Name: 허 혈 성 뇌졸중의 쥐 모델에서 뇌혈관 장애의 비보에 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-11T14:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 19 s
Description: 학습하세요 허혈성 뇌졸중 쥐 모델에서 혈관내 실 삽입법으로 뇌혈관장벽 손상을 평가하는 재현성 높은 생체 내 기법을. Evans Blue 염료 투과성 측정으로 뇌졸중 후 장벽 기능을 정량 분석합니다.

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저자는 재정 지원에 대 한 아르다 빌 대학 의료 과학 (아르다 빌, 이란)의 연구에 대 한 부 장관에 게 감사 (No를 부여: 9607).

모든 절차는 동물 연구를 실시 위한 아르다 빌 대학교 의료 과학 연구 위원회의 지침에 따라 수행한 (윤리적 ID 번호: 적외선 ARUMS입니다. REC.1394.08).이 시각된 연구에서 사용 하는 성인 남성 Sprague-Dawley 쥐 (300-350 g) 목초지 연구소 (테헤란, 이란)에서 얻은.
1. 마 취와 Flowmetry
<ol><li>4 %isoflurane 사용 하 여 마 취를 유도 하 고 수술 하는 동안 질소 산화물 (70 %v / v)와 산소 (30 %v / v)의 혼합물에 isoflurane (1-1.5%)으로 유지 합니다.</li>
	<li>피드 백 제어 난방 담요에 발생 하기 쉬운 자세에서 anaesthetized 동물을 놓고이 난방 장치에 연결 된 프로브를 직장에 의하여 37±0.5 ° C에서 체온을 유지 합니다.</li>
	<li>건조를 방지 하기 위해 양쪽 눈에 안과 연 고의 작은 금액을 적용 합니다.</li>
	<li>전기 면도기와 두개골의 왼쪽에 외과 영역을 면도. 거 즈 패드와 함께 betadine 솔루션을 사용 하 여 피부를 소독. 린스이 지역 메 마른 패드 70% 에탄올을 포함 하 고 3 주기17두 단계를 반복 합니다.</li>
	<li>진통, 대 수술 지역17에 0.5 %bupivacaine 0.2 mL을 피하 주사.</li>
	<li>(왼쪽된 눈의 측면 법에서의 왼쪽된 귀에 확장 되는) 두개골에 1cm 긴 피부 절 개를 하 고 두개골 노출 왼쪽된 temporalis 근육 해 부. 그런 다음 만들 작은 버 구멍 5mm 측면 하 고 1mm 도플러 유량 계 연필 프로브 팁의 용이성 배치 bregma18 후부.</li>
	<li>경향이 부정사의 위치에서 쥐 바뀌고 레이저 연필 조사 지역 대뇌 혈 류 (rCBF)을 모니터링 하는 데 이전 드릴된 두개골 블라인드 구멍에 넣어.</li>
	<li>각 동물의 초기 rCBF를 기록 하 고 100%로 이것을 고려 하십시오. 특히, 중간 대뇌 동맥 폐색 (MCAO) rCBF의 80%에 감소는 검색된19,20때마다 시작 됩니다.</li>
</ol>2입니다. 초점 Cerebra 허 혈의 유도
<ol><li>목 영역을 면도 하 고 betadine 솔루션 및 70% 에탄올으로 피부를 소독. 진통17수술 사이트에서 피하 0.5 %bupivacaine 0.2 mL를 주사.</li>
	<li>좌 일반 경 동맥 (LCCA) 액세스할 수 목의 복 부 표면에 2 cm 긴 외과 절 개를 확인 합니다. 외부 경 동맥 (ECA) 및 내부 경 동맥 (ICA)의 분기점에 액세스 하려면 인접 근 막과 미주 신경에서 LCCA를 격리 합니다.</li>
	<li>LCCA 또는 5-0 비단 봉합 사를 고용 하는 ECA 영구적으로 선 하 고 ICA pterygopalatine 동맥의 수준에 무료 부.</li>
	<li>느슨하게 LCCA, 주위 5-0 비단 봉합의 넥타이 배치 후 일시적으로 사라지는 혈관 마이크로 클립 클램프.</li>
	<li>이전 배치 느슨한 넥타이 이전 LCCA에 작은 절 개를 하 게 다음 ICA의 luminal 공간에 4-0 실리콘 코팅 나일론 봉합을 삽입 하 고 나일론 봉합 확보 및 혈액 누수 방지 LCCA 주위 봉합 조입니다.</li>
	<li>ICA에서 혈관 마이크로 클립을 제거 합니다. 그런 다음, MCA 근원의 폐색을 나타내는 rCBF에 표시 된 감소를 관찰까지 실리콘 코팅된 intraluminal 필 라 멘 트를 사전. 허 혈 성 기간 (90 분)의 끝에, intraluminal 봉합21철수 여 reperfusion를 시작 합니다.</li>
</ol>3. 경 정 맥 Cannulation 및 에반스 블루 (EB) 주입
<ol><li>1 cm 세로 절 개를 목에는 중간의 왼쪽을 만들고 퉁 명 스럽게 왼쪽된 경 정 맥 (LGV)의 외부 분기 액세스 멀리 표면 근을 해 부. 다음, 영구적으로 5-0 비단 봉합으로 LGV의 두개골 끝 선. 느슨하게 주위 정 맥, 두 관계를 놓고 일시적으로 혈관 마이크로 클램프와 LGV의 심장 끝을 클램프.</li>
	<li>두 봉합 사이 LGV에 작은 절 개를 하 게 그리고 LGV의 luminal 공간으로 가득 heparinized 혈 청 카 테 터 삽입 및 사전 그것은 약 10 m m. 나중, 조여 정 맥 카 테 터를 확보 하 고 출혈 방지 주위 합자. 적은 양의 정 맥 붕괴를 피하기 위해 혈 청을 주입.</li>
	<li>Reperfusion 기간 시작 되는 시점에서 5 분 동안 EB 염료 (식 염 수에 2 %EB 솔루션의 1 mL/kg) 주사 천천히. 그 후,는 정 0.5 mL 정상 식 염 수를 주입 하 여 세척 하 고 주입 정 맥12,22에서 철수.</li>
	<li>마지막으로, 목과 머리의 절 개를 봉합 하 고 intraperitoneally buprenorphine 0.05 mg/kg을 주사 (IP) 수술 후 진통17reperfusion 기간 동안 모든 6-8 h 주사를 반복.</li>
	<li>복구 케이지17수 화를 제공 하기 위해 미리 데워 진된 saline(IP)의 5 mL를 주사.</li>
	<li>장소 특별 한 복구에 동물 온도 및 공기 조화 제어 하 고 마 취에서 동물의 복구를 모니터링 합니다.</li>
</ol>4. 혈액 뇌 장벽 침투성의 평가
<ol><li>Reperfusion의 24 h 후 깊이 thiopental 나트륨과 동물 anesthetize. 그런 다음, 흉 골 아래에 작은 구멍을 만들어 흉 강을 엽니다.</li>
	<li>오른쪽 아 트리 움에 작은 개통을 확인 하 고 미리 따뜻하게 0.9% 식 염 수 (37 ˚C) 안마당에서 정상적인 염 분 출구23무색 될 때까지 순환에서 EB를 씻어 15 분 동안 좌 심 실을 통해 110 mmHg의 압력의 250 mL를 주입.</li>
	<li>즉시 두개골에서 뇌를 제거 하 고 뇌 매트릭스에 배치. 후 각 전구 및 소 뇌를 해 부하 고 중간 선 따라 왼쪽 (Lesioned)에서 뇌의 오른쪽 반구를 분리 후 깨끗 한 면도날을 사용 하 여.</li>
	<li>각 반구의 무게 하 고 별도로 버퍼링 하는 인산 염의 2.5 mL에 균질 trichloroacetic 산 (60%)의 2.5 mL 소용돌이 기계를 사용 하 여 2 분이 혼합.</li>
	<li>1,322 x g에서 30 분 동안 뇌 샘플 원심 고 샘플 10 분 동안 4 ℃ 냉장고에 진정을 허용 합니다.</li>
	<li>610 nm23에 분 광 광도 계에 의해 EB 흡 광도 추정 하는 supernatants를 사용 합니다.</li>
	<li>EB 농도 표준 곡선 및 표현 결과 대 한 뇌 조직의 µ g/g으로 계산 합니다.</li>
</ol>5입니다. 생산 EB 표준 곡선의
<ol><li>EB 버퍼링 하는 인산 염의 5 ml에서의 µ g 1-10의 농도와 EB의 10 샘플 솔루션을 준비 합니다.</li>
	<li>610에 각 샘플의 흡 광도 값 nm는 분 광 광도 계를 사용 하 여.</li>
	<li>Y 축 (그림 1)에 스프레드시트와 X 축에 현재 EB 농도 흡 광도 값을 사용 하 여 분산형 차트를 확인 합니다.</li>
	<li>곡선의 방정식에 대 한 선형 추세선을 정의 합니다. 그런 다음 샘플의 EB 농도를 사용 합니다.</li>
	<li>뇌 조직 무게의 µ g/g으로 EB 넘쳐 흐름의 최종 결과 보고 합니다.</li>
</ol>6. 가짜 작업
<ol><li>가짜 운영 그룹 (포함 절 개 목 지역에 EB 주입)에 쥐와 같은 수술 과정을 수행 하지만 MCAO는 제외.</li>
</ol>

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</ol>

저자는 공개 없다.

지금까지, autoradiography 방사성 추적기24,25, 면역 형광 검사 현미경 검사 법26,27, EB 넘쳐 흐름 기술은20, 의 검출 등 다양 한 방법 23 혈액-뇌 장벽 손상을 평가 하는 데 사용 되었습니다. EB 염료 강력 하 게 혈 청 알 부 민에 바인딩할 수 이며 혈관 누설을 감지 하 고 측정 BBB 붕괴11,,2829는 추적 프로그램으로 사용 됩니다. 매우 허용 하 고 안정적인 방법으로 EB 넘쳐 흐름 기술 허 혈 성 뇌졸중을 포함 ...

Vasogenic 뇌 부 종 혈액-뇌 장벽 (BBB) 중단으로 인해 허 혈 성 뇌졸중의 중요 한 합병증 및 뇌졸중 환자1,2에서 생존 율의 주요 결정 요인이 남아 있다. 혈액-뇌 장벽 (BBB)는 뇌 모 세관 내 피 세포 (BCECs)에 의해 형성 된 뚜렷한 혈관 구성 요소 (예: BCECs, pericytes, astroglial, 및 신경 세포3중 꽉 접합)의 구성, 제공 하는 중앙 신경 조직 (CNS) 말 초 혈액 순환4,5사이의 특수 하 고 역동적인 인터페이스. 국 소 빈 혈 reperfusion 상해 등 모욕 BBB의 기능적 무결성을 방해 하 고 궁극적으로 트리거 대뇌 염증 및 기본 뇌 손상 뇌 실질에 순환 하는 백혈구의 침투를 후속으로 이어질 수 있습니다. 6 , 7. 뇌졸중의 발생에 따라 BBB의 부전의 정확한 검출을 위한 동물 모델 필요. 이러한 모델은 새로운 신경 보호 전략을 소개 하 고 기본 병 태 생리 기계 장치 공부에 대 한 매우 중요. 체 외에서 세포 문화 기반 모델 BBB의 높은 개발 하 고 되었습니다 BBB physiopathology8,,910의 분자 연구에 사용. 그럼에도 불구 하 고, vivo에서 동물 모델, 인간의 임상 조건에 비슷한 BBB의 허 혈 성 손상, 생산은 또한 매우 보람 이와. 에반스 블루 (EB)의 넘쳐 흐름의 정량적 검출은 잘 허용 하 고 민감한 기술 평가 BBB 무결성 및 신경 퇴행 성 질환, 허 혈 성 뇌졸중11, 를 포함 하 여 기능에 대 한 사용 되었습니다. 12 , 13 , 14.이 방법은 비용, 재현성, 및 완전히 적용 가능한 모든 실험 실험실에서. 그것의 구현 방사성 트레이 서15 또는 자기 공명 영상 (MRI)16다른 방법에 대 한 필수 구성 요소를 같은 고급 장비를 필요 하지 않습니다. 이 문서에서는, BBB 평가 EB 넘쳐 흐름을 사용 하 여 허 혈 성 뇌졸중의 쥐 모델에서의 기본적인 기술적 프로세스 포괄적으로 설명 합니다.

<table><tbody><tr><td>이소플루란</td><td>피라말</td><td>AWN 34041100</td><td>20 - 25 &deg; C</td></tr><tr><td>2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride (TTC)</td> <td>Molekula</td><td>31216368</td><td>4 년</td></tr><tr><td>Sprague&ndash; 돌리 쥐&nbsp;</td><td>Pasture Institute (테헤란, 이란)</td><td></td><td>300-350g</td></tr><tr><td>Evans Blue&nbsp;</td><td>시그마-알드리치&nbsp;</td><td>314-13-6</td><td></td></tr><tr><td>트리클로로 아세트산&nbsp;</td><td>시그마-알드리치&nbsp;</td><td>76-03-9</td><td>2 년</td></tr><tr><td>Bupivacaine HCl (0.5 %)</td> <td>Delpharm 투어</td><td></td><td>아래&nbsp; 25 &deg; C</td></tr><tr><td>Bupernorphine</td><td>Exir (이란)</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>탄산나트륨</td><td>시그마-알드리치&nbsp;</td><td>497-19-8</td><td></td></tr><tr><td>염화나트륨&nbsp;</td><td>시그마-알드리치&nbsp;</td><td>7647-14-5</td><td></td></tr><tr><td>Di- 수소수소 인산나트륨</td><td>EMD Millipore&nbsp;</td><td>231-448-7</td><td></td></tr><tr><td>염화칼</td>륨 <td>시그마-알드리치&nbsp;</td><td>&nbsp; 7447-40-7</td><td></td></tr><tr><td>에탄올&nbsp;</td><td>시그마-알드리치&nbsp;</td><td>64-17-5</td><td></td></tr><tr><td>실리콘(Xantopren)</td><td>Heraeus</td><td>EN ISO 4823</td><td></td></tr><tr><td>활성제 유니버설 플러스</td><td>헤레우스</td><td>66037445</td><td></td></tr><tr><td>마이크로 해부 펜치</td><td>스톨팅</td><td>52100-41</td><td></td></tr><tr><td>스프링 시저</td><td>스톨팅</td><td>52130-00</td><td></td></tr><tr><td>운영&nbsp; 가위</td><td>Roboz</td><td>52140-70</td><td></td></tr><tr><td>뇌 매트릭스&nbsp;</td><td>Stoelting</td><td>51390</td><td></td></tr><tr><td>작은 동물을 위한 마취 기계 |</td><td>&nbsp; Kent Scientific</td><td>SS-01</td><td></td></tr><tr><td>Power Lab 시스템</td><td>AD Instruments</td><td>ML880</td><td></td></tr><tr><td>레이저 도플러 유량계</td><td>AD Instruments</td><td>ML191</td><td></td></tr><tr><td>가열 피드백 시스템</td><td>Harvard Appratus</td><td>72-7560</td><td></td></tr><tr><td>혈관 마이크로 클램프</td><td>FineScience Tools</td><td>18055-03</td><td></td></tr><tr><td>실크 5-0 봉합사 Ethicon</td><td></td><td>682G</td><td></td></tr><tr><td>Ethilon 4-0 봉합 실&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>EH6740G</td><td></td></tr></tbody></table>

허 혈 성 뇌졸중의 쥐 모델에서 뇌혈관 장애의 비보에 평가

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

허 혈 성 뇌졸중 vasogenic 대뇌 부 종 및 후속 기본 뇌 손상, 혈액-뇌 장벽 (BBB)의 파괴를 통해 중재 된다 이끌어 낸다. 유발 허 혈 성 뇌졸중 쥐 설립 되었고 BBB의 기능 무결성을 조사 하 비보에 모델로 사용. 허 혈 성 상해 두뇌 샘플에서 에반스 블루 (EB)의 spectrophotometric 감지 소설 치료 modalities의 개발과 연구에 대 한 신뢰할 수 있는 정당성을 제공할 수 있습니다. 이 방법은 재현성 결과 생성 하 고 특별 한 장비를 위한 필요 없이 어떤 실험실에 적용 됩니다. 여기, 선물이 쥐에서 허 혈 성 뇌졸중의 유도 따라 EB의 넘쳐 흐름의 검출에 시각 및 기술 지침.

가짜 운영 쥐의 좌 반구와 우 반구에서 EB 수준에 중요 한 차이가 없었다 (1.06 ± 0.1 µ g/g과 1.1 ± 0.09 µ g/g, 각각). 그림 2A 2B, 일시적인 허 혈의 유도에서 같이 (90 분 허 혈 / 24 h reperfusion) EB 수준에 상당한 차이 발생 (10.41 ± 0.84 µ g/g, p &lt; 0.001) 각각에 비해 허 혈 성 쥐의 왼쪽된 반구에 운영 하는 가짜 쥐에 반구입니다. 샨 다, 이러한 결과 나타냅니다 정상적인 조건 하에서 EB 쉽게 뇌 실질에 BBB를 교차할 수 없습니다 대뇌 허 혈 성 모욕 (그림 2A와 2B) BBB의 향상 된 침투성 통해 EB의 넘쳐 흐름을 유도.
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이 절차의 전반적인 목표는 비보에 허 혈 성 뇌졸중의 쥐 모델에서 뇌혈관 장애의 평가 대 한 높은 재현 기법을 제공 하는입니다.

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...

이 절차의 전반적인 목표는 허혈성 뇌졸중의 반응 모델에서 혈액-뇌 장벽 파괴에 대한 생체 내 평가의 재현성이 높은 방법을 제시하는 것입니다. 이는 뇌 좌측의 중대뇌동맥 폐색을 위해 내강내 필라멘트를 사용하여 허혈성 뇌졸중을 유도함으로써 이루어집니다. 절차의 다음 단계는 경정맥 외부 가지를 캐뉼레이션하고 중대뇌 동맥 폐색이 끝나고 재관류 기간이 시작될 때 Evans Blue 염료를 주입하는 것입니다.24시간 후 깊은 마취 상태에서 동물의 순환계가 에반스 블루에서 씻겨 나가고 뇌가 제거됩니다. 그런 다음 두 개의 대뇌 반구를 분리, 균질화 및 원심분리한 다음 궁극적으로 조직의 상등액을 사용하여 분광 광도계로 Evans Blue 농도를 측정합니다. 마취 및 유속 측정.4% 이소플루란을 사용하여 마취를 유도하고 수술 기간 동안 70% 아산화질소와 13% 산소의 혼합물에 1-1.5% 이소플루란으로 마취를 유지합니다. 마취된 동물을 피드백 제어 가열 담요에 엎드린 자세로 놓고 이 가열 장치에 연결된 직장 프로브를 사용하여 체온을 정상적인 생리적 범위로 유지합니다. 두개골 왼쪽의 수술 부위를 면도하고 거즈 패드를 사용하여 베타딘 용액을 도포하여 피부를 소독합니다.70% 에탄올이 함유된 멸균 패드로 교체하고 두 단계를 3회 반복합니다. 왼쪽 눈의 안각에서 왼쪽 귀 기저부까지 뻗어 있는 두개골을 1cm 길이로 절개하고 왼쪽 측두근을 절개하여 두개골을 노출시킵니다. 그런 다음 브레그마의 측면 5mm와 후방 1mm에 작은 구멍을 뚫어 도플러 유량계 펜슬 프로브의 끝을 쉽게 배치할 수 있습니다.쥐를 엎드린 자세에서 누운 자세로 바꾼 다음 레이저 연필 프로브를 이전에 뚫은 두개골 구멍에 넣어 국소 뇌 혈류를 모니터링합니다. 각 동물의 기준선 국소 뇌혈류를 기록하고 국소 뇌허혈의 100% 유도로 간주합니다. 목 부위를 면도하고 베타딘 용액과 70% 에탄올로 피부를 소독합니다.진통을 위해 수술 부위에 0.2ml의 0.5%부피바카인을 피하주사합니다. 왼쪽 총경동맥에 접근하기 위해 목의 복부 표면을 2cm 길이의 외과적 절개를 만듭니다. 총경동맥을 인접한 근막과 미주신경으로부터 분리하여 외부 경동맥과 내부 경동맥의 분기점에 접근합니다.5-0 낭 봉합사를 사용하여 왼쪽 총경동맥 또는 외부 경동맥을 영구적으로 결찰하고 내부 경동맥을 익상구개 동맥 수준까지 절개합니다. 총경동맥 주위에 5-0 낭 봉합사를 느슨하게 배치한 다음 혈관 마이크로 클립으

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Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 비디오는 EAE 마우스 모델에서 혈액-뇌 장벽 파괴를 평가하는 절차를 보여줍니다. 다양한 크기의 형광 염료를 역궤도로 주입하여 뇌의 혈관을 순환합니다. 작은 염료는 틈을 통해 뇌 조직으로 누출되는 반면, 큰 염료는 장벽 손상 정도와 상관관계가 있는 파괴가 심한 경우에만 들어갑니다.

EAE 마우스 모델에서 형광 염료를 사용한 혈액-뇌 장벽 파괴 결정

이 비디오는 중대뇌동맥 폐색을 받은 쥐의 뇌 절편에서 경색 영역과 뇌 부종을 평가하는 방법을 보여줍니다. 경색 부위는 산화 환원 염색을 사용하여 식별되며, 이미지 분석 소프트웨어의 블루 필터 및 임계값 기능은 영향을 받은 반구의 경색 영역과 부종을 정량화합니다.

중대뇌동맥 폐색 후 쥐 뇌에서 경색 영역과 뇌 부종 측정(Measuring the Infarct Zone and Brain Edema in a Rat Brain Following Middle Cerebral Artery Occlusion)

출처: Kuts, R. et al. 쥐의 운동 피질에서 레이저로 인한 뇌 손상. J. Vis. Exp. (2020)이 비디오는 쥐의 레이저 유도 뇌 손상 후 혈액 뇌 장벽(BBB) 무결성을 평가하는 방법을 보여줍니다. 추적 염료를 꼬리 정맥에 주입하여 뇌로 순환하고 손상된 BBB를 통해 조직으로 누출되도록 합니다. 그런 다음 뇌를 추출하고 가공하여 염료를 방출합니다. 염료의 형광 강도는 레이저로 인한 BBB 손상의 정도를 정량화하기 위해 측정됩니다.

레이저로 유도된 뇌 손상 쥐 모델에서 혈액-뇌 장벽 무결성 평가 

혈액 - 뇌 장벽 장애는 뇌에 특정 약물의 전달을 에이즈. 마니 톨은 물리적 장벽을 방해하기 위해 간 arterially 혈관을 수축 주변 세포를 전달했습니다.

혈액 - 뇌 장벽 장애의 쥐 모델 Neurovascular 치료학 타겟이 분명한 허용하려면

이 프로토콜은 마우스의 일시적인 중대뇌동맥 폐색 후 경색 부피와 혈액-뇌 장벽 파괴를 감소시키는 반복적인 저산소증 전조건화 또는 전신 저산소증에 대한 짧은 노출을 설명합니다. 또한 신경혈관 보호의 효능을 평가하기 위해 뇌졸중 후 경색 용적과 혈액-뇌 장벽 파괴의 이중 정량화에 대해 자세히 설명합니다.

마우스의 반복 저산소 전처리 및 과도 중간 대뇌 동맥 폐쇄 후 신경 혈관 보호의 정량화

이 연구에서 우리는 신경 퇴행 성 조건 하에서 혈액-뇌 장벽 장애를 평가 하기 위한 간단 하 고 효율적인 절차를 제시. 우리의 목표를 달성 하기 위해 우리는 높은 분자량 fluorescein isothiocyanate 표시 (FITC) 주입-마우스 경으로 알 부 민 정 맥 및 형광 현미경 검사 법에 의해 뇌 실질에 그것의 누설을 평가.

FITC 표시 된 알 부 민 신경 질환의 마우스 모델에서의 정 맥 주입에 의해 혈액-뇌 장벽 침투성의 평가

여기 우리는 마우스 뇌 혈관 침투성 분석 결과 형광 추적기 관류 뇌혈관 장애의 동물 모델에 적용 되는 다음의 복 주사를 사용 하 여 현재. 한 반의 두뇌 양적 침투성을 평가 하 고 추적 프로그램 시각화/immunostaining에 대 한 다른 사용 됩니다. 절차 10 쥐에 대 한 5-6 시간 걸립니다.

Vivo에서 혈액-뇌 장벽 침투성 분석 결과 사용 하 여 마우스에 붙일 추적기 표시

이 프로토콜은 설치류 뇌 샘플의 동일한 세트에서 허혈성 뇌 손상의 세 가지 가장 중요한 매개 변수를 측정하는 새로운 기술을 설명합니다. 하나의 뇌 샘플만 사용하는 것은 윤리적 및 경제적 비용 면에서 매우 유리합니다.

설치류 뇌 샘플의 단일 세트에서 뇌졸중 후 뇌 부종, 경색 영역 및 혈액 뇌 장벽 고장 측정

서로 다른 시점의 마우스에 두 개의 형광 염료를 투여하여 혈액뇌장벽(BBB) 파괴로 인한 염료 유출을 시각화하는 방법이 개발되었습니다. 동결 보호제로서 글리세롤을 사용함으로써 동일한 샘플에 대한 면역조직화학이 촉진되었습니다.

경미한 외상성 뇌 손상의 마우스 모델에서 혈액-뇌 장벽 파괴 평가

쥐 생체 내 모델은 허혈성 뇌졸중의 병리학적 메커니즘과 치료 표적을 조사하는 데 필수적인 도구입니다. 이 연구는 쥐의 중대뇌동맥 폐색(MCAO) 후 경색된 뇌 절편에서 면역형광 염색을 수행하는 방법을 설명합니다.

허혈성 뇌졸중의 쥐 모델에서 면역형광에 의한 세포 사멸 신호 평가

학습하세요 허혈성 뇌졸중 쥐 모델에서 혈관내 실 삽입법으로 뇌혈관장벽 손상을 평가하는 재현성 높은 생체 내 기법을. Evans Blue 염료 투과성 측정으로 뇌졸중 후 장벽 기능을 정량 분석합니다.

허 혈 성 뇌졸중의 쥐 모델에서 뇌혈관 장애의 비보에 평가

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