Name: 만성 수축 부상으로 쥐에 있는 자동화 된 걸음 걸이 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 49 s
Description: 배우세요 만성 수축 부상 쥐 모델에서 자동화된 보행 분석을 이용한 기계적 통각 과민 반응 평가 방법입니다. 이 기술은 말초 신경 손상 후 감각 기능을 측정하여 통증 연구의 핵심 질문에 답할 수 있으며, 객관적인 보행 매개변수 분석이 가능합니다.

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이 연구는 충남 국립 대학, 연구원의 동양 의학 (KIOM)와 한국 건강 기술 연구의 보조금에 의해 지원 되었다 &#38; D 프로젝트 통해는 한국 보건 산업 개발 연구소 (진흥원), 보건 복지부에 의해 자금 &#38; 복지, 한국 (번호 부여: HI15C0007).

모든 실험 통증 연구에 대 한 국제 협회의 윤리 지침에 따라 실시 했다와 충남대 (에서 기관 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인 되었다 대전, 한국).
 1. 좌 골 신경에 CCI 유도 <ol><li>집 남성 ICR 마우스 제어 실내 온도 (20-25 ° C에서 유지 하는)와 습도 (40-60%), 12 h 명암 주기에서 20-25 g 무게 무료 음식에 접근 하 고 물입니다. 수술 하기 전에 적어도 일주일의 동물 관리 실에서 쥐에 대 한 새 환경 순응 기간 허용.
	<ol><li>주택, 동안 모양 및 마우스의 동작을 관찰 하 고 비정상적인 운동 활동을 보여주는 마우스를 사용 하지 마십시오. 
		참고: CCI 수술 전에 1 일 폰 Frey 필 라 멘 트를 적용 하 여 뒷 발을의 기계적 감도 측정 하 고 정상적인 기준선 값 자동된 걸음 걸이 분석을 수행. 마우스 제어 및 실험적인 그룹에 무작위로 할당 다음,.</li>
	</ol></li> <li>수술 당일, 2,2,2-tribromoethanol (250 mg/kg, 복 (IP))를 주입 하 여 마우스 anesthetize. 
	참고: 외과 용 가운, 장갑, 마스크 등 개인 보호 장비를 착용 하십시오.
	<li><ol>2,2,2 tribromoethanol의 2.5 g의 무게와 5 mL의 최종 볼륨을 2-메 틸-2-buthanol를 추가 합니다. 멀리 빛 솔루션 유지 (예를 들어, 어두운 컨테이너를 사용 하 여 또는 호 일에 포장).</li>
		<li>40 ° C에가 열 하 고 10-30 분에 대 한 교 반에 의해 완전히 분해를 허용 시 약</li>
		<li>증류수 200 mL의 최종 볼륨을 추가 하 고 잘 혼합 때까지 저 어.</li>
		<li>4 ° C에서 aliquots를 저장 하 고 어둠 속에서 계속. 2 주 후, 마 취 새로운 aliquots로 대체 되어야 합니다.</li>
		<li>주사 1 g 몸 무게 당 20 µ L의 볼륨. 예를 들어 마우스의 몸 무게는 25 g, 500 µ L의 솔루션을 제공 합니다. 이 마 취의 일반적인 기간은 1 h. 
		참고:이 솔루션 빛에 노출 되 면 유독한 될 것입니다 하거나 열 빛과 열에 노출 하지 않도록 조심 해야 합니다. IP 주입 경로 사용 하지 않는 것이 좋습니다.</li>
	</ol></li> <li>마우스 깊은 마 취에 빠지고 때 (즉, 발생 하기 쉬운 위치)를 등 쪽으로 운영 테이블에 그것을 배치 하 고 70% 알코올 면봉으로 오른쪽의 외부 중반 허벅지 영역 소독. 
	참고: 꼬 집 거 나 뒷 발 또는 꼬리에 자극 압력에 응답의 부족을 확인 하 여 깊은 마 취 확인.</li>
	<li>마우스 오른쪽 좌 골 신경에 CCI 유도.
	<ol><li>메스 칼 날 길이가 1.0-1.5 cm의 중반 허벅지 주변 피부에 절 개를 만들기.</li>
		<li>노골적 노출 좌 골 신경에 마이크로-모기 hemostat와 허벅지 근육을 해 부.</li>
		<li>3 번 4-0 크롬 다 봉합 사를 사용 하 여 1.0-1.5 m m 간격으로 노출 된 좌 골 신경 선. 
		참고: 가벼운 떨고 동측 뒷 발에 나타날 때까지 좌 골 신경에서 매 여 느슨한 ligations를 확인 합니다. 쥐의 가짜 그룹 받은 신경 결 찰 하지 않고 제외 하 고 비슷한 조건에서 같은 외과 여.</li>
	</ol></li> <li>3-4 5-0 실크를 사용 하 여 간단한 중단 봉합 수술 열기를 닫고 povidone 요오드 수술의 바깥 영역의 살 균 소독.</li>
	<li>수술 후,가 열 패드에서 깨끗 한 장에 마우스 장소. 동물 마 취에서 회복은 때 케이지 그들의 가정 그들이 돌아갑니다. 
	참고:이 연구에서 항생제 안 사용 되었다. 일단 긍정적인 제어로 매일 50 mg/kg의 복용량에 CCI + GBP 받은 그룹 IP gabapentin (GBP).</li>
</ol> 2. 기계적인 용어인의 측정 (테스트 폰 Frey) 참고: 동측 뒷 발의 발바닥 표면에 폰 Frey 필 라 멘 트의 1 g를 사용 하 여 기계적 자극에 철수 응답의 주파수를 평가.
<ol><li>각 시험 당일 행동 테스트 룸에 마우스를가지고 하 고는 테스트 하기 전에 적어도 30 분 동안 그들의 자신의 가정 장에 마우스 적응 
	참고: 외과 용 가운, 장갑, 마스크 등 개인 보호 장비를 착용.</li>
	<li>금속 메쉬 바닥에 투명 한 아크릴 상자에 마우스를 놓고 마우스 30 분에 대 한 적응</li>
	<li>부드럽게 1 g 폰 Frey 필 라 멘 트의 뒷 발의 발바닥 표면에 적용 하는 필 라 멘 트 굴절 될 때까지.</li>
	<li>적용 필 라 멘 트 자극 동측 뒷 다리를 10 번 이상 10 s 간격으로 발 하 고 결과 기록. 
	참고:이 연구에서 10 타석에서 발 철수 응답 수 발 철수 주파수 (PWF, %)의 비율로 표시 됩니다. 폰 Frey 테스트 CCI 수술 후 매 2 일 수행한.</li>
</ol> 3. 걸음 걸이 분석 자동화 참고: 동물 걷고는 및 매개 변수를 자동으로 다양 한 걸음 걸이 분석 하는 동안 각 발 인쇄를 시각화 하는 걸음 걸이 분석 시스템, 등으로 발 인쇄, 강도, 보 폭 길이, 발 자세 위상, 스텝 시퀀스, 스윙, 스윙 속도, 등이 연구에서 우리는 발 인쇄 영역 및 백분율 데이터 변환 후 하나의 자세 변경 contralateral 사이 왼쪽 동측 오른쪽 뒷 발 대 보였다. 따라서, 50%의 결과 나타냅니다 발 인쇄의 크기와 바닥, 왼쪽과 오른쪽 사이의 접촉 발 지역 기간 동일한. 또한 0%에 접근 하는 더 낮은 데이터 값 표시 크기와 접촉의 기간 contralateral 측면에 비해 동측 뒷 발에 감소 (참조 그림 2의 B 패널 및 그림 3).
<ol><li>새 환경 순응, 계속 10 분 걸음 걸이 분석 장치 내에서 마우스 CCI 수술 전 5 일 하루에 한 번. 
	참고: 새 환경 순응을 포함 한 걸음 걸이 분석 테스트는 어둠 속에서 수행 되어야 합니다.</li>
	<li>걸음 걸이 분석을 위한 검사 실에 쥐 하 고는 테스트 하기 전에 적어도 30 분 동안 그들의 가정 장에 적응
	<ol><li>프로그램 메뉴의 설정 탭에서 설정는 &#34; 산책로 길이 &#34; 30 cm, 그리고 설정 하는 &#34; 기간을 실행 하는 최대 &#34; 5 s와 &#34; 변화를 실행 하는 최대 &#34; 50%.</li>
		<li>선택에서 등록 된 카메라는 &#39; 설치 &#39;의 탭은 &#39; 프로그램 &#39; 메뉴.</li>
		<li>선택 &#34; 수집 열 &#34;에서 &#39; 취득 &#39;의 탭에서 &#39; 프로그램 &#39; 메뉴.</li>
		<li>상태 메시지 다음 클릭은 &#39; 배경 스냅 &#39; (즉, 빈) 빈 보도의 배경 그림을 버튼.</li>
	</ol></li> <li>클릭는 &#39; 수집을 시작 &#39; 버튼 및 산책로;에 마우스를 놓고 녹음 마우스의 움직임에 따라 자동으로 시작 됩니다. 
	참고: 때 마우스는 명확 하 게 산책로에서 산책, 프로그램 자동으로 분류로이 이동 &#34; 준수 실행 &#34; 녹색 아이콘. 소프트웨어를 발 인쇄를 검색 하지 못했습니다, 경우는 실험 빨간색 아이콘을 볼 것 이다 하 고 녹음을 반복 해야 합니다. 적어도 5 개의 성공적인 준수 실행 분석을 위해 필요 하다.</li>
	<li>선택 테스트 후 &#39; 실행 분류 &#39;의 취득 탭에서는 &#39; 프로그램 &#39; 메뉴.</li>
	<li>선택 분석 및 클릭에 대 한 실행은 &#39; 자동 분류 &#39; 단추. 
	참고: 분류, 후 모든 통계 매개 변수는 자동으로 저장 하 고는 실험 클릭 하 여 결과 찾을 수 있습니다 &#34; 보기 실행 통계 &#34; 분석 메뉴에서.</li>
</ol>

<ol><li>Loeser, J. D., Treede, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Kyoto+protocol+of+IASP+Basic+Pain+Terminology%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">The Kyoto protocol of IASP Basic Pain Terminology.</a> Pain. 137 (3), 473-477 (2008).</li>
<li>Colloca, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuropathic+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Dis+Primers%22%5BJournal%5D)">Neuropathic pain.</a> Nat Rev Dis Primers. 3, 17002(2017).</li>
<li>Vranken, J. H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20021340">Mechanisms and treatment of neuropathic pain.</a> Cent Nerv Syst Agents Med Chem. 9 (1), 71-78 (2009).</li>
<li>DeLeo, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+neuropathic+pain+model%3A+sciatic+cryoneurolysis+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Characterization of a neuropathic pain model: sciatic cryoneurolysis in the rat.</a> Pain. 56 (1), 9-16 (1994).</li>
<li>Kim, S. H., Chung, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+model+for+peripheral+neuropathy+produced+by+segmental+spinal+nerve+ligation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">An experimental model for peripheral neuropathy produced by segmental spinal nerve ligation in the rat.</a> Pain. 50 (3), 355-363 (1992).</li>
<li>Seltzer, Z., Dubner, R., Shir, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+behavioral+model+of+neuropathic+pain+disorders+produced+in+rats+by+partial+sciatic+nerve+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">A novel behavioral model of neuropathic pain disorders produced in rats by partial sciatic nerve injury.</a> Pain. 43 (2), 205-218 (1990).</li>
<li>Bennett, G. J., Xie, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+peripheral+mononeuropathy+in+rat+that+produces+disorders+of+pain+sensation+like+those+seen+in+man%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man.</a> Pain. 33 (1), 87-107 (1988).</li>
<li>Dixon, W. J. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7387124">Efficient analysis of experimental observations.</a> Annu Rev Pharmacol Toxicol. 20, 441-462 (1980).</li>
<li>Bonin, R. P., Bories, C., De Koninck, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simplified+up-down+method+%28SUDO%29+for+measuring+mechanical+nociception+in+rodents+using+von+Frey+filaments%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pain%22%5BJournal%5D)">A simplified up-down method (SUDO) for measuring mechanical nociception in rodents using von Frey filaments.</a> Mol Pain. 10, 26(2014).</li>
<li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> J Neurosci Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li>
<li>Chen, H., Du, J., Zhang, Y., Barnes, K., Jia, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+a+Reliable+Gait+Evaluation+Method+for+Rodent+Studies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Establishing a Reliable Gait Evaluation Method for Rodent Studies.</a> J Neurosci Methods. , (2017).</li>
<li>Kang, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antinociceptive+Profile+of+Levo-tetrahydropalmatine+in+Acute+and+Chronic+Pain+Mice+Models%3A+Role+of+spinal+sigma-1+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Antinociceptive Profile of Levo-tetrahydropalmatine in Acute and Chronic Pain Mice Models: Role of spinal sigma-1 receptor.</a> Sci Rep. 6, 37850(2016).</li>
<li>Huehnchen, P., Boehmerle, W., Endres, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+paclitaxel+induced+sensory+polyneuropathy+with+%26%2334%3BCatwalk%26%2334%3B+automated+gait+analysis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Assessment of paclitaxel induced sensory polyneuropathy with &#34;Catwalk&#34; automated gait analysis in mice.</a> PLoS One. 8 (10), e76772(2013).</li>
<li>Vrinten, D. H., Hamers, F. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%27CatWalk%27+automated+quantitative+gait+analysis+as+a+novel+method+to+assess+mechanical+allodynia+in+the+rat%3B+a+comparison+with+von+Frey+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">'CatWalk' automated quantitative gait analysis as a novel method to assess mechanical allodynia in the rat; a comparison with von Frey testing.</a> Pain. 102 (1-2), 203-209 (2003).</li>
<li>Martinov, T., Mack, M., Sykes, A., Chatterjea, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+changes+in+tactile+sensitivity+in+the+hind+paw+of+mice+using+an+electronic+von+Frey+apparatus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Measuring changes in tactile sensitivity in the hind paw of mice using an electronic von Frey apparatus.</a> J Vis Exp. (82), e51212(2013).</li>
<li>Ferland, C. E., Laverty, S., Beaudry, F., Vachon, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gait+analysis+and+pain+response+of+two+rodent+models+of+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Gait analysis and pain response of two rodent models of osteoarthritis.</a> Pharmacol Biochem Behav. 97 (3), 603-610 (2011).</li>
<li>Mogil, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypolocomotion%2C+asymmetrically+directed+behaviors+%28licking%2C+lifting%2C+flinching%2C+and+shaking%29+and+dynamic+weight+bearing+%28gait%29+changes+are+not+measures+of+neuropathic+pain+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Pain%22%5BJournal%5D)">Hypolocomotion, asymmetrically directed behaviors (licking, lifting, flinching, and shaking) and dynamic weight bearing (gait) changes are not measures of neuropathic pain in mice.</a> Mol Pain. 6, 34(2010).</li>
<li>Ferreira-Gomes, J., Adaes, S., Castro-Lopes, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+movement-evoked+pain+in+osteoarthritis+by+the+knee-bend+and+CatWalk+tests%3A+a+clinically+relevant+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain%22%5BJournal%5D)">Assessment of movement-evoked pain in osteoarthritis by the knee-bend and CatWalk tests: a clinically relevant study.</a> J Pain. 9 (10), 945-954 (2008).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

현재 폰 Frey 필 라 멘 트를 사용 하 여 기계적 용어인의 측정은 가장 널리 방법 고통 동물 모델에서 보여 주기 위해 사용 촉각 과민 증. Neuropathic 고통에 대 한 동물 모델 개발을 계속, 감각 기능에 대 한 평가의 방법론이 되었습니다 또한 향상 된8,,910,15. 그 보고서에서 그것은 이러한 수정 이전 방법에 대 한 더 빠르고, 정확 하 고 사용 하기 쉬운 대체를 제공할 수 있습니다 제안 되었습니다. 그러나, 그 방법에서 데이터 여전히 수 있습니다 제한 될 그것의 주관과 메서드를 수행 하는 기술 또는 경험의 요구에 의해. 또한, 동물 억제 폰 Frey 테스트를 수행할 때 피할 수 없는 및 따라서 구속 관련 스트레스는 동물의 고통 응답 결과 영향을 미칠 수 있습니다.
<p cla...

외상, 대사 장애, 염증, 감염, 허 혈에 의해 유도 된 신경의 병 적인 변화 또는 자가 면역 질환은 때때로 neuropathic 고통, 병 변 또는 질병의 직접적인 결과로 발생 하는 통증으로 정의 되는 결과 somatosensory 시스템1에 영향을 미치는. Neuropathic 고통을 일반적으로 견딜 수 이며 불행 하 게도, 기존의 진통제 일반적으로 생성 하지 않습니다 충분 한 고통 릴리프2. Neuropathic 고통의 주요 기능은 자연과 자극 갖는 (즉, 용어인 및 통) 통증을 포함합니다. 용어인 가벼운 터치 등 따뜻한 자극 일반적으로 비-고통 스러운 자극에 나타나는 nociceptive 응답 이다. 통 유해 기계적 또는 열 자극3에 향상 된 고통 응답을 나타냅니다. 비록이 두 증상 모두 비판적으로 환자의 삶의 질 저하, 기계적 용어인 부드러운 촉각 자극에 의해 불러 일으켰다는 가장 악화 증상 부드러운 접촉은 일상 생활에서 피하기 어렵다 때문입니다.
기본 메커니즘 및 neuropathic 고통의 처리를 위한 새로운 진통제를 조사, 고통 응답의 정확한 측정은 필수적입니다. 수많은 neuropathic 고통을 동물 모델 개발 nociceptive 답변은 뒷 다리에 때문에 그것의 높은 접근성4,5,,67지역 발. 따라서, 대부분 통증 응답 평가 폰 Frey 필 라 멘 트 같은 특별 한 악기를 사용 하 여 기계적 자극을 적용 하 여 뒷 발 발바닥 또는 등 쪽 표면에 수행 되었습니다. 가장 자주 사용 되는 방법 중 하나는 최대 이며 딕슨에 의해 설명 하는 방법을 아래로8 그리고 나중 수정 버전9,10. 그러나, 매우 숙련 된, 경험 있는 경험 폰 Frey 테스트를 수행 하는 데 필요한 되며 결과 주관적 일 수 있습니다.
자동된 보 행 분석 시스템은 자유롭게 이동 하는 설치류에서 걷기의 다양 한 매개 변수를 측정 하 여 신경 및 신경 근육 학 장애를 조사할 수 있습니다. 다양 한 신경 손상 동물 모델에서에서 nociception 정도와 여러 치료의 antinociceptive 효과 평가 될 수는 고통 자극11,12,13, 를 추가 하지 않고 14.이 분석 시스템 같은 정적 및 동적 걸음 걸이 매개 변수를 검색할 수 있습니다: 인쇄 영역 (바닥 연락처 전체 발 인쇄의 영역)를 발, 발 강도 (접촉 발 영역의 평균 강도), 길이 (보 폭 같은 발의 연속 게재 위치 사이의 거리), 자세 단계 (단일 뒷 발에 대 한 지상 접촉의 기간), 단계 시퀀스 (순서는 4 발 바닥에 배치 됩니다), 스윙 (스윙 단계 기간), 그리고 스윙 속도 (계산 기간에서 보 폭 길이 스윙과 초당 픽셀으로 표시). 이 종이 사용 분석 시스템 및 하 고 만성 수축 부상 (CCI) neuropathic 마우스를 사용 하 여 폰 Frey 테스트와 함께 데이터의 간단한 비교를 제공 합니다.

<table><tbody><tr><td>0.9% 식염수</td><td>JW 제약</td><td>N/A</td><td>약물용 차량</td></tr><tr><td>1ml 주사기</td><td>BD Plastipak</td><td>300013</td><td>주입 장치</td></tr><tr><td>2, 2, 2-트리브로모에탄올(97% 순도)</td><td>Sigma</td><td>T48402</td><td>마취</td></tr>제 <tr><td>2-메틸-2-부탄올(99% 순도)</td><td>2</td><td>, 2, 2-트리브로모에탄올용</td>Sigma <td>152463</td> 용매</tr><tr><td>Catwalk 자동 보행 분석 시스템</td><td>Noldus</td><td>N / A</td><td>aniaml 보행</td></tr><tr><td>크롬 catgut (4-0 두께)</td> <td>AILEE</td><td>C442</td><td>Ligature</td></tr>의 자동 분석 소프트웨어 좌골 신경 <tr><td>Gabapentin</td><td>Sigma</td><td>Y0001280</td><td>Analgeisc,이 연구에서 양성 대조 약물로 사용</td></tr><tr><td>Graefe Forceps</td><td>F.S.T</td><td>11051-10</td><td>수술</td></tr>기구 <tr><td>가열 패드</td><td>대신전자</td><td>M-303AT</td><td>체온 조절</td></tr><tr><td>ICR 마우스</td><td>삼타코</td><td>N/A</td><td>실험동물</td></tr><tr><td>Mersilk (3-0 두께)</td><td>ETHICON</td><td>W598H</td><td>피부 봉합 수술용 봉합사</td></tr><tr><td>재료 Micro-Mosquito</td><td>F.S.T</td><td>13010-12</td><td>수술기구</td></tr><tr><td>Micro-scissors</td><td>F.S.T</td><td>14090-09</td><td>Surgical 기구</td></tr><tr><td>바늘 홀더</td><td>F.S.T</td><td>12002-12</td><td>수술 기구</td></tr><tr><td>포비돈 요오드</td><td>Firson</td><td>N/A</td><td>수술 후 감염 방지를 위한 소독제</td></tr><tr><td>메스 블레이드</td><td>F.S.T</td><td>10010-00 (#10)</td><td>절개를 위한 수술 도구</td></tr><tr><td>메스 손잡이</td><td>F.S.T</td><td>10003-12 (#3)</td><td>절개를</td></tr> <tr><td>위한 수술 도구Von-Frey 필라멘트</td><td>North Coast</td><td>NC12775-99</td><td>기계적 자극에 대한 감각 기능을 테스트하기 위한 측정 장치</td></tr></tbody></table>

만성 수축 부상으로 쥐에 있는 자동화 된 걸음 걸이 분석

Automated Gait Analysis in Mice with Chronic Constriction Injury

폰 Frey 테스트 neuropathic 고통 동물의 감각 기능 검사에 널리 이용 되는 고전적인 방법 이다. 그러나, 그것은 주관적인 데이터와 같은 몇 가지 단점이 고 숙련 된, 경험 있는 실험의 요구 사항이 있다. 날짜 하려면, 다양 한 수정 폰 Frey 방법 개선 하지만 여전히 몇 가지 한계가 있다. 최근 보고서는 걸음 걸이 분석 neuropathic 동물에서 더 정확 하 고 객관적인 데이터를 생성 하는 건의 했다. 이 프로토콜을 쥐에 neuropathic 고통의 결정 자동화 된 걸음 걸이 분석을 수행 하는 방법을 보여 줍니다. 새 환경 순응의 몇 일 후 쥐 발자국을 밝히는 유리 바닥에 자유롭게 걸을 허용 되었다. 발자국과 걸음 걸이의 정량화 발 인쇄, 그네 시간, 발, 등 의 각도의 영역 등 다양 한 걷는 매개 변수 자동 분석 비디오 클립을 통해 수행 된 다음,
이 연구의 주요 목적은 자동화 된 걸음 걸이 분석의 방법론을 설명 하 고 간단히 폰 Frey 필 라 멘 트를 사용 하 여 고전적인 감각 테스트에서 데이터와 비교 하는 것입니다.

우리 폰 Frey 테스트를 수행 하 고 CCI 수술 후 10 일 이내 CCI 쥐에서 걸음 걸이 분석을 자동화. 통계 분석에 대 한 양방향 분산 분석 (ANOVA)의 반복된 측정 전반적인 효과 결정 하 고 Dunnett의 게시물-특별 분석 실험 그룹 중 p-값을 결정 하기 위해 수행 합니다.
그림 1 에 표시 된 결과 고전 폰 Frey 테스트 데이터의 시간 과정을 나타냅니다. CCI 쥐의 (%) PWF CCI 수술 후 증가 2 일 이었고 가짜 그룹에 비해 10 일 동안. CCI 긍정적인 통제 그룹, GBP (50 mg/kg, IP, 일단 10 일 시작 1 일 수술 후 매일)에서 크게 CCI 강화 PWF 완화. 패널 A의 가짜 그룹에서 PWF (%)는 8.00 ± 수술에 대 timepoint 사전 ...

Neuropathic 동물 모델에서 고통 응답의 정확한 평가 통증 질환의 병 태 생리학을 조사 하 고 새로운 진통제 개발에 중요 한. 우리는 뒷 다리 발 자동된 보 행 분석 시스템에 의해 설치류의 감각 기능을 결정 하는 과민 하 고 객관적인 방법을 제시.

The von Frey test is a classical method that has been widely used to examine the sensory function of neuropathic pain animals. However, it has some ...

이 절차의 전반적인 목표는 자동화된 보행 분석 시스템을 사용하여 만성 수축 손상이 있는 마우스의 기계적 이질통을 분석하는 것입니다. 이 방법은 설치류의 말초 신경 손상 후 감각 기능을 측정하여 통증 연구 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 분석 시스템이 빠르고 사용하기 쉬우며 다양한 보행 매개변수에 자동으로 점수를 매긴다는 것입니다.이 연구를 위해 체중이 20-25g인 수컷 ICR 마우스를 표준 조건에서 최소 1주일 동안 수용합니다. 생쥐의 외모와 행동에 따라 마우스를 선택합니다. 탈모, 흉터, 움직임 감소 등의 비정상적인 모습이나 행동을 보이는 마우스를 사용하지 마십시오.선택한 마우스를 사용하여 수술 5일 전부터 매일 자동화된 보행 데이터를 수집하여 기준선 측정을 수행합니다. 수술 하루 전, 뒷발에 1g의 필라멘트를 삽입하여 Von Frey 검사를 수행하여 기준선 반응을 얻습니다. 부상 그룹과 가짜 그룹 간의 반응 균형을 맞추십시오.각 테스트 날짜에 쥐를 행동 테스트실로 데려와 테스트 전에 최소 30분 동안 자신의 집 케이지에서 마우스에 적응시킵니다. 수술 후 격일로 Von Frey 테스트를 사용하여 기계적 이질통을 측정합니다. 금속 메쉬 바닥의 깨끗하고 투명한 아크릴 상자에 마우스를 넣고 30분 동안 상자에 적응시킵니다.다음으로, 필라멘트가 구부러질 때까지 1g의 Von Frey 필라멘트를 동측 뒷발의 발바닥 표면에 부드럽게 바릅니다. 이 자극 패턴을 10회 반복하여 발 철수를 관찰합니다. 자극 사이에 최소 10초 동안 기다립니다.인출 횟수를 기록하고 분석을 위해 회수 빈도를 점수화합니다. 격일로 어둠 속에서 수행해야 하는 보행 분석 테스트도 수행합니다. 다시 말하지만, 쥐를 집 케이지의 실험실에 최소 30분 동안 적응시킵니다.보행 분석 장치를 설정하려면 소프트웨어 제어로 이동하십시오. 설정 탭에서 보행로 길이를 30cm로 설정하고, 최대 실행 시간을 5초로 설정하고, 최대 실행 범위를 50%로 설정합니다.그런 다음 프로그램 메뉴의 설정 탭에서 등록된 카메라를 선택한 다음 획득 탭에서 캡처 열기를 선택합니다. 상태 메시지 다음에 배경 맞추기 버튼을 클릭하여 빈 보도의 배경 사진을 찍습니다.이제 마우스를 통로에 놓고 10분 동안 장치에 적응하도록 합니다. 장치는 항상 생쥐 사이에 알코올로 세척해야 합니다. 마우스가 장치에 적응하면 획득 시작 버튼을 클릭합니다.마우스의

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Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

화살 비행기에서 운동학 걸음 걸이 분석 운동 실행 하는 방법에 대 한 매우 정확한 정보를 생성 합니다. 우리는 중재 면역 demyelination 대상이 쥐에 대 한 걸음 걸이 적자를 식별 하기 위해 이러한 기술의 응용 프로그램을 설명 합니다. 이러한 방법은 다른 마우스 모델을 갖춘 장애인된 운동에 대 한 걸음 걸이 적자 하 사용할 수 있습니다.

MOG35-55를 받게 하는 C57BL/6 쥐에 화살 평면 운동학 걸음 걸이 분석 실험적인 자기 면역 뇌 유발

이 연구에서 우리 복 부 비행기 모터 조정 마우스 모델 (예를 들어, endophilin 돌연변이 나이 진출 neurodegeneration의 진행에 미묘한 변화를 모니터링 하 이미징 기반 운동학 걸음 걸이 분석의 사용을 보여 줍니다. 마우스 라인)입니다.

연령에 따라 모터 손상 Neurodegeneration와 쥐의 걸음 걸이 분석

여기에 제시된 프로토콜은 전임상 연구를 위한 설치류에서 사중 운동의 3차원 운동학을 수집하고 분석하는 프로토콜이다.

설치류의 전임상 연구를 위한 3D 운동걸음걸이 분석

발자국 분석은 쥐의 운동 이상을 정량화하는 연구자들을 위한 디지털화된 걸음걸이 분석 프로그램에 대한 저비용 대안입니다. 속도, 단순성 및 세로 전위로 인해 마우스 모델의 행동 자형화에 이상적입니다.

신경 근육 질환의 마우스 모델의 행동 현상형에 대한 저렴한 걸음걸이 분석

자동 걸음걸이 분석은 말초 신경 손상 및 척수 타박상 손상의 설치류 모델에서 기능적 회복을 평가하는 실행 가능한 도구입니다. 다양한 실험 모델에서 운동 기능을 평가하기 위해 단 하나의 설정만 필요하지만, 동물의 세심한 하드 및 소프트 웨어 조정 및 훈련이 매우 중요합니다.

주변 신경 또는 척수 타박상 부상으로 설치류의 기능적 회복을 평가하기 위한 자동 걸음걸이 분석

우리는 상주 신경 호감 부상 후 쥐의 행동 테스트 배터리를 통해 모터 행동의 평가를위한 프로토콜을 제공합니다.

일방적인 상시 신경 호감 부상 후 쥐에서 모터 행동의 다인 평가

본 프로토콜은 시뮬레이션된 불사용 환경에 노출된 후 쥐의 보행 동작 변화를 묘사하기 위한 3차원 동작 추적/평가를 설명합니다.

설치류의 비활동으로 인한 보행 변화에 대한 포괄적인 이해

마우스워커(MW) 툴박스를 사용하여 자유롭게 걷는 쥐의 운동 패턴을 정량적으로 설명하는 실험 파이프라인이 제공되며, 초기 비디오 녹화 및 추적에서 정량화 후 분석에 이르기까지 다양합니다. 생쥐의 척수 타박상 손상 모델은 MW 시스템의 유용성을 입증하기 위해 사용됩니다.

MouseWalker를 사용하여 척수 손상 마우스 모델에서 운동 기능 장애 정량화

이 프로토콜은 딥러닝 기반 다중 관절 궤적 자동 라벨링과 함께 마커리스 러닝머신 테스트를 사용하여 쥐 하지의 운동학 평가 파이프라인을 구축하여 재현 가능한 동작 정량화를 가능하게 합니다.

쥐의 후肢 운동 운동학을 객관적으로 정량화하기 위한 딥러닝 기반 다중 관절 동기 추적

우리는 DeepLabCut을 사용하여 자유롭게 움직이는 쥐의 자발적인 보행과 이동을 정량화하는 저비용 마커 없는 워크플로우를 제시합니다. 이 프로토콜은 단일 카메라 비디오 획득, 해부학적 랜드마크의 무마커 추적, 시공간적 운동 매개변수 추출을 통합하여 전문 장비 없이도 비침습적이고 접근 가능한 운동 행동 분석 프레임워크를 제공합니다.

자유롭게 움직이는 쥐의 자발적 보행 및 이동 분석을 위한 저비용 마커리스 DeepLabCut 기반 워크플로우

배우세요 만성 수축 부상 쥐 모델에서 자동화된 보행 분석을 이용한 기계적 통각 과민 반응 평가 방법입니다. 이 기술은 말초 신경 손상 후 감각 기능을 측정하여 통증 연구의 핵심 질문에 답할 수 있으며, 객관적인 보행 매개변수 분석이 가능합니다.

만성 수축 부상으로 쥐에 있는 자동화 된 걸음 걸이 분석

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