Pentylenetetrazole 유도 점화 마우스 모델

이 방법은 간질의 심층 분석에 도움이 될 수 있습니다. 발작은 신경 정신 발달 장애에 관여할 수 있는 뇌의 조직학적 변화를 유도합니다. 이 기술의 주요 장점은 PTZ의 자기 대화 용량이 다른 현재 방법보다 제어 가능한 발작을 더 잘 유도할 수 있다는 것입니다.

PTZ(PTZ 밀리리터당 2mg)를 멸균된 0.9% 염화나트륨(sodium chloride)에 용해시켜 주사 준비를 시작합니다. 동물의 무게를 잰 다음 3분 동안 관찰실에 두십시오. 다음으로, 27 게이지 바늘에 부착된 1ml 주사기로 PTZ를 복부의 왼쪽 또는 오른쪽 사분면에 복강간에 주입합니다.

마지막으로, PTZ 주입 후 동물의 이상 행동을 관찰합니다. 낯선 마우스가 될 대상 마우스와 같은 성별의 2개월에서 6개월 된 129 SV 마우스를 최소 두 마리 확보합니다. 각 낯선 쥐는 별도로 보관해야 합니다.

각 훈련 세션마다 15분 동안 습관화할 수 있도록 마우스를 케이지에 두십시오. 70% 에탄올로 표면을 닦아 두 케이지의 전체 장치를 청소합니다. 그런 다음 3 챔버 장치의 두 측면 챔버에 빈 케이지를 놓고 챔버 사이의 문을 엽

피험자 마우스가 익숙해지도록 하려면, 피험자 마우스를 중앙 챔버에 놓고 마우스가 두 케이지를 모두 조사할 때까지 장치 전체에서 마우스가 자유롭게 움직일 수 있도록 하고 추가로 5분을 더한다. 동물이 중앙 방으로 이동한 후 문을 닫고 쥐가 중앙 방에서 5분 동안 자유롭게 움직이도록 합니다. 이 기간 동안 129 SV 마우스 중 하나를 케이지에 넣어 케이지에 익숙해집니다.

대상 마우스의 습관화 기간이 끝나자마자, 129 SV 마우스가 들어있는 케이지(낯선 사람 1 케이지)를 옆 방 중 하나에 놓고, 오브젝트 케이지라고 불리는 빈 케이지를 다른 쪽 방에 놓는다. 문을 열고 대상 마우스의 행동을 모니터링하십시오. 피험자 마우스가 10분 동안 자유롭게 움직이도록 하고 4개의 행동 매개변수를 기록합니다.

첫 번째는 각 방, 낯선 사람 1 방, 물체 방 및 중앙 방에서 보낸 시간입니다. 두 번째는 각 케이지, Stranger One 케이지 및 오브젝트 케이지를 조사하는 데 소요된 시간입니다. 세 번째는 각 방으로 들어가는 입구의 수이고 네 번째는 이동 한 총 거리입니다.

마우스가 중앙 챔버로 이동한 후 도어를 닫습니다. 케이지를 닦은 후, 또 다른 129 SV 마우스를 Stranger Two 케이지라고 불리는 케이지 중 하나에 배치하고 Stranger Two 케이지를 챔버 중 하나에 배치하여 사회적 참신함 분석을 시작합니다. Stranger One Mouse를 Stranger One 케이지라고 하는 다른 케이지에 넣고 Stranger One 케이지를 다른 방에 놓습니다.

마지막으로 문을 열고 대상 마우스의 동작을 모니터링합니다. 피험자 쥐가 10분 동안 자유롭게 움직이도록 하고 사회성 분석을 위해 설명된 것과 동일한 행동 매개변수를 측정합니다. 특정 조건의 컨디셔닝 장치에 마우스를 배치하는 것으로 시작합니다.

예를 들어, 투명한 플렉시 유리 벽, 금속 격자 바닥, 에탄올 냄새, 100lux 밝기 및 65 데시벨 배경 백색 소음이있는 정사각형 장치. 0.1밀리암페어 전기 충격의 의사 무작위 타이밍으로 5분 동안 3회 2초 동안 발 충격으로 마우스를 컨디셔닝합니다. 그런 다음 컨디셔닝 후 마우스를 홈 케이지로 되돌립니다.

컨디셔닝 다음 날, 마우스를 쇼크 상태와 동일한 장치에 넣고 5분 동안 동결 시간을 측정하여 기억력 평가를 수행합니다. 같은 날 늦게, 마우스를 새로운 장치에 넣고 5분 동안 평가하는 동안 동결 시간을 측정합니다. 마지막으로 동일한 조건과 새로운 조건 사이의 동결 시간을 비교합니다.

연구 결과, PTZ 주사군은 발작 점수가 점진적으로 증가한 반면, 식염수 주사군은 발작이나 비정상적인 행동이 유발되지 않았다. 또한, 반복적인 발작은 비정상적인 축삭 분지 형성 또는 이끼 낀 섬유 발아 및 해마의 과립 세포의 비정상적인 이동을 촉진했습니다. PTZ를 투여한 쥐는 정상적인 사회성을 보였다.

생쥐는 물체 방보다 낯선 사람 1 방에서 더 많은 시간을 보냈고, 물체 우리보다 낯선 사람 1 우리를 더 많이 조사했다. PTZ를 투여한 마우스는 비정상적인 사회적 새로움을 보였는데, 이는 사회적 기억 장애가 있음을 나타냅니다. PTZ를 투여한 쥐는 또한 상황별 공포 테스트에서 기억력 장애를 보였다.

이 절차에 따라 Morris 물 미로 또는 기타 기억력 테스트와 같은 다른 방법을 수행하여 간질 발작의 영향을 받는 기억 능력 손상에 대한 추가 질문에 답할 수 있습니다. 개발 후 이 기술은 간질 분야의 연구자들이 모델 동물을 사용하여 발작으로 인한 신경 정신 발달 장애의 메커니즘으로 탐구할 수 있는 길을 열었습니다.