Name: 쥐의 활동 기반 거식 증을 평가 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 26 s
Description: 학습하세요 쥐의 활동 기반 거식증 모델을 통해 신경생물학 및 행동 메커니즘을 연구하는 방법을. 이 기법은 인간에서 평가할 수 없는 거식증의 근본 원인을 연구하는 데 활용됩니다.

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이 작품은 NARSAD 독립 조사 수상 및 IMHRO 상승 스타 우울증 연구 상을 SCD 메모리의 조지 Largay에 의해 투자 되었다.

여기에 설명 된 모든 메서드는 기관 동물 관리 및 사용 위원회 (IACUC), 샌디에고가 주 대학에 의해 승인 되었습니다.
1입니다. 마우스
<ol><li>연구에 대 한 적절 한 마우스 스트레인을 선택 합니다.</li>
	<li>공급 업체에서 쥐를 구입 하거나 적절 한 실험 번호를 얻을 줄을 증폭.</li>
	<li>그룹 하우스 충분 한 새 환경 순응 기간 동안 수 있도록 연구를 시작 하기 전에 적어도 1 주 동안 동물 시설에 마우스를 구입.</li>
	<li>때 마우스는 8 주 정도 미리 실험 새 환경 순응 단계를 시작 합니다.</li>
</ol>2입니다. 주택
<ol><li>취소 방해 실행 휠, 식품 용기, 그리고 물 병을 포함할 수 있는 연습장을 선택 합니다.</li>
	<li>실내 온도 및 습도 테스트 가설을 보완 하기 위해 통제 한다. 참고: 높은 온도 ABA28의 개발을 줄일 것입니다.</li>
</ol>3. 실행 바퀴
<ol><li>예제 테이블의 자료 를 참조 하십시오 잠재적인 산만 하 고 케이지 내에서 얽 힘을 피하기 위해 무선 통신으로 바퀴를 선택 합니다.</li>
</ol>4입니다. 물 병
<ol><li>실행 바퀴 또는 홈 장에 음식 저장소 공간에 대 한 경쟁 하지 것입니다 물 병을 선택 합니다.</li>
	<li>식 수에서 약물 치료를 제공 하는 경우 덕트 테이프는 빛에 민감한 환경을 만드는 병.</li>
</ol>5입니다. 식품
<ol><li>낮은-지방 차 우 가설 테스트 되 고 (예를 들어, Envigo의 설치류 다이어트 8604)에 대 한 적절 한을 선택 합니다. 참고: 다이어트는 지방과 설탕에 높은 ABA29의 개발을 줄일 수 있습니다.</li>
	<li>작은 유리 용기를 사용 하 여 제공 하는 차, 약 65 cm 높이에 직경 x 50 cm. 참고: 자동된 급지대 조사 방해를 제한 하 여 스트레스를 줄일 수 있습니다 유리 항아리를 대신 사용할 수 있습니다. ABA 연구 약물 조작으로 수행 하는 경우 가장 유리한 수 있습니다.</li>
</ol>6. 미리 실험 새 환경 순응 단계
<ol><li>노트북 및 휠 허브 가까이 케이지 랙을 선택 하 여 실험 영역을 설정 합니다. 이 데이터 전송 문제를 제한 합니다.</li>
	<li>노트북과 무선 허브 설정.</li>
	<li>노트북에 휠 관리 소프트웨어를 엽니다.<ol>
<li>두 허브 활성화 되어 보장 하기 위해 소프트웨어를 보세요.</li>
		<li>"도구"를 열고 "바퀴 삭제." 5 번이이 단계를 반복 합니다.</li>
		<li>소프트웨어를 닫습니다 다음 다시 여십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>휠 베이스의 배터리 팩으로 3 AAA 배터리를 배치 합니다.<ol>
<li>휠 베이스의 하드웨어에 배터리 팩 와이어를 연결 합니다. 이 연결이 끊긴된 전에 사용 될 것입니다. 휠 베이스에 배터리 팩을 닫습니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>휠 베이스를 보장 하기 위해 소프트웨어 적절 한 무선 허브에서 "1" ID와 함께 나열 됩니다 확인 하십시오. 기본 ID가 "1"로 표시 되지 않으면, 배터리 팩을 분리 하 고 6.2 단계에서 다시 시작.</li>
	<li>이름 열에서 마우스 ID에 "1"에서 휠 ID를 변경 합니다.</li>
	<li>실행 중인 바퀴의 안정성을 보장 하기 위해 덕트 테이프와 감 금 소의 바닥에 자료를 준수 합니다. 쥐 노출된 테이프에 씹는 것으로 모든 테이프, 막대기를 허용 하지 않습니다.</li>
	<li>부식된 자석 조각 없이 실행 바퀴 디스크를 선택 하십시오.</li>
	<li>기지에 바퀴를 놓고 케이지 벽 격자에서 클리어런스 확인 휠을 회전 합니다.</li>
	<li>특정 소프트웨어를 실행 하는 바퀴 회전 계산 제대로 되도록 회전 수 디스크를 회전 합니다.</li>
	<li>덕트-녹화 실행 바퀴와 물 병 케이지 바닥에 음식 항아리의 밑바닥으로 침구 또는 지 고 젖은에서 손실 되지 않도록 조각의 차를 방지 합니다. 참고: 젖은 차 우 차 우30건조에 비해 음식 섭취 량을 증가 시킵니다.</li>
	<li>항아리에 차 우의 5 개를 놓습니다. 참고: 사전 실험 단계 차 사용할 수 광고 libitum 이며 무게. 될 필요가 없습니다. 새 환경 순응 기간 동안 실행 하는 바퀴에 노출 ABA21,31강화 수 있습니다.</li>
	<li>장에 전체 물병을 놓고 물 광고 libitum제공 합니다.</li>
	<li>모든 감 금 소는 무선으로 연결 된 실행 중인 휠, 음식, 그리고 물 때까지 반복 합니다.</li>
	<li>개별적으로 자신의 적절 한 새에 마우스를 놓습니다.</li>
	<li>소프트웨어를 관리 하는 바퀴에 "파일"로 이동 하 고 "수집을 시작 합니다." 클릭</li>
	<li>바퀴 회전을 보장 하기 위해 소프트웨어 업데이트는 계산 되 고 시스템이 잘 작동.</li>
	<li>쥐 2 전체 일을 위한 실험 주택 조건에 적응</li>
	<li>그들은 ABA 실험을 처리 하기 위해 충분 한 건강 보장 하기 위해이 단계 마우스를 평가 합니다.</li>
	<li>케이지 어떠한 홍수 물 병에서 매일 확인 합니다. 병, 범람 하는 경우 새로운 케이지와 함께 오래 된 케이지를 장착 하 고 바퀴와 간섭 없이 감 금 소에 식품을 준수 하기 위해 필요한 조치를 반복 합니다.</li>
	<li>하루에 2, 음식 수준에 대 한 감 금 소를 확인 합니다. 낮은 경우에 음식, 차 우 2 조각으로 리필. 이렇게 쥐를 방해 하지 않고. 참고: 사전 실험 새 환경 순응 단계 어떤 마우스 hypophagia 전시 또는 저 체, 연구에서 마우스를 제거 합니다.</li>
</ol>7. 실험 초기 단계-주 1
<ol><li>선택 "끝", 다음 "" 휠 관리 소프트웨어에 수집을 시작 합니다.</li>
	<li>규모에 작은 플라스틱 비 커에 9 g 차 밖으로 0.00 g 감도로 측정 합니다. 정확한 체중을 기록 합니다.</li>
	<li>부드럽게 제거 하 고 0.0 g 감도와 마우스 규모에 큰 플라스틱 비 커에 무게. 기록의 무게입니다. 참고: 제한 처리 하는 동안 쥐의 스트레스, 따라서 그들을 참을성 있게 처리 하 결정적 이다.</li>
	<li>모든 새 환경 순응 식품의 폐기.</li>
	<li>항아리와 뿐만 아니라 그의 dispose에서 제거 했을 수 있는 어떤 음식에 대 한 검색 침구.</li>
	<li>물 병 자리에 두고 하지만 그것은 적절 하 게 전체 보장.</li>
	<li>깨끗 한 오염 70% 소 프로 파 놀과 종이 타 올으로 바퀴를 실행.</li>
	<li>청소는 소 프로 파 놀 말린 후에 필요 하다, 그것의 감 금 소에는 마우스를 반환 하 고 선반에 케이지를 장착.</li>
	<li>모든 마우스 무게와 음식의 9 g 밖으로 측정 및 감 금 소에 배치 될 때까지이 단계를 반복 합니다.</li>
</ol>8. 실험 초기 단계-2-7 일
<ol><li>매일 같은 시간에 동물 시설을 반환 합니다. 또는 10 분 측정 다 하지 마십시오.</li>
	<li>규모에 작은 플라스틱 비 커에 9 g 차 밖으로 0.00 g 감도로 측정 합니다. 정확한 체중을 기록 합니다.</li>
	<li>부드럽게 제거 하 고 0.0 g 감도와 마우스 규모에 큰 플라스틱 비 커에 무게. 기록의 무게입니다.</li>
	<li>감 금 소에서 식품 항아리를 당겨 하 고 모든 음식을 0.00 g 가늠 자에 작은 비 커에 덤프.<ol>
<li>배설물과 침구는 음식 음식 항아리에 경우 모든 침구와 배설물의 선택. 작은 스 트레이너를 사용 하 여 무게 비 커에 가루 식품을 문질러. 핀셋 (필요한 경우)와 함께이 일을 하기 전에 모든 배설물을 제거 합니다. 참고: 침구는 하지 헤어는 스 트레이너를 통해 맞게 더 작은 조각으로.</li>
		<li>장에 음식 잔해에 대 한 검색 하 고 체중을 비 커에 추가 합니다. 남은 음식의 양을 기록 합니다. 참고: 경우 침구와 감 금 소를 검색 해야 합니다, 그것은 마우스 장에 무게 비 커 또는 전송 스트레스를 줄이기 위해 사용 하는 동안 그렇게 할 최고의.</li>
		<li>모든 식품의 폐기.</li>
	</ol>
</li>
	<li>깨끗 한 항아리를 닦 고 다시 감 금 소 합니다. 필요한 경우 테이프를 교체 합니다.</li>
	<li>항아리에 새로운 식품의 이전 측정된 9 g를 놓습니다.</li>
	<li>깨끗 한 오염 70% 소 프로 파 놀과 바퀴를 실행, 다음 바퀴를 말리십시오. 한 번에 하나의 케이지가 고 실수로 바퀴를 교환 하지 마십시오.</li>
	<li>종료 하 고 매일 프로그램을 실행 하는 휠에 수집을 다시 시작.</li>
	<li>제한 단계가 시작 될 때까지이 단계를 반복 합니다.</li>
</ol>9. 실험 제한 단계-주 1
<ol><li>종료 하 고 휠 관리 소프트웨어에 수집을 시작 합니다.</li>
	<li>무게 기준 프로토콜 당 쥐, 오래 되 고 새로운 음식.</li>
	<li>
지금 바퀴를 청소 하지 않습니다. 이 그들의 한정 된 수 유 기간 동안 마우스를 산만 수 있습니다.</li>
	<li>새로운 음식, 차 우의 9 g에 6 h에 대 한 액세스를 허용 합니다. 기록 시간 음식 제공 됩니다. 참고: 음식을 사용할 수 있는 가벼운 주기 동안에 ABA의 개발에 적용 됩니다. 마우스는 일반적으로 라이트 사이클 동안 수 면, 이후 쥐 소비 하지 않습니다 일반적으로 그들의 매일 음식의 대부분이 시점 이후, ABA의 개발 악화이 시간 동안 음식에 접근을 주는. 반대로, 마우스 어두운 주기 동안 음식 액세스를 부여 것입니다 개발 ABA 더 느리게32. 더 이상 발생 합니다 식품 액세스의 기간을 조정 또는 더 짧은 생존 시간 (그림 2). 음식 예상 활동 (연방 항공국)는 과다, 음식 제공32,,3334전에 즉시 발생 합니다. FAA로 보였다 바퀴 운영 하는 연방 항공국 동안 액세스 거부 ABA 동작32살펴볼 ABA의 개발을 달라질 수 있습니다.<ol>
<li>각 마우스 나중 음식 정확히 6 h를 제거 하 고 남은 수량 측정. 기록 시간 음식 제거 됩니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>필요한 경우 지금, 바퀴를 청소 하 고 뒤에 후속 연습장에서 당기는 음식에 점점 없이 그렇게 하려고.</li>
	<li>음식 무게 고 마우스 당 먹은 음식의 양을 결정 하는 음식에 차이 계산.</li>
	<li>각 마우스에 대 한 강하 무게를 계산 합니다. 참고: 강하 무게 때 초기 체중의 최종 측정의 75%에 도달 하면 마우스 실험에서 제거 해야 합니다. 예를 들어 마우스 무게가 20 g 15 g에 도달 하면 제한 단계 시작 되는 시점에 그것은 실험에서 제거 되어야 합니다.</li>
	<li>동물 시설에 손에 강하의 복사본 무게를 보관 합니다. 참고: 실험 평가 ABA에서 복구 시도 될 수 있습니다; 식품 중 ad libitum, 제공 또는 바퀴는 쥐 건강 한 몸 무게34반환 과정 연구에 잠겨 있다.</li>
</ol>10. 실험 제한 단계-2-14 일
<ol><li>1 일 제한 프로토콜에서 모든 측정 단계를 반복 합니다. 바퀴 인수를 다시 시작 하지 마십시오.</li>
	<li>마우스에 도달 하는 경우 드롭 무게 (그것의 기준선 체중의 75%), 휠 및 식품 항아리 케이지에서 제거는 감 금 소의 바닥에 충분 한 음식을 제공 그리고 다른 생쥐와 함께 진행. 일단 모든 감 금 소에 참석 된, 드롭 무게에 도달한 모든 마우스를 안락사.</li>
	<li>실험의 기간에 대 한 각 마우스에 휠을 둡니다.</li>
	<li>매일 어떤 부상에 대 한 각 마우스를 확인 하십시오. 필요한 경우, 손상 된 발톱 클립, 염증, 등 조언을 물어 동물 보호 직원 부상으로 진행 하는 방법에 대 한 확실 치료.</li>
</ol>11. 연구 종료
<ol><li>연구는 14 일을 지속 했다, 15 일에 모든 쥐를 무게. 제한 1 일 중량 기준 체중으로 간주 됩니다. 참고: 학문의 길이 가설 테스트를 해결 하기 위해 수정할 수 있습니다. 긴 기간 음식 액세스 기간 연구 길이 연장 사용할 수 있습니다.</li>
	<li>필요에 따라 마우스를 안락사.</li>
	<li>적절 한 객실에 더러운 장비를 가져가 라.</li>
	<li>하루 10 전체 일의 데이터를 제공 하는 15에 휠 수 수집을 끝.</li>
	<li>무선 휠 허브를 해제 합니다.</li>
	<li>데이터를 추출 합니다.</li>
	<li>데이터를 분석 합니다.</li>
</ol>

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저자는 공개 없다.

ABA 실험 경험 마음 유전 가변성에 다른 긴장, 나가, 약물, 및 AN. 베어링의 다른 다양 한 변수를 테스트 하 여 수정할 수 있습니다, 그리고 조정 실행 바퀴 또는 음식 액세스 기간 것 늘리거나의 심각도 증 후 그리고 강하의 속도입니다. 이것은 관심의 실험적인 질문에 따라 실험의 길이 늘리거나 검색할 수 있습니다.
음식 섭취 량의 정확한 측정 ABA 패러다임의 중요 한 부분 이지만, 종종 문제가 만들 수 있습니다. 침구, 대변, 및 소변 식품 항아리에 케이지 공간으로 이동 되는 식품과 함께 정확 하 게 남은 음식 무게에 어려움을 제공 합니다. 항아리에 감 금 소를 통해 마우스는 또한 음식과 가루 식품의 작은 비트를 남겨 주세요. 스 트레이너 적절 한 무게 녹음을 위한 음식 잔재를 찾을 침구를 통해 선별의 문제를 완화 하는 데 도움이 하지만 방법은 틀림. 그들의 무게를 마우스 처리 ABA 패러다임에서 또 다른 중요 한, 아직 혼란 요소 이다. 조사 방해를 가진 마우스는 ABA...

1953 년 이후 설치류 역설적 과다 그들은 음식 가용성은 제한1때 자발적인 hypophagia 진행 하면서 바퀴를 무료로 주어진 바퀴를 실행에 표시를 보고 되었습니다. 반대로, 설치류 하지 않습니다 신속 하 게 드롭 체중 일정에 음식을 제공 하는 바퀴를 실행 하지 않고 또는 실행 하는 바퀴와 함께 지 내게 하 고 제공 하는 식품 광고 libitum1,2,3. ABA 모델 몸 무게, hypophagia, 저체온증, 발 정기의 손실 및 증가 자극 HPA 축4의 극적인 감소에 안정적으로 발생합니다. 궁극적으로, ABA 죽음, 주제 패러다임5에서 제거 하지 않는 한 발생 합니다. ABA 패러다임 연구를, 복잡 한 식사 장애 식욕-행동의 심한 dysregulation는 약 100에 1 명의 여성 및 남성6의 작은 비율에 영향을 미치는의 동물 모델을 제공 합니다. AN 고통 받아 환자 자주 과다, 운동, 일반적인 불안7,8의 극단적인 금액으로 구성 된 전시. 약 10%의 사망률과 AN 모든 정신 장애9중 가장 높은 사망 율이 있다. 10,11에서 그 고통을 위한 아무 승인된 약리 치료는 현재 치료는 인지 치료, 제한 됩니다.
AN는 주로 여성에 영향을 미치는 질환으로 일반적으로 간주 되었다. 10 배 이상 남성 보다 여성에서 가능성이 있는 진단, 여성 과목으로 전통적으로는12에 초점입니다. 그러나, 특별 한 배려는 연구에서 남성을 제외에 취해야 한다. 그러나 낮은 남성, 근육 dysmorphia (MD)에 남아의 진단 신체 이미지 왜곡 및 다이어트 자주 무질서에 AN, 많은 유사성을가지고 있는 상태입니다. MD와는 비슷한 방식으로13,,1415에 분류 될 수 있습니다 개념에 대 한 지원이입니다. 이 MD의 경우도 대표는 "남성"의 버전 AN 제안할 수 있습니다. 동물 모델의 맥락에서 일부 보고서는 건의 했다 남성은 ABA 패러다임을 여성 보다 더 적습니다. 예를 들어 최근 연구는 높은 사망률을 보였다 고 C57Bl/6 마우스16에 여성에 비해 음식 섭취 량을 감소. 민감성 ABA에의 한 예측은 자발적인 신체 활동 (SPA). 더 높은 또는 낮은 스파 쥐 여성17보다 더 강한 효과 보여주는 남성 쥐와 ABA 패러다임에 체중을 더 높습니다. 반대로, 여성 설치류 ABA18제한 단계 남성 보다 더 많은 운동을 관찰 되었습니다. 또한, 연구 Balb/cJ 마우스 C57Bl/6 마우스, 여성 쥐에 높은 사망률을가지고 하 고 남성 (그림 1)6에 비해 음식 섭취 량 감소의 반대의 효과 표시. 와 ABA 패러다임에서 남녀 간의 결과 다양 한 패턴을 먹는 무질서와 남성에 대 한 인식을 증가, 남성 및 여성 주제를 테스트 해야 합니다.
ABA 패러다임, 섹스의 차이 이외에도 나이 및 스트레인 고려 되어야 한다 과목을 선택할 때. 더 정확 하 게 사춘기 마우스는 이후 AN 청소년 기, 쥐와 쥐19,20,,2122관찰로 일반적으로 나온다 AN를 모델 수 있습니다. 기준선 수준에 다른 사람 보다 더 활성화 되어 긴장 있다 자화 율의 높은 속도 ABA23의 심각도. 긴장 불안, DBA/2와 같은 더 높은 수준의 알려진 바퀴 운영 하는 활동, ABA 패러다임24에서 더 빠른 강하 율을 나타내는 것이 증가 하고있다. 실험 설계에 따라 선택의 변형 ABA의 기간을 최대화 하기 위해 맞출 수 있습니다.
ABA 역설 마우스 고유 하지 않습니다. 쥐를 포함 하 여 다른 포유동물, 햄스터, gerbils, 돼지, 다람쥐, 그리고 기니 피그가 현상6설명 했다. 포유류 종에 걸쳐 ABA 현상 보존 ABA 패러다임 인 간에 있는 거식 증 같은 동작을 기본 메커니즘을 조사 하는 변환 도구를 제공할 수 있습니다 제안 합니다. 특히 마우스는 ABA 기본 메커니즘의 연구에 적합. 마우스에 밀도가 지 내게 될 수 있다 고 생성 시간이 상대적으로 짧습니다. 마우스는 완전히 시퀀스 게놈 그리고 수많은 outbred, 타고 난, 특별 한 긴장, congenics, 등 사용할 수 있습니다. 생성 된 유전자 조작 선의 광대 한 수, 그들이 연구에 대 한 이상적인 손을 질문에 AN. 따라 같은 질환에 영향 유전 평가, 연구원은 복잡 한 신경 회로 또는 진 식을 조작할 수 있습니다. 잠재적으로 가능한 인간을 공부 하는 경우는 유전 영향에 대 한 질문에 대답 하는 ABA 패러다임에서 행동 평가 하기
AN의 동물 모델의 제한 된 수 현재 존재. 스트레스 모델 유도 hypophagia 설치류 꼬리 곤란 사용 하 여에서 참신 유도 hypophagia, 찬 수영, 및 두뇌 자극. 스트레스를 유도, HPA 축에 변화 감소 된 몸 무게25결과 식욕 감소. 그러나, HPA 축은 또한 potently 또한 과다 등 AN의 추가 기능을 통합 하는 ABA에 의해 자극 됩니다. 공부는에서 고려해 야 할 또 다른 모델은 만성 음식 제한 모델. 40 ad libitum 의 60%에서 범위에 식품을 제한 하 여 영양26에 생리 적인 응답을 모방 수 있습니다 하나. 이 방법은 부적당 한 먹이의 효과 연구에 대 한 유효 하지만, 그것 않습니다 재현 하지는의 핵심 문제는 자발적인 음식 제한. ABA 패러다임에서 동물 음식 액세스의 일의 부분에 대 한 박탈 하지만 바퀴는 또한 존재 하는 경우에 자발적으로 음식 섭취를 줄일 수 있습니다. 유전자 모델은 또한 AN. 연구원의 병 인을 검사 하 이용 되었다 neurochemical 및 유전적 요인 등 유전자 BDNF와 신경 전달 물질 도파민, 세로토닌27는에 연루를 발견 했다. 유전자 모델의 사용은 AN 뒤에 신경 메커니즘 이해 결정적 이다. 그러나, AN의 게놈 넓은 협회 연구는 아직 중요 한 안타를 굴복 하지 그리고 AN에 없는 희귀 한 변종 발견 되었습니다. 미래 연구 AN 관련 고기에 대 한 이해를 높이기 위해 ABA 모델 유전 접근을 결합 한다.
전체 정신 장애에 대 한 동물 모델 개발 복잡성과 인간의 장애의이 사실상 불가능 하다. 그러나, 정신 장애의 특정, 잘 정의 된 구성 요소를 모델링 함으로써 기본 생물학 또는 이상에 대 한 독특한 통찰력 얻을 수 있습니다. 이러한 생물 학적 통찰력 다음 소설 치료를 식별 하기 위해 사용할 수 있습니다. 설치류 ABA 패러다임 따라서 윤리적 인간, 유전자 조작, 신경 회로, 물결 효과 등에서 공부 수는 같은 동작을 기본 메커니즘을 공부에 대 한 전 임상 도구를 제공 합니다 그리고 특정 환경 요인의 결과입니다.

<table><tbody><tr><td>무선 로우 프로파일 러닝 휠, 허브, 소프트웨어</td><td>Med Associates</td><td>ENV-047</td><td></td></tr><tr><td>Standard Teklad Rodent Chow</td><td>Envigo</td><td>8604</td><td></td></tr><tr><td>8 주 된 마우스</td><td>Jackson Laboratories</td><td>연구에 사용 된 Balb / cJ</td><td>균주 - 다른 균주를 사용하여 ABA</td></tr><tr><td>Scout Pro Scale 200g</td><td>Ohaus</td><td>SPE202</td> 마우스 Scout Pro Scale 400g<td>의 무게를 측정하는 데 사용됩니다</td></tr><tr><td>.</td><td>오하우스</td><td>SPE402</td><td>음식의 무게를 잰 데 사용</td></tr></tbody></table>

쥐의 활동 기반 거식 증을 평가

Assessing Activity-based Anorexia in Mice

설치류 개발 활동 기반 거식 증 (ABA)는 제한 된 먹이 계획에 노출 하 고 무료로 액세스할 수 실행 바퀴에. 이러한 조건으로 생명이 체중 감소 이어질. 그러나, 이러한 조건 중 하나만 노출 설치류는 궁극적으로 정상적인 몸 무게를 적응. 증가 실행 감소와 결합 된 자발적인 음식 섭취에 ABA 조건 하에서 역설적 표시, ABA 동작 수많은 포유류 종에서 관찰 된다.
ABA 패러다임 거식 (AN), 식욕-행동의 심한 dysregulation는 섭식 장애에 대 한 동물 모델을 제공합니다. 과목 단독 실행 바퀴에 대 한 무료 액세스와 함께 지 내게 됩니다. 매일, 주제 제한 된 양의 시간에 대 한 음식을 제공 합니다. 실험의 과정에서, 피사체의 체중 높은 활동과 낮은 칼로리 섭취 량 감소. 연구 기간 얼마나 오래 식품은 매일 제공, 음식 제공, 마약 테스트 되 고, 마우스의 변형 및 환경 요인의 종류에 따라 다릅니다.
부족 한 환자, 그들의 낮은 삶의 질, 치료의 높은 비용 및 그들의 높은 사망 율에 대 한 효과적인 약물 치료는 더 연구를 긴급을 나타냅니다. 제공 하는 새로운 치료를 개발 하기 위하여는 같은 동작을 조사 하는 방법을 마우스, ABA 실험을 수행 하기 위한 기본적인 개요를 제공 합니다. 이 프로토콜 Balb/cJ 마우스에 사용 하기 위해 최적화 된 하지만 다른 질문, ABA의 유전적 요인에 특히 관련 된 작업에 뛰어난 유연성을 제공 하는 다른 긴장에 대 한 쉽게 조작할 수 있습니다.

두뇌 파생 된 neurotrophic 요인 (BDNF), 단백질 체중 유지 보수, 뿐만 아니라 먹이의 조절에 기여 하는35와 함께 환자의 혈 청에서 감소 된다. 이 실험 예정 먹이, 실행 바퀴 액세스 또는 BDNF 식 마 (HPC), 복 부 tegmental 지역 (VTA), 핵 accumbens (NAc), 내측 전 두 엽 피 질 (mPFC) 내에 둘 다의 효과 평가. 신경 세포 접착 분자 1의 표현 (NCAM1) mesocorticolimbic 통로에서 BDNF에 효과의 특이성을 탐험을 평가 했다.
쥐 동물 보호 시설에서 기후 제어 룸에 12시 12분 빛 어두운 주기 내에서 개별적으로 보관 했다. 감 금 소는 릴레이 데이터 모든 30 무선 실행 바퀴를 갖춘 했다 노트북 s. 표준 차 항아리에 제공 했다 약 2"직경에서...

개별적으로 음식에 제한 된 액세스 주어진 실행 바퀴와 함께 지 내게 쥐 음식 소비에 있는 감소를 개발 하 고 실행 바퀴에 활동. 이 실험적인 현상 활동 기반 거식 증을 이라고 합니다. 이 패러다임 신경 생물학 분야를 연구 하 고 거식 증 nervosa의 기본 동작에 대 한 실험 도구를 제공 합니다.

Rodents develop activity-based anorexia (ABA) when exposed to a restricted feeding schedule and allowed free access to a running wheel. These conditions ...

이 실험의 전반적인 목표는 신경성 식욕 부진증의 기저에 있는 신경생물학과 행동을 조사하는 것입니다. 이 방법은 신경성 식욕 부진증의 신경 토대가 무엇인지, 어떤 뇌 회로가 관련되어 있는지와 같은 섭식 장애와 관련된 정신 의학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 인간에서는 평가할 수 없는 거식증의 근본적인 메커니즘을 연구하는 데 사용할 수 있다는 것이다.노트북과 휠 허브에 가까운 케이지 랙을 선택하여 실험 영역을 설정합니다. 이렇게 하면 데이터 전송 문제가 제한됩니다. 이제 휠 허브와 소프트웨어 간의 연결을 활성화하십시오.먼저 휠 관리 소프트웨어를 열어 두 무선 허브가 모두 활성화되어 있는지 확인합니다. 소프트웨어에서 기본 휠 연결을 재설정합니다. 도구를 열고 휠 삭제를 선택합니다.이 단계를 5번 반복한 다음 소프트웨어를 닫았다가 다시 엽니다. 다음으로 바퀴에 동력을 공급합니다. 배터리 팩 와이어를 휠 하드웨어에 연결하고 배터리를 휠 베이스에 삽입합니다.그런 다음 소프트웨어를 살펴보십시오. 휠베이스는 적절한 무선 허브 아래에 하나의 ID와 함께 나열되어야 합니다. 그렇지 않은 경우 배터리 팩을 분리하고 소프트웨어에서 휠을 삭제한 다음 다시 시도하십시오.바퀴가 인식되면 ID를 해당 동물의 ID로 교체하십시오.그런 다음 주행 바퀴의 바닥을 덕트 테이프로 케이지 바닥에 부착하여 안정성을 확보합니다. 생쥐가 노출된 테이프를 씹을 수 있으므로 테이프가 튀어나오지 않도록 하십시오. 다음으로, 베이스에 부식된 마그네틱이 없는 러닝 휠 디스크를 놓고 휠을 회전시켜 케이지 벽과 격자로부터 간격을 확인합니다.디스크를 돌리고 각 회전이 소프트웨어에 제대로 등록되는지 확인하십시오. 그런 다음 덕트 테이프를 사용하여 음식 항아리를 케이지에 고정합니다. 달리는 바퀴와 물병에서 멀리 두십시오.그런 다음 항아리에 차우 두 조각을 넣고 물병을 가득 채운 케이지에 부착하고 케이지 바닥에 침구를 추가합니다. 이러한 방식으로 모든 케이지를 준비한 후 마우스를 적절한 케이지에 개별적으로 배치합니다. 모든 쥐가 케이지에 들어가면 소프트웨어로 이동하여 파일을 클릭 한 다음 수집을 시작하십시오.실험 전반에 걸쳐 시험 단계를 나누기 위해 새로운 인수를 시작합니다. 이제 쥐가 이틀 동안 주거 환경에 적응하도록하십시오. 이 단계에서 각 마우스가 ABA 실험을 처리할 수 있을 만큼 건강한지 결정합니다.실험 셋째 날에

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Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

내는, 둥지 및 비장은 쥐가 쉽게 실험실에서 수행하는 종 - 전형적인 활동입니다. 이 문서들은 쉽고 저렴하게 평가하는 방법을 설명합니다. 이러한 프로토콜은 마우스 스트레인, 뇌 병변 및 질환에 매우 민감합니다. 또한 그들은 생쥐에 대한 "환경 농축"를 구성하고, "3 RS"18 "다듬 는다"부분을 구현.

평가는 마우스에 둥지 건설, 그리고 비장을내는

전위의 활동 (LMA)는 생쥐의 행동을 간단하고 쉽게 수행 측정이다. 비디오 추적 소프트웨어 (VTS) 및 LMA의 커플 링 LMA 분석 설명서, 라인 교차 방식에 비해 특히, 특이성 및 감도 개선 할 수 있습니다. 또한 VTS 마우스 LMA의 장기 추적을 할 수 있습니다.

마우스의 단기 및 장기 전위의 활동은 영상 추적 소프트웨어에 의해 분석

오픈 필드 활동 수준이 기관차 및 행동 활동 수준을 평가하기 위해 사용된다. 이 프로토콜은 신경 근육 질환에 대한 임상 시험에서 사용하는 잘 설계된 표준화 된 프로토콜을 제공합니다.

골격근 질환에 대한 열기 필드 활동 모니터링 시스템을 사용하여 행동 및 운동력 측정

여기에서는 암컷 청소년기 마우스에서 활동 기반 거식증(ABA)을 유도하는 프로토콜을 제시합니다. ABA는 달리는 바퀴에 접근할 수 있는 설치류에게 음식 제한을 가함으로써 유발되는 과잉 행동 상태입니다. 이 현상은 신경성 식욕 부진증의 근본적인 신경생물학을 연구하기 위한 모델로 사용되고 있습니다.

활동 기반 식욕 부진 설치류 모델을 사용하면 거식증의 신경 생물학적 기초 연구에

우리는 전신 마 취를 사용 하 여 프로시저 동안 쥐에 복지를 평가 하기 위해 프로토콜을 개발. 복지의 수준 뿐만 아니라 glucocorticoid 대사 산물 분석 했다 나타내는 행동 매개 변수의 시리즈. 프로토콜은 과학, 동물 중심 방식에서 심각도의 정도 추정 하는 일반적인 보조로 사용할 수 있습니다.

일반 마 취 기계를 사용 하 여 프로시저에 대 한 마우스에 웰빙의 체계적인 평가

이 프로토콜 신체 조성 분석기와 신체 구성 및 쥐에서 대사 매개 변수 특성을 대사 동물 모니터링 시스템의 사용을 설명 합니다. 고 지방 먹이로 유도 된 비만 모델은 이러한 기술의 응용 프로그램에 대 한 예제로 사용 됩니다.

신체 구성 및 높은 지방 연 준 쥐에서 대사 배우면 분석

이 원고는 비만 마우스에 있는 열발생 성 분포세포의 기저 대사 속도 및 산화 용량을 측정하는 프로토콜을 기술합니다.

비만 마우스에 있는 에너지를 소모하기 위하여 기저 에너지 지출 및 열발생 성 지방세포의 용량을 결정합니다

설치류 모델은 자폐 스펙트럼 장애(ASD)와 관련된 핵심 행동을 연구하는 데 유용한 도구입니다. 이 기사에서는 생쥐에서 ASD의 핵심 기능을 모델링하기 위한 두 가지 행동 테스트, 즉 반복적인 행동을 평가하는 셀프 그루밍(self-grooming)과 사회적 장애를 문서화하는 3개의 챔버 사회적 상호 작용 테스트(three-chamber social interaction test)에 대해 설명합니다.

생쥐의 자폐증과 유사한 행동을 평가하기 위한 전략

본 연구는 매일 4가지 사회적 스트레스 요인을 통합함으로써 암컷 C57BL/6J 마우스의 정신 장애에 대한 다중 통합 사회적 스트레스(MISS) 모델을 설명합니다. 10일 동안 MISS 노출을 반복한 후, 생쥐는 우울증과 불안과 같은 표현형을 개발하여 여성 피험자의 정신 장애를 연구하기 위한 자연스러운 병인학 기반 동물 모델을 제공했습니다.

암컷 C57BL/6J 마우스의 정신 장애에 대한 다중 통합 사회적 스트레스 모델

M&amp;M(지방과 설탕으로 만든 매우 맛있는 음식)에 간헐적으로 접근하는 것을 사용하여 쥐에서 폭식 모델이 확립되었습니다. 이 고지방, 고설탕 식품에 간헐적으로 접근하는 생쥐는 음식에 지속적으로 접근하거나 전혀 접근하지 않는 쥐에 비해 스트레스와 같은 행동, 칼로리 섭취 증가 및 표준 차우보다 해당 음식을 선호하는 것으로 나타났습니다.

생쥐의 간헐적 폭식 모델

학습하세요 쥐의 활동 기반 거식증 모델을 통해 신경생물학 및 행동 메커니즘을 연구하는 방법을. 이 기법은 인간에서 평가할 수 없는 거식증의 근본 원인을 연구하는 데 활용됩니다.

쥐의 활동 기반 거식 증을 평가

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