Name: Neurodegeneration의 초파리 모델에서 성인 등반 동작을 분석 하기 위한 자동화 된 신속한 반복 부정적인 Geotaxis 분석 결과 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-09-12T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 52 s
Description: 학습하세요 Drosophila 성인 등반 결손을 자동화된 RING 분석법으로 측정하는 방법을. 신경퇴행성 질환과 관련된 운동 능력 저하 메커니즘을 연구하는 데 활용할 수 있습니다.

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우리는 블루밍턴 재고 센터와 비엔나 초파리 RNAi 센터 플라이 주식에 대 한 감사합니다. 링 장치에 대 한 특허는 상하이 고급 연구소, 과학의 중국 아카데미에 속한다. 요청에 RflyDetection 소프트웨어 푸 드 황 하 여야 한다 (저자 목록 참조). 이 작품은 국가 기본 연구 프로그램의 중국에서 교부 금에 의해 지원 되었다 (973 프로그램 2013CB945602)와 국가 자연 과학 재단의 중국 (31270825 및 31171043). 우리 호 연구소 회원을 토론 및 의견을 위한 감사합니다.

1. 비행 컬렉션 <ol><li>25 ° C, 습도 70%, 그리고 12 h/12 h 명암 주기에서 표준 비행 거리 음식에 파리를 유지.</li>
	<li>수집 UAS-Dicer2; DDC GAL4 비행 virginsunder 이산화탄소 (CO 2) 마 취.</li>
	<li>2 일 오래 된 성인 남성 파리 다음 genotypes을 들고 하이 처녀 크로스: UAS-mCD8GFP (제어), auxR 16182 (aux RNAi) auxGFP (보조 overexpression), 그리고 auxR 16182; auxGFP (구조), 남자와 함께: 1: 2의 여성 비율.</li>
	<li>별도로 수집 새로 eclosed 남성 및 여성 25 표준 음식 각 일반 비행 유리병에서 10 파리 배치 실험, 당 각 그룹에 대 한 3 튜브에서 ° c.</li>
	<li>실험, 유지는 수집된 최대 35 일 파리와 하루 5, 15, 25, 35에서 자동된 링 분석에 대 한 그들을 사용.</li>
</ol> 2. 반지 분석 결과 자동 <ol><li>전송 10 각 유전자 형 당 수집된 파리 (남녀 공통) 유리병, 다음 나사와 유리병을 확보. 제어 파리와 함께 실험의 각 집합에 대 한 다른 genotypes을 들고 파리를 분석 (최대 10 리 바이 알, 동시에 각 유리병에 10 파리).</li>
	<li>디지털 카메라 장치, 앞에 설정 하 고 파리 한 번 녹음 시작은 모두 로드 하 고 준비.</li>
	<li>허용 튜브에 정착 파리에 대 일 분, 후 단계 드라이버를 제어 하는 단계 컨트롤러 설정;이 연속적으로 상승 하 고 4 회 2에서에서 장치 탭을 연결 된 레버를 제어 하는 작은 전기 모터 드라이브 s. 그림 1을 참조 하십시오.
	<ol><li>도청, 후 파리 벽 승천을 시작 하는 것을 참고. 계속 녹음.</li>
	</ol></li> <li>2.3에서 60의 간격 3 ~ 5 연속 재판 단계에서 설명한 대로 동기화 반복.</li>
	<li>5, 15, 25, 그리고 35 일 된 파리에 대 한 실험을 반복합니다. 각 그룹에 대 한 적어도 3 독립적인 실험, 적어도 30 수집 된 각 실험 (3 병) 난다.</li>
</ol> 3. 데이터 분석 <ol><li>컴퓨터에 녹화 된 비디오를 가져올.</li>
	<li>6 비디오의 스냅샷을 각 재판에 대 한 감청 후 s.</li>
	<li>RflyDetection 소프트웨어에 스냅숏 이미지를 가져오는 ( 그림 2 참조)를 사용 하는 &#39; 파일 &#39; 메뉴.</li>
	<li>도구 모음에서 기본 아이콘을 사용 하 여 다음 이미지에 위와 더 낮은 베이스 라인을 표시 하는 커서를 사용 하 여 정확 하 게는 유리병의 위와 더 낮은 베이스 라인을 설정.</li>
	<li>에 유리병 (예를 들어, 여기에 10) 당 파리의 수를 입력은 &#39; rect에 Flys &#39; 필드와 유리병 길이 (예를 들어, 여기에 14 cm)에 &#39; 튜브 높이 &#39; 설정 표시줄에 필드.
	<ol><li>개별 비행 위치 검색 하 고 각 유리병에 대 한 화면에 표시 됩니다. 
		참고: 그림 2는 모든 메뉴 단추 클릭의 위치를 나타냅니다.</li>
	</ol></li> <li>소프트웨어 자동으로 각 비행에 대 한 등반 거리를 결정 하 고 오른쪽 패널에 테이블에 각 유리병에 10 파리에서 평균된 값을 표시 합니다. ( 그림 2 참조)</li>
	<li>추가 통계 분석을 위해 통계 소프트웨어 (예를 들어, 프리즘) 등반 수 처리.</li>
	<li>현재 데이터 의미 ± SEM.</li>
	<li>P 계산-의미의 값 (별표로 표시 * p &#60; 0.05, * * p &#60; 0.01, * * * p &#60; 0.001)를 사용 하 여 단방향 ANOVA Bonferroni 여러 비교 테스트</li>
</ol>

<ol><li>Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assaying+locomotor%2C+learning%2C+and+memory+deficits+in+Drosophila+models+of+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Assaying locomotor, learning, and memory deficits in Drosophila models of neurodegeneration.</a> J Vis Exp. (49), (2011).</li>
<li>Nichols, C. D., Becnel, J., Pandey, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+assay+Drosophila+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Methods to assay Drosophila behavior.</a> J Vis Exp. (61), (2012).</li>
<li>Madabattula, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+Analysis+of+Climbing+Defects+in+a+Drosophila+Model+of+Neurodegenerative+Disorders%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Quantitative Analysis of Climbing Defects in a Drosophila Model of Neurodegenerative Disorders.</a> J Vis Exp. (100), e52741(2015).</li>
<li>Podratz, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+automated+climbing+apparatus+to+measure+chemotherapy-induced+neurotoxicity+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Fly+%28Austin%29%22%5BJournal%5D)">An automated climbing apparatus to measure chemotherapy-induced neurotoxicity in Drosophila melanogaster.</a> Fly (Austin). 7 (3), 187-192 (2013).</li>
<li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+iterative+negative+geotaxis+%28RING%29%3A+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Exp Gerontol. 40 (5), 386-395 (2005).</li>
<li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+rapid+iterative+negative+geotaxis+assay+and+its+use+in+a+genetic+screen+for+modifiers+of+Abeta%2842%29-induced+locomotor+decline+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Bull%22%5BJournal%5D)">Automated rapid iterative negative geotaxis assay and its use in a genetic screen for modifiers of Abeta(42)-induced locomotor decline in Drosophila.</a> Neurosci Bull. 31 (5), 541-549 (2015).</li>
<li>Shen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SH2B1+is+Involved+in+the+Accumulation+of+Amyloid-beta42+in+Alzheimer%27s+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Alzheimers+Dis%22%5BJournal%5D)">SH2B1 is Involved in the Accumulation of Amyloid-beta42 in Alzheimer's Disease.</a> J Alzheimers Dis. 55 (2), 835-847 (2017).</li>
<li>Song, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Auxilin+Underlies+Progressive+Locomotor+Deficits+and+Dopaminergic+Neuron+Loss+in+a+Drosophila+Model+of+Parkinson%27s+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">Auxilin Underlies Progressive Locomotor Deficits and Dopaminergic Neuron Loss in a Drosophila Model of Parkinson's Disease.</a> Cell Rep. 18 (5), 1132-1143 (2017).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Downregulation+of+RBO-PI4KIII%CE%B1+Facilitates+A%CE%B242+Secretion+and+Ameliorates+Neural+Deficits+in+A%CE%B242-Expressing+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Downregulation of RBO-PI4KIIIα Facilitates Aβ42 Secretion and Ameliorates Neural Deficits in Aβ42-Expressing Drosophila.</a> J Neurosci. 37 (19), 4928-4941 (2017).</li>
<li>Riemensperger, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single+dopamine+pathway+underlies+progressive+locomotor+deficits+in+a+Drosophila+model+of+Parkinson+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep%22%5BJournal%5D)">A single dopamine pathway underlies progressive locomotor deficits in a Drosophila model of Parkinson disease.</a> Cell Rep. 5 (4), 952-960 (2013).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

여기에 설명 된 자동된 링 분석 결과 동시에 파리의 수백에 대 한 비행 부정적인 geotaxis 동작의 높은 처리량 분석을 수 있습니다. 이전 성인 등반을 분석 하기 위한 기존 전략 개별 유리병에 하나의 비행의 관측을 포함 하 고 비행 위치 수동으로 눈에 의해 감지. 이 오히려 지루한 과정 잘못 또는 노동 집약 일 뿐만 아니라 데이터의 오해에 때로는 발생할 수 있습니다. 우리의 자동화 된 반지 분석 결과 간단한 클릭으로 시작 하 고 장치를 자동으로 동기화 하 고 최대 100 파리의 등반 능력을 평가. 전기 동기화 제어 시간 및 다른 매개 변수를 더 정확한 수단을 제공 합니다, 그리고 그래서 성인 등반 하는 것을 비행의 전체 캡처 프로세스 신중 하 게 측정 될 수 있다.
다음으로, 우리의 자체 디자인된 RflyDetection 소프트웨어와 함께 정확한 비행 위치 식별할 수 있습니다. 소프트웨어 고려 전체 2D 유리병 영역 (사각형 프레임에 의해 결정), 및 위쪽 및 아래쪽 기준선에...

다양 한 프로토콜 및 방법 초파리 성인 등반 동작의 분석을 위해 개발 되었습니다. 오히려 힘 드는 전통적인 분석 주로 개별 유리병에 넣어 하나의 비행을 포함를 사용 하 수동 힘 동기화1,2,3,4내려 파리를 누릅니다. 지루한 및 시간이 걸리는, 큰 높은 처리량 연구에 대 한 부적 절 한 이며 다른 제한 뿐만 아니라 파리 다운 탭을 사용 하는 수동 힘의 잠재적인 변이 있다. 분석 결과 개선 하기 위해, 급속 한 반복 부정적인 Geotaxis (반지) 분석 결과 수많은 파리 같은 시간5이상의 높은 처리량 분석을 수 있는 개발 되었다. 그러나, 분석 결과 여전히 비행 행동을 동기화를 수동으로 exerting 힘을 요구 한다. 이전 분석 결과 따라 수정 반지 분석 결과의 우리의 버전 포함 금속 기지 비행 동기화6를 전기 모터에 의해 자동으로 제어 하는 여러 비행 포함 하 튜브를 호스팅. 녹음 시 즉시 동기화 다음 기록 후 즉시 등반 자체 설계 소프트웨어를 사용 하 여 분석. 우리의 자동화 된 반지 분석 결과 지루하고 노동 집약 과정에서 한 번에 하나씩 단일 비행 데이터 수집에 제거 하 고 더 효율적으로 데이터 수집 프로세스를 활성화. 또한, 자동된 링 분석 결과 메커니즘 기본 Alzheimer를 명료 하 게 하는 연구와 파 킨 슨 병, 고효율7,8,9 접근 유효성 검사의 수에 고용은 .
이 문서에서 자동된 링 분석 결과를 DDC Gal4 RNAi 파리 구동을 사용 하 여 보여 줍니다. DDC Gal4 따라서 neurodegeneration10동반 운전 적자와 관련 된 타겟 유전자 효과 분석 하기 위한 훌륭한 도구를 나타내는 dopaminergic (다)와 serotonergic 신경, 특히 표현 Gal4 라인입니다. 또한, 우리 통합 UAS-Dicer2, RNAi 효율성, UAS-Dicer2; 를 생성을 향상 플라이 라인 DDC Gal4 라인 도구. 우리가 사용 하도록 선택 하는 RNAi 파리는 auxilin (보조) RNAi v16182 (auxR16182), 우리가 이전에 효과 전시 하기 위하여 확인 하는 유전자 비행 운동 활동8. auxGFP 파리는 또한 보조 overexpression 시 효과 분석에 대 한 준비. 우리는 비행 부정적인 geotaxis 측정, 결과, 결과에서 얻은 어떤 의미를 토론 하 자동된 링 분석 결과 사용 하는 방법을 보여줍니다.

```html
<table><tbody><tr><td>Forma Environmental Chamber</td><td>Thermo</td><td>3949</td><td></td></tr><tr><td>Carbon dioxide cylinders</td><td>FuLian GAS Technology</td><td>GB/T6052</td><td></td></tr><tr><td>HDR-Camcorder</td><td>SONY</td><td>HDR-CX220E</td><td></td></tr><tr><td>Binocular stereomicroscope</td><td>Xin Zhen</td><td>SMZ-168BL</td><td></td></tr><tr><td>Electronic scales</td><td>MinQiao</td><td>SL1002N</td><td></td></tr><tr><td>Refrigerator</td><td>Haier</td><td>SC-350</td><td></td></tr><tr><td>Agar-agar powder</td><td>Sinopharm</td><td>10000561</td><td></td></tr><tr><td>Glucose</td><td>Sinopharm</td><td>10010518</td><td></td></tr><tr><td>Corn meal</td><td>Sinopharm</td><td>5464654</td><td></td></tr><tr><td>Brown sugar</td><td>LiuCaiYuan</td><td>45467936</td><td></td></tr><tr><td>Instant dry yeast</td><td>AB MAURI</td><td>20886</td><td></td></tr><tr><td>AuxR16182</td><td>VDRC</td><td>7187</td><td></td></tr><tr><td>UAS-Dicer2</td><td>Bloomington</td><td>24650</td><td></td></tr><tr><td>UAS-mCD8GFP</td><td>Bloomington</td><td>32185</td><td></td></tr><tr><td>DDC-Gal4</td><td></td><td></td><td>A gift from Fude Huang</td></tr><tr><td>AuxGFP</td><td></td><td></td><td>A gift from Henry Chang</td></tr></tbody></table>
```

neurodegeneration의 초파리 모델에서 성인 등반 동작을 분석 하기 위한 자동화 된 신속한 반복 부정적인 geotaxis 분석 결과

An Automated Rapid Iterative Negative Geotaxis Assay for Analyzing Adult Climbing Behavior in a Drosophila Model of Neurodegeneration

신경 퇴행 성 질환 운동 능력, 감소 된 수명, 및 연령에 따라 neurodegeneration의 진보적인 손실에 자주 연관 된다. 이러한 세포의 메커니즘을 이해 하 이벤트, 그리고 그들의 인과 관계 서로, 초파리 melanogaster, 정교한 유전자 도구와 다양 한 행동 기능으로 사용 된다 질병 모델 평가 신경 고기입니다. 여기는 초파리 성인 부정적인 geotaxis 행동, neurodegeneration와 관련 된 가능한 모터 결함에 대 한 표시로 분석 하는 높은 처리량 방법에 설명 합니다. 자동화 기계 설계 및 드라이브 플라이 동기화 나중 초 분에 걸쳐 부정적인 geotaxis 행동의 녹음 수 있도록 초기 전기 전류를 사용 하 여 개발 되었습니다. 디지털 녹화 된 비디오에서 이미지 다음 통계 데이터 조작에 대 한 자체 설계 RflyDetection 소프트웨어와 함께 처리 됩니다. 다른 하나의 비행에 따라 수동으로 제어 부정적인 geotaxis 분석 결과,이, 빠르고, 정확 하 고 높은 처리량 프로토콜을 사용 하 데이터 수집에서 더 많은 파리의 수백 보다 동시에, 사전에 효율적인 접근 방식을 제공 하 우리 운전 적자 neurodegeneration 연관의 기본 메커니즘을 이해.

이 기사는 비행 부정적인 geotaxis 행동 평가에서 자동된 링 분석 결과의 사용을 보여줍니다. 이전 반지 분석 결과는 달리 우리의 분석 결과 동시에 비행 행동을 동기화 하는 전기 힘을 제공 하 고 파리의 수백까지 분석 하는 자동된 장치 포함 (그림 1). Dicer2;의 분석 DDC &#62; auxR16182 DA 뉴런에 보조 식 비행 운동 활동에 대 한 중요 한 제안 파리 남성과 여성 모두 파리에 대 한 6-s 시간 프레임에서 등반 거리에는 연령에 따라 감소 했다. 상승 능력 auxGFP overexpression 다 신경에 따라 영향을 받을 것 같지 않습니다 그리고 auxR16182 및 auxGFP DA 뉴런에서의 공동 식 구조 RNAi 표현 형 (그...

이 단계별 프로토콜 파리의 수백을 접대 하 고 전기 모터에 의해 그들의 행동을 동기화 하는 자동화 된 멀티 실린더 시스템을 사용 하 여 초파리 부정적인 geotaxis 동작을 분석 합니다. 동기화 시 디지털 기록 및 자체 디자인된 RflyDetection 소프트웨어를 사용 하 여 분석 된 비행 부정적인 geotaxis 동작 분석입니다.

Neurodegeneration의 초파리 모델에서 성인 등반 동작을 분석 하기 위한 자동화 된 신속한 반복 부정적인 Geotaxis 분석 결과

Neurodegenerative diseases are frequently associated with a progressive loss of movement ability, reduced life span, and age-dependent neurodegeneration. ...

이 자동화된 급속 반복 부정적 지오택시스 분석의 전반적인 목표는 신경퇴행과 관련된 Drosophila 성충 등반 결손을 분석하는 것입니다. 이 방법은 신경과학 분야의 주요 질문에 답할 수 있는 도움을 줄 수 있습니다. 예를 들어, 신경퇴행과 관련된 운동 결손의 메커니즘 같은 것입니다. 이 기술의 주요 장점은 파리의 등반 활동을 자동화되고 높은 정확도로 분석할 수 있다는 것입니다.이 기술의 의미는 신경퇴행의 치료 및 진단에까지 확장됩니다. 왜냐하면 신경퇴행성 질환은 빈번하게 움직임 능력의 점진적 상실과 삶의 기간 감소 및 나이에 따른 신경퇴행과 관련이 있기 때문입니다. 우리는 이 방법에 대한 아이디어를 처음 가지게 되었습니다. 우리는 Drosophila 성충의 운동 활동을 더 정확하게 측정하고 싶었습니다.파리 수집을 위해, 25도 섭씨, 70% 습도 및 12시간 빛, 12시간 어둠 주기에서 표준 파리 사료로 파리를 유지하는 것으로 시작합니다. 탄소 산화 마취 하에 UAS-Dicer2 DDC-GAL4 파리 처녀를 수집합니다. 처녀를 2일 된 성충 수컷 파리와 교배시키고, 남성/여성 비율은 1:2로 합니다.각 실험 그룹마다 새로 부화한 수컷과 암컷을 각각 3개의 비알에 분리하여 수집합니다. 각 일반 파리 비알에 10마리의 파리를 표준 사료와 함께 넣습니다. 그런 다음 비알을 25도 섭씨로 설정합니다. 자동화된 RING 분석을 수행하기 위해 각 유전자형당 10마리의 수집된 남녀 파리를 각 비알에 옮깁니다.그런 다음 나사로 비알을 고정합니다. 각 실험 세트에 대해 대조군 파리와 다른 유전자형을 가진 파리를 함께 분석합니다. 장치 앞에 배치된 디지털 카메라를 켜고 파리가 로드되어 준비되면 녹화를 시작합니다.카메라는 수평으로 배치해야 하며, 카메라는 RING 장치에서 적절한 거리에 배치되어 모든 파리의 위치를 비교적 정확한 위치에서 캡처해야 합니다. 파리가 비알에 정착하도록 1분 동안 기다린 후, 스텝 드라이버를 제어하는 스텝 컨트롤러를 켭니다. 이는 소형 전기 모터를 제어하여 부착된 레버를 연속적으로 올리고 2초 동안 장치를 4회 두드리게 합니다.장치를 두드린 후, 파리가 벽을 오르기 시작하는 것을 확인할 수 있습니다. 녹화가 계속 진행되는 동안, 방금 시연된 동기화를 반복하여 60초 간격으로 3~5회의 연속 시도를 반복합니다. 5, 15, 25 및 35일 된 파리에 대해 실험을 반복합니다.각 실험 그룹에 대해 각 실험에 대해 적어도 3개의 독립적인 실험을 수행하고, 최소 30마리의 수집된 파리 또는 3개의 비알을 사용합니다. 데이터를 분석하기 위해, 녹화된 비디오를 컴퓨터에 가져옵니다. 각 시도에 대해 두드림 후 6초에 비디오의 스냅샷을 찍습니다.R-fly 탐지 소프트웨어에서, 파일 메뉴를 사용하여 스냅샷 이미지를 가져옵니다. 다음으로, 도구 모음의 기준선 아이콘을 사용하여 비알의 상단 및 하단 기준선을 정확하게 설정한 다음, 커서를 사용하여 이미지의 상단 및 하단 기준선을 표시합니다. 설정 막대에서, 비알 내 파리 수 필드에 비알당 파리 수를 입력하고, 튜브 높이 필드에 비알 길이를 입력합니다.개별 파리 위치는 각 비알에 대해 화면에서 점으로 감지되고 표시됩니다. 오른쪽 패널의 표에는 소프트웨어가 각 파리에 대한 등반 거리를 자동으로 결정하고, 각 비알의 10마리 파리의 평균 값을 표시합니다. 데이터는 평균 ± SEM으로 표시합니다.의미 있는 P값은 일원 분산 분석과 Bonferroni 다중 비교 검정을 사용하여 계산합니다. 이 비디오에 제시된 자동화된 RING 분석을 사용하여 Dicer2 지정

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Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

, 전위의 기능을 측정하는 학습을위한 행동 assays, 및 메모리...

에 시금 운동력이있는 사람, 학습, 및 메모리 적자 Drosophila</emNeurodegeneration의> 모델

Drosophila melanogaster은 한 세기 이상에서 많은 중요한 생물 학적 과정의 분자 및 세포 기초를 이해하기 위해 사용되었습니다 유전자와 behaviorally 다루기 쉬운 모델 시스템이다. Drosophila 잘 플라이 행동의 유전적 기초에 대한 통찰력을 얻기 위해 악용되었습니다.

분석의 방법 Drosophila 행동

이 비디오는 비행 이동을 정량화하는 간단한 방법을 설명하고 수행된 등반 분석을 보여줍니다. 비행 등반 분석은 음성 지오택시 반응에 의존하는 운동 기능의 일반적인 테스트입니다.

플라이 클라이밍 분석: Drosophila melanogaster에서 일반 운동을 테스트하는 방법

여기에 우리가있는 도파민 (DA) 신경 세포의 연령에 따라 신경 변성을 연구하기 위해 설립 된 두 가지 분석을...

에 신약 표현형을 평가<em&gt; 초파리</em&gt; 등산 분석 실험에 의한 도파민 뉴런과 뇌 전체의 면역 염색

초파리 melanogaster의는 자발적인 운동 활성 등의 행동에 영향을 미치는 유전 적 또는 환경 적 조작을 공부에 유용하다. 여기에서 우리는 적외선 빔과 자발적인 운동 활성을 정량화하는 데이터 분석 소프트웨어와 함께 모니터를 활용하는 프로토콜을 설명합니다.

의 자발적인 운동 활성의 결정<em&gt; 초파리</em

우리는 신경퇴행성 질환의 모델로 Drosophila melanogaster에서 최적화되고 저렴하며 신뢰할 수 있는 음성 지오택시 분석을 제시합니다. 경미한 운동 결함에 더 민감하기 때문에 이 분석은 잠재적인 유전적 상호 작용 및 약물 표적을 스크리닝하는 데 도움이 됩니다.

퇴행성 신경 질환의 초파리 모델에서 등반 결함의 정량 분석

섬 분석 결과 초파리 melanogaster의 기본적인 운동 동작을 평가 하는 데 사용할 수 있는 비교적 새로운, 비용 분석 결과가 이다. 이 원고는 자동 데이터 처리 및 유전 약리학 큰 스크린에 대 한 중요 한, 높은 처리량 판독 시험이 섬 분석 결과 데이터의 객관적인 정량화에 대 한 알고리즘을 설명 합니다.

Drosophila 섬 분석 결과에서 운전 행동의 높은 처리량 분석

우리는 Drosophila melanogaster에있는 신경 변성을 전시하는 돌연변이를 위한 스크린에 전방 유전 접근을 사용하여 프로토콜을 제시합니다. 그것은 궁극적으로 신경 보호의 프로세스와 관련있는 새로운 유전자를 확인하기 위하여 등반 분석, 기관학 분석, 유전자 매핑 및 DNA 순서를 통합합니다.

소독멜라노가스터에서 새로운 신경보호 유전자를 식별하기 위한 생체 전방 유전자 스크린

현재 프로토콜은 속도, 거리 등의 매개변수를 계산하기 위해 고화질 비디오 녹화를 기반으로 각 프레임의 픽셀을 분할하는 플러그인과 호환되는 오픈 소스 소프트웨어 피지를 사용하여 손으로 만든 경기장에서 파리의 움직임을 추적 및 분석하여 초파리 의 운동 활동을 평가합니다.

초파리에서 운동 활동을 분석하는 간단한 기술

이 프로토콜은 전통적인 포유류 모델에 대한 대안으로 운동 기능 장애의 정량화를 통해 초파리의 신경 독성을 평가하기 위한 고처리량, 비용 효율적인 방법을 제시합니다. 민감하고 재현 가능하며 윤리적으로 유리한 모델을 사용하여 제약 화합물, 환경 제제 또는 유전자 변형의 신경독성 영향을 평가하는 것을 목표로 합니다.

신경독성에 대한 판독으로서의 Drosophila melanogaster 의 운동 기능 장애에 대한 행동 분석

학습하세요 Drosophila 성인 등반 결손을 자동화된 RING 분석법으로 측정하는 방법을. 신경퇴행성 질환과 관련된 운동 능력 저하 메커니즘을 연구하는 데 활용할 수 있습니다.

Neurodegeneration의 초파리 모델에서 성인 등반 동작을 분석 하기 위한 자동화 된 신속한 반복 부정적인 Geotaxis 분석 결과

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