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DOI: 10.3791/56630-v
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이 원고는 양성자 교통 시스템의 활동을 측정 하 양성자-선택적 전극 및 패치 방법 클램핑의 응용 프로그램을 설명 합니다. 이러한 메서드는 일반적으로 양성자 수송 활동, 적당 한 감도, 시간 해상도 및 부족 한 세포내 환경 제어 등을 연구 하는 데 사용 하는 기술의 몇 가지 제한 사항이 극복.
이온 선택성 미세전극과 결합된 거대 패치 방법은 이온 플럭스를 검출하고 정량화하는 데 사용되는 다목적 방법입니다. 구체적으로, 세포막에서 발현되는 전기 중성 이온 수송체, 나트륨-수소 교환기 또는 NHE의 활성에 의해 생성된 양성자 플럭스를 측정하는 데 사용됩니다. 나트륨-수소 교환기는 원형질막에 매우 근접한 양성자의 구배를 생성하며, 여기에 주황색 고리로 표시됩니다.
세포막을 가로지르는 이러한 양성자의 구배는 양성자 선택적 미세전극을 사용하는 기술과 결합된 전체 세포 패치 클램프 기록으로 측정됩니다. 양성자 선택성 미세전극은 세포 표면 가까이로 이동하며, 여기서 세포 표면으로부터 멀리 떨어진 위치 A.And 에 표시된 세포로부터 이동하는 양성자의 플럭스를 기록하고, 여기서 위치 B.그리고 나서, 위치 A로 표시된 용액에 존재하는 자유 양성자 농도를 기록하고, 세포막에 가까운 위치 A로 돌아가서, 반복적이고 진동하는 움직임으로. A에서 B까지의 전압 차이가 기록되며 NHE 활동의 대표자에 따라 달라집니다.
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