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DOI: 10.3791/56919-v
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Vivo에서 시스템의 복잡성 트랜스-와 cis에 의해 활성화 노치 수용 체의 억제 사이 구별 하 게 어려운 게-ligands, 각각. 여기, 우리가 시험관에서 셀 집계 분석 실험의 트랜스를 초파리 노치의 바인딩 질적 및 반 정량적 평가 위한 기반 프로토콜 제시-ligands 대 cis-ligands.
이 응집 분석의 전반적인 목표는 Notch 수용체와 트랜스 리간드의 결합과 시스 리간드에 의한 억제를 평가하는 것입니다. 이 방법은 유전적 또는 약리학적 요인이 Notch 수용체와 리간드의 결합에 어떤 영향을 미치고 신호 전달을 변경하는지에 대한 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 Notch 수용체와 리간드의 트랜스 및 시스 결합을 평가할 수 있다는 것입니다.
흥미롭게도, 내인성 리간드의 중첩 효과를 포함하지 않습니다. 신호 수신 셀을 스핀다운하고 Schneider's Medium에서 재현탁하여 평가를 시작합니다. 혈구계를 사용하여 수동으로 세포를 계수합니다.
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