Name: 바른된 장소 기본 패러다임을 사용 하 여 마우스에 마약 추구의 복직 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 29 s
Description: 학습하세요 조건적 장소 선호(CPP) 방법으로 실험동물의 마약 재추구 행동을 평가하는 기법입니다. 환경 자극과 스트레스가 재발에 미치는 영향을 연구하여 중독 치료 전략 개발에 활용할 수 있습니다.

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Generalitat 발렌시아, PROMETEOII / 2014/063; 보건, 사회 서비스 및 평등입니다. 마약, 약물 의존성, 2014I007;에 대 한 연구 프로젝트에 국가 계획에 대 한 정부의 위임 경제와 경쟁력 (MINECO), 건강 연구소 카를로스 III, 중독성 질환 (RTA) RD12 / 0028/0005 네트워크와 RD16 / PSI2014-51847-R., 페더 자금 "una 마네 드 대처해 유로 파", 및 유럽 연합, 0017/0007

마우스 및 그들의 관리와 관련 된 모든 절차는 국가, 지역, 및 현지 법률 및 규정, 지침 2010/63/유럽 유럽의 회의와 2010 년 9 월 22 일의 위원회 사용 하는 동물의 보호에 있는 준수 과학적인 용도입니다. 동물 사용 및 발렌시아 대학교의 관리 위원회는 현재 프로토콜을 승인 했다.
1. 재료와 바른된 장소 기본 설정에 대 한 설정:
<ol><li>3 일 1-2 분 각 테스트 전에 쥐를 처리 합니다. 꼬리의 기지를 파악 한다. 시체는 가능 하면 지원 합니다. 이 동물을 처리할 때 통증과 고통을 최소화 하 고 간섭 변수, 스트레스 등을 방지 하기 위해 이루어집니다. 참고: 1 남성 생쥐의 60 일 이전 (젊은 성인) 35-40 g 무게 현재 실험에서 채택 되었다. 약물 유발 복직 남녀의 쥐에서 수행할 수 있습니다. 그러나, 스트레스 유발 복직에 관한 사회적 패배 패러다임 설계 되었습니다 남성 설치류에만 암컷으로 아니 주민 쥐에 적극적인 응답을 유도.</li>
	<li>장소 컨디셔닝에 대 한 동일한 상자 작은 중앙 회색 영역 (13.8 긴 × 31.5 cm 폭 × 높이 34.5)으로 구분 된 두 개의 동일한 구획 (30.7 cm 긴 × 31.5 cm 넓은 × 높이 34.5 cm)로 만든 사용 합니다. 참고: 구획 있고 다른 바닥 텍스처 벽 색 (검은 칸에 부드러운 층과 백색 것에 있는 거친 층). CPP 상자의 각 구획에는 4 개의 적외선 빛 광선 및 중앙 구획에서 6 포함 되어 있습니다. 동물의 위치와 구획 사이 횡단의 기록 수 있습니다.</li>
	<li>설정 최대 방 조명 (해제 또는 인하) 매일. 빨간 불 (권장)를 사용 하 여 동물 그것을 인식 하지 않습니다 하 고 실험 (약 40 럭 스 바닥 수준 1 미터에서 측정)에 대 한 감쇠입니다.</li>
	<li>사전 및 사후 컨디셔닝 위한 15 분을 등록 하는 프로그램을 설정 (소프트웨어에 대 한 재료의 표 참조) 테스트 (그림 2)</li>
	<li>모든 실험에 필요한 코카인 솔루션을 준비 합니다. 0.9% 염 산 코카인 분해 0.1 mL/10 g 몸 무게의 볼륨에 NaCl (염 분). 소용돌이 혼합물 그리고 하루의 끝에 4 ° C에서 저장소. 참고: 코카인 농도 연구의 목적에 따라 달라질 수 있습니다. 목표는 코카인의 subthreshold 복용량을 평가 하는, 1 mg/kg 농도 수 사용, 이전 연구24,35에서 보듯이 제어 동물에 효과적입니다. 효과적인 복용량은 목적, 선택, 효과적 하지만 복직24를 유도 하지 않습니다, 또는 25 mg/kg 농도 효과적 이며 기본 설정19의 복직을 유도 6 mg/kg 농도 될 수 있습니다.</li>
	<li>그들의 어두운 단계 동물을 테스트 하 고 각 동물에 대 한 같은 상자를 사용 하 여 일에 걸쳐.</li>
	<li>동물 매일 자신의 집 새에 시험장에 가져오고 그들을 두고 15 분 동안 그대로 habituation 기간으로 모든 테스트 관련 소리에.</li>
</ol>2입니다. 테스트
<ol><li>수집 참고: 장소 컨디셔닝, 초기 자연 환경 측면에서 편견의 절차의 3 단계 구성: 사전, 컨디셔닝, 조화와 후 컨디셔닝 (그림 1).<ol>
<li>
사전 컨디셔닝 (Pre-C) (3 일) (그림 2, 그림 3, 그림 4) 참고: 여기, CPP 상자에 구획의 중립 가치 평가 됩니다. 각 구획에 소요 된 시간을 측정 하 고 나중 후 컨디셔닝 테스트에서 동일한 구획에 있는 그것을 비교.<ol>
<li>테스트 룸에 동물을 가져오고 두고 15 분 동안 익혀 진다.</li>
			<li>길로 틴 케이지에서 제거 됩니다 확인 하십시오.</li>
			<li>컴퓨터와 프로그램은 설정 합니다. 동물 Id를 입력 하 고 "예 심" 및 "시작" 명령 (그림 2)를 누릅니다.</li>
			<li>부드럽게 중간 챔버 (회색 구획)로 마우스를 배치 하 고 최소 소음 테스트 룸을 두고.</li>
			<li>자신의 집 새에 다시 모든 동물을가지고 고 재판 완료 되 면 데이터를 저장 합니다.</li>
			<li>쥐 두 구획 15 분에 대 한 장치 액세스를 허용 (900 s) 하루에 3 일 연속.</li>
			<li>당일 3, 900 s 동안, 각 구획에 소요 된 시간을 적어 하 고 단계 (그림 3)에서 구획의 할당에 대 한 그것을 저장 합니다.</li>
			<li>절반 동물 약물 또는 차량 한 구획 (예를 들어, 검정), 그리고 (예를 들어, 흰색) (그림 4)는 다른 구획에 다른 반에 받을 각 그룹에 할당 합니다. 참고: 동물의 최종 배포 절반 동물의 처음 기본 구획 및 기본이 아닌 구획에 나머지 절반에 할당 된 확인 해야 합니다. 또한, 동물의 절반 한 구획 (예를 들어 검은 것)에 (이 경우에는 백색 것)에서 다른 나머지 절반 약을 받았다.</li>
			<li>그룹 그룹 (테스트 그룹 차이 분산 분석 (ANOVA)) 뿐만 아니라 두 구획 내에서 균형 점수. 대략적인 지침으로 값 주위 해야 한다 사전-C 테스트 (그림 4)에서 360-370 s. 참고: 중요 한 차이가 사전 C 테스트 기간 동안 마약-및 차량 결합 구획에 소요 된 시간 사이 감지 한다.</li>
			<li>강한 혐오 또는 어떤 구획에 대 한 선호 하는 동물을 제외 합니다. 구획, 33% 보다 적은 시간을 보내고으로 혐오를 고려 하 고 동물 동안에 그의 총 시간 67% 이상 선호를 고려.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
(4 일) 컨디셔닝 (그림 5)
		<ol>
<li>동물의 무게 그리고 코카인 복용에 대 한 이러한 가중치를 사용 하 여 조절 하는 동안.</li>
			<li>코카인 이나 몸 무게에 따라 식 염 수 주사기를 준비 합니다.</li>
			<li>한 번에 하나의 마우스를 intraperitoneally 주사 (ip) 즉시에 그들의 상자 할당 된 검정 또는 흰색 부분으로 부드럽게 장소.</li>
			<li>4 h의 간격, 후 마우스 30 분 (그림 5)에 대 한 약물 결합 구획에 수감 직전 약 복용량 주입.</li>
			<li>대체이 절차, 매일 2-4 한 일 1와 3, 그리고 염 분에 코카인으로 시작.</li>
			<li>감 금 수행 되는 두 경우 모두 단두대 문 두 구획을 구분 하 여 중앙 영역을 액세스할 수 없게 만들고 확인 합니다. 참고:이 단계에서 있다 PC 프로그램을 설정할 필요가 없습니다.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
후 컨디셔닝 (게시물-C) (1 일)
		<ol>
<li>테스트 룸에 동물을 가져오고 두고 15 분 동안 익혀 진다.</li>
			<li>두 구획을 분리 하는 단두대 문을 제거 합니다.</li>
			<li>컴퓨터와 프로그램은 설정 합니다. 동물 Id를 입력 하 고 "시작" 명령을 누릅니다.</li>
			<li>900 s 관찰 기간 동안 각 구획에서 다루어지지 않은 쥐에 의해 소요 된 시간을 기록 합니다.</li>
			<li>재판 완료 되 면 자신의 집 새에 다시 모든 동물을가지고 하 고 데이터를 저장 합니다.</li>
			<li>게시물-C 시 약물 결합 구획에 소요 되는 시간 크게 보다 크면 사전 C 테스트에 약 장소 특혜를 유도 했다는 것이 좋습니다. 반대 경우 약물 결합 구획에 대 한 혐오를 고려 하십시오.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>멸종
	<ol>
<li>약물 결합 구획에 대 한 선호를 개발 하는 모든 그룹/동물 주간 멸종 세션을 실시 합니다.</li>
		<li>15 분 (사전 및 포스트 C 테스트와 동일)에 대 한 동물 (길로 틴) 없이 장치에 놓습니다 (그림 1). 참고: 경우 복용량에는 CPP는 높은 (25mg/kg), 주당 1 멸종 세션 수행. Subthreshold 복용량 사용된 (1 mg/kg) 인 경우에, 다음 (예: 월요일, 목요일) 주당 2 멸종 세션을 수행 합니다.</li>
		<li>멸종 테스트에서 데이터 사전-C 테스트에 대해 차이 표시 하지 않습니다 하지만 그들은 게시물 C 테스트에 대해 차이 표시 할 때 소멸 하는 특혜를 고려 하십시오.</li>
		<li>멸종을 확인 후 24 시간 테스트를 반복 합니다.</li>
	</ol></li>
	<li>CPP의 복직
	<ol>
<li>
복직 못쓰게 유도
		<ol>
<li>멸종 확인 된 후 코카인 24 h의 못쓰게 복용량의 효과 평가 합니다. 참고: 못쓰게 복용량 반 이전 복용량 동물 컨디셔닝 동안 받은 있습니다. 복직 테스트 Pre-C와 포스트 C 테스트는 동일한 프로토콜을 겪 습, 제외 하 고 동물 비 파견에 코카인의 복용량을 받을 장소는 테스트 하기 전에 15 분. 복직 유발 약물 못쓰게의 효능 복용량의 순서36를 얻은 결과에 역할을 재생 하지 있지만 반복된 멸종/복직 경험23, 후 강화 될 수 있다.</li>
			<li>테스트 룸 (비 파견 장소)에서 다른 룸에 동물을가지고 (그림 6).</li>
			<li>코카인의 이전 복용량을 절반으로 그들을 주사 (예를 들어, 동물 25 mg/kg 코카인, 못쓰게 복용량으로 단련 된 경우 12.5 mg/kg을 될 것 이라고).</li>
			<li>15 분에 대 한 그들의 물고기 등을 맞댄 그들을.</li>
			<li>시험장에 그들을 데리고 고 15 분 (동일은 사전 및 포스트 C 테스트)에 대 한 즉시 (단두대 문을 분리 구획) 없이 장치에 동물을 배치.</li>
			<li>약물에 의해 유도 된 기본 설정의 복직의 정도의 측정으로 마지막 멸종 세션 복직 테스트 중 마약 한 쌍 구획에 소요 된 시간 (초)에서 차이 고려 하십시오.</li>
			<li>그것까지 복용량을 감소 효과가 되도록 확인은 때마다 멸종 복직 절차를 반복 합니다. 참고: 식 염 수 주입 제어 코카인 못쓰게 (그리고 주입 자체의 아닙니다) 용량 제어를 사용할 수 있습니다 복직을 유도 하.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
스트레스 유발 복직
		<ol>
<li>멸종 확인 된 후 스트레스 유발 복직 24 h의 효과 평가 참고: 복직 테스트는 동일 제외 하 고는 동물 15 분 테스트 후에 agonistic 사회적 패배 발생 (그림 6) 포스트-c (15 분 무료 ambulation) 실시</li>
			<li>다른 룸에 CPP 룸에서 동물을 가져가 라.</li>
			<li>동일한 나이 및 플라스틱 케이지 (그림 6)에 몸 무게의 일치는 적극적인 상대 섹스와 실험 마우스를 놓습니다. 참고: agonistic 발생 실험 마우스에 대 한 패배 결과 중립 투명 플라스틱 케이지 (23x13.5x13cm)을 10 분 테스트로 구성 됩니다. 적극적인 상대를 준비 하려면 먼저 실험 쥐로 3 주에 대 한 나이 및 몸 무게에 일치 하는 다른 동물을 격리 합니다. 전투 경험을 습득 하 고 공격적인 영토 행동의 높은 수준의 그들을 테스트 하도록 훈련. 적극적인 conspecifics를, 마우스 되어야 최소한 3 주 동안 격리 하며 다음 훈련 공격적 행동을 공격 하 고. 동물 쌍에 그들을 직면 하는 중립 환경에서 훈련 된다. 우리 게 물린 상대 2 또는 3 시간 하 고, 감 금 소에서 그들을 얻을 전에 두 쥐 중 하나 제출, 쇼에 적극적인 행동을 강화 하는 발생의 경험을 훈련 항상 결말. 침략 (위협과 공격에서 적극적인 conspecific)을 일으켰던 실험 쥐 회피/도망 및 방어/복종 행동을 제시 해야 합니다. 기준 패배, 수직 복종 위치 특징의 특정 자세를 채택, forepaws, 회반죽 각된 머리, 다리를 절 며 이며 철회 귀 (그림 6). 버크 그 외 여러분, 2016 년에 침입자에 대 한 복종 부정사 자세를 표시 하는 경우 발생 하는 사회를 이전 종료 고려 > 8 s 또는 13 공격 물기에 발생 한 경우. 중요 한 상해의 위험 없이 화면 동물을 또 다른 옵션 구멍, 통과 하 중 동물에 대 한 충분히 큰 메쉬에에서 동물을 속도를 수 있습니다.  침략 공격적인 행동을 직접 쓰는 동물 없이 검출 될 수 있다.  동물 상처 직경 및/또는 근육의 직접적인 노출에서 1 cm와 부상 격려, 그것은 연구에서 제외 하 고 안락사 해야.</li>
			<li>Agonistic 발생의 10 분 후 쥐 시험장으로 고 15 분 (동일은 사전 및 포스트 C 테스트)에 대 한 즉시 (단두대 문을 분리 구획) 없이 CPP 기구에 동물을 배치.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>3. 통계 분석
참고: 이상적인 샘플 크기 그룹 당 15 동물의 최소 이어야 합니다.
<ol><li>와 함께 한 변수, 치료, 사이 혼합된 ANOVA를 사용 하 여 그룹의 약 결합 구획에서 보낸 평균 시간 분석 (제어 그룹, 실험적인 그룹, 두 그룹의 예는 그림 7 c)는 두 가지 수준, 변수-일, 내 한 2 레벨 (Pre-C와 포스트 C) 참고: 제어 그룹에서 동물 약을 받을 하지만 아무 환경 조작. 다른 한편으로, 실험 그룹 동물 다른 환경 조건에 노출 됩니다. 사전-C는 약에 감도에 어떤 중요 한 차이가 있다면 확인 하는 테스트 존중과 게시물 C 하루에 마약 한 쌍 구획에 소요 하는 시간을 비교 합니다.</li>
	<li>또한, Bonferroni 포스트 hoc 분석 중요 한 점수 중 하나를 확인을 수행 합니다.</li>
	<li>멸종-복직 절차 하지만 마지막 순간에는 실험의 과정에서 계속 하 Student´s t-테스트를 통해 개발된 환경 분석 그들 그룹에 멸종 및 복귀 값에 관련 된 데이터 분석 와 함께 ANOVA와는 변수 내에서 (일)에 따라 각 그룹 수준 수와. 참고: 비교의 수를 증가 하는 때 중요 한 것 그의 기회 또한 증가. 따라서, 가양성 (유형 1 오류) 되지 않도록 우리 ' 올바른 ' 여러 t-테스트에 대 한 Bonferroni 보정으로 더 보수적인 테스트 함으로써 p 가치. 그러나, 복직 테스트에 대 한 비교 여야 한다 복직 테스트 및 마지막 멸종 테스트 사이. 따라서, 교정에 대 한 필요가 있다.</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

마약 중독 연구의 핵심 치료를 갈망을 감소 하 고, 따라서, 타락에 취약성을 줄이기의 개발 이다. CPP 패러다임의 복직 모델 덕분에 재발, 미래 연구의 우선순위를 조절 하는 다른 절차와 환경 요인의 영향을 연구 가능 하다. 있다, 고려해 야 할 몇 가지 중요 한 포인트 CPP 패러다임은 환경 요인에 매우 민감한 테스트.
수정 및 문제 해결: 복직 모델의 CPP 버전 관심의 약물에 따라 수정할 수 합니다. 조건된 기본 설정, 기간 및 컨디셔닝 세션 수 등의 크기에 영향을 미칠 수 있는 다른 요인이 있다. 연결 수는 일반적으로 가장 일반적인 4 6 1에서 범위. 컨디셔닝 테스트 기간 약물의 약 동학의 특성에 따라 설정 됩니다.
그래서 필요한 시간을 줄이기 위해 프로토콜을 사용 하 여 유용 CPP 연구는 일반적으로 많은 시련을 포함 한다. 이것을 위해 시험의 수를 줄이기 위해 이며 또 다른 방법은 현재 ...

장소 설정 조절 (CPP) 패러다임 다양 한 자극1,2에 의해 유도 된 조건된 보상 평가의 간단한 방법을 제공 하 고 습 관성 약3의 바른된 보람 효과 연구를 광범위 하 게 사용 되었습니다. . 그것은 파블로프 조절, 습 관성 행동4를 유지 하기 위한 환경 단서 약물 관련의 동기 부여 값 평가에 기반. 이 모델에서는 환경 단서 확보 보조 appetitive 속성 (바른된 보람 효과) 기본 reinforcer3쌍이 될 때. 예를 들어 (CPP 장에 한 구획의 색깔) 등 처음 중립 장소 일부 동안 남용 약물의 특정 효과와 결합은 다른 구획은 차량의 주사와 연결 하는 동안 세션5, 컨디셔닝. 동물 이전 약물과 관련 된 구획에서 더 많은 시간을 보낸다면 컨디셔닝, 다음, 그것은 가정 CPP3를 개발 했다. 특혜의 설립은 기본 reinforcer 약에 연결 된 환경 단서에 양수 값을 제공 하는 동물 때 이루어집니다. 따라서, 동물 그 문맥 단서6응답에서 행동 약 찾는 응답을 수행 합니다. 특정 조건 (예를 들어, 이전 사회 패배에서 겪어) 동물 인지 더 취약 하 고 민감한는 복용량을 보여주는 약의 subthreshold 복용량의 보람 속성의 평가 허용 하는 CPP 모델 없는 순진한 동물7에 효과적 이다.
CPP 모델 또한 현재 프로토콜의 목표는 재발3, 공부 하는 동물 모델으로 멸종/복직을 평가 하기 위해 사용 되었습니다. 3 개의 다른 단계가 있다: 수집, 멸종, 및 복직 (그림 1). CPP 복직 모델에서 동물 약 결합 구획, CPP 취득 하 고 그들은 여러 멸종 세션을 수행 하는 다음. 우리 정의 멸종 동물 되었습니다 조건된 보람 자극에 근사의 행동의 응답을 감소 하는 순간 제거 (예를 들어, 약)8. 멸종 세션 동안 동물, 약의 부재에 구획 인수 취향은 점차적으로 감쇠9찾아보기. 고려해 야 할 중요 한 문제는 동물 멸종 (마약 한 쌍 구획에 소요 된 시간에 진보적인 감소) 동안 전시 행동 변화 때문에 이전 배운된 응답와 경쟁 하는 새로운 학습 프로세스 수 또는 제목3의 내부 동기 상태에 있는 감소에. 마지막으로, 컨텍스트 또는 약물 신호를 통해 장소 특혜의 재건 립 복직1의 우리의 모델 것입니다.
관리 관련된 약물의 주사를 못쓰게 문맥 단서에 근사의 재건 립 이라고 여겨진다 환경 설정을 복원할 수 있습니다. 마약 못쓰게 복직 약물 갈망을 유도 하 고 보상 관련 환경 단서를 추구 하는 동물 동기의 즐거운 효과의 영구 메모리가 발생 합니다.
어떤 CPP 복귀 모델의 장점은 절차는 비-침략 적 (수술을 요구 하는 자기 관리)와, 저렴 하 고 간단. 또한,이 모델은 좋은 기준 타당성 인간10,11, 재발, 약12,13 에 다시 노출 등을 유도 하는 자극으로 복직을 유도 발생 잘 모방으로 또는 14스트레스.
멸종-정 맥 자체 관리의 복직 모델 같은 다른 기술이 있다. 여기, 동물 동물, compulsivity, 및 동기14,,1516의 작동 응답의 평가 허용 하는 약을 복용할 수 레버를 누릅니다. 자기 관리 절차는 CPP의 주요 장점은 CPP 복직 접근의 재현으로 구성 된 약와 컨텍스트 자극의 인센티브 동기 부여 값의 재 활성화를 반영 하는 것으로 간주 됩니다. 컨텍스트17에 행동입니다. 또한, 약물 자극, 스트레스, 등도 복직18,19를 유도할 수 있다. 예를 들어 한 자체 관리 연구 후 발 충격 또는 구속 스트레스20쥐에 있는 헤로인의 복직에 아무 효과 설명 합니다. 저자는 그것이 성공적 그 스트레스는 다른 맥락에서 자기 관리 챔버 외부 테스트 때문에 논의. 반면, 복직 CPP 모델을 사용 하는 경우에 거기 동일한 스트레스를 사용 하 여 후 모 르 핀 유도 CPP의 명확한 다시 설립 이었다 그는 CPP의 및 서로 다른 시간에 다른 문맥에서 적용 (0과 15 분 후 스트레스 노출)18 .
문학에서 여러 연구 약물 및 스트레스 유발 복직의 다른 방법으로 나타났습니다. 한편으로, 약물 유발 복직 쥐와 쥐 모 르 핀5,21,,2223, 코카인24,25, 암페타민26를 사용 하 여 보고 되었습니다. 27, 에탄올28,29, 그리고 3, 4-Methylenedioxymethamphetamine (환각제)30. 다른 한편으로, 스트레스에 노출 취약점 약물 남용 결정 요인 수 있습니다. 스트레스는 약7,,3132 의 보람 있는 효과 증가 알려져 있으며 타락에 있는 그들의 역할은 잘 설립된33,34. 예를 들어 패배는 conspecific와 사회적 상호 작용에서 모 르 핀 그리고 코카인 CPP18,19복원. 또한, 사회 패배를 반복 노출 동물 코카인의 subthreshold 복용량의 바른된 보람 효과에 더 취약 하 고 코카인7의 매우 낮은 복용량과 기본 설정 복원.
CPP 복귀 모델의 응용 프로그램 동물, 재발 취약점을 평가 하는 유용 하 고 중요 한 방법 이며 주요 트리거 같은 인간의 타락을 위협 하는 다른 미묘한 환경 조작, 평가 허용 약물 또는 스트레스 유발 효력 회복

<table><tbody><tr><td>MONPRE 2Z 소프트웨어</td><td>CIBERTEC S.A., 스페인</td><td>해당 없음</td><td></td></tr><tr><td>회색 중앙 영역으로 분리된 두 개의 동일한 크기의 구획이 있는 동일한 플렉시글라스 상자.</td><td>CIBERTEC S.A., 스페인</td><td>N/A</td><td>칸막이는 서로 다른 색상의 벽(검은색 vs 흰색)과 뚜렷한 바닥 질감(검은색 칸은 미세한 격자, 흰색 칸은 넓은 격자)을 가지고 있다. 모든 상자에는 상자의 각 칸에 4 개의 적외선 빔이 장착되어 있고 중앙 영역에 6 개의 적외선 빔이 장착되어있어 동물의 위치와 한 칸에서 다른 칸으로의 교차를 기록 할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>Cocaine hydrochloride</td><td>Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>동물: OF1 근친 교배 균주</td><td>Charles River, 스페인 바르셀로나</td><td>N/A</td><td>PND 42 및 PND 60에 실험실에 도착한 수컷 마우스가 CPP 테스트를 수행합니다. 이 동물들은 사회적 패배와 공격성 모델을 위해 특별히 지정되었다.</td></tr><tr><td>표준 다이어트- Teklad Global Diet 2014</td><td>Harlan Laboratories Models, S. L. (바르셀로나, 스페인)</td><td></td><td>에서 공급 13 kcal % 지방, 67 kcal % 탄수화물 및 20 % kcal 단백질; 2.9 kcal / g</td></tr><tr><td>고지방 다이어트 TD.06415</td><td></td><td></td><td>45 kcal %, 36 kcal % 탄수화물 및 19 % kcal 단백질; 4.6 kcal / g</td></tr></tbody></table>

바른된 장소 기본 패러다임을 사용 하 여 마우스에 마약 추구의 복직

Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

현재 프로토콜 약물 중독에서 재발의 모델로 단련 장소 특혜 (CPP)를 설명합니다. 이 모델에서 동물 약물 결합 구획, 바른된 장소 특혜를 얻으려고 훈련 먼저 하 고 후 컨디셔닝 테스트 후 그들은 설립된 특혜 소화 여러 세션을 수행. CPP는 마약 관련된 환경 단서의 바른된 보람 효과의 평가 허용합니다. 다음, 소멸된 CPP, 약의 못쓰게 복용량의 비 파견 관리와 스트레스 자극에 노출에 의해 견고 하 게 복원할 수 수 있습니다. 두 메서드 모두 여기 설명 될 것 이다. 동물 행동 응답 reinitiates, 복직 조건된 보상의 장소를 찍은 것으로 간주 됩니다.
이 프로토콜의 주요 장점은 그것은 비 침략 적, 저렴 한, 그리고 좋은 유효 기준으로 간단한입니다. 또한, 스트레스 또는 약물을 찾는 행동으로 재발을 조절 수 있는 다이어트 같은 다른 환경 조작의 연구 수 있습니다. 그러나 한 가지 한계는 경우 연구원 동기 부여 및 약물의 기본 강화 효과 탐구 하는 것을 목표로, 그것은 자기 관리 절차 보완 될 한다는 그들은 동물의 작동 응답을 포함.

첫째, 못쓰게 스트레스로 복직에서 대표적인 결과 성인 OF1 남성 마우스를 사용 하 여 그림 7 에 나와 있습니다.
그림 7b는 시간을 나타내는 데이터는 사전에 약 결합 compartment(s)에서 소비 하 고 포스트 C 테스트 반복된 측정 ANOVA (Pre-C와 포스트 C 비교) 과목 내에서 변수 일 분석 했다. 결과 변수 일의 중요 한 효과 보였다 [F(1,34) 51.179; = p < 0.001] 모든 동물 중 C에 비해 게시물 C 하루에 특혜를 개발, 모든 동물 25 mg/kg 코카인으로 단련 했다 고 멸종 했다 달성 한 그룹 받았다 복직 (그림 7a</stron...

이 프로토콜 재발의 모델로 단련 장소 특혜 (CPP)를 설명합니다. 이 절차 갈망으로 마약 관련 환경 단서의 영향을 고려 하는 실험실 동물에서 재발의 측정을 허용 하 고 기권 중독자에 재발은 현재 약물 남용 치료 프로그램의 초점 이다.

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...

이 절차의 전반적인 목표는 약물 관련 환경 신호 및 스트레스의 영향을 고려하여 실험실 동물의 약물 추구 행동의 회복을 평가하는 것입니다. 이 방법은 약물 중독 분야의 핵심 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있으며, 예를 들어 약물 추구로의 재발을 조절할 수 있는 다양한 환경 조작의 역할과 같은 것입니다. 이 기법의 주요 장점은 CPP 복원이 맥락에 대한 접근 행동의 재출현에서 일관되게 약물과 쌍을 이루는 맥락 자극의 인센티브 동기 부여 가치의 재활성화를 반영하는 것으로 간주된다는 것입니다.이 기술의 함의는 약물 재발의 윤리학으로 확장되는데, 이는 인간 재발의 주요 유발 요인인 다양한 환경 조작을 평가하는 데 유용하고 민감한 방법이기 때문입니다. 이 방법을 처음 사용하는 경우 복원 모델은 환경 변화에 매우 민감하기 때문에 어려움을 겪을 것입니다. 시술 중에는 방과 환경 조건이 일정하게 유지되어야 하며, 특히 이성의 동료, 소음 또는 조명 조건과 함께 있어야 합니다.약물 및 스트레스로 인한 회복에 대한 반응은 결과에 영향을 미칠 수 있는 다양한 절차에 의해 수행됩니다. 특히 이러한 이유로 사회적 패배를 사회 복귀의 결정 요인으로 보여주는 것이 중요하다. 먼저, 테스트 3일 전에 각각 1-2분 동안 마우스를 다루십시오.서면 프로토콜의 지시에 따라 동일한 상자, 검사실 및 코카인 용액을 설정하십시오. 매일 쥐를 집 케이지에 넣어 실험실로 데려오십시오. 쥐가 모든 테스트 관련 소음 및 자극에 익숙해지는 기간으로 15분 동안 방해받지 않고 앉아 있도록 합니다.케이지에서 단두대 도어가 제거되었는지 확인하고 컴퓨터 설정을 시작합니다. 마우스의 ID를 입력하고 평가판 및 시작 명령을 누릅니다. 그런 다음 마우스를 상자의 중간 챔버에 놓고 시험실에서 소음을 최소화합니다.시험이 완료되면 쥐를 집 우리로 다시 모으고 컴퓨터에 데이터를 저장합니다. 각 마우스가 3일 연속으로 하루에 15분 동안 상자의 두 칸에 액세스할 수 있도록 합니다. 셋째 날에는 각 마우스가 각 구획에서 보낸 시간을 기록합니다.다음으로, 마우스의 절반을 한 칸에 약물을 투여하고 다른 절반을 다른 칸에 투여하도록 지정합니다. 먼저 쥐의 무게를 측정하여 적절한 코카인 복용량을 결정합니다. 그런 다음 적절한 용량의 코카인 또는 식염수가 함유된 주사기를 준비한다.한 번에 각 마우스를 복강내로 주입하고 할당된 구획에 부드럽게 넣습니다. 4시간 후, 코카인을 주입하고 쥐를 약

reinstatement-drug-seeking-mice-using-conditioned-place-preference

Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

Reinrestore of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm (조건화된 장소 선호 패러다임을 사용한 마우스의 약물 탐색의 복원)

복직 절차로 알려진 재발의 동물 모델은, 약물 추구하는 재발 스트레스의 역할을 연구하기 위해 널리 사용되었습니다. 여기, 우리는 온화, 간헐적인 전기 footshock에 급성 노출을 통해 실험실 쥐에서 찾는 코카인의 복직을 유도하는 방법에 대한 리포트입니다.

실험실 쥐의 추구 코카인 Footshock 유발 복직을 유학을위한 절차

이 프로토콜에서는 마우스의 reinforcer으로 감각 자극을 사용하여 operant 학습하는 방법을 설명합니다. 이것은 사전에 훈련이나 음식 제한을 필요로하지 않으며 그것은 같은 음식으로 약리 또는 자연 reinforcer를 사용하지 않고 동기 행동의 연구를 수 있습니다.

마우스의 추구 Operant 감각

이 문서에서는 마우스의 뇌에 바이러스 벡터를 microinject하고 수집, 멸종 위기 및 회복 단계를 포함하는 에어컨 장소 환경 패러다임에서 테스트하는 방법에 대해 설명합니다.

크레 재조합이 코카인 컨디셔닝 장소 환경에있는 표적 유전자의 역할을 연구하는 표현 바이러스 성 벡터의 정위 미세 주입

이 프로토콜은 연구자들이 조건화된 장소 선호 및 운동 행동 민감성 분석을 사용하여 중독의 이러한 측면을 테스트하기 위해 고안된 실험을 수행할 수 있도록 하기 위한 것입니다.

코카인 유발 행동 과민성 및 마우스의 조건 장소 선호도 평가

큐 반응성 마약 복용 경험을 갈망 하 고 절제 인간에서 재발로 연결 된 단서에 감도로 개념입니다. 큐 반응성은 다음의 자체 관리 하 고 금 욕을 강요 큐 반응성 테스트에서 appetitive 접근 동작이 발생 하는 마약 관련 신호를 향해 측정 attentional 오리엔테이션에 의하여 쥐에서 모델입니다.

코카인 사용 장애의 쥐 모델에서 큐 반응성을 측정 하기 위한 프로토콜

여기, 모 르 핀 조절 장소 특혜 (CPP) 프로토콜은 쥐에 갈망의 부 화를 측정 하는 설명입니다.

쥐에 갈망의 부 화를 측정 하기 위한 바른된 장소 설정 프로토콜

여기에 설명 된 방법은 쥐의 행동 관련 회로에서 코카인으로 유도 된 가소성을 광학 유전 학적으로 역전시키는 데 사용되는 절차를 설명합니다. 시상 편도체 시냅스의 지속적인 저주파 광 자극은 장기 우울증 (LTD)을 유도합니다. 코카인 경험이 있는 쥐에서 생체내 광유전학적으로 유도된 LTD는 단서-동기 약물 탐색의 후속 감쇠를 초래하였다.

광유전학을 사용하여 신경 가소성을 역전시키고 쥐에서 코카인 추구를 억제

처벌이 부과 된 금욕을 추구하는 헤로인에 대한 강력한 급성 식량 박탈로 인한 재발을 보여주는 절차가 설명되어 있습니다. 처벌 부과 금욕 모델은 헤로인 자기 관리를위한 추구 및 테이크 체인 일정을 사용하여 성공적으로 구현되었습니다. 헤로인 추구 테스트는 24 시간의 식량 부족 스트레스 후에 수행됩니다.

처벌 부과 금욕 후 헤로인의 스트레스로 인한 재발을 연구하는 절차

우리는 객관적인 측정이 널리 채택 고무 손 착각 패러다임에 종사 할 수있는 방법을 보여줍니다. 이 측정은 잘 확립 crossmodal 일치 성은 작업을 수정하여 얻을 수 있습니다. 이 작업은 고무 손 착각에서와 같이 신체 표현의 변조에 중요한 감각적 프로세스를 조사 할 수 있습니다.

고무 손 환상 패러다임에서 목표 행동 측정을 확보하는 수단으로 Crossmodal 일치 성은 작업

절차는 쥐에서 알코올 추구 행동의 갱신을 설명한다 트리거 알코올 연관된 환경 콘텍스트의 용량을 연구.

절차 흰쥐의 파블로프 에어컨 알코올 추구 행동의 상황에 의한 갱신을 준수합니다

학습하세요 조건적 장소 선호(CPP) 방법으로 실험동물의 마약 재추구 행동을 평가하는 기법입니다. 환경 자극과 스트레스가 재발에 미치는 영향을 연구하여 중독 치료 전략 개발에 활용할 수 있습니다.

바른된 장소 기본 패러다임을 사용 하 여 마우스에 마약 추구의 복직

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