혈소판 수혈에 미에 대 한 메서드를 검사 하는 루틴

이 방법의 전반적인 목표는 출혈 또는 혈액암 환자에 대한 이러한 혈액 제제의 사용을 최적화하기 위해 기증자 센터 또는 병원 혈액 은행에서 수행할 수 있는 일상적인 검사를 통해 혈소판 수혈을 특성화하는 것입니다. 이 방법은 혈소판 수혈에 활성 혈소판 또는 비활성화 혈소판이 포함되어 있는지 여부와 같은 수혈 의학의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 혈소판 활성화의 입증된 지표로서 미립자 함량에 대한 빠르고 정확한 스크리닝을 제공한다는 것입니다.

이 방법을 처음 접하는 개인은 현재 일상적으로 수행되지 않기 때문에 백의 튜브 세그먼트에서 샘플을 채취하는 방법을 배워야 합니다. 이 방법에 대한 아이디어는 다른 기증자의 혈소판이 활성화 상태의 변동성이 높고 이것이 환자에게 영향을 미치는 것으로 보였을 때 처음 떠올랐습니다. 혈소판 농축액에서 검체를 채취하는 방법에는 세 가지가 있습니다.

파우치에서 샘플을 추출하려면 혈소판 백의 내용물을 5초 동안 끝에서 끝까지 5회 부드럽게 수평으로 움직여 잘 섞습니다. 클램프를 파우치에 열면 파우치가 비워지고 저절로 채워집니다. 동적 광 산란 또는 DLS 테스트에는 100마이크로리터 샘플만 필요하므로 파우치를 완전히 채울 필요는 없습니다.

튜브 실러로 연결 튜브를 열 밀봉하여 백에서 파우치를 분리합니다. 빈 튜브에서 샘플링할 때 혈소판 백 튜브가 비어 있게 보관되었는지, 튜브 블록이 여전히 제자리에 있는지 확인합니다. 튜브를 육안으로 검사하여 튜브에 혈소판 농축물이 없는지 확인합니다.

스트리퍼를 닫은 상태에서 핸들을 압축하여 롤러 사이의 튜브를 짜서 튜브의 튜브 블록을 최대한 가깝게 튜브의 튜브 스트리퍼를 닫고 튜브 블록을 해제합니다. 스트리퍼를 빈 튜브 아래로 천천히 당겨 튜브가 스트리퍼 뒤에서 천천히 채워지도록 합니다. 스트리퍼 아래 섹션이 완전히 팽창할 때까지 또는 스트리퍼가 튜브 끝에서 1인치 이내에 있을 때까지 계속합니다.

튜브 스트리퍼의 핸들을 단단히 누르고 스트리퍼를 튜브 아래로 천천히 당기는 것이 중요합니다. 스트리퍼로 정지 지점에 도달하면 튜브 실러를 사용하여 스트리퍼보다 1인치 높은 튜브를 열 밀봉합니다. 이제 수동 튜브 스트리퍼의 핸들을 풉니다.

테스트 세그먼트를 만들기 위해 이전 씰보다 1-2인치 높은 열 밀봉을 다시 가열합니다. 그런 다음 혈소판 단위에서 테스트 세그먼트를 잘라냅니다. 이 세그먼트는 DLS 테스트에 사용됩니다.

비어 있지 않은 튜브에서 샘플링할 때는 백을 세로로 걸고 튜브 블록이 제자리에 있으면 분리합니다. 튜브를 육안으로 검사하여 상당한 고체 덩어리가 있는지 확인합니다. 단단한 덩어리가 있는 경우 그 위를 밀봉하여 가방에 벗겨지지 않도록 합니다.

그런 다음 튜브의 밀봉된 끝 부분에 최대한 가깝게 튜브의 튜브 스트리퍼를 닫습니다. 손잡이를 눌러 롤러 사이의 튜브를 짜서 튜브의 내용물을 가방에 벗겨냅니다. 클램핑력을 유지하면서 튜브를 따라 튜브 스트리퍼를 백 쪽으로 이동합니다.

걸이 고리에서 혈소판 백을 제거하고 스트리퍼를 닫은 상태에서 끝에서 끝까지 5번 기울여 5초 동안 백을 부드럽게 섞습니다. 스트리퍼를 닫은 상태에서 가방을 세로로 걸어두십시오. 스트리퍼를 빈 튜브 아래로 천천히 당겨 튜브가 스트리퍼 뒤에서 천천히 채워지도록 합니다.

스트리퍼 아래 섹션이 완전히 팽창할 때까지 또는 스트리퍼가 튜브 끝에서 1인치 이내에 있을 때까지 계속합니다. 스트리퍼로 정지 지점에 도달하면 튜브 실러를 사용하여 스트리퍼보다 1인치 위에 있는 튜브를 열 밀봉합니다. 스트리퍼를 해제한 후 이전 씰보다 1-2인치 높은 열 밀봉을 다시 하여 테스트 세그먼트를 만듭니다.

튜브의 마지막 부분을 잘라서 버립니다. 그런 다음 혈소판 단위에서 테스트 세그먼트를 잘라냅니다. 이 세그먼트는 DLS 테스트에 사용됩니다.

스플래시 쉴드와 깨끗하고 마른 가위를 사용하여 파우치 튜브 또는 테스트 세그먼트의 한쪽 끝을 자릅니다. 시료 채취 도구를 사용하여 모세관을 즉시 채우고 열린 파우치 또는 튜브 세그먼트에서 모세관으로 샘플을 직접 채취합니다. 채워진 모세관의 바닥을 모세관 실런트에 부드럽게 밀어 넣어 밀봉하고 트레이에 부드럽게 비틀고 약간의 압력을 가합니다.

그런 다음 모세관에서 100마이크로리터 고정 부피 피펫과 팁을 분리하여 모세관 실란트에 모세관이 단단히 박혀 있는지 확인합니다. 모세관 밀봉제 트레이에서 모세관을 제거하고 이소프로필 알코올 패드로 닦습니다. 모세관의 바닥을 부드럽게 튕겨 기포가 갇히지 않도록 합니다.

마지막으로 모세관을 DLS 시스템에 배치합니다. 시작하려면 콘솔을 시작하고 터치 스크린의 지침에 따라 로그인한 다음 미세입자 또는 MP 테스트 옵션을 선택하여 혈소판 샘플의 미세입자 함량을 측정하기 위한 새로운 DLS 테스트를 시작합니다. 바코드 스캐너를 사용하여 샘플 정보를 입력하거나 수동으로 입력합니다.

지시에 따라 모세관을 DLS 시스템에 놓고 테스트를 시작합니다. 테스트가 완료되면 모세관 홀더에서 샘플을 제거하고 시설 지침에 따라 소모품을 적절하게 폐기합니다. 혈소판 백에 결과에 해당하는 색상으로 태그를 지정합니다.

예를 들어, 주황색은 활성화되지 않은 경우 표시되고 분홍색은 활성화된 경우 표시됩니다. Dynamic Light Scattering은 브라운 운동에 의해 현탁액으로 움직이는 입자의 속도를 측정합니다. 다른 속도에 따라 작은 입자는 빠르게 움직이고 큰 입자는 천천히 움직입니다.

이 기술은 샘플의 크기 분포를 결정합니다. DLS는 이 수혈에 15% 미만의 미립자 함량을 기준으로 활성화되지 않은 혈소판이 포함되어 있는지 확인합니다. 참으로. 미세입자가 거의 없는 대부분의 원반형 혈소판은 현미경으로 볼 수 있었습니다.

그러나 육안으로 보기에는 첫 번째 백과 정확히 동일하게 보이는 다른 혈소판 수혈에는 15% 이상의 미립자 함량을 기반으로 한 활성화된 혈소판이 포함되어 있습니다. 이 샘플에서는 다양한 혈소판 형태, 작은 응집체 및 많은 미세입자를 현미경으로 볼 수 있었습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 혈소판 백에서 비침습적으로 샘플을 채취하여 모세혈관을 채우고 샘플의 미립자 함량을 테스트하여 혈소판 인벤토리를 최적으로 사용하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.

이 절차를 시도하는 동안 좋은 대표 샘플을 얻기 위해 가방을 잘 혼합하는 것이 중요합니다. 그리고 이 절차에 따라 유세포 분석과 같은 다른 방법을 수행하여 미립자의 세포 기원에 대한 질문에 답할 수 있습니다. 이 기술을 숙달하면 약 2분 30초 안에 수행할 수 있습니다.

5분 검사와 함께 혈소판 수혈은 8분 이내에 특성화할 수 있습니다. 개발 후 이 기술을 통해 병원 혈액 은행은 혈소판 목록을 검사하고, 활성화되지 않은 혈소판으로만 혈액학/종양학 환자를 치료하고, 사용된 혈소판 수혈의 감소를 관찰할 수 있었습니다. 앞서 말했듯이, 가장 안전한 수혈은 수혈하지 않는 수혈입니다.

이 방법은 수혈 전에 혈소판의 특성화에 대한 통찰력을 제공하지만, 공여자로부터 직접 혈소판이 풍부한 혈장을 검사하는 데에도 사용할 수 있습니다. 이 기술의 함의는 혈액암 환자의 치료에까지 미치는데, 이는 불응성 위험을 줄이는 비활성화 혈소판 수혈의 이점을 얻기 때문입니다.