Name: 장 부분 방해의 마우스 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-05T14:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 33 s
Description: 배우세요 마우스 장 부분 방해 수술법을 통해 위장관 조직의 분자적 및 형태학적 변화를 연구하는 방법을. 이 기법은 신뢰할 수 있고 재현 가능하며 비용 효율적인 동물 모델을 제공합니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

저자 벤자민 J Weigler, D.V.M., 박사에 게 감사 하 고 월트 맨 더 빌, 그들의 우수한 동물 서비스에 대 한 D.V.M. (동물 자원 및 캠퍼스 참석 수 의사, 네바다 대학 리노)에 그들의 변호사 뿐만 아니라 쥐 제공 수술 절차입니다.

다음 프로토콜 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC) 네바다 대학 리노 (UNR) 동물 자원에 의해 승인 되었습니다 고 연구 동물의 사용에 관한 모든 기관 윤리 지침을 준수.
1입니다. 동물입니다.
<ol><li>성숙 (4-6 주 이전) C57BL/6 쥐 20-30 g. 집 UNR 동물 자원에서 중앙된 동물 시설에 실험실 쥐의 식민지 사이 무게를 얻을.</li>
</ol>2. 부분 방해 수술
참고: 수술 수술에 전념 한 방에 수행 됩니다. 모든 수술 기구는 수술 전에 압력가 마로 소독. 수술 실에서 모든 직원에 의해 불 임 수술 가운과 장갑을 항상 착용 되어야 한다.
<ol><li>수술 마우스에 대 한 준비<ol>
<li>산소의 공급을 보장 하기 위해 마 취 전달 시스템을 확인 하 고 isoflurane 절차에 대 한 적절 한입니다. 공급 산소를 켭니다. 가스 유량 계 및 유도 챔버에서 동물 500-1000 mL/분 장소에 그것을 조정 켜고 상단 인감.</li>
		<li>5%, isoflurane 기화 기를 켜고 휴식 될 때까지 동물을 모니터링. 코 콘 마 취 전달 시스템을 전환.</li>
		<li>산소, 어떤 잔류 가스의 유도 챔버를 플러시 다음 해제 유도 챔버 라인 코 콘 라인을 유지 하면서 오픈.</li>
		<li>상공에서 동물을 제거 하 고 신중 하 게 동물의 눈에 안과 연 고를 배치.</li>
		<li>가스 흐름을 계속 하는 때 데워 따뜻한 패드에 원뿔을 놓습니다.</li>
		<li>100-200 mL/min, 2-3 %isoflurane 산소 흐름을 변경 합니다. 동물 이동 하기 시작, gentlyrestrain까지에 코 콘 동물 완전히 취 다시.</li>
		<li>호흡 및 절차 동안 자극에 응답을 모니터링 하 고 필요에 따라 isoflurane (2-5%)의 비율을 조정. 동물 anesthetization 수준의 수술을 수행 하기 전에 발가락 핀치 반사의 부족에 의해 모니터링 됩니다.</li>
		<li>Intraperitoneally 절 개 사이트에서 통증 의학 (buprenorphine, 몸 무게의 1 µ g/g)을 주사.</li>
		<li>깨끗 한 면봉을 사용 하 여 복 부에 머리 제거 로션을 적용 합니다. 로션 앉아 보자 마우스, 3-5 분 후 거 즈 및 면 면봉을 사용 하 여 제거. 모든 머리는 마우스의 복에서 제거 되었습니다 때까지이 단계를 반복 합니다.</li>
		<li>70% 에탄올 거 즈 및 면 면봉을 사용 하 여 피부를 청소. 복 부를 청소 하려면 swabsticks 또는 povidone-요오드 솔루션을 적용 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>부분 장애 수술<ol>
<li>2.5 x 2.5 cm 수술 영역에 대 한 중간에 여 25 x 50 cm 메 마른 종이 사용 하 여 외과 사이트 드러 워 진. 피부와의 경계에 메 마른 스트립을 배치 하 여 동물에 드 레이프를 보안 합니다.</li>
		<li>~3.0 cm 복 부 절 개를 15 블레이드 메스, 피부만 베 고이 이번에 musculoperitoneal 레이어로 절단 방지를 사용 하 여 경도 확인 합니다.</li>
		<li>Using 집게와가 위 수술, 신중 하 게 별도 피부 musculoperitoneal 계층에서 발생 musculoperitoneal 레이어에 어떤 절 개 하지 않고. 레이어 충분히 분리 된 (약 1 c m x 4cm), 후 식별는 교육 musculoperitoneal 레이어는 교육 따라 컷된 ~ 2 cm에 알바 알바 노출 마이크로 집게와가 위를 사용 하 여 복 강.</li>
		<li>신중 하 게 찾아서 맹을 식별 합니다. 천천히 그리고 부드럽게 마이크로-집게, 근 결 및 살 균 드 레이프에 밖에 서 맹와 회장와 복 강에서 맹을 제거 합니다. 즉시 0.9% 멸 균 식 염 수 젖은 거 즈로 장 조직 축 축 하 게 하 고 항상 습 하는 동안 그들은 복 부 구멍의 이상으로 노출된 조직 유지.</li>
		<li>찾아서 회장 및 인접 콜론 사이 mesentery를 식별 합니다. 절 개 (~ 1 cm)는 mesentery에서, 그리고 바로 아래, 회장, 병렬 확인 하 고 모든 맥 관 구조를 절단 하지 않도록.</li>
		<li>압력가 실리콘 링 (길이, 4 m m 외부 직경, 3.5 m m 내부 직경 6 m m)를 가져가 라. 경도 잘라 튜브를 열고 마이크로 집게와 반지를 엽니다.</li>
		<li>Mesentery 조직에는 절 개를 통해 열린된 링의 한쪽 끝을 삽입 합니다. 반지에 의해 포위 하는 회장으로 접촉, 다른 한쪽 끝을 가져와서 완성 된 고리 모양 반지를 반환 합니다.</li>
		<li>실리콘 링 완전히는 회장 주변을 확인 하 고 봉합으로 반지를 닫습니다 신중 하 게 내장 복 강에 다시 배치.</li>
	</ol>
</li>
	<li>수술 폐쇄<ol>
<li>간단한 수행 하는 교육을 따라 musculoperitoneal 레이어에 연속 봉합 알바는 musculoperitoneal을 흡수 되기 쉬운 봉합 된 상처. 봉합 후 깨끗 한 거 즈 배어 0.9% 멸 균 식 염 수와 어떤 출혈.</li>
		<li>완전히 가까운 별도 나일론 봉합, 상처, 피부에 간단한 연속 봉합을 수행 합니다.</li>
		<li>두 봉합 완료 된 후 새로운 swabstick 또는 povidone-요오드 상처 청소.</li>
		<li>Intraperitoneally 주사 항생제 (gentamicin, 20-30 g 몸 무게에 따라 마우스 당 150 μ).</li>
		<li>절차의 완료 후 isoflurane 기화 끄고 식을 얻고 시작 때까지 유일한 흐르는 산소 호흡을 동물 허용.</li>
		<li>일단 동물 깨어, 완전히 복구 될 때까지 열 지원으로 별도 복구 영역으로 동물을 놓습니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. 작업 후 관찰입니다.
<ol><li>수술의 완료 후 이동 동물 복구 방에 인큐베이터 온도 습도 통제 된다. 동물 들이 인큐베이터에서 동안 두 번째 시간에 대 한 첫 번째 시간 30 분에 다음에 대 한 동물 postoperatively 매 15 분을 모니터링 합니다.</li>
	<li>소정의 관찰 완료 되 자 마자 그들의 자신의 개인 감 금 소 동물 이동 및 통증18, 그리고 합병증 (의 어떤 표시 없이 수술 상처가 제대로 치유 되도록 임상 표시에 대 한 매일 그들을 모니터합니다 dehiscence) 현재.</li>
</ol>

<ol><li>Millat, B., Guillon, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiopathology+and+principles+of+intensive+care+in+intestinal+obstructions%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Prat%22%5BJournal%5D)">Physiopathology and principles of intensive care in intestinal obstructions.</a> Rev Prat. 43, 667-672 (1993).</li>
<li>Tonelli, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+developments+in+Crohn%27s+disease%3A+solution+of+doctrinal+mysteries+and+reinstatement+as+a+surgically+treatable+disease.+1.+The+process+is+not+a+form+of+enteritis+but+lymphedema+contaminated+by+intestinal+contents%5BTitle%5D)+AND+%22Chir+Ital%22%5BJournal%5D)">New developments in Crohn's disease: solution of doctrinal mysteries and reinstatement as a surgically treatable disease. 1. The process is not a form of enteritis but lymphedema contaminated by intestinal contents.</a> Chir Ital. 52, 109-121 (2000).</li>
<li>Limsrivilai, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meta-analytic+Bayesian+model+for+differentiating+intestinal+tuberculosis+from+Crohn%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Meta-analytic Bayesian model for differentiating intestinal tuberculosis from Crohn's disease.</a> Am J Gastroenterol. 112, 415-427 (2017).</li>
<li>Dvorak, D., Adamova, Z., Bar, T., Slovacek, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Internal+hernia+as+a+cause+of+small+bowel+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Rozhl+Chir%22%5BJournal%5D)">Internal hernia as a cause of small bowel obstruction.</a> Rozhl Chir. 96, 34-36 (2017).</li>
<li>Massani, M., Capovilla, G., Ruffolo, C., Bassi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gastrointestinal+stromal+tumour+%28GIST%29+presenting+as+a+strangulated+inguinal+hernia+with+small+bowel+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Case+Rep%22%5BJournal%5D)">Gastrointestinal stromal tumour (GIST) presenting as a strangulated inguinal hernia with small bowel obstruction.</a> BMJ Case Rep. , (2007).</li>
<li>Chen, J., Chen, H., Sanders, M., Perrino, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+SRF%2FCArG-dependent+gene+transcription+during+chronic+partial+obstruction+of+murine+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Regulation of SRF/CArG-dependent gene transcription during chronic partial obstruction of murine small intestine.</a> Neurogastroenterol Motil. 20, 829-842 (2008).</li>
<li>Chang, I. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+interstitial+cells+of+Cajal+and+development+of+electrical+dysfunction+in+murine+small+bowel+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Loss of interstitial cells of Cajal and development of electrical dysfunction in murine small bowel obstruction.</a> J Physiol. 536 (Pt 2), 555-568 (2001).</li>
<li>Liu, D. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voltage+dependent+potassium+channel+remodeling+in+murine+intestinal+smooth+muscle+hypertrophy+induced+by+partial+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Voltage dependent potassium channel remodeling in murine intestinal smooth muscle hypertrophy induced by partial obstruction.</a> PLoS One. 9 (2), e86109(2014).</li>
<li>Guo, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Down-regulation+of+hydrogen+sulfide+biosynthesis+accompanies+murine+interstitial+cells+of+Cajal+dysfunction+in+partial+ileal+obstruction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Down-regulation of hydrogen sulfide biosynthesis accompanies murine interstitial cells of Cajal dysfunction in partial ileal obstruction.</a> PLoS One. 7, e48249(2012).</li>
<li>Yang, J., Zhao, J., Chen, P., Nakaguchi, T., Grundy, D., Gregersen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interdependency+between+mechanical+parameters+and+afferent+nerve+discharge+in+hypertrophic+intestine+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol-Gastr+L%22%5BJournal%5D)">Interdependency between mechanical parameters and afferent nerve discharge in hypertrophic intestine of rats.</a> Am J Physiol-Gastr L. 310, G376-G386 (2016).</li>
<li>Zhao, J., Liao, D., Yang, J., Gregersen, H. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2857539/">Biomechanical remodeling of obstructed guinea pig jejunum.</a> J Biomech. 43, 1322-1329 (2010).</li>
<li>Bowen, E. J., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22129371">Duodenal Brunner's glade adenoma causing chronic small intestinal obstruction in a dog.</a> J Small Anim Pract. 53, 136-139 (2012).</li>
<li>Bettini, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertrophy+of+intestinal+smooth+muscle+in+cats%5BTitle%5D)+AND+%22Res+Vet+Sci%22%5BJournal%5D)">Hypertrophy of intestinal smooth muscle in cats.</a> Res Vet Sci. 75, 43-53 (2003).</li>
<li>Macdonald, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smooth+muscle+phenotypic+plasticity+in+mechanical+obstruction+of+the+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Smooth muscle phenotypic plasticity in mechanical obstruction of the small intestine.</a> J Neurogastroenterol Motil. 20, 737-740 (2008).</li>
<li>Ha, S. E., et al. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28806761">Transcriptome analysis of PDGFRα+ Cells identifies T-types Ca2+ channel CACNA1G as a new pathological marker for PDGFRα+ cell hyperplasia.</a> PLoS One. 12, e0182265(2017).</li>
<li>Park, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serum+response+factor+is+essential+for+prenatal+gastrointestinal+smooth+muscle+development+and+maintenance+of+differentiated+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Serum response factor is essential for prenatal gastrointestinal smooth muscle development and maintenance of differentiated phenotype.</a> J Neurogastroenterol Motil. 21, 589-602 (2015).</li>
<li>Spencer, N. J., Sanders, K. M., Smith, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migrating+motor+complexes+do+not+require+electrical+slow+waves+in+the+mouse+small+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Migrating motor complexes do not require electrical slow waves in the mouse small intestine.</a> J Physiol. 553, 881-893 (2003).</li>
<li>Langford, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coding+of+facial+expressions+of+pain+in+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Coding of facial expressions of pain in the laboratory mouse.</a> Nat Methods. 7, 447-449 (2010).</li>
<li>Terez, S. D., Notari, L., Sun, R., Zhao, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+smooth+muscle+responses+to+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurogastroenterol+Motil%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of smooth muscle responses to inflammation.</a> Neurogastroenterol Motil. 24, 802-811 (2012).</li>
<li>Chen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smooth+muscle+hyperplasia%2Fhypertrophy+is+the+most+prominent+histological+change+in+Crohn%27s+fibrostenosing+bowel+strictures%3A+A+semiquantitative+analysis+by+using+a+novel+histological+grading+scheme%5BTitle%5D)+AND+%22J+Crohns+Colitis%22%5BJournal%5D)">Smooth muscle hyperplasia/hypertrophy is the most prominent histological change in Crohn's fibrostenosing bowel strictures: A semiquantitative analysis by using a novel histological grading scheme.</a> J Crohns Colitis. 11, 92-104 (2017).</li>
<li>Huizinga, J. D., Chen, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+Cells+of+Cajal%3A+Update+on+Basic+and+Clinical+Science%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Gastroenterol+Rep%22%5BJournal%5D)">Interstitial Cells of Cajal: Update on Basic and Clinical Science.</a> Curr Gastroenterol Rep. 16, 363(2014).</li>
<li>Jirkof, P., Touvieille, A., Cinelli, P., Arras, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Buprenorphine+for+pain+relief+in+mice%3A+repeated+injections+vs+sustained-release+depot+formulation%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Buprenorphine for pain relief in mice: repeated injections vs sustained-release depot formulation.</a> Lab Animal. 49, 177-187 (2015).</li>
<li>Spencer, N. J., Dinning, P. J., Brookes, S. J., Costa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+the+mechanisms+underlying+colonic+motor+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Insights into the mechanisms underlying colonic motor patterns.</a> J Physiol. 594, 4099-4116 (2016).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

우리는 지속적으로 그리고 reproducibly 장 포 수술을 받는 쥐 장 평활 근 비 대를 인간의 창 자 방해를 모방 개발 시연. 장 방해 수술 마우스7, 쥐10, 기니 돼지11, 개 고양이12 와13를 포함 하 여 다른 동물에 대 한 개발 되었습니다. 마우스 모델 장 방해의 시간, 비용, 크기, 및 다른 더 큰 동물 모델에 비해 phenotypic 장점이 있다. 쥐 또는 쥐에 비의 개발 10-14 일10, 기니 돼지, 개 및 고양이11,,1213에 2-4 주에 비해 걸립니다. 구매 하 고 마우스는 또한 다른...

창 자 방해는 소형 또는 대형 내장 내장1통과 음식을 소화, 유체 및 가스 방지에서 부분적 또는 완전 한 막힘. 방해, 때문 방해 좁히는 루멘2장 벽 두껍게 될을 유도 합니다. 장 방해의 결과로 복 부 접착 조직 형성을 일으키는 원인이 되는 복 부 또는 골반 수술 또는 염증 성 장 질환 (크 론 병), 계실 염, 탈 장, volvulus, 준한, GI 무질서에서 발생할 수 있습니다. intussusception, 변 비, 지저분한 impaction, 의사 방해, 암 및 종양3,,45. 이러한 경우 장 장애물은 종종 내장6tunica muscularis의 비 대도 이어질.
루멘의 포 장 팽창, 유도 및 기능 연동7,,89,10, 계속 필요에 응답에서 방해 주위 부드러운 근육 층 두께 증가 11,,1213. 장 포의 동물 모델 부드러운 근육 비 대에 쥐7, 쥐10, 기니 돼지11, 개12, 고양이13 일관 되 게 내에서 유사한 비 대를 개발 하는 연구 개발 된는 장 근육 레이어입니다.
장 포의 마우스 모델 생성 및 창 자 방해에서 vivo에서공부를 가장 비용 효율적인 방법입니다. 작은 창 자 방해는 회장을 둘러싼 배치 수술 실리콘 링을 사용 하 여 마우스에 수행 됩니다. 포 쥐 포 수술8,15후 근육 레이어 두께 (비 대)에서 초기 셀 (증식)의 수 증가 및 증가 보였다. SMC는 기본 플라스틱 셀 hypertrophic 조건14응답에서 평활 근 층 내에서 성장 하지만 ICC 등 다른 세포와 PDGFRα+ 셀 SMC와 밀접 하 게 관련 된, 또한 다시 채워집니다. 우리가 이전에 보고 된 포 쥐 작은 창에 비 개발 어떤 SMC에서 높은 증식7,,1516PDGFRα+ 셀으로 dedifferentiated는. 반대로, ICC 전락 되며 장 obsruction7의 개발 기간 동안 hypertrophied 부드러운 근육 층 내에서 잃었다. 포 모델의 또 다른 주요 장점은 장 신 경계와 전파 neurogenic 모터 패턴에 변화를 유도 하는 능력 이다. 주요 전파 마우스 작은 창 자에서 neurogenic 모터 패턴은 마이그레이션 모터 복잡 한 (MMC), neurogenic 이며 ICC 또는 전기 느린 파도17필요 하지 않습니다. 포 모델 부분 방해에 의해 Mmc와 장 신경 개조 어떻게에 명확한 통찰력을 제공할 수 있습니다.
여기, 우리는 실리콘 링을 사용 하 여 장 포 수술 murine 프로토콜을 제안 합니다. 쥐 포 수술을 안정적으로 수신 소장의 tunica muscularis 비 대 생산. Hypertrophic 근육 내 SMC, ICC, PDGFRα+, 그리고 신경 세포는 극적으로 리 모델링.

<table><tbody><tr><td>외과 용 드레이프</td><td>의료 및 수의학 용품</td><td>SMS40</td><td>40 " X100 야드</td></tr><tr><td>언더 패드, econ, 프로 플러스</td><td>의료 및 수의학 용품</td><td>MSC281224</td><td>17x24 "</td></tr><tr><td>아이리스 가위</td><td>Braintree scientific, Inc</td><td>SC-i-130</td><td></td></tr><tr><td>아이리스 가위</td><td>Vantage</td><td>V95-304</td><td></td></tr><tr><td>Dumont 전자 및 보석 핀셋</td><td>Dumont</td><td>98-180-3</td><td></td></tr><tr><td>꼰 흡수성 봉합사</td><td>Covidien polysorb</td><td>SL-5687G</td><td>5-0, polyglactin</td></tr><tr><td>나일론 비흡수성 모노 필라멘트</td><td>AD 수술</td><td>S-N618R13</td><td>6-0, 나일론</td></tr><tr><td>외과 용 칼날</td><td>Dynarex</td><td></td><td>No.15</td></tr><tr><td>바늘 홀더</td><td>Jacobson 미세 혈관</td><td>36-1342TC</td><td>8.5 인치</td></tr><tr><td>메스 손잡이</td><td>Flinn scientific</td><td>AB1049</td><td></td></tr><tr><td>미세 수술 용 가위</td><td>WPI</td><td>503305</td><td></td></tr><tr><td>바셀린 안과 연고</td><td>Puralube VET</td><td></td><td>3.5g</td></tr><tr><td>Fluriso (이소 플루란</td><td>Vetone</td><td>V1 502017</td><td>250 ml</td></tr><tr><td>스테리 스트립 강화 피부 클로저</td><td>3M</td><td>R1547</td><td></td></tr><tr><td>수술용 장갑</td><td>Medline</td><td>MSG2270</td><td></td></tr><tr><td>귀 루프 얼굴 마스크</td><td>안전 지대</td><td>RS700</td><td></td></tr><tr><td>Avant 거즈 부직포 스폰지</td><td>Caring</td><td>PRM25444</td><td></td></tr><tr><td>Surgical cup</td><td>Admiral&nbsp; craft OYC-2</td><td>725-A42</td><td>2.5 oz</td></tr><tr><td>Swabstick</td><td>ChloraPrep</td><td>260103</td><td>2% w/v 클로르헥시딘&nbsp; 글루코네이트(CHG) 및 70% v/v 이소프로필 알코올(IPA)</td></tr><tr><td>면 팁 어플리케이터</td><td>Puritan</td><td>806-WC</td><td></td></tr><tr><td>부프레노르핀</td><td>동물원 제약</td><td>BZ8069317</td><td>1mg/ml</td></tr><tr><td>겐타마이신 황산염</td><td>Vetone</td><td>G-6336-04</td><td>100mg/ml</td></tr><tr><td>속효성 젤 크림 제거제</td><td>Veet</td><td>8111002</td><td></td></tr><tr><td>주사기</td><td>AHS</td><td>AH01T2516</td><td>1ml(바늘 포함)</td></tr><tr><td>실리콘 링</td><td>VWR</td><td>60985-720</td><td>길이 6mm, 외경 4mm, 내경 3.5 mm</td></tr><tr><td>C57BL/6 마우스</td><td>잭슨 연구소</td><td></td><td>4-6 주</td></tr></tbody></table>

장 부분 방해의 마우스 모델

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

장 장애물, 방해 하거나 차단 연동 운동, 복 부 유착 및 tumorous 종양을 포함 하 여 가장 위장 (GI) 질환에 의해 발생할 수 있습니다. 그러나, 개장 하는 메커니즘 휴대에, 참여 하 고, 창 자 방해는 제대로 이해. 창 자 방해의 여러 동물 모델 개발 되었습니다, 하지만 마우스 모델은 가장 비용/시간 효과적인. 마우스 모델 장 부분 방해 (PO)를 올바르게 수행 하지 경우 높은 사망률의 수술 주입을 사용 합니다. 또한, 쥐가 수술을 받고 적절 한 봉쇄는 사용 되지 않습니다 또는 제대로 배치 하는 경우 비 대를 개발 하기 위해 실패. 여기, 우리는 매우 낮은 사망률과 안정적이 고 재현 장 장애물 포 수술에 대 한 상세한 프로토콜을 설명 합니다. 이 프로토콜을 부분적으로 차단 하는 작은 창 자에서 소화 운동 회장을 둘러싸는 수술 배치 실리콘 반지를 이용 한다. 부분 막힘 소장 소화 운동의 중단으로 인해 열려진 될 게. 내장의 팽창 반지 점차적으로 죽음을 일으키는 원인이 될 때까지 2 주 동안 개발의 구두에 부드러운 근육 비 대를 유도 합니다. 수술 포 마우스 모델 hypertrophic 장 조직 평활 근 세포 (SMC), 중간 셀의 Cajal (ICC), PDGFRα+를 포함 하 여 장 셀의 병 적인 변화를 공부 하는 데 유용의 비보에 모델 제공 및 신경 장 방해의 발달 동안에 세포입니다.

부분 방해 (PO) 수술 ileocecal 괄약근 가까운 회장 주위 실리콘 링을 삽입 하 여 1 개월 된 생쥐에서 유도 했다. 이 반지는 회장에 부분적인 방해를 만들었습니다. 가짜 작업 (그래서) 나 이/성별에 반지 없이 수행 했다 쥐와이 쥐가 어떤 증상 포 쥐에서 찾아낸 그들과 유사한를 표시 하지 않았습니다. 마우스는 신속 하 게 몇 시간 포 수술에서 회복. 그들은 명백한 행동 변화 또는 약점 첫 주 내에서 보여주지만, 후 첫 번째 주, 그들은 점차적으로 포의 흔적을 표시 하기 시작 했다: 부풀어 복 부와 더 적은 더 작은 배설물 펠 릿의 생산. 포 쥐 8과 13 일 포스트 포 수술 등 제어 마우스 함께 희생 되었다. 소장 부분적으로 가득 고 8 일 포스트 포 수술에서 불어와 완전히 가득 이었고 그래서 (그림 1A) 마우스를 제어에 비해 13 일 포스트가 수술에 불어. 8과 13 일 포스트 포 수술 쥐의 결에 찌 끼...

창 자 방해는 심한 복 부 통증, 메스꺼움, 구 토, 그리고 대변의 통과 방지 하면 내장의 부분적 또는 완전 한 막힘. 쥐에서 장 부분 obsructions를 만들기 위한이 절차는 병 적인 세포 성장 및 소장에서 죽음을 기본 메커니즘을 공부에서 신뢰할 수 있는.

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...

이 수술 절차의 전반적인 목표는 장폐색에 대한 반응으로 발생하는 위장 조직의 분자 및 표현형 변화에 대한 연구를 용이하게 하는 생쥐에서 장 폐색을 안정적이고 일관되게 생성하는 것입니다. 이 방법은 장 폐색으로 인한 표현형 변화의 기저에 있는 세포 메커니즘을 둘러싼 위장 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 신뢰할 수 있고 복제 가능하며 비용 효율적이라는 것입니다.이 기술의 의미는 장 폐색으로 인한 인간 병리학에서 관찰되는 표현형 상태를 모방하기 때문에 장 폐색 치료로 확장됩니다. 이 절차를 시연하는 것은 우리 연구실의 박사후 연구원인 Se Eun Ha와 대학원생인 Lai Wei입니다. 발가락 꼬집음에 대한 반응이 없는 것을 확인한 후 동물의 눈에 연고를 바르고 마우스를 보온 패드에 놓습니다.제모 크림으로 복부의 털을 제거하고 70% 에탄올로 노출된 피부를 청소합니다. 포비돈 요오드 용액으로 수술 부위를 소독하고 수술 부위에 2.5 x 2.5cm 구멍이 있는 25 x 50cm 크기의 멸균 종이를 동물에게 씌웁니다. 개구부와 피부 경계에 멸균 스트립으로 드레이프를 고정하고 15번 메스 날을 사용하여 3cm 세로 피부 절개를 만듭니다.겸자와 수술용 가위를 사용하여 조직을 절개하지 않고 근육복막층에서 피부를 조심스럽게 분리하고 알바 선의 위치를 찾습니다. 그런 다음 마이크로 집게와 가위를 사용하여 알바 선을 따라 2cm를 잘라 복강강을 노출시키고 맹장을 조심스럽게 찾습니다. 마이크로 겸자를 사용하여 복강강 내의 맹장, 근위결장 및 회장을 멸균 드레이프로 천천히 부드럽게 이동하고 즉시 0.9% 멸균 식염수에 적신 거즈로 장 조직을 적십니다.회장과 근위결장 사이의 장간막을 찾고 회장과 평행하고 바로 아래에 있는 장간막을 1cm 절개하여 혈관 구조를 절단하지 않도록 주의합니다. 장간막 혈관을 열기 위해 세로로 자르고 마이크로 집게를 사용하여 적절한 크기의 오토클레이브 멸균 실리콘 링을 엽니다. 절개 부위를 통해 링의 한쪽 끝을 삽입하고 링의 끝을 첫 번째 끝과 접촉시켜 기구를 원래 모양으로 되돌립니다.고리가 회장을 완전히 둘러싸고 있는지 확인하고 봉합사로 고리를 닫습니다. 장간막의 절개 부위는 고리가 들어갈 수 있을 만큼 커야 하지만 혈관이 절개되지 않을 만큼 작아야 합니다. 또한 고리가 결장이 아닌 회장에 놓여 있는지 확인하십시오.장을 조심스럽게 원래의 해부학적 위치로 되돌리고 흡

a-mouse-model-of-intestinal-partial-obstruction

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

수술 후 장폐색 (POI)가 증가 병적 상태와 장시간 입원으로 이어지는 복부 수술의 합병증입니다. 예방 또는 치료 전략이 심화 연구를 부족하기 때문에하는 것은 필요합니다. 따라서 우리는 POI의 pathophysiology를 조사하고 잠재적 인 치료 옵션을 연구하기위한 표준화하고 실현 가능한 마우스 모델을 만들었습니다.

장 조작의 표준화 된 모델의 분석 : 쥐의 장 운동성 및 내장 벽의 염증의 기능 평가

이 비디오는 마우스 모델의 장 투과성을 연구하기 위한 회장 루프 모델의 생성을 보여줍니다. 이 방법은 상피 장벽 기능과 그에 따른 면역 반응을 이해하기 위한 라이브 모델을 제공합니다.

마우스 회장 루프 모델: 마우스의 장 투과성을 연구하기 위한 수술 모델

이 비디오에서는 마우스 근위 결장 루프 또는 pcLoop 세그먼트를 생성하는 수술 절차를 설명한 다음 장 상피 투과성을 연구하기 위해 세그먼트에 형광 마커를 내강 내 주입하는 방법을 설명합니다.

Mouse Proximal Colon loop Model의 생성: 내강내 주사 후 혈청 내 형광 마커를 검출하여 근위 결장 루프를 생성하고 장 투과성을 측정하는 수술 절차

여기, 선물이 간 부상 및 설치류에서 중생의 외과 모델로 부분 담 관 결 찰.

마우스에 부분적 담 관 결 찰: 지역화 된 폐쇄성 Cholestasis의 제어 모델

Murine 원심 인공 인간의 전환 colitis, 지저분한 스트림에서 제외 콜론 세그먼트에서 주로 림프 colitis 위한 murine 모델을 제공 합니다.

Murine 원심 인공, C57BL/6 마우스에 전환 Colitis의 새로운 모델

Anastomotic 누설 또는 수술 후 고장 수술 후 병 적 상태와 사망률의 주요 원인입니다. 저 승 문 합을 만들기 위한 우리의 수술 anastomoses의 치유 메커니즘을 공부에 대 한 안정적이 고 재현 가능한 방법입니다.

쥐에 있는 저 승 문 합의 창조

Dysregulated 장 상피 장벽 기능 및 면역 반응은 생리적인 모형의 부족 때문에 제대로 조사되지 않는 선동적인 장 질병의 특징입니다. 여기서는 생체 내 점막 투과성 및 백혈구 모집을 연구하기 위해 잘 혈관화되고 외부화된 장 세그먼트를 사용하는 마우스 장 루프 모델을 설명합니다.

표준화된 장 루프 모델을 사용하여 마우스에서 장 투과성 및 호중구 환전 이동의 기능 평가

설치류에서 널리 사용되는 장 허혈 재관류 손상(IRI) 수술 모델을 생성하는 방법을 설명합니다. 이 시술은 상장간막 동맥의 폐색과 혈류의 회복을 포함합니다. 이 모델은 수의학 및 인간 의학 모두에서 장내 IRI의 폐색 원인을 조사하는 연구에 유용합니다.

상장간막 동맥의 폐색을 통한 장 허혈-재관류 손상의 설치류 모델

단일 문합 십이지장-회장 우회술(SADI-S)은 중요한 대사 효과가 있는 새로운 비만 절차입니다. 이 기사에서는 마우스에서 SADI-S의 신뢰할 수 있고 재현 가능한 모델을 제시합니다.

생쥐의 단일 문합 십이지장-회장 우회술(Single-Anastomosis Duodeno-Ileal Bypass with Sleeve Gastrectomy Model in Mice)

우리는 장 조작을 통해 생성된 수술 후 장폐색의 쥐 모델을 설명합니다. 위장 통과 기능, 병리학적 변화 및 면역 세포 활성화는 수술 후 24시간 후에 평가되었습니다.

수술 후 장폐색 쥐 모델

배우세요 마우스 장 부분 방해 수술법을 통해 위장관 조직의 분자적 및 형태학적 변화를 연구하는 방법을. 이 기법은 신뢰할 수 있고 재현 가능하며 비용 효율적인 동물 모델을 제공합니다.

장 부분 방해의 마우스 모델

더 많은 동영상 탐색