Name: Antecubital 정 맥 도관 법에 의해 높은 강도 운동 중 혈액 젖 산 염과 플라스마 인슐린의 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-18T12:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 28 s
Description: 학습하세요 고강도 운동 중 전완 정맥 도관을 통한 혈액 샘플링 방법을 배우세요. 이 기술은 운동 생리학 및 호르몬 대사 변화를 실시간으로 연구하는 데 활용됩니다.

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저자는 신문을 읽고에 대 한 박사 P. Karagiannis와 그의 기술 지원에 대 한 교수 T. 호요 인정 하 고 싶습니다.

여기에 설명 된 모든 방법 로컬 윤리 위원회에 의해 승인 되었습니다 (도시샤 대학 윤리 위원회: 15033), 헬싱키의 선언에 의해 설정 된 표준 규격을 따라에서 했다. 동의 모든 참가자 로부터 얻은 것입니다. 참가자 들은 남성 레크리에이션 선수 (20.1 ± 1.2 년, 나이, 체중, 69.7 ± 6.2 k g, 높이, 176.1 ± 5.8 cm; 신체 지방 13.6 ± 1.5% 및 VO2최대 52.6 ± 6.6 mL/min1/kg1).
1입니다. 운동 프로토콜의 설립
참고: 현재 연구는 HIIE 프로토콜 중 antecubital 정 맥에서 혈액 샘플링에 의해 혈액 호르몬 및 대사 산물 역학의 평가의 구성 되어 있습니다.
<ol><li>낮은 강도에서 측에서 자전거의 5 분와 따뜻한을 수행을 요구 하십시오. 워밍업, 후 5 분 동안 휴식 하는 주제를 보자.</li>
	<li>다리 주기 측에서 다음 HIIE를 수행 하기 위해 주제를 물어: 30 s 높은 강도 운동, 구분 하 여 나머지 (그림 1)의 4 분의 3 관찰. 참고: 30 s 복싱 설정 되어야 합니다 강도 평등에서 90%로 이전 수행된 Wingate 테스트의 전원 평균. 다른 곳에 대 한 완전 한 윈 게이트 테스트8 참조.</li>
	<li>30 s 복싱에 대 한 작업 부하를 계산 하려면 다음 수식: 일 = 힘 x 거리 (식 1) 힘 = 질량 x 가속도 (식 2) 일 = (질량 x 가속도) 거리 (식 3) x 참고:이 모델에서는, 질량은 작업 부하 (kg), 그리고 가속도 9.81 m/s2이다. 거리는 바퀴 직경 (1.622 m). 때문에 바퀴 회전 3.7 타임된 /peal 회전, 페달 회전 당 거리 3.7 x 1.662입니다. 또한, 페달 주파수 90 레 브/분1이므로 우리 90 한 페달 거리를 곱하면 해야. 일 = 9.81 x 3.7 x 1.622 x 90 (식 4) x 작업 부하 작업 부하 = 일 / (9.81 x 3.7 x 1.622 x 90) (식 5)</li>
</ol>2입니다. 도관 법
참고: 튜브 및 vacutainers 표시 되어야 합니다 시간 손실을 방지 하려면 미리.
<ol><li>지 혈 대는 도관 법에 대 한 선택 하는 팔을 감싸 줍니다. 이렇게 하려면 선택한 팔 뒷면 신축성 밴드 놓습니다. 스트레칭 밴드, 팔 주위 밴드와 함께 루프를 확인 하 고 탄성을 넥타이.</li>
	<li>보이는 antecubital 정 맥을 선택 하 고 에탄올 또는 알코올 피부를 소독.</li>
	<li>피부와 15 °의 대략적인 각도에서 정 맥으로 멸 균된 정 맥의 끝을 삽입 합니다. 참고:은 정 원심 방향에 인접에서 삽입 한다. Cannulation 성공 하면 혈액의 backflush 관찰 한다.</li>
	<li>손으로 정을 장악 하 고 바늘을 부드럽게 제거 합니다. 참고: 운동을 하는 동안 바늘의 각도 유지, 면 조직 피부와 바늘 사이 사용할 수 있습니다. 테이프와 함께이 구조를 수정 합니다.</li>
	<li>헤 파 린과 첫 번째 혈액 샘플 (약 2.5 mL) aspirate는 vacutainer를 연결 합니다. 직후, 40 분 동안 얼음 상자에 넣어 혈액 샘플을 냉동. 혈액 가스 분석 하려고 하는 경우 보조 도움 요청.</li>
	<li>카 테 터에 튜브를 연결 하 고 혈액 응고를 피하기 위해 튜브의 전체 길이에 헤 파 린 주사. 나비를 닫습니다.</li>
	<li>테이프를 사용 하 여 카 테 터를 고정 시켜야 합니다. 이 시점에서 확인, 피사체의 팔 이동성 혈액 컬렉션에 방해가 되지 않습니다. 이 상태를 확인 하려면 반드시 바늘 위치 어떤 운동에 의해 영향을 받지 않습니다.</li>
</ol>3. 혈액 Samplings
<ol><li>때까지 테에만 피는 vacutainer를 사용 하 여는 헤 파 린을 제거 합니다. 혈액 플래쉬 백을 관찰 하는 경우 2.5 단계에 설명 된 대로 샘플을 수집 합니다.</li>
	<li>샘플 수집 후 혈액 응고를 피하기 위해 카 테 테 르 튜브에 헤 파 린을 다시 삽입할. 이 작업 후 단계 2.5 여러 샘플 컬렉션 반복 수 있습니다.</li>
	<li>마지막 샘플 수집 후 조심 스럽게 cannulation 튜브를 제거 하 고 알코올 피부를 청소. 가능 출혈을 방지 하려면는 catheterization 되었다 장소에 소독된 면 계속 주제 요청.</li>
	<li>혈액 vacutainer 튜브에 수집 후 신중 하 게 1.5 mL 튜브에 혈액의 약 1.5 mL를 통과 하 고 얼음에 튜브를 유지.</li>
	<li>젖 산 검출기를 사용 하 여 나머지 혈액에서 측정 혈액 젖 산. 같은 날에는 플라즈마 혈액 샘플을 (혈액의 약 1.5 mL) 구하십시오.</li>
	<li>플라스마 분리, 혈액 샘플을 4 oC에서 5000 x g에 5 분 동안 원심 및 새로운 1.5 mL 튜브에 상쾌한 분리.</li>
	<li>한 번 더 원심 분리를 반복 하 여 플라즈마 정화.</li>
	<li>혈장 분리 후 호르몬 분석까지-80 oC에서 샘플을 저장 합니다.</li>
	<li>ELISA 키트로 제조업체의 당 ( 재료의 표참조) 프로토콜을 사용 하 여 플라스마 인슐린을 측정 합니다.</li>
</ol>

<ol><li>Wahl, P., Mathes, S., Köhler, K., Achtzehn, S., Bloch, W., Mester, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+active+vs.+passive+recovery+during+Wingate-based+training+on+the+acute+hormonal%2C+metabolic+and+psychological+response%5BTitle%5D)+AND+%22Growth+Horm+IGF+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of active vs. passive recovery during Wingate-based training on the acute hormonal, metabolic and psychological response.</a> Growth Horm IGF Res. 23 (6), 201-208 (2013).</li>
<li>Wahl, P., Mathes, S., Achtzehn, S., Bloch, W., Mester, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+vs.+passive+recovery+during+high-intensity+training+influences+hormonal+response%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Sports+Med%22%5BJournal%5D)">Active vs. passive recovery during high-intensity training influences hormonal response.</a> Int J Sports Med. 35 (7), 583-589 (2014).</li>
<li>Nalbandian, H. M., Radak, Z., Takeda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+active+recovery+during+interval+training+on+plasma+catecholamines+and+insulin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sports+Med+Phys+Fitness%22%5BJournal%5D)">Effects of active recovery during interval training on plasma catecholamines and insulin.</a> J Sports Med Phys Fitness. , (2017).</li>
<li>Stolen, T., Chamari, K., Castagna, C., Wislff, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+Soccer%5BTitle%5D)+AND+%22Sport+Med%22%5BJournal%5D)">Physiology of Soccer.</a> Sport Med. 35 (6), 501-536 (2005).</li>
<li>Bangsbo, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+physiology+of+soccer--with+special+reference+to+intense+intermittent+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol+Scand+Suppl%22%5BJournal%5D)">The physiology of soccer--with special reference to intense intermittent exercise.</a> Acta Physiol Scand Suppl. 619, 1-155 (1994).</li>
<li>MacInnis, M. J., Gibala, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiological+adaptations+to+interval+training+and+the+role+of+exercise+intensity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Physiological adaptations to interval training and the role of exercise intensity.</a> J Physiol. 595 (9), 2915-2930 (2017).</li>
<li>Emberts, T., Porcari, J., Dobers-Tein, S., Steffen, J., Foster, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+intensity+and+energy+expenditure+of+a+tabata+workout%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sports+Sci+Med%22%5BJournal%5D)">Exercise intensity and energy expenditure of a tabata workout.</a> J Sports Sci Med. 12 (3), 612-613 (2013).</li>
<li>Smith, J. C., Hill, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+energy+systems+during+a+Wingate+power+test%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Sports+Med%22%5BJournal%5D)">Contribution of energy systems during a Wingate power test.</a> Br J Sports Med. 25 (4), 196-199 (1991).</li>
<li>Dotan, R., Bar-Or, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Load+optimization+for+the+Wingate+Anaerobic+Test%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Appl+Physiol+Occup+Physiol%22%5BJournal%5D)">Load optimization for the Wingate Anaerobic Test.</a> Eur J Appl Physiol Occup Physiol. 51 (3), 409-417 (1983).</li>
<li>Carrasco-Benso, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+adipose+tissue+expresses+intrinsic+circadian+rhythm+in+insulin+sensitivity%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Human adipose tissue expresses intrinsic circadian rhythm in insulin sensitivity.</a> FASEB J. 30 (9), 3117-3123 (2016).</li>
<li>Hatfield, D. L., Nicoll, J. X., Kraemer, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Circadian+Rhythm+on+Power%2C+Force%2C+and+Hormonal+Response+in+Young+Men%5BTitle%5D)+AND+%22J+Strength+Cond+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of Circadian Rhythm on Power, Force, and Hormonal Response in Young Men.</a> J Strength Cond Res. 30 (3), 725-732 (2016).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

이 연구에서는 antecubital 정 맥 catheterized 했다, 그리고 높은 간격 운동 중 혈액 샘플 수집 성공적으로 되었습니다. 이 방법론의 사용의 예를 들어, 혈액 샘플 플라스마 인슐린에 대 한 혈액 젖 산에 대 한 전후 (플라즈마 분리) 분석 되었다. 이 방법의 주요 장점은 수 혈액 샘플의 컬렉션 짧은 기간입니다. 동시에 그것은 몇 가지 한계는. 예를 들어, 제한 된 운동 양식 수 있는 그것의 사용; 조교 수, 고 전문 숙련 된 직원을 요구 했다; 그리고 팔 뚝에 낮은 혈압의 결과로 낮은 샘플 볼륨의 위험.
성공적인 혈액 샘플 컬렉션에 대 한 주체의 팔 정적 위치에 있어야 합니다. 때문에 팔 뚝 이동성 메서드는 몇 가지 운동 형식에만 적용할 수 있는 그것의 현재 모양에 감소 된다. 여기, 우리는 운동을 주기 측에서 수행 하지만 수정, 사용 될 수 컴퓨터 실행 디딜 방 아에 메서드를 적용 하는 방법을 설명 합니다. 두 경우 모두, 혈에 경험을 가진 직원은 필요 합니다...

신체 활동 중 대사 및 endocrinal 마커의 측정 다른 운동 modalities의 생리 적인 의미를 이해 하는 관련성입니다. 일부 운동 형식 (예: 높은 강도 간격 운동 (HIIE)), 동안 혈액 대사와 호르몬 수준을 상대적으로 짧은 시간1,2,3변동.
구분 하 여 낮은 강렬한 운동 및 수동 기간4,5강도 높은 운동 짧은 기간 (즉, 축구, 농구, 럭비) 많은 스포츠에 의하여 이루어져 있다. HIIE 상기 스포츠와 유사성을 선물 하 고 따라서 선수6을 위한 훈련 방법으로 널리 사용. 또한, 스포츠와의 유사성 때문에 HIIE 사용 되었습니다 모델 운동 생리학7공부 하. 혈액 샘플링은 중요 한 생리 적 변수를 측정 하 고 그것은 자주 연구 목적 및 건강 상태 평가 대 한 사용. 그러나, HIIE 동안 혈액 샘플링 샘플 컬렉션 사이의 짧은 시간 때문에 기술적으로 어려운 수 있습니다. 이 문제에 해결책으로 여기 선물이를 받는 방법을 혈액 샘플 antecubital 정 맥 도관 법에 의해 짧은 기간 동안 과목 수행 HIIE.

<table><tbody><tr><td>사이클 에르고미터</td><td>Monark</td><td>MONARK Ergomedic 874 E</td><td></td></tr><tr><td>카테터</td><td>Terumo</td><td>SR-FF2032</td><td></td></tr><tr><td>Vacutainer</td><td>Terumo</td><td>PZ-D03</td><td></td></tr><tr><td>튜브 카테터</td><td>Terumo</td><td>SP-PTW30L02</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Terumo</td><td>PF-10HF10UA</td><td></td></tr><tr><td>인슐린 ELISA 키트</td><td>Abnova</td><td>ELISA 키트 KA0921</td><td></td></tr></tbody></table>

antecubital 정 맥 도관 법에 의해 높은 강도 운동 중 혈액 젖 산 염과 플라스마 인슐린의 평가

Evaluation of Blood Lactate and Plasma Insulin During High-intensity Exercise by Antecubital Vein Catheterization

신체 활동 중 대사 및 endocrinal 마커의 측정 다른 운동 modalities의 생리 적인 의미를 이해 하는 관련성입니다. 일부 동안 형식 (예: 높은 강도 간격 운동) 운동, 혈액 대사와 호르몬 수준을 짧은 기간 변경. 현재 연구에서 우리는 운동 하는 동안 몇 가지 혈액 샘플의 수집 수 있는 antecubital 정 맥 catheterize 하는 방법을 설명 합니다. 인슐린 및 정 맥 젖 산 농도 강도 높은 운동을 하는 동안 설명된 방법의 응용 프로그램에 의해 측정 되었다. 높은 강도 운동 구분 복구의 4 분의 3 30의 복싱 운동에 의하여 이루어져 있다. 마지막 복구 기간 후 윈 게이트 테스트 수행 되었다. Antecubital 정 맥에서 혈액 샘플 전에 각 30 s 한판 승부 후 전에 그리고 Wingate 테스트 후 얻은 했다. 그 결과, 운동을 하는 동안 플라스마 인슐린과 정 맥 혈액 젖 산 변화를 평가 가능 했다.

대표적인 결과로 우리 혈액 젖 산 및 인슐린 유사 6 과목에서 주기 측에 HIIE 동안 측정 하이 프로토콜을 사용. 피크 전력 및 Wingate 테스트에 대 한 평균 전력 732 ± 120와 549 ± 84 와트, 각각 있었다. 평균 전력은 HIIE의 30 s 발작 동안 전원 출력 (494 ± 75 와트)를 계산 하기 위해 사용 되었다.
그림 2 플라즈마 인슐린, 혈액 젖이 나올 편차는 HIIE 동안 보여준다. 플라스마 인슐린 (그림 2A) 첫 번째 및 세 번째 30 s 복싱 동안 감소 하지만 두 번째 시 합 및 복구 기간 동안 증가 했다. 다른 한편으로, 플라즈마 젖 산 (그림 2B)는 두 번째 및 세 ...

여기 우리는 높은 강도 간격 훈련 기간 동안 antecubital 정 맥에서 혈액 샘플을 몇 가지를 얻기 위해 프로토콜을 제시. 이 프로토콜 혈액 대사 산물의 측정에 유용 수 있습니다 하 고 동안 endocrinal 마커 운동.

Antecubital 정 맥 도관 법에 의해 높은 강도 운동 중 혈액 젖 산 염과 플라스마 인슐린의 평가

The measurement of metabolic and endocrinal markers during physical activity is of relevance to understanding the physiological implications of different ...

이 실험의 전반적인 목표는 주기 에르고미터 운동 중에 단일 피험자로부터 여러 정맥혈 샘플을 얻는 것입니다. 이 측정은 다양한 운동 방식 동안 다공성 생리학, 호르몬 및 대사 변화에 대한 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 운동 중에도 여러 혈액 샘플을 얻을 수 있다는 것입니다.절차를 시연하는 것은 우리 실험실과 협력하는 Rie Oosaki가 될 것입니다. 고강도 인터벌 운동 프로토콜 동안 후두부 정맥의 혈액, 호르몬 및 대사 산물 역학을 평가하기 위해, 피험자가 먼저 저강도로 에르고미터에서 5분 동안 워밍업을 수행하도록 합니다. 5분간 휴식을 취한 후, 피험자에게 이전에 수행된 윈게이트 테스트에서 결정된 평균 파워 평균에서 90%의 강도로 30초의 고강도 운동 인터벌을 3회 수행하게 하고, 운동 인터벌당 4분의 휴식으로 구분한다.혈액 샘플 채취를 위해 카테터 삽입을 위해 선택한 팔에 지혈대를 묶고 큐빗 전 정맥을 확인합니다. 알코올로 피부를 살균하고 멸균 된 캐뉼라의 끝을 전후 정맥에 삽입하고 피부에 약 15도 각도로 삽입합니다. 삽관이 성공적이면 혈액의 역광을 관찰해야 합니다.바늘을 제거한 후 캐뉼라를 고정하고 바늘 아래에 면 티슈를 놓습니다. 빈 채취 튜브로 헤파린을 제거하고 채혈을 위한 새 용기를 캐뉼라에 연결합니다. 약 2.5ml의 혈액을 흡인하고 나비를 닫고 즉시 샘플을 얼음 위에 놓습니다.그런 다음, 혈액 샘플 응고를 피하기 위해 튜브의 전체 길이에 헤파린을 주입하고 피험자가 다음 일련의 운동 간격을 시작하도록 합니다. 마지막 샘플을 채취한 후 캐뉼레이션 튜브를 조심스럽게 제거하고 더 많은 알코올로 피부를 소독합니다. 출혈을 최소화하기 위해 멸균 솜 조각을 채취 부위에 부드럽게 누르고 각 샘플에서 1.5ml의 혈액을 얼음 위의 개별 1.5ml 마이크로 원심분리기 튜브로 옮깁니다.젖산 검출기를 사용하여 각 1ml 혈액 샘플의 혈중 젖산을 측정하고 1.5ml 혈액 샘플 부분 표본의 두 배를 원심분리합니다. 상층액을 새로운 mirocentrifuge tube로 옮기고, transfer supertanants에서 새 tube로 샘플을 다시 원심분리합니다. 그런 다음 ELISA에 의한 혈장 인슐린 분석이 이루어질 때까지 정제된 혈장 샘플을 섭씨 영하 80도에서 보관합니다.이 대표적인 실험에서, 6명의 환자 말초 혈액 샘플 모두에서 혈장 인슐린 수치가 1차 및 30초 고강도 운동 기간 동안 감소했으나, 회복 기간의 두 번째 간격 동안에는 증가하였다. 그러나 혈장 젖산은 두 번째와 세 번째 30초 고강도 인터벌 운동 기간 동안 감소했고 처음 30초 인터벌 및 회복 기간 동안 증가했습니다. 이 절차를 시도하는 동안 혈액 샘플을 섭씨 40도 이하로 유지하는 것을 기억하는 것이 중요합니다.이 절차에 따라 Brodgar's Analysis와 같은 다른 방법을 수행하여 운동 중 pH 수준 변화에 대한 추가 질문에 답할 수 있습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 주기 에르고미터 운동 중에 전후정맥에서 연속적인 혈액 샘플을 수집하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.

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