 합니다.

사이토 반응성 및 확산에서 체 외에 허 혈 성 같은 조건 모니터링

산성 후 조절은 뇌 허혈을 예방합니다. 여기서는 APC를 실행하는 두 가지 모델을 제시합니다. 이들은 시험 관내에서 산소 - 글루코스 부족 후에 산성 버퍼 corticostriatal 슬라이스를 전달함으로써 생체 내에서 중간 대뇌 동맥 폐색 후 20 % CO 2 흡입에 의해 각각 달성된다.

대뇌 허혈에 대한 산성 후행 조절의 신경 보호를 연구하기위한 실험 모델

이 문서는 기본 폭발 외상 성 뇌 손상의 새로운 모델을 설명합니다. 압축 공기 구동된 충격 튜브는 단일 충격파를 마우스 hippocampal 슬라이스 문화 체 외에 노출 하는 데 사용 됩니다. 이것은 높은 처리량을 가진 재현할 수 뇌 조직 손상 생성 하는 간단 하 고 빠른 프로토콜 이다.

모델을 새로운 시험관에 폭발 외상 성 뇌 손상의

이 프로토콜 신경 줄기 세포 및 분화 향상을 위한 면역 형광 검출에 차가운 대기 플라즈마 처리의 자세한 실험 단계를 제공 하는 것을 목표로.

신경 줄기 세포 분화는 원스텝 차가운 대기 플라즈마 치료에서 체 외에 의해

신경 줄기 세포를 전달하는 방법, 용액 또는 현탁액을 주입하기 위한 적응성, 일반적인 경동맥을 통해 (마우스) 또는 외부 경동맥 (쥐) 허혈성 뇌졸중 후보고된다. 주입된 세포는 뇌 의 자당종 전체에 광범위하게 분포되며 전달 후 최대 30d까지 검출될 수 있다.

쥐와 마우스 두뇌에 신경 줄기 세포의 동맥 내 납품: 대뇌 허혈에 응용 프로그램

이 작업은 3D 뇌종양 모델, 즉 시험관 내 배양, 생체 내 모델 및 생체 내 쥐 모델에서 구현하기 위한 유연한 상호 디지털화 전극의 개발을 설명합니다. 제안된 방법은 상이한 수준의 복잡성에서 종양에 대한 펄스 전기장의 효과를 평가하기 위해 사용될 수 있다.

교모세포종의 펄스 전기장 치료를 위한 유연한 유기 전자 장치

지방 유래 중간엽 기질 세포(AdMSC)는 염증과 관련된 질병을 치료하는 데 유용한 강력한 면역 조절 특성을 가지고 있습니다. 쥐 AdMSC와 원발성 혼합 신경교세포를 분리 및 배양하고, AdMSC를 자극하여 항염증 유전자 및 성장 인자를 상향 조절하고, AdMSC의 이동을 평가하고, 원발성 혼합 프리온 감염 신경교세포와 AdMSC를 공동 배양하는 방법을 보여줍니다.

프리온 유발 염증을 줄이기 위해 원발성 혼합 신경교세포와 공동 배양된 지방 유래 중간엽 기질 세포

배우세요 저선량 대기압 플라즈마 제트를 이용한 SH-SY5Y 세포의 포도당 결핍 유발 손상 신경보호 기법. 이 방법은 헬륨 플라즈마로 세포 손상을 줄여 허혈성 뇌 질환 치료에 새로운 가능성을 제시합니다.

SH SY5Y 세포의 포도 당 부족 유발 부상에 대 한 신경 보호 요원으로 대기압 플라즈마 제트의 새로운 응용 프로그램

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