카 테 테 르 배치 및 5/6 신 복 막 투 석의 Murine 모델에 대 한 수술 기법

이 방법은 요독 또는 요독이 아닌 상태에서 수액 노출에 대한 반응으로 복막 또는 전신 변화에 대한 복막 투석 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 장기간에 걸쳐 많은 양의 액체를 복강내로 주입할 수 있고 유전자 변형 동물을 사용할 수 있다는 것입니다. 이 기술의 의미는 구조적 및 기능적 복막 저하의 치료 및 진단으로 확장되며, 이는 잠재력, 치료 전략 테스트 및 바이오마커 평가를 용이하게 하기 때문입니다.

우리는 복막 손상과 관련된 분자 신호를 시작하기 위해 유전자 변형 마우스를 사용해야 할 필요성을 예상했을 때 이 방법에 대한 아이디어를 처음 떠올렸습니다. 카테터 삽입의 경우, 각 동물의 오른쪽 옆구리와 등을 면도한 후 발가락 꼬집음에 대한 반응 부족을 확인하고 동물의 눈에 연고를 바릅니다. 다음으로, 수술대 왼쪽 측면에 있는 첫 번째 동물을 놓고 노출된 피부를 1% 클로르헥시딘 글루코네이트 용액으로 소독합니다.

뭉툭한 가위를 사용하여 몸의 오른쪽 옆구리를 0.5cm 절개합니다. 그런 다음 동물의 등 전체를 덮고 있는 피부가 잘 분리될 때까지 인접한 근육층에서 피부를 조심스럽게 분리하십시오. 피부 절개를 통해 근육층을 직경 1mm 정도 절개하고 근육 절개 부위에 카테터 끝과 첫 번째 플라스틱 링을 삽입합니다.

5-0 또는 6-0 비흡수성 봉합사로 카테터 주위의 복막벽을 단단히 봉합하되, 하나의 플라스틱 링은 복막강 내부에, 다른 하나는 근육과 피부 사이에 끼웁니다. 절개 전에 봉합사를 준비해야 하며 카테터를 삽입할 때까지 근육을 풀어서는 안 됩니다. 그렇지 않으면 절개 부위가 매우 작기 때문에 다시 찾기가 어려울 수 있습니다.

액세스 포트를 마우스 꼬리 쪽의 피하 공간에 삽입하고 두 번째 봉합사로 상처를 봉합합니다. 그런 다음 흉골이 완전히 누운 후 동물을 우리로 되돌립니다. 4-7일 후, 복막 투석 치료를 시작하려면 먼저 주사기에 복막 투석액 2ml를 넣고 1% 클로르헥시딘 글루코네이트 용액으로 포트를 둘러싼 피부를 소독합니다.

그런 다음 한 손으로 꼬리와 접근 포트로 동물을 구속하고 다른 손으로 비스듬한 바늘을 사용하여 포트에 유체를 주입합니다. 5/6 신장 절제술 및 카테터 배치의 경우, 시연된 바와 같이 동물의 수술을 준비한 후 갈비뼈 바닥에 가까운 동물의 왼쪽에 0.5cm 피부를 절개합니다. 근육을 작게 절개하여 복막에서 왼쪽 신장을 추출하고 캡슐과 부신을 제거합니다.

소작기를 사용하여 신장의 사지를 태우고 절단한 다음 신장을 복막강으로 되돌립니다. 그런 다음 불용성 5-0 또는 6-0 봉합사로 근육과 피부 상처를 봉합하고 완전히 회복되면 동물을 우리로 되돌려 보냅니다. 다음 날, 시연된 바와 같이 동물의 오른쪽을 0.5cm 정도 절개하고 동물의 뒤쪽 피부를 근육에서 분리합니다.

근육을 0.3-0.4cm 절개하고 복막강에서 오른쪽 신장을 추출합니다. 캡슐과 부신을 제거하고 비흡수성 5-0 또는 6-0 봉합사를 사용하여 신장 정맥, 동맥 및 요관을 결찰합니다. 이제 신장을 완전히 제거하고 카테터를 삽입하여 근육 상처를 봉합하기 전에 시연된 것처럼 두 개의 플라스틱 링 사이에 근육이 유지되도록 합니다.

시연된 바와 같이 액세스 포트를 피하 공간으로 도입하고 피부를 닫습니다. 그런 다음 완전히 회복될 때까지 모니터링하면서 동물을 우리로 되돌려 보내고 시연된 바와 같이 고삼투압액을 투여하기 전에 동물이 최소 10일 동안 회복할 수 있도록 합니다. 카테터의 가장 먼 부위에서 얻은 마우스 perial perial perial tissue 는 투석 중 두께와 세포 동원이 증가한 것을 보여주며, 이는 신장 절제술된 동물에서 더욱 악화됩니다.

흉선 상피 세포는 또한 복막 투석에 의해 유도된 세포 간 연합 분해로 인해 변형된 형태를 나타냅니다. 신장 절제술된 마우스의 혈청 샘플은 5/6 신장 절제술이 요독 상태를 유도하여 실험 과정에서 요독 질소 수치를 기준선과 비교하여 증가시키는 것을 나타냅니다. 더욱이, 신장이 완전히 기능할 때, 요독 질소 수치는 복막 투석액에 노출된 쥐에서도 기초 상태와 유사하게 유지됩니다.

이러한 기술은 5분에서 7분 안에 완료할 수 있습니다. 신장 절제술없이 15-20 분. 왼쪽 신장 소작의 경우 20-25 분.

올바른 신장 제거 및 카테터 배치를 위해, 그 방법론이 적절하게 수행되는 경우. 개발 후 이 기술은 복막 투석 분야의 연구자들이 복막 투석 치료를 받는 신장 환자의 복막 보존을 위한 치료 옵션을 탐색할 수 있는 길을 열었습니다.