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생쥐의 본능적 인 방어 하는 동안 공간 메모리의 역할을 조사에 대 한 행동 분석 결과
생쥐의 본능적 인 방어 하는 동안 공간 메모리의 역할을 조사에 대 한 행동 분석 결과
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JoVE Journal Behavior
A Behavioral Assay for Investigating the Role of Spatial Memory During Instinctive Defense in Mice

생쥐의 본능적 인 방어 하는 동안 공간 메모리의 역할을 조사에 대 한 행동 분석 결과

Full Text
10,102 Views
05:49 min
July 21, 2018

DOI: 10.3791/56988-v

Ruben Vale1,2, Dominic Evans1,2, Tiago Branco1,2

1UCL Sainsbury Wellcome Centre for Neural Circuits and Behaviour, 2MRC Laboratory of Molecular Biology

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 프로토콜 분석 결과 행동, 반 즈 미로 테스트에 따라, 어떻게 본능적 인 방어 연구 작업 공간 환경 지식에 의해 수정 됩니다.

이 분석은 동물이 최근에 학습한 목표 위치를 향해 어떻게 이동하는지와 같은 공간 기억 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 패러다임의 주요 장점은 잘 통제된 감각 자극에 의해 유발되는 병인학적으로 중요한 목표 지향적 탐색 행동을 이끌어내고 마우스에 대한 사전 훈련을 필요로 하지 않는다는 것입니다. 먼저 플랫폼 주변에 시각적 신호를 첨부하여 쥐가 접근하지 못하도록 가장자리에서 최소 2cm 떨어져 있어야 합니다.

대피소를 플랫폼에 부착합니다. 그런 다음 대피소 입구에 발광 다이오드(LED)를 배치하여 지역의 시각적 랜드마크 신호를 제공합니다. 다음으로, 외부 원위 시각 신호로부터 마우스를 격리하기 위해 경기장 주변의 플랫폼 표면 위로 40cm, 아래로 15cm 연장되는 팔각형 벽을 조립하고 플랫폼 가장자리에서 10cm 떨어진 곳에 배치합니다.

초음파 스피커를 플랫폼 중앙에서 50cm 위에 배치하여 혐오적인 청각 자극을 전달하고 사운드 카드와 앰프를 스피커에 연결합니다. 그런 다음 경기장 위 64cm에 반투명 스크린을 배치하여 프로젝터를 사용하여 머리 위에 혐오적인 시각적 자극을 다시 투사합니다. 플랫폼 표면 중앙에 5-10개의 러그가 있도록 프로젝터 조명을 보정합니다.

적외선과 손실 통과 필터가 있는 적외선 카메라를 플랫폼 위에 배치하여 획득한 비디오에서 보호기 깜박임을 방지합니다. 그런 다음 외부 신호가 실험에 영향을 미치지 않도록 방음 상자 안에 행동 장치를 놓습니다. 마지막으로 시중에서 판매되는 소프트웨어를 사용하여 온라인에서 마우스의 위치를 추적합니다.

경기장 위에 위치한 화면에 시각적 자극을 투사하는 것으로 시작합니다. 온라인에서 마우스의 위치를 추적하고 시각적 자극을 동물 위의 중앙에 배치하기 위해 이전에 정의된 시각적 자극의 위치에 해당하는 경기장의 관심 영역을 미리 정의합니다. 다음으로, 3초 동안 총 9초 동안 17에서 20kHz까지 3개의 주파수 변조 업스윕 트레인으로 구성된 청각 자극을 테스트합니다.

먼저 플랫폼 표면을 70% 에탄올로 꼼꼼하게 청소하여 원치 않는 후각 신호를 제거합니다. 대피소를 물과 70% 에탄올로 헹구고 다시 한 번 물로 씻어 에탄올 냄새를 가르칩니다. 플랫폼이 젖었을 경우 쥐가 대피소에 들어가는 것을 피할 수 있으므로 플랫폼과 대피소를 모두 완전히 말리십시오.

실험 전에 플랫폼을 회전하여 각 시도마다 플랫폼의 대피소 위치를 변경합니다. 다음으로, 마우스를 가정용 케이지에 있는 실험실로 가져오고 10분 동안 적응 기간 동안 케이지를 테스트 플랫폼 옆에 놓습니다. 쥐의 집 우리에서 대피소 내부로 2g의 침구를 추가하여 지역 후각 신호로 사용합니다.

홈 케이지에서 마우스를 제거하고 꼬리로 회수하지 마십시오. 컵에 넣거나 들어 올릴 수 있는 강화 항목 위로 올라가게 하십시오. 그런 다음 마우스를 경기장 중앙에 부드럽게 놓고 비디오 획득을 시작합니다.

7분 동안 습관화하는 시간을 가지며, 이 시간 동안 혐오스러운 자극이 나타나지 않습니다. 마우스가 네 개의 팔다리가 모두 대피소 안에 있을 때 적어도 한 번은 대피소를 찾아 들어갈 수 있는 충분한 시간을 갖도록 합니다. 다음으로, 동물이 미리 정의된 관심 영역에 도달하면 마우스 위에 중앙에 있는 시각적 자극의 전달을 자동 또는 수동으로 트리거합니다.

동일한 세션에서 두 개 이상의 탈출 반응을 유도하려면 마우스가 자발적으로 대피소를 떠날 수 있도록 허용합니다. 분석이 완료되면 동물을 집 우리로 되돌립니다. 마지막으로, 다음 동물을 테스트하기 전에 플랫폼과 보호소를 청소하십시오.

청각적 또는 시각적 자극에 노출된 쥐는 자극의 시작과 비행 시작 사이의 짧은 잠복기로 빠른 탈출 반응을 시작했습니다. 자극에서 벗어나기 위한 평균 잠복기는 시각 자극보다 청각 자극에서 훨씬 더 길었습니다. 또한 대피소로의 탐색은 정확했고 비행 궤적은 자극 유형을 가로질러 직선에 가까웠습니다.

피난처가 없는 미로에 7분 동안 순응한 후, 긴 시각적 자극이 나타나자 탈출 대신 얼어붙는 행동이 일어났다. 이 기술을 마스터하면 제대로 수행하면 90분 안에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 시각적 자극을 마우스의 머리 위 또는 위에 제시하는 것을 기억하는 것이 중요하며, 마우스가 플랫폼의 가장자리를 조사하는 동안에는 자극을 놓칠 수 있으므로

그렇지 않습니다.

개발 후,이 기술은 본능적 행동 분야의 연구자들이 생쥐의 본능적 방어 행동에 대한 학습 된 지식의 통제를 탐구 할 수있는 길을 열었습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 마우스에서 방어 행동을 유도하는 방법과 탈출 응답 중 공간 탐색을 연구하는 데 마우스를 사용하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.

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