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DOI: 10.3791/56615-v
Kyle M. Koss1,2, Matthew A. Churchward1,2, Andrea F. Jeffery1,3, Vivian K. Mushahwar1,2,4, Anastasia L. Elias3, Kathryn G. Todd1,2,5
1Department of Psychiatry,University of Alberta, 2Alberta Innovates-Health Solutions Interdisciplinary Team in Smart Neural Prostheses (Project SMART),University of Alberta, 3Department of Chemical and Materials Engineering,University of Alberta, 4Division of Physical Medicine and Rehabilitation,University of Alberta, 5Centre for Neuroscience,University of Alberta
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
여기, 우리는 쥐의 3D 문화에 대 한 프로토콜 이다, microglia, 및 oligodendrocytes를 포함 하 여 두뇌 파생 명과 셀을 제시. 1 차 세포 배양, methacrylated 히 알루 론 산 (하 마) 하이드로 겔 합성, HAMAphoto 중 합 및 셀 캡슐화 및 샘플 공초점 레이저 스캐닝 전자 현미경 이미징 처리 설명 합니다.
이 3D 세포 배양 프로토콜의 전반적인 목표는 주요 지표 세포인 미세아교세포, 성상세포, 희소돌기아교세포를 사용하여 중추신경계의 신경교세포 반흔 이벤트를 모델링하는 것입니다. 이 방법은 신경 염증 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있으며, 예를 들어 신경교세포가 재생 전략을 강화하고 신경교 세포의 흉터를 풀 수 있는 가능성에 대한 답을 찾는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 신경교 생물학이 체계적이고 높은 처리량 조작을 통해 3D 마이크로 환경에서 빠르게 특성화될 수 있다는 것입니다. 파종을 위한 커버 슬립을 준비하려면 먼저 3-프로필 메타크릴레이트 1밀리리터를 증류수 49밀리리터에 첨가하여 2% 용액을 만드는 것으로 시작합니다. 그런 다음 18mm 유리 덮개를 용액에 넣고 실온에서 1 시간 동안 흔듭니다. 1시간 후 각 커버 슬립을 100밀리리터의 탈이온수가 담긴 세 개의 비커에 연속적으로 담그어 커버 슬립을 헹굽니다. 그런 다음 건조제와 섭씨 40도의 오븐으로 진공 청소기에서 덮개를 건조시킵니다. 다음날 집게를 사용하여 개별 커버 슬립을 70% 에탄올에 빠르게 담그십시오. 그런 다음 건조하지 않고 각 덮개 슬립을 12웰 플레이트의 우물에 떨어뜨립니다. 다음으로, 1ml의 멸균 탈이온수로 각 우물을 씻습니다. 그런 다음 1ml의 멸균 폴리를 추가하십시오.
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