고기 건조 하는 동안 미생물 부하에 백 리 향 에센셜 오일의 응용 프로그램의 효과

이 실험의 전반적인 목표는 증기 단계에 적용된 타임 에센셜 오일이 육류 건조 과정에서 효과적인 방부제 역할을 할 수 있는지 평가하는 것입니다. 이 방법은 합성 방부제 대신 천연 방부제를 효과적으로 적용하는 방법과 같은 식품 가공 및 안전 분야의 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 고기가 건조되는 동안 타임 에센셜 오일을 빠르고 균일하게 분배할 수 있고 모든 증기를 액체 오일 적용의 경우보다 적은 부피로 사용할 수 있다는 것입니다.

이 방법을 사용하면 건조육의 안전성과 품질을 향상시킬 수 있는 통찰력을 얻을 수 있으며 다른 바람직하지 않은 미생물에 대한 다른 식품의 처리에도 적용할 수 있습니다. 일반적으로 이 방법을 처음 접하는 개인은 박테리아의 수를 세는 데 사용되는 드롭 플레이트 방법에는 적절하게 준비된 플레이트와 연습이 필요하기 때문에 어려움을 겪을 것입니다. 지역 정육점에서 쇠고기 짧은 등심 하나를 구하여 구입 후 20분 이내에 밀봉된 백에 담아 상온에서 실험실로 옮깁니다.

층류 안전 캐비닛에서 짜낸 병에서 분사된 10% 에탄올을 70초 동안 도포하여 쇠고기 근육의 외부 표면을 살균합니다. 그런 다음 멸균 기술을 사용하여 근육의 바깥 표면을 잘라내어 제제에 에탄올이 남지 않도록합니다. 그런 다음 근육을 밀봉된 가방에 넣고 섭씨 영하 18도에서 하루 동안 얼립니다.

다음날, 얼어붙은 근육을 섭씨 4도에서 6시간에 걸쳐 해동합니다. 그런 다음 층류 안전 캐비닛에서 고기 절단기를 사용하여 0.5cm 두께의 조각을 만듭니다. 그리고 조각의 크기를 5x2.5 평방 센티미터 직사각형 샘플로 더욱 줄입니다.

보관을 위해 샘플을 비닐 봉지에 포장하고 냉동실에 보관하십시오. 층류 안전 캐비닛에서 육류 샘플을 접종하기 위해 E.coli ATCC 25922의 표준화된 접종물을 준비합니다. 접종을 위해 알루미늄 호일 시트에 최소 4개의 샘플을 정렬합니다.

그런 다음 두 번째 호일 시트에 그만큼의 샘플을 로드하여 접종되지 않은 대조군 역할을 합니다. 다음으로, 400마이크로리터의 접종물을 한쪽 면에 바르고 멸균 세포 살포기를 사용하여 표면에 부드럽게 펴 바르는 방식으로 각 샘플을 접종합니다. 그런 다음 샘플을 10분 동안 건조시킵니다.

그런 다음 핀셋으로 샘플을 뒤집고 샘플당 총 800마이크로리터의 접종물에 대해 절차를 반복합니다. 그 후, 접종된 원료시료 중 2개와 접종되지 않은 대조군 2개의 접종 효율을 확인합니다. 그리고 나머지 샘플은 호일로 싸십시오.

원료 샘플을 펩톤 물에 10분 동안 실온에서 140rpm으로 흔들어 세척합니다. 세척 후 Microtiter 플레이트에 박테리아가 포함된 목욕물을 10배 연속 희석하여 5회 만듭니다. 다음으로, 멀티채널 피펫을 사용하여 6x6 방울 방법을 사용하여 MacConkey 한천 및 플레이트 수 한천이 있는 플레이트에 각 희석액을 5마이크로리터 방울 적용합니다.

방울은 한천에 빠르게 흡수되어야 합니다. 6x6 방울 방법으로 희석액을 배양하려면 플레이트 카운트 한천 플레이트와 MacConkey 한천 플레이트를 적절하게 건조시켜 방울이 한천에 빠르게 흡수되도록 합니다. 그런 다음 접종된 플레이트를 섭씨 37도에서 24시간 동안 배양합니다.

백리향 에센셜 오일을 증기로 도포하기 위해 고기 건조 오븐을 준비하십시오. 12x20cm 여과지에 79% 티몰을 함유한 원하는 부피의 TEO를 담급니다. 이제 호일에 남아있는 샘플을 여과지와 함께 TEO로 준비된 건조 오븐으로 옮겨 6 시간 동안 건조시킵니다.

동시에 TEO가 없는 고기 건조 오븐에서 대조군 샘플 세트를 처리합니다. 건조 후 박테리아 처리된 샘플에서 E.coli의 생존을 평가하려면 한 번의 교체로 펩톤 물로 샘플을 세척하는 동일한 절차를 반복합니다. 이 경우 10분 동안 흔든 후 수조의 샘플을 섭씨 37도의 인큐베이터로 옮겨 6시간 동안 농축 전 배양을 합니다.

사전 농축 후 이전과 같이 목욕물을 10배 희석하여 5회 만듭니다. 그런 다음 6x6 드롭 방법을 사용하여 검출 플레이트에 희석액을 심고 24시간 동안 플레이트를 배양합니다. 다음날, 고기 그램당 식민지 형성 단위를 결정합니다.

플레이트에서 흰색 반점으로 나타나는 중온성 호기성 박테리아의 존재 여부를 검사하고, 한천을 세고, 빨간색에서 짙은 분홍색으로 나타나는 MacConkey 한천의 전형적인 대장균 군락을 계산합니다. 미생물 데이터를 분석하려면 개수를 그램당 CFU 로그로 변환하고 변형 분석을 사용하여 처리의 주요 영향을 확인합니다. 건조 과정에서 모든 대장균이 제거되는 것은 아닙니다.

일부 박테리아는 생존 가능하지만 배양할 수 없는 상태로 들어갑니다. 따라서 고기를 고온 및/또는 다습한 환경에서 부적절하게 보관하면 이러한 박테리아가 다시 생존할 수 있게 되어 소비자에게 잠재적으로 해를 끼칠 수 있습니다. 건조하는 동안 다른 용량의 TEO로 고기를 처리하면 대장균을 완전히 또는 부분적으로 제거할 수 있습니다.

육류 샘플에 있는 호기성 박테리아와 장내 간균의 수는 PCA 및 MCA 플레이트에서 측정되었습니다. 1.5ml의 TEO를 적용했을 때 6시간의 사전 농축 단계 후에도 박테리아의 성장이 관찰되지 않았습니다. 이 선량은 공기 1리터당 0.028밀리리터의 TEO 증기에 해당합니다.

이 비디오를 시청한 후에는 건조 중 에센셜 오일의 증기상으로 고기를 처리하는 방법을 잘 이해하고 최종 제품에서 생존 가능한 박테리아의 수를 평가해야 합니다. 이 절차 외에도 관능 평가 및 GC 분석과 같은 다른 방법을 수행하여 최종 제품에 대한 소비자 수용 가능성 및 백리향 에센셜 오일 잔류물의 양에 대한 추가 질문에 답할 수 있습니다. 고기 절단기와 병원성 박테리아로 작업하는 것은 위험할 수 있으므로 항상 적절한 보호 장비를 착용하고 층류 안전 캐비닛을 사용하는 등의 예방 조치를 취해야 한다는 것을 잊지 마십시오.