Name: Laminotomy 허리 지 루트 신경 절의 액세스 및 돼지에 주입 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-10-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min
Description: 배우세요 돼지에서 척추 후궁 절제술을 이용해 요추 배신경절에 약물을 정확히 주입하는 방법을. 이 기술은 신경외과 및 전환신경과학 연구에서 약물 전달 효율성을 검증하는 데 활용됩니다.

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연구 지원 Schulze 가족 재단 (A.S.B.)에 의해 수행 되었다.

여기에서 설명한 모든 방법을 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC)의 메이 요 클리닉에 의해 승인.
 1. 경직의 필수 구성 요소 및 재현성 <ol><li>디자인의 사후 보장, 좋은 연구실 관행 항상에 있으며 어떤 동물 이전 IACUC (또는 유사한 위원회)에 의해 내부 승인을의 국가 기준에 따라 실험에 참여. 
	참고:이 프로토콜은 임상 충실 한 접근을 유지 하도록 설계 되었습니다. 따라서, 재료, 악기와 관련 된 기술 설명 패션 인 간에 있는 임상 기준에 동일 합니다. 예를 들어, 엄격한 무 균 기법을 따라 하 고 만료 된 재료는 사용 하지 마십시오.</li>
	<li>실험 설정에이 방법론의 재현성을 지원 하기 위해 내부 표준 운영 절차를 개발 하 고 돼지 품종, 체중, 성별, 그리고 별도 동료 사이 나이에 변화에 대 한 제어. 
	참고:이 프로토콜의 디자인 무게 38-53 kg. 돼지의 사용에 근거 했다</li>
</ol> 2. 수술 동물 관리 <ol><li>절차에 앞서 1 일 5mg/kg에서 주어진 예방 근육 (IM) ceftiofur, 관리.</li>
	<li>빠른 고체 음식 동물 및 미용 치료, 즉 기름 목욕, 절차 이전 12 h에서 동물을 제한.</li>
	<li>메신저 tiletamine 및 zolazepam, 5 mg/kg, 그리고 IM xylazine, 2 mg/kg.에서 Telazol으로 주어를 사용 하 여 프로시저의 1 시간 이내 뽑기 일반 마 취</li>
	<li>일단 유도, 관리 피하 (SC), 지속적인 buprenorphine 릴리스 (SR), 0.18 mg/kg.에서 주어진</li>
	<li>귀 정 맥 카 테 터를 배치 하 고 급속 한 순서 배치 endotracheal 튜브 삽 관 법 수행.</li>
	<li>펄스 속도도 모니터링 기능 산소와 심장 박동 모니터를 혀에 심장 박동 연결.</li>
	<li>경향이 위치에 동물 놓고 전기 클리퍼를 사용 하 여 등을 통해 피부를 클립 합니다. 머리 중간 코로나 평면에 중간 화살 비행기에서 고 경도를 견 갑 골 쪽이 성 례의 정점에서 연장 대형, 양자 영역 클립. 접착 테이프를 사용 하 여 머리와 부동성 피부 제거.</li>
	<li>스크럽 클리핑된 영역 최대 3 번 따뜻한 물과 비누로 하 고 보풀 수건을 사용 하 여 피부 건조.</li>
	<li>마크 양자 해부학 적 랜드마크 수술 마킹 펜을 사용 하 여. 마지막 늑 골, 장 골 볏, spinous 프로세스, 및 가로 프로세스 표시. 
	참고: 마지막 늑 골, 장 골 볏, 및 가로 프로세스를 표시 하 여 요 추 척추는 경계선의 우량한, 열 등 한, 및 측면 경계를 따라 각각. 이 프로토콜은 액세스 및 관심의 모든 허리 DRG의 주입 가이드 설계 되었습니다. 참고로, 우수한 장 골 볏 정렬 L3 또는 L4 척추 수준.</li>
	<li>요원 스위트 전송에 대 한 따뜻한 담요와 동물 커버.</li>
</ol> 3. 신 제품군에 위치 <ol><li>부드럽게 리프트와 위치는 경향이 동물 수정된 큰 자비 롭 동물에 슬링 패딩된 복 조리개와. 
	참고: 복 부 조리개 수 있습니다 복 부의 압력에서 감소에 대 한 척추의 인간의 수술 하는 동안 사용 된 윌슨 프레임 비슷합니다. 차례 차례로,이 자가 척추 혈관에서 출혈 감소 합니다. 슬링은 다리 주변 신경 충돌에서 동물을 보호 하는 패딩된 구멍을 통해 자유롭게 걸 수 있기 때문에 유리 하다. 그러나, 때문에 슬링 프레임 금속, 그것 해야 합니다 수 채워집니다 전기 합선 및 실수로 동물 화상을 방지 하기 위해 절연. 담요 롤 동물의 크기에 따라 편안한 자세에서 머리와 목의 위치에 배치 될 수 있습니다.</li>
	<li>유지 전신 1-3%를 사용 하 여 효과를 적정 (IH) isoflurane 흡입. 안과 연 고와 눈을 축 축 하 게 하 고 부드럽게 그들 닥 쳐 테이프.</li>
	<li>중요 한 기호 문서 온도, 혈압, 심장 박동, 및 산소 모니터링 장소 라인. 환기 capnography 모니터링할.</li>
	<li>왼쪽 이나 오른쪽 견 갑 골 위에 접착제, 일회용 electrosurgical 분산 전극 배치.</li>
	<li>관리 따뜻하게 Lactated 벨 &#39; 귀 정 맥 카 테 터를 통해 유지 보수 체액으로 s. 5-10 mL/kg의 비율로 체액을 제공/h.</li>
	<li>흉부 및 자 궁 경부 지역 위에 강제 공기 데우는 장치를 놓고 마지막 갈비뼈를 포함 하지 마십시오.</li>
</ol> 4. 살 균 준비의 요원에 대 한 필드 왼쪽 양면 사출 참고:이 시점에서 엄격한 살 균 방식 진행.
<li>준비 0.7% 요오드 povacrylex 및 74% 이소프로필 알코올의 제조 업체에 따라 다양 한 응용 프로그램 시작 하는 요 추 척추 overlying 피부 <ol>&#39; s 지시. 가이드 바늘 나중 메 마른 패션에 배치 될 수 있도록 antisepsis 표시 가로 프로세스 과거 중간 코로나 비행기 쪽으로 확장 하 여 계획 된 주입의 옆에 응용 프로그램을 lateralize.</li>
	<li>표시 요 추 spinous 프로세스에 따라 중간 이상 되는 계획 된 절 개 사이트를 대략적으로 직사각형 패션에 일회용 외과 수건 장소.</li>
	<li>적용 항균 접착제 incise 요원 수건을 통해 드러 워 진 그리고 피부. 장소에 커튼을 클램프와 요원 필드 휘장 가장자리 확장.</li>
	<li>보안 요원 필드와 모니터링 기술자 사이 슬링의 머리에서 기둥에 수직 드 레이프.</li>
	흡입 및 무 균 커튼을 클램핑 함으로써 요원 분야 내 electrosurgery <li>보안 라인. 살 균 필드 튜브 및 와이어의 무료 끝 통과.</li>
</ol> 5. 피부 절 개 및 Subperiosteal 해 부 <ol><li>중간 선 따라 허리 spinous 프로세스를 만져 하 고 3 연속 척추 수준 식별.</li>
	<li>#15 메스를 사용 하 여 절 개 드 레이프 spinous 프로세스에 직접 후부를 통해 8-12 cm 중간 화살 절 개를 엽니다. Hemostasis 거 즈 tamponade monopolar electrosurgery를 사용 하 여 유지. 
	참고: 관리는 하지에서 벗어나고 정중 선 절 개가 paraspinal 근육에서 출혈을 제한 하기 때문에 앞쪽 방향에서 고급은 취해야 한다. 정기적인 촉진 spinous 프로세스에 대 한 발전을 촉진 한다. Weitlaner, Meyerding, 또는 Gelpi 브래킷으로 자체 유지 수 있습니다 배치 되며 위치 해 부를 촉진 하는 데 필요한. 흡입은 가시성을 유지 하는 데 사용 됩니다.</li>
	<li>피하 조직 및 지방 thoracolumbar 근 막에 도달할 때까지 monopolar electrosurgery를 사용 하 여 해 부. 만져 thoracolumbar 근 막 깊이 spinous 프로세스와 spinous 프로세스 사이 supraspinous 인 대 확장을 노출 하는 중간에 따라 근 막 잘라. 
	참고: thoracolumbar 근 막 조직, aponeurotic 칼 집으로는 간접, 중간 방향 측면에서 interweaves 결합 조직 입자로 식별 됩니다. 이 시점에서, 절 개 3 spinous 프로세스 해 부 분야의 센터 내 맞춤 centermost spinous 프로세스와 완벽 하 게 볼 수 있습니다 수 있도록 우수한 또는 열 등 한 방향으로 길게 할 수 있습니다.</li>
	<li>#15 블레이드를 사용 하 여 각 spinous 프로세스에 후부 supraspinous 인 대를 통해 2 m m 깊은 parasagittal 절 개 배치. Spinous 프로세스의 후부 표면의 왼쪽된 3 분의 1에 따라 각 절 개 배치.</li>
	<li>부드럽게 각 inc 따라 각 수준에서 supraspinous 인 대 출시5 mm 자유로움 엘리베이터를 사용 하 여 ision.</li>
	<li>Subperiosteal 비행기를 식별 하 고 각 spinous 프로세스의 측면 표면 따라 그 비행기 내에서 해 부.</li>
	<li>Subperiosteal 해 부를 수행 부드러운 되도록 병렬 방식에서 각 spinous 과정, 심지어 해 부 이루어집니다.</li>
	<li>Monopolar electrosurgery subperiosteal 해 부와 함께에서 사용 하 여 interspinous 공간 따라 paraspinal 근육 첨부 파일 incise.</li>
	<li>각 수준에서 lamina를 식별 하 고 계속 옆으로 3 노출된 척추를 연결 하는 2 zygapophyseal 관절의 측면 경계에 도달 하는 파스 라는 관절 사이의 lamina의 측면 가장자리를 도달 하는 subperiosteal 해 부 interarticularis. 
	참고: 동위 interarticularis 어떤 점에서 DRG 있는 척추 구멍의 후부 테두리입니다. 때때로, 작은 정 맥은 lamina의 후부 표면에 있는 구멍에서 발생 합니다. 이러한 정 맥 subperiosteal 해 부 동안에 파열 하는 경향이 있다. Hemostasis 바이 폴라 electrosurgery 및 뼈 왁 스는 구멍에 적용의 조합을 사용 하 여 쉽게 이루어집니다.</li>
</ol> 6. 단일 레벨 Laminotomy <ol><li>centermost lamina 사이 고 2 zygapophyseal 관절 내측으로 laminotomy의 대상 식별.</li>
	<li>추적의 열 등 한 가장자리, 꼬리 zygapophyseal 공동의 연속 열 등 관절 프로세스에 그냥 중간 지점에 lamina.</li>
	<li>를 사용 하 여 5 mm 자유로움 엘리베이터 또는 퀴 렛 lamina 및 중앙 운하의 caudalmost 가장자리 사이의 전환 만져. 
	참고:은 주의 하지 강제로 palpating 악기 앞쪽이 듀 럴 색 및 척수 연락처 것입니다. 유의 하십시오 돼지에서 척수 척추 요 추 18 과거 확장. 촉진을 촉진 하기 위하여이 지역 overlying 추가 부드러운 조직을 제거 하는 척추 디스크 rongeur를 사용할 수 있습니다.</li>
	<li>사용은 2 mm 최대-무, 45도 Kerrison rongeur piece-wise 패션에 뼈를 추출. 그냥 꼬리는 작은 꽃 자루의 꼬리 표면 수준에 위에 spinous 프로세스의 기지에 따라 뼈를 제거 하 고 옆으로 밖으로 그것의 전체 넓이에.</li>
	<li>사용 각도 뼈 rongeurs 뼈 제거 지원. 두고는 laminotomy 크게 완료 될 때까지 자리에 lamina에 연결 된 열 등 한 관절 과정.</li>
	<li>는 열 등 한 관절 프로세스를 자유롭게 이동 하 고 연결 된 zygapophyseal 공동 캡슐에 의해서만 확인 합니다. #11 또는 #15 블레이드를 사용 하 여 캡슐 incise.</li>
	<li>Piece-wise 패션에 열 등 한 관절 프로세스를 제거 하지만 인접 한 뛰어난 관절 프로세스를 그대로. 
	참고:는 laminotomy 완료 hemostasis 바이 폴라 electrosurgery 함께 수행 됩니다. Monopolar electrosurgery 신경 구조의 근접 때문에 사용 되지 않습니다. 본 왁 스 노출 된 뼈에서 출혈의 사이트에 따라 놓일 수 있다 고 흡수 젤라틴 스폰지 부드러운 조직 근처 hemostasis를 가져오기 위해 사용할 수 있습니다. Cottonoid 심지 묽 및 해 부에서 혈액에 유용한 도구입니다.</li>
</ol> 7. DRG의 해 부 <ol><li>피난 piece-wise 패션에 경 막 외 지방 표면에서 깊은 medially 시작 하 여 옆으로 진행. 6-10 프랑스 프레이 저 흡입 팁 양극 겸 자 및 흡입을 사용 하 여 부드러운 절 개 하 여 지방을 제거. 
	참고: 확대 확대 또는 해 현미경의 사용은 안전 하 게 철수 경 막 외 지방 하 고 세심 한 hemostasis 바이 폴라 electrosurgery를 사용 하 여 경 막 외 정 맥 총의 달성 하는 데 필요한 세부 수준을 제공 하는 데 도움이.</li>
	<li>는 Superoinferior 방향, 피부 절 개의 축에 평행으로 실행 하는 중간 선 따라 듀 럴 색을 식별 합니다. 듀 럴 색 경 막 신경 루트 소매를 볼 수 있습니다 때까지 듀 럴 색 따라 경 막 외 지방 제거.</li>
	<li>추적 듀 럴 소매 옆 및 inferiorly 경 막 외 지방 피난 하 여 확대는 DRG 주위를 볼 때까지. 
	참고: 그것의 타원형 모양 및 노란색 오렌지 색상에 대 한 DRG를 식별 합니다. 중간 허리 척추에는 DRG는 일반적으로 4-6 m m 크기, 측면 방향으로 중간에 긴 위치에 직접 열 등 또는 2-3 mm의 각 작은 꽃 자루에 중간. 무딘, 직각 신경 후크는 작은 꽃 자루를 만져 부드럽게 하는 데 사용할 수 있습니다.</li>
	인접 한 척추 신경 볼 때까지 <li>측면, DRG, 과거 경 막 외 지방을 대피. 
	참고: durotomy 발생 하면, 그것을 복구 간단한 실행 stich의 6-0 나일론 봉합 및 부드러운 마이크로 바늘 드라이버를 사용 하 여 방수 마감.</li>
</ol> 8. DRG의 주입 <ol><li>22 게이지 척수 바늘을 사용 하 여 32-게이지 대류 향상 된 배달 (CED) 바늘의 궤적을 안내 하. 피부와 paraspinal 근육 통해 22 게이지 가이드 바늘 찔린. 
	참고: CED 바늘은 조직, 일컬어 대량 흐름, 압력 기온 변화도 19 , 20 때문에 유체 대류를 달성 하도록 설계 되었습니다.</li>
	<li>목표는 DRG의 경도 축에 근접 하 고 해 부 분야의 측면 paraspinal 벽에서 신흥 바늘 팁에서 궤적을 따라 가이드 바늘.</li>
	<li>벌금 바늘 루멘은 DRG의 중심에 정렬 될 때까지 바늘 경로 조정. 
	참고: 가이드 바늘 결코가 수는 DRG 문의.</li>
	<li>멸 균 주사기로 살 균 injectate을 작성 하 고 메 마른 주입 튜브에 주사기를 연결.</li>
	<li>는 CED 바늘에 튜브를 장악 하 고 손 살 균 필드 주사기. 프로그래밍 가능한 주사기 펌프에 주사기를 연결. 
	참고: 튜브 5 피트의 길이 불 임 및 이동성 유지 되도록 준비 된다. 또한, 그것은 파라마운트 중요성 없음 기포 솔루션으로 도입 될.</li>
	<li>식 CED 바늘 팁에서 볼 때까지 injectate 사전.</li>
	<li>는 가이드 바늘 루멘 내의 CED 바늘을 배치 하 고 가이드 바늘 팁에서 나온다 때까지 천천히 CED 바늘을 사전. DRG 바늘 맞춤 동안 구멍이 되지 확인 하십시오.</li>
	<li>미세 조정 CED 팁의 최종 위치를 결정 하는 탄도의 긴 축 따라 가이드 바늘 위치.</li>
	<li>바늘 및 CED 바늘 깊이 가이드 CED 바늘의 맞춤 달성 되 면 함께 연동 바늘 허브를 사용 하 여 가이드를 확보.</li>
	<li>모든 사출 장치 연결 완전히 가이드 바늘, CED 바늘을 포함 하 여 보호 되 고 injectate와 연결 된 튜브 로드 확인.</li>
	<li>대략적인 CED 바늘 팁와 DRG에 긴 축 따라 가이드 바늘 사전.</li>
	<li>CED 바늘 팁 DRG 펑크.</li>
	<li>는 DRG의 3 차원 중심으로 CED 바늘 팁을 submerse. 
	<li>CED 졸업된 속도 볼륨의 3 단계를 사용 하 여 injectate의 제공 100 μ.</li>
	<li>2 제공 4 μ μ/첫 번째 단계에 대 한 민. 두 번째 단계에 대 한 4 μ/분 8 μ를 제공 합니다. 세 번째이자 마지막 단계에 대 한 8 μ/분에 제공 하는 88 μ. 
	참고: 수 단계 사이 및 압력 평형 수 있도록 마지막 단계 후 3 분 일시 중지.</li>
	<li>최종 주입 단계와 부드럽고, 부드러운 모션에서 긴 축 따라 3 분 일시 중지 후 주입 기구 철회. 
	참고: 삽입 된 솔루션을 무색, 착 색된 염료 0.1% 무게/injectate 배포 12의 시각적 평가에 도움이 볼륨의 농도에서 솔루션에 포함 되어 있습니다. 또한, 중요 한 염료 4 &#39;, 연구 설계 injectate 배포 5의 더 평가가 필요한 경우 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) 0.25 μ g/μ의 농도에서 솔루션에 포함 된는.</li>
</ol> 9. 폐쇄 <ol><li>동원 및 플러시 파편, 즉 뼈 파편의 사이트 폐쇄 전에 외과 사이트에 따뜻한 식 염 수 관개의 적용 3 라운드. 흡입을 사용 하 여 식 염 수와 파편. 
	참고: 세심 한 hemostasis 관개 명확 때 지켜진다. Hemostatic 에이전트 (젤라틴 스폰지)와 cottonoid이이 시간에 제거 됩니다. 모든 자료와 악기 폐쇄 이전 절 개 사이트에서 삭제 하는 확인 하십시오.</li>
	<li>폐쇄에 대 한 3 계층 기법 사용.</li>
	<li>0 봉합 사를 사용 하 여 간단 하 고, 중단, 사용 방식에서 thoracolumbar 근 막 봉합. Stich 모든 5-8 m m 방수 폐쇄를 달성 하기 위해 배치.</li>
	<li>봉합 스티치와 함께 간단 하 고, 중단, 반전 패션에 2-0 봉합 사를 사용 하 여 피하 조직 배치 모든 5-에-8mm 적절 한 강도 달성 하기 위해.</li>
	<li>실행 간단한, 0 봉합 사를 사용 하 여 피부를 닫거나 중단 패션.</li>
	<li>바늘 카운터를 사용 하 여 아무 sharps 집결을 위해</li>
	<li>관개 식 염 수와 피부, 건조 한 피부, 고 접착성 붕대 스트립 절 개 수직 배치.</li>
	<li>장소 거 즈 붕대 위에 제거 하 고 항균 최종 접착제를 연결 incise 드 레이프.</li>
</ol> 10. 수술 동물 관리 <ol><li>Extubate, 따뜻한 담요, 커버 하 고 복구 동물 수송.</li>
	<li>수술 모니터링 및 생존 수술에서 회복 기관 표준 운영 절차에 따라. 최소한, 관찰 동물 마다 15 분 의식, 시간당 전체 마 취 회복, 달성 될 때까지 두 번 매일의 반환까지 그 후.</li>
	<li>관리 IM 또는 구두 carprofen 4 mg/kg, 일단 수술 날 0에 시작 하는 5 일 동안 매일에 주어진 제공 수술 후 통증 관리. 수술 날 2에 0.18 mg/kg에서 주어진 SC buprenorphine SR, 관리.</li>
	<li>수술 날 4에 5 mg/kg에서 주어진 메신저 ceftiofur를 함으로써 수술 antisepsis 관리.</li>
	<li>수술 후 5-7 일에 붕대를 제거합니다. 일반적으로 수술 후 10-14 일에 완료 되 면 상처 치유는 봉합을 제거.</li>
	<li>연구 끝점에 도달 하면 기관 표준 운영 절차에 따라 동물을 고통 없이 안락사.</li>
</ol>

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<li>Riley, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraspinal+stem+cell+transplantation+in+amyotrophic+lateral+sclerosis%3A+A+phase+I+safety+trial%2C+technical+note%2C+and+lumbar+safety+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Intraspinal stem cell transplantation in amyotrophic lateral sclerosis: A phase I safety trial, technical note, and lumbar safety outcomes.</a> Neurosurg. 71 (2), 405-416 (2012).</li>
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</ol>

없음; 저자는이 연구에 관련 된 충돌의 관심 있다.

우리는 DRG 통해 laminotomy 및 건강 한 큰 동물성 종에 있는 intraganglionic 주입 수술 노출 하는 방법을 설명 하고자 특히, 돼지. 설치류, 유사한 방법 자세한 12 되어 있으며 기존의 pharmacologic 요원 8,10 및 바이러스 성 벡터 6,7,,912 DRG를 제공 하는 데 사용. 위의 작은 동물 연구에서 결과 유망 하 고 우리의 프로토콜 돼지에 이러한 사전 결과 번역 하는 다른 사람에 대 한 방법을 포장 됩니다 바랍니다. 건강 하 고 병에 걸린 동물에 위의 연구, 전 임상 연구에서 작은 동물의 유틸리티를...

지 루트 신경 절 (DRG)은 척추 칼럼을 따라 위치한, 신경 해부학 개별 컬렉션. 각 DRG 특정 신체 영역에서 인코딩 및 주변 자극 중앙 신경 시스템 (CNS)를 릴레이 하는 기본 감각 뉴런을 포함 합니다. 예를 들어, 관절염의 통증에는 통증 수용 체는 관절에 대 한 위치 인식 유해 자극 때 시작 됩니다. 이 과정은 불린다 nociception. 유해 자극의 장기 인식 만성 통증 1이끌어 낸다.
만성 통증 한 목표 intraganglionic 주입 3등 DRG, 진통제의 대상된 배달에 대 한 유용한 방법을 개발 하는 전 임상 연구 2 의 빈번한 주제 이다. 그러나, DRG는 범위 내에서 보 니 척추 foramina 4의 거주 때문에 접근 하기 어려운. 몇몇 그룹은 성공적으로 설치류 5,6,7,8,,910에서 척추 수술을 통해이 장애물을 극복 했다.
클리닉, laminectomy 일반적인 척추 작업이 며 그로 인하여 척추 운하 11unroofing 척추 lamina의 외과 제거를 가리킵니다. 그러나 DRG에 대 한 직접 액세스를 감당할 수술 기법의 설치류 5,12에 성공 했다,, 번역 관련 구조의 크기에 비현실적인 고려 차이 그 영향을 어떻게 있을 수 있습니다. 약 동학 또는 기술적 타당성 13,14. 예를 들어 한 연구 T10 3.0, 7.0, 그리고 쥐, 돼지, 및 인간, 각각 158.2 m m에 가로 척수 직경 결정. 따라서, 큰 동물 신경 구조의 더 나은 대략 인간의 차원 모델.
돼지, Raore 그 외 여러 intraspinal 주사 16자 궁 경부 척수에 대 한 액세스를 다단계 laminectomy를 사용. 절차 잘 용납 되었다 고 단계 나 임상 실험 대 등 수술 결과 문서화 17을 했다. 이 결과 기술적 타당성 및 인간에서 안전의 예측으로 큰 전 임상 동물 모델의 지속적인된 사용을 권장합니다.
날짜 하려면, 아무 상세한 방법론 외과 접근 및 큰 동물 종에서 DRG의 주입에 대 한 존재 합니다. 이 변환 간격을 좁히는, 우리 보고 DRG 노출 및 돼지에 laminotomy 통해 주입에 대 한 프로토콜. 표준 신경외과, 악기, 기술과 재료를 사용 했다 하 고 메서드가 현대 외과 연습을 모방 하도록 설계 되었습니다. 우리 intraganglionic 주입 허리 DRG에 대 한 용액을 사용 하 여 설명 하 고 수술 하루 21 조직학 통해 배달 확인.

<table><tbody><tr><td>대형 인도적 동물 슬링</td><td>Britz & 회사</td><td>002539</td><td>복부 조리개</td></tr><tr><td>접착제 환자 복귀 전극을 포함하도록 수정 - 9 인치</td><td>메드 트로닉</td><td>E7506</td><td>-</td></tr><tr><td>레인저 혈액 및 유체 온난화 시스템</td><td>3M</td><td>24500</td><td>-</td></tr><tr><td>젖산 링거 유체</td><td>Hospira</td><td>0409-7953-09-Force</td><td></td></tr> <tr><td>공기 온난화 장치</td><td>3M</td><td>77500</td><td>-</td></tr><tr><td>애플리케이터가 있는 Duraprep 솔루션, 26mL(0.7% 요오드 포바크릴렉스, 74% 이소프로필 알코올)</td><td>3M</td><td>8630</td><td>-</td></tr><tr><td>멸균 일회용 수술용 수건</td><td>Medline</td><td></td> <td>MDT2168286-Ioban</td></tr> <tr><td>2 절개 드레이프</td><td>3M</td><td>6651EZSB</td><td>-</td></tr>일회용 <tr><td>흡입 용기 및 튜브</td><td>Medline</td><td></td> <td>DYND44703H-</td></tr><tr><td>버튼 스위치 전기 수술 단극 연필</td><td>메드트로닉</td><td>E2450H</td><td>-</td></tr><tr><td>파인 스무스 스트레이트 바이폴라 전기수술 집게, 4 1/2 인치</td><td>Bovie</td><td>A826</td><td>-</td></tr><tr><td>#15 블레이드</td><td>Miltex</td><td>4-315</td><td>-</td></tr><tr><td>#11 블레이드</td><td>Miltex</td><td>4-311-4</td><td></td></tr> <tr><td>x 4 수술용 거즈</td><td>Dynarex</td><td>3262-Weitlaner</td><td></td></tr> <tr><td>자체 유지 견인기, 8 인치</td><td>Miltex</td><td>11-618</td><td>-</td></tr><tr><td>Meyerding 자체 유지 견인기, 1 x 2 3/8 인치</td><td>Sklar</td><td>42-2078-Gelpi</td><td></td></tr> <tr><td>자체 유지 견인기, 7 인치</td><td>Sklar</td><td>60-6570-Freer</td><td></td></tr> <tr><td>엘리베이터, 5mm</td><td>Medline</td><td></td> <td>MDS4641518F-Bone</td></tr> <tr><td></td><td>wax Ethicon</td><td>W31G-Spurling</td><td></td></tr> <tr><td>추간판 롱저, 3mm</td><td>Sklar</td><td>42-2852</td><td>-</td></tr><tr><td>스펄링 45도, 업 바이트 Kerrison rongeur, 2mm</td><td>Medline</td><td></td> <td>MDS4052802-Leksell</td></tr> <tr><td>앵글 롱거, 2mm</td><td>Sklar</td><td>40-4097-Gelfoam</td><td></td></tr><tr><td>, 크기 50</td><td>Pfizer</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>AZL32301-Cottonoid 패티</td><td>Medtronic</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>8004007-Frazier 흡입 팁, 6 Fr</td><td>Sklar</td><td>50-2006-Frazier</td><td></td></tr> <tr><td>흡입 팁, 10 Fr</td><td>Sklar</td><td>50-2010-Dandy</td><td></td></tr> <tr><td>무딘 직각 신경 후크</td><td>Medline</td><td>MDS4005220</td><td>-</td></tr><tr><td>나일론 봉합사, 6-0</td><td>Ethicon</td><td>697G-Castroviejo</td><td></td></tr> <tr><td>부드러운 마이크로 바늘 홀더</td><td>Medline</td> <td>MDG2428614-22</td><td></td></tr> <tr><td>게이지 Quinke 포인트 척추 바늘</td><td>Halyard Health</td><td>18397-32</td><td></td></tr> <tr><td>게이지 CED 바늘 잠금 Luer 허브</td><td>의견 보기</td><td>n/a</td><td>에서와 같이: Pleticha, J., Maus, T.P., Christner, J.A., Marsh, M.P., Lee, K.H., Hooten, W.M., Beutler, A.S. Minimally invasive convection-enhanced delivery of biologics into dorsal root ganglia: validation in the pig model and prospective modeling in humans. 기술 노트. J 신경외과. 121(4), 851-8 (2014년).</td></tr><tr><td>폴리에틸렌 튜브, 5</td>피트 <td>Scientific Commodities</td><td>BB31695-PE/05-Monoject</td><td></td></tr> <tr><td>주사기, 3mL</td><td>Kendall</td> <td>SY15352-NanoJet</td><td></td></tr> <tr><td>주사기 펌프</td><td>Chemyx</td><td>10050-DAPI</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9542-Fast</td><td></td></tr> <tr><td>Green FCF</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F7252</td><td>-</td></tr><tr><td>전구 관개 주사기</td><td>Medline</td><td></td><td></td></tr> DYND20125-Fine-toothed <tr><td>Adson 집게</td><td>Medline</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>MDS1000212-Vicryl 봉합사, 0</td><td>Ethicon</td><td>J603H-Vicryl</td><td></td></tr> <tr><td>봉합사, 2-0</td><td>Ethicon</td><td>J317H</td><td>-</td></tr><tr><td>니들 카운터</td><td>Medline</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>NC20FBRGS-Steri-스트립 스킨 클로저, 1/2x4 인치</td><td>3M</td><td>R1547</td><td>-</td></tr></tbody></table>

laminotomy 허리 지 루트 신경 절의 액세스 및 돼지에 주입

Laminotomy for Lumbar Dorsal Root Ganglion Access and Injection in Swine

지 루트 신경 절 (DRG)는 머리 아래 모든 기본 감각 신경 세포를 포함 하는 해부학 잘 정의 된 구조. 이 사실은 만성 통증을 치료 하기 위한 새로운 치료제의 주입을 위해 DRG 매력적인 목표 합니다. 작은 동물 모델에서 laminectomy 각 DRG를 둘러싼 척추 뼈의 외과 제거를 포함 하기 때문에 DRG 주입을 용이 하 게 사용 되었습니다. 큰 동물 종, 즉, 돼지에에서 요 추 DRG의 intraganglionic 주입에 대 한 기술을 설명합니다. Laminotomy는 DRG 표준 신경외과, 악기, 기술과 재료를 사용 하 여 직접 액세스할 수 있도록 수행 됩니다. Laminectomy 통해 더 광범위 한 뼈 제거와 비교, 우리가 충분 한 DRG 액세스를 달성 하는 동안 척추 해부학을 보존 하기 위해 laminotomy를 구현 합니다. DRG 주입의 자가 진행 비 독성 염료를 사용 하 여 모니터링 됩니다. 수술 당일 21 안락사, 다음 주입의 성공 조직학의 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) intraganglionic 배포에 대 한에 의해 결정 됩니다. 우리는 프로토콜을 설명 하는 생물학으로 비활성 솔루션을 주입. 이 방법 적용된 미래에 전 임상 연구 대상 DRG 치료 솔루션을 수 있습니다. 우리의 방법론은 큰 동물성 종에 intraganglionic 작은 동물 패러다임의 translatability를 테스트 용이 해야. 또한,이 프로토콜은 그 돼지에서 DRG 주입의 전 임상 연구를 계획에 대 한 핵심 자원으로 봉사 할지도 모른다.

Injectate의 더 평가 DRG injectate의 성공적인 납품 DAPI 확산의 조직학 평가 의해 결정 됩니다. 기법 바늘 팁은 DRG의 3 차원 중심에 위치 한다. 따라서, 배달 DAPI 바늘 끝에 조직학 단면도에서 둘 다 (중앙 DRG 섹션) 근처 고 먼 (주변 DRG 섹션) 얼룩의 정도 평가 하 여 결정 됩니다. 그림 1A 및 그림 1B 한 DRG의 성공적인 주입을 나타냅니다. DAPI 얼룩 모두 중앙과 주변 DRG 실질 통해 균등 하 게 분산 되었다. 따라서, 성공적인 DRG 주입 DAPI 3 차원 DRG 아키텍처에 걸쳐 얼룩의 확산 확산에 의해 그림입니다. 최적의 주입 일관성 얼룩 그림 이다. 예를 들어, 최소한의 얼룩 (그림 1C) 또는 외부 변죽만 DRG 실질 (그림 1D</str...

Intraganglionic 주입에 대 한 요 추 느 루트 신경 절 (DRG)에 대 한 액세스를 제공 하는 돼지에서 laminotomy 하는 방법을 설명 합니다. 사출 진행 intraoperatively 그리고 조직학 수술 후 21 일까지 확인 모니터링 합니다. 이 프로토콜 DRG 주입 관련 된 미래의 전 임상 연구 사용 될 수 있습니다.

Laminotomy 허리 지 루트 신경 절의 액세스 및 돼지에 주입

Dorsal root ganglia (DRG) are anatomically well defined structures that contain all primary sensory neurons below the head. This fact makes DRG attractive ...

이 절차의 전반적인 목표는 대류 강화 전달 바늘을 사용하여 용액의 신경절 내 주사를 위해 돼지의 요추 등쪽 뿌리 신경절에 외과적 접근을 제공하는 것입니다. 이 방법은 신약이 DRG 실질에 직접 전달될 때 DRG 세포에 미치는 영향에 관한 기초 및 중개 신경과학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 솔루션이 DRG에 성공적으로 전달되었는지 확인하고 생물학적 복제물 간의 결과를 비교하는 데 필요한 기술 데이터를 제공한다는 것입니다.이 기법은 신경절 내 전달에 대한 참조 표준이 될 것입니다. 궁극적인 목표는 이미지 안내 전달입니다. 이 참조 표준을 통해 우리는 제제의 치료 효능과 전달 효율성을 고유하게 특성화할 수 있습니다.수술을 위해 돼지를 마취한 다음 패딩 처리된 복부 구멍이 있는 개조된 대형 인도형 동물 슬링에 넣습니다. 단락을 방지하기 위해 금속 부품이 패딩되어 있는지 확인하십시오. 요추 위에 있는 피부를 준비하려면 제조업체의 지침에 따라 충분한 양의 용액을 사용하여 해당 부위를 문지릅니다.동일한 기술을 사용하여 표시된 횡돌기를 지나 정중선 관상쇄면을 향해 수술 스크럽을 계속합니다. 다음으로, 표시된 요추 돌기를 따라 정중선 위의 절개 부위 주위에 수술용 수건을 깔끔하게 놓습니다. 그런 다음 작전 부지 주변을 훨씬 넘어 전체 지역을 드레이프합니다.수술 준비가 완전히 완료되면 15번 메스를 사용하여 척추돌기 바로 뒤쪽의 절개 드레이프를 통해 8-12cm 크기의 정중선 시상 절개를 여는 것으로 시작합니다. 거즈 탐포네이드와 단극 전기 수술을 사용하여 지혈을 유지합니다. 다음으로, 단극 전기 수술을 사용하여 흉추 요추 근막 위에 있는 피하 조직과 지방을 절개합니다.다음으로, 흉추 요추 근막 깊숙한 곳까지 가시돌기를 촉진하고 정중선을 따라 근막을 절단하여 가시돌기 사이에 걸쳐 있는 척추상 인대를 노출시킵니다. 이 시점에서 절개 부위는 세 개의 가시돌기가 완전히 보이도록 어느 방향으로든 길어질 수 있습니다. 이제 15번 칼날을 사용하여 각 가시돌기 후방의 척추상 인대를 통해 2mm 깊이의 시상골 주위를 절개합니다.가시돌기의 뒤쪽 표면의 왼쪽 3분의 1을 따라 절개를 만듭니다. 그런 다음 5mm Freer 엘리베이터를 사용하여 각 절개 부위를 따라 각 레벨의 척추상 인대를 부드럽게 풀어줍니다. 이제 골막하평면을 확인하고 각 가시돌기의 측면 표면을 따라 해당 평면 내에서 해부합니다

laminotomy-for-lumbar-dorsal-root-ganglion-access-injection

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

신경 전구체 이식은 보호 및 / 또는 척수 상해 (SCI)과 모터 신경 장애, amyotrophic 패스 경화증 (ALS)에 분실 / 역기능 자궁 phrenic 모터 뉴런을 교체 유망 전략이다. 우리는 ALS와 SCI의 쥐 모델에서 자궁 경부 척수 복부 혼까지 셀 전송을위한 프로토콜을 제공합니다.

루게릭병과 외상 척수 상해에서 자궁암 복부 호른를 타겟팅하는 Intraspinal 세포 이식

Rhizotomy 후 도설 루트 Axons의 라이브 영상

척수로 (유전자 및 세포) 요법의 전달에 사용되는 수술 기술과 장치의 짧은 영상 설명입니다. 이 기술은 동물에 보여하지만, 완전히 번역 현재 인간 응용 프로그램에 사용되는입니다.

치료의 척추 배달을위한 수술 기법 : 괴팅겐 Minipigs의 절차의 데모

출처: Unger, M. D., et al., 돼지의 요추 등근 신경절 접근 및 주사를 위한 추궁 절개술. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 대류 강화 전달을 사용하여 표적 신경 치료 전달을 위해 요추 후근 신경절에 접근하기 위해 마취된 돼지의 추궁 절개술 절차를 보여줍니다.

돼지 모델에서 요추 등근 신경절에 표적 주입을 위한 추궁 절개술

출처: Cheah, M., et al. 등뿌리 신경절 주사(Dorsal Root Ganglion Injection)와 등뿌리 크러시 손상(Dorsal Root Crush Injury)은 감각 축삭 재생의 모델입니다. J. Vis. 특급 (2017). 이 비디오는 바이러스 현탁액을 배측근신경절(DRG)에 주입하고 마취된 쥐에서 등쪽 뿌리 분쇄를 통해 제어된 축삭 손상을 유도하는 단계별 절차를 보여줍니다. 이 프로토콜에는 DRG를 노출시키고, 축삭 재생을 촉진하기 위해 성장 촉진 바이러스 벡터를 전달하고, 감각 신경 손상 및 재생을 모델링하기 위해 척수에 대한 축삭 연결을 절단하는 것이 포함됩니다.

배근 신경절 주입 및 등뿌리 크러시 손상을 사용하여 쥐의 감각 축삭 재생 모델링

이 프로토콜은 감각 축삭 재생을 연구하기 위한 모델로 성체 쥐에서 바이러스 벡터와 동시 등쪽 뿌리 압착 손상과 함께 등뿌리 신경절(DRG) 주사를 사용하는 것을 제시합니다. 이 모델은 감각 축삭 재생을 촉진하기 위한 유전자 요법의 사용을 조사하는 데 적합합니다.

등쪽 뿌리 신경절 사출 및 지느러미 루트 감각 축삭의 재생을위한 모델로 부상 크러시

본 프로토콜은 체세포 및 내장 자극에 대한 요추-6 DRG 뉴런의 앙상블의 반응을 측정하기 위한 생체 내 칼슘 이미징을 간략하게 설명합니다. 다른 자극에 반응하는 뉴런 간에 철저한 비교가 이루어질 수 있습니다. 이 프로토콜은 침술과 같은 내장 통증 및 신체 자극의 메커니즘을 조사하는 데 유용합니다.

생체 내 체세포 및 내장 자극에 대한 배근 신경절 뉴런의 반응에 대한 칼슘 이미징

이 수술 프로토콜은 표적 치료를 제공하기 위해 설치류의 척추 경막하 공간에 척수강내 카테터를 삽입하는 단계별 가이드입니다.

치료 전달을 위한 설치류 척수의 경막하 공간에 접근

이 프로토콜은 국소 마취 하에 추간공 전체 내시경 추간공 절개술을 수행하기 위한 단계별 가이드를 제공합니다. 이 동작 보존 기술은 인접 분절 질환 환자의 L5/S1 추간공 협착증을 치료하기 위한 융합 확장에 대한 최소 침습 수술 대안으로 제시됩니다.

L5/S1 인접 분절 추간공 협착증에 대한 국소 마취 하에 추간공 전체 내시경 요추 추간공 절개술

이 글에서는 성체 마우스에서 CNS 표적 치료제의 테스칼 내 전달 방법을 자세히 설명하며, 프로토콜의 정확성과 반복 주사 허용에 중점을 둡니다. 이 연구에는 안티센스 올리고뉴클레오타이드가 SOD1-ALS 모델 마우스에서 돌연변이 SOD1 발현을 감소시킨 검증 연구 결과가 포함되어 있어, 신경퇴행성 질환 전임상 연구에서 이 접근법의 유용성을 뒷받침합니다.

SOD1-ASO의 요추 수막내 주사, 인간 SOD1-G93A ALS 마우스에서 정밀한 중추신경계 표적 지정과 예측 효능을 위한 방법

배우세요 돼지에서 척추 후궁 절제술을 이용해 요추 배신경절에 약물을 정확히 주입하는 방법을. 이 기술은 신경외과 및 전환신경과학 연구에서 약물 전달 효율성을 검증하는 데 활용됩니다.

Laminotomy 허리 지 루트 신경 절의 액세스 및 돼지에 주입

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