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DOI: 10.3791/57167-v
Milica Momcilovic1, Sean T. Bailey2, Jason T. Lee3, Charles Zamilpa3, Anthony Jones3, Gihad Abdelhady1, James Mansfield4, Kevin P. Francis5, David B. Shackelford1
1Division of Pulmonary and Critical Care Medicine,University of California Los Angeles David Geffen School of Medicine, 2University of North Carolina at Chapel Hill, 3Department of Molecular and Medical Pharmacology,University of California Los Angeles, 4Andor Technology, 5Division of Orthopaedic Surgery,University of California Los Angeles David Geffen School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
이 프로토콜에서 설명 하는 [18F]-2-fluoro-2-deoxy-D-glucose 양전자 방출 단층 촬영 및 컴퓨터 단층 촬영 (18F FDG PET/CT) 이미징 타겟 치료 MLN0128는 에 종양 변화 응답을 측정 하기 위해 활용 하는 방법 Kra/Lkb1 돌연변이 마우스 폐암의 모델 및 결합 된 높은 해상도 ex vivo autoradiography와 양적 조직학 영상.
이 방법은 암 대사 및 암 치료 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 예를 들어, 종양 성장과 종양 대사를 조절할 수 있는 새로운 치료법의 식별과 같습니다. 이 기술의 주요 장점은 시간이 지남에 따라 발생하는 폐 종양에 대한 비침습적 이미징을 수행할 수 있다는 것입니다.
이는 종양 대사가 다양한 치료 개입에 어떻게 반응하는지 실시간으로 더 잘 이해할 수 있기 때문에 중요합니다. 이러한 절차를 시연하는 것은 Crump Institute의 전임상 이미징 센터의 이미징 과학자입니다. 주의: 방사능을 취급할 때는 보호 장비를 사용하고 적용 가능한 모든 규제 절차를 따르십시오.
먼저 플루오린 18 표지된 플루오로-데옥시글루코스 주사 전 한 시간 동안 섭씨 37도에서 이미징할 마우스의 케이지를 데우는 것으로 시작합니다. 이것은 추적자의 갈색 지방 소비를 줄입니다. 첫 번째 마우스의 무게를 측정하고 무게를 기록합니다.
기관에서 승인한 방법을 사용하여 마우스를 마취한 후 발가락을 꼬집어 마취 깊이를 테스트합니다. 반응이 보이지 않으면 마취 중 건조를 방지하기 위해 눈에 안과 연고를 바르는 것으로 절차를 계속하십시오. 방사성 반감기가 109분인 플루오로 데옥시글루코스(fluoro-deoxyglucose)를 100마이크로리터당 70-75마이크로큐리의 조정된 감쇠 보정 주입 농도로 멸균 식염수에 조심스럽게 희석합니다.
그런 다음 28게이지 바늘로 100마이크로리터를 인슐린 주사기에 넣고 선량 계산기를 사용하여 방사능 선량을 측정합니다. 감쇠 보정을 결정하기 위해 측정 및 측정 시간을 기록하십시오. 리드 주사기 홀더에 주사기를 놓습니다.
주사하려면 먼저 따뜻한 물에 적신 거즈로 꼬리를 1-2 분 정도 따뜻하게합니다. 그런 다음 70% 이소프로판올로 닦아 주사 직전에 꼬리 정맥을 확장시킵니다. 측면 꼬리 정맥을 통해 볼루스 주사로 주사기의 전체 볼륨을 투여합니다.
그리고 주입 시간을 기록하십시오. 그런 다음 용량 교정기를 사용하여 주사기의 남은 용량을 측정하고 측정 및 시간을 기록합니다. 마지막으로, 주입된 마우스를 섭씨 37도에서 1.5-2%의 이소플루란이 함유된 마취실에 넣어 PET 스캔 전 1시간 동안 마우스의 전신 순환을 통해 프로브가 분포되도록 합니다.
1시간 후, 첫 번째 마우스를 섭씨 37도로 설정된 이미징 챔버에 콧방울 이소플루란 마취 하에 놓습니다. 그리고 누운 자세로 의료용 테이프로 팔다리를 제자리에 고정합니다. PET CT 스캐너에 이미징 챔버를 놓고 PET CT 스캐너 설명서에 설명된 대로 PET 및 CT 스캔을 획득합니다.
PET CT가 완료된 후 이미징 챔버에서 마우스를 제거하고 케이지에서 회복할 때까지 기다립니다. 파일(File)을 클릭한 다음 파일 가져오기(Import File)를 클릭하여 재구성된 PET CT 이미지를 AMOD 소프트웨어로 가져옵니다. 그리고 적절한 DICOM 파일을 선택합니다.
PET 데이터 세트를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭합니다. 그리고 기본 정보 탭에서 그램당 주입 용량 백분율 필드를 찾습니다. 이전에 보고된 그램당 주입 용량의 백분율을 입력합니다.
Edit를 클릭한 다음 Add ROI를 클릭하여 종양과 정상 조직의 관심 영역을 그립니다. ROI의 셰이프를 선택하고 ROI에 이름을 지정합니다. 종양과 조직에 대한 ROI를 그리고 세 축 모두에서 관심 조직을 포함하도록 치수를 조정합니다.
Fluorine 18 표지된 fluoro-deoxyglucose PET 이미징은 KL 마우스라고 하는 KRAS 및 LKB1 공동 돌연변이가 있는 종양을 가진 마우스에서 수행되었습니다. 이 쥐의 종양은 해당작용성이 높았습니다. F-FDG 소비량 증가에서 알 수 있듯이.
이전에 발표된 연구와 일치합니다. 전체 폐의 절제술은 여러 종양의 존재를 드러냈으며, 여기에서 횡방향, 시상 및 관상 모양으로 나타났습니다. 쥐 폐의 5개 엽을 H&E로 염색하여 조직의 형태를 시각화했습니다.
엽 1-5는 포도당 수송체 1을 위해 염색되었습니다. 종양 세포의 원형질막에 대한 Glut1의 발현 및 국소화는 fluorine 18 labeled fluoro-deoxyglucose의 표준 흡수 값과 직접적인 상관관계가 있습니다. 이 절차를 수행할 때 FDG 생체 분포는 동물 취급 조건에 따라 달라진다는 점을 기억하는 것이 중요합니다.
마취, 온난화 및 단식과 같은. 재현성을 보장하려면 이러한 단계를 일관되게 수행해야 합니다. 이 일반적인 절차에 따라 다른 PET 흔적을 사용하여 아미노산 대사 및 수용체-리간드 상호 작용과 같은 생체 내 다양한 생물학적 과정을 측정할 수 있습니다.
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