2018년 6월 7일
이 프로토콜 재발의 모델로 단련 장소 특혜 (CPP)를 설명합니다. 이 절차 갈망으로 마약 관련 환경 단서의 영향을 고려 하는 실험실 동물에서 재발의 측정을 허용 하 고 기권 중독자에 재발은 현재 약물 남용 치료 프로그램의 초점 이다.
이 절차의 전반적인 목표는 약물 관련 환경 신호 및 스트레스의 영향을 고려하여 실험실 동물의 약물 추구 행동의 회복을 평가하는 것입니다. 이 방법은 약물 중독 분야의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있으며, 예를 들어 약물 추구로의 재발을 조절할 수 있는 다양한 환경 조작의 역할과 같은 것입니다. 이 기법의 주요 장점은 CPP 복원이 맥락에 대한 접근 행동의 재출현에서 일관되게 약물과 쌍을 이루는 맥락 자극의 인센티브 동기 부여 가치의 재활성화를 반영하는 것으로 간주된다는 것입니다.
이 기술의 함의는 약물 재발의 윤리학으로 확장되는데, 이는 인간 재발의 주요 유발 요인인 다양한 환경 조작을 평가하는 데 유용하고 민감한 방법이기 때문입니다. 이 방법을 처음 사용하는 경우 복원 모델은 환경 변화에 매우 민감하기 때문에 어려움을 겪을 것입니다. 시술 중에는 방과 환경 조건이 일정하게 유지되어야 하며, 특히 이성의 동료, 소음 또는 조명 조건과 함께 있어야 합니다.
약물 및 스트레스로 인한 회복에 대한 반응은 결과에 영향을 미칠 수 있는 다양한 절차에 의해 수행됩니다. 특히 이러한 이유로 사회적 패배를 사회 복귀의 결정 요인으로 보여주는 것이 중요하다. 먼저, 테스트 3일 전에 각각 1-2분 동안 마우스를 다루십시오.
서면 프로토콜의 지시에 따라 동일한 상자, 검사실 및 코카인 용액을 설정하십시오. 매일 쥐를 집 케이지에 넣어 실험실로 데려오십시오. 쥐가 모든 테스트 관련 소음 및 자극에 익숙해지는 기간으로 15분 동안 방해받지 않고 앉아 있도록 합니다.
케이지에서 단두대 도어가 제거되었는지 확인하고 컴퓨터 설정을 시작합니다. 마우스의 ID를 입력하고 평가판 및 시작 명령을 누릅니다. 그런 다음 마우스를 상자의 중간 챔버에 놓고 시험실에서 소음을 최소화합니다.
시험이 완료되면 쥐를 집 우리로 다시 모으고 컴퓨터에 데이터를 저장합니다. 각 마우스가 3일 연속으로 하루에 15분 동안 상자의 두 칸에 액세스할 수 있도록 합니다. 셋째 날에는 각 마우스가 각 구획에서 보낸 시간을 기록합니다.
다음으로, 마우스의 절반을 한 칸에 약물을 투여하고 다른 절반을 다른 칸에 투여하도록 지정합니다. 먼저 쥐의 무게를 측정하여 적절한 코카인 복용량을 결정합니다. 그런 다음 적절한 용량의 코카인 또는 식염수가 함유된 주사기를 준비한다.
한 번에 각 마우스를 복강내로 주입하고 할당된 구획에 부드럽게 넣습니다. 4시간 후, 코카인을 주입하고 쥐를 약물 쌍을 이루는 구획에 30분 동안 가둡니다. 두 구획을 분리하는 단두대 문이 닫혀 있는지 확인하십시오.
컨디셔닝 후 테스트 당일에는 동물을 테스트실로 데려와 15분 동안 익숙해지도록 합니다. 단두대 도어를 제거하고 두 개의 구획을 분리하고 컴퓨터 프로그램을 설정합니다. 동물 ID를 입력하고 시작 명령을 누릅니다.
15분의 관찰 기간 동안 처리되지 않은 마우스가 상자 칸에서 보낸 시간을 기록합니다. 관찰 기간이 끝나면 쥐를 집 우리로 다시 모으고 컴퓨터에 데이터를 저장합니다. 매주 약물 쌍 구획에 대한 선호도를 보인 모든 쥐와 함께 멸종 세션을 수행합니다.
먼저 상자에서 단두대 문을 제거하고 동물을 상자에 15분 동안 넣습니다. 전체 그룹이 약물 쌍 구획을 선호하지 않는 것으로 나타나면 24시간 후에 테스트를 반복하여 소멸을 확인합니다. 약물로 인한 복권의 경우, 멸종이 확인된 후 24시간이 지나면 동물을 다른 방으로 데려가야 합니다.
그런 다음 이전 복용량의 절반 용량의 코카인을 주사하고 15분 동안 사육장에 다시 넣는다. 다음으로, 쥐를 실험실로 데려가 15분 동안 상자에 넣습니다. 각 마우스가 각 구획에서 소비하는 시간을 기록하고 컴퓨터에 데이터를 저장합니다.
스트레스로 인한 복권의 영향을 평가하려면 멸종이 확인된 후 24시간이 지나면 쥐를 다른 방으로 데려갑니다. 다음으로, 실험용 쥐를 공격적인 상대 쥐와 함께 플라스틱 케이지에 10분 동안 놓습니다. 적대적인 만남이 끝나면 실험용 쥐를 제거하고 실험실로 데려갑니다.
마지막으로 단두대 문을 제거하고 쥐를 상자에 15분 동안 보관합니다. 사회적 스트레스와 관련하여, 우리는 그 동물이 실제로 패배했는지를 확인해야 한다. 패배로 끝나지 않는 긍정적 인 사회적 만남은 코카인의 장소 선호의 회복을 막는 보호 효과를 보여줍니다.
CPP 프로토콜을 사용하여 이 연구의 수컷 마우스는 코카인의 재발을 측정하기 위해 다양한 환경 조작을 받았습니다. 프라이밍 유도 복원은 프라이밍 용량이 효과가 없는 것으로 확인될 때까지 후속 감소하는 프라이밍 용량을 받았습니다. 이 그림에서 볼 수 있듯이 코카인 1kg당 12.5, 6.25, 3.125, 1.56mg을 프라이밍하면 복귀에 상당한 효과가 있었습니다.
생쥐는 사회적 상호작용을 받았는데, 실험 동물은 스트레스로 인한 회복을 측정하기 위해 공격적인 상대에게 패배했습니다. 공격적인 동물에게 노출되어 실험 15분 전에 패배한 것은 이전에 소멸되었던 선호를 회복시키는 결과를 낳았다. CPP 시술 전에 반복적인 사회적 패배를 겪은 쥐는 코카인의 역치 미만 용량으로 인해 수정된 보상 효과를 보여주었습니다.
선호도가 사라진 후, 사회적으로 패배한 쥐는 코카인 1kg당 0.5mg에 불과한 프라이밍 용량으로 선호도를 회복했습니다. 크랙 중독 연구의 핵심은 갈망을 줄이고 결과적으로 재발에 대한 취약성을 줄이는 치료법의 개발이라는 것을 기억하는 것이 중요합니다. 정맥 투여와 같은 다른 방법은 강박성이나 약물 획득 동기와 같은 추가 질문에 답하기 위해 수행할 수 있습니다.
이 개발 후,이 기술은 약물 중독 분야의 연구자들이 쥐의 약물 추적으로의 복귀를 탐구 할 수있는 길을 열었습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 장소 선호도를 다시 설정하는 컨텍스트 또는 약물 단서와 같은 다양한 환경 조작을 통해 재발을 유도하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.
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본 프로토콜은 실험 동물의 재발 측정을 중심으로, 재발 모델로서의 조건 장소 선호도(Conditioned Place Preference, CPP)에 대해 설명합니다. 이 방법은 약물 치료 프로그램의 핵심 영역인 갈망과 재발에 있어 약물과 연관된 환경적 단서가 미치는 영향에 중점을 둡니다.
조건 형성 장소 선호도(Conditioned Place Preference, CPP) 재발 모델은 물질 사용 장애의 재발을 유발하는 환경적 트리거를 평가하기 위한 예측 프레임워크를 제공하며, 중독 치료제의 표적 검증을 지원합니다. 소거된 약물 탐색 행동의 단서 및 스트레스 유발 재발을 정량화함으로써, 이 분석법은 갈망 취약성을 감소시키고자 하는 화합물의 기전적 리스크 제거를 가능하게 합니다. 이러한 행동 판독 결과는 1차 강화에 영향을 주지 않으면서 동기 부여 가치를 조절하는 중재 방법을 식별함으로써 포트폴리오 결정에 정보를 제공합니다.
CPP 재발 실험은 표적 가설 검증부터 리드 최적화에 이르는 발견 연속체 과정에 부합하며, 재발 취약성에 영향을 미치는 화합물을 반복적으로 평가할 수 있게 합니다.