관찰 및 깜박이 표면 강화 된 라만 산란의 분석

Blinking Surface-enhanced Raman Scattering에 대한 이 분석의 전반적인 목표는 금속 나노 입자 표면에서 단일 분자의 거동을 조사하는 것입니다. 이 방법은 고체 액체 계면의 작동 거동에 대한 계면 및 산호 과학의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.이 기술의 주요 장점은 하나의 비디오에서 약 12개의 깜박이는 지점을 동시에 관찰할 수 있기 때문에 많은 데이터를 수집할 수 있다는 것입니다. 이 절차를 시작하려면 두 개의 유리 현미경 슬라이드를 액체 세제와 수돗물로 세척하십시오.

슬라이드를 증류수로 헹구고 자연 건조시킵니다. 다음으로, 0.1% 폴리-l 라이신의 수용액을 하나의 드라이 슬라이드에 적용합니다. 용액을 슬라이드에 2-3초 동안 놓아둡니다.

그런 다음 압축 공기 송풍기를 사용하여 여분의 용액을 제거하고 슬라이드를 건조시킵니다. 다음으로, 콜로이드은 나노 입자의 현탁액을 슬라이드에 적용합니다. 서스펜션을 2-3초 동안 그대로 두십시오.

압축 공기로 슬라이드를 건조시킵니다. 그런 다음 소수성 장벽 펜을 사용하여 슬라이드의 26mm x 26mm 영역을 완전히 둘러쌉니다. 장벽을 건조시키십시오.

밀폐된 공간을 채우기 위해 슬라이드에 증류수를 떨어뜨립니다. 물의 증발을 방지하기 위해 두 번째 깨끗하고 건조한 유리 슬라이드로 슬라이드를 덮으십시오. 슬라이드 어셈블리를 s에 놓습니다.amp도립 현미경의 스테이지.

암시야 콘덴서를 통해 백색광으로 슬라이드를 비춥니다. 2x 대물렌즈에서 60x 대물렌즈로 변경하여 다양한 색상의 스팟에 초점을 맞춥니다. 다음으로, 다이오드 펌핑 솔리드 스테이트 연속파 532 나노미터 레이저, 대역 통과 간섭 필터 및 렌즈를 사용하여 샘플 표면에 대해 30도 각도로 감쇠된 빔으로 샘플을 비춥니다.

레이저 조명을 뷰의 중앙으로 이동하고 샘플 스테이지의 z 방향을 약간 조정하여 스폿의 초점을 구체화합니다. 응집체를 균일한 배경에 대해 단조로운 점으로 관찰합니다. 그런 다음 레이저를 끄고 대물 렌즈 뒤에 긴 통과 에지 필터를 삽입합니다.

간섭 필터와 외부 렌즈를 통해 샘플 표면에 대해 30도 각도로 레이저로 샘플을 비춥니다. 스테이지를 x 및 y 방향으로 이동하여 깜박이는 지점을 찾습니다. 그런 다음 프레임 시간이 61-120밀리초인 딥 쿨 디지털 CCD 카메라를 사용하여 스폿의 20분 길이의 비디오를 획득합니다.

분석을 시작하려면 CCD 카메라 소프트웨어에서 획득한 비디오를 엽니다. 클릭하고 드래그하여 깜박이는 점이 있거나 없는 영역을 선택합니다. 시간 분석을 수행하여 스폿 및 어두운 영역에 대한 신호 강도 시간 프로파일을 도출합니다.

이러한 방식으로 모든 깜박이는 지점과 관심 있는 어두운 영역에 대한 프로필을 획득합니다. 그런 다음, 지속 시간을 기준으로 밝은 이벤트와 어두운 이벤트에 대한 확률 분포를 생성합니다. 폴리-l 라이신으로 코팅된 슬라이드로 준비된 은 나노 응집체의 SERS에서 여러 가지 빛깔의 깜박임 반점이 관찰되었습니다.

깜박이는 신호는 은 나노 응집체 접합부에서 무작위 보행 단일 분자에 기인합니다. 단일 나노 응집체의 신호는 양자점의 깜박이는 형광과 달리 시간이 지남에 따라 다양한 강도를 보여주었습니다. 밝은 이벤트에 대한 임계값은 기준선 강도보다 3 표준 편차 높은 값으로 설정되었으며, 각 지점에 대해 밝은 이벤트 및 어두운 이벤트 지속 시간이 결정되었습니다.

밝은 이벤트의 확률 분포는 이벤트 기간에 대해 선과 로그 로그 그래프로 표시되었으며, 어두운 이벤트의 확률 분포는 기간에 대해 곡선으로 표시되었습니다. 어두운 이벤트 지속 시간이 일반적으로 밝은 짝수 지속 시간보다 길었기 때문에 밝은 이벤트에 대한 멱법칙 지수는 어두운 이벤트에 대한 지수보다 작은 경향이 있었습니다. 암흑 이벤트에 대한 절단 시간이 짧을수록 분자 무작위 보행이 더 빠르거나, 비방사 상태에서 방출 상태로의 에너지 장벽이 더 높거나, 또는 이 둘의 조합을 나타냅니다.

이 비디오를 시청한 후에는 깜박이는 SERS 현상을 관찰하고 분석하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.