Dictyostelium discoideum 응답 심각한 기계적인 자극의 평가

이 절차의 전반적인 목표는 간단한 기계적 섭동 후 세포 내 신호 전달 네트워크의 다양한 구성 요소의 활동을 검사하는 것입니다. 이 방법은 세포가 기계적 자극을 포함한 다양한 환경적 단서를 감지하고 방향성으로 이동하는 방법과 같은 세포 이동 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 반응에 대한 운동성이나 극성의 혼란스러운 기여 없이 기계적 자극에 대한 초기 반응을 검사할 수 있다는 것입니다.

우리는 약간의 교반과 함께 전달된 화학유인제에 대한 부착 세포의 반응을 테스트했을 때 이 방법에 대한 아이디어를 처음 갖게 되었고 차량 제어로 자극된 세포의 강력한 반응을 발견했습니다. 먼저 항생제 없이 냉동 스톡에서 소량의 세포를 HL5 배지에 접종하여 Klebsiella aerogenes를 준비하고 하룻밤 동안 배양합니다. 클렙시엘라 에어로제네스(Klebsiella aerogenes) 박테리아가 있는 상태에서 딕티오스텔리움(Dictyostelium)이 성장하면 마크로피노솜(macropinosome)의 수가 감소하여 외부 자극에 대한 세포 반응성이 향상됩니다.