Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

Lauren Green; Cody J. Smith

doi:10.3791/57024

JoVE Journal
Developmental Biology

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JoVE Journal Developmental Biology

Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

생활 그대로 Zebrafish에 단일 셀 Photoconversion

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09:49 min

March 19, 2018

DOI: 10.3791/57024-v

Lauren Green^1,2, Cody J. Smith^1,2

¹Department of Biological Sciences,University of Notre Dame, ²Center for Stem Cells and Regenerative Medicine,University of Notre Dame

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

여기, 우리가 어떻게 셀 photoconversion 형광 단백질, Eos, 살아있는 동물을 표현 하는 특정 영역에 자외선 노출을 통해 이루어집니다 보여 프로토콜 제시.

이 광변환 기술의 전반적인 목표는 단일 동물의 단일 세포를 다른 형광 세포 집단과 구별하는 것입니다. 이 방법은 해당 분야의 주요 발달 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있으며 시간 경과에 따른 단일 세포 이동을 시각화할 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 최소 침습적이며 단일 세포 또는 더 큰 집단을 라벨링하는 데 사용할 수 있다는 것입니다.

또한 사용자는 특정 관심 영역을 선택하고 원하는 대상을 사진 변환할 수 있습니다. 광변환 단백질을 발현하는 형질전환 제브라피쉬를 수컷과 암컷으로 짝짓기하고 텍스트 프로토콜에 따라 난자를 채취한 후, 488나노미터 광원과 GFP 필터 세트가 있는 해부 현미경을 사용하여 24개의 hpf 배아를 스크리닝합니다. 바늘이나 핀셋을 사용하여 배아를 수동으로 분리하십시오.

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