마우스에 가로 대동맥 수축 유도를 폐쇄 가슴 모델

이 절차의 전반적인 목표는 쥐 폐쇄 흉부 모델에서 횡방향 대동맥 수축을 수행하여 좌심실 심근 비대를 유도하는 것입니다. 이 최소 침습적 기법은 호흡기 질환을 줄이고 염증 반응을 최소화하는 데 도움이 된다. 이 방법은 면역학 분야의 주요 질문, 예를 들어 좌심실 비대 발병에서 심장 대식의 반응에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다.

이 기술의 가장 큰 장점은 흉곽이 손상되지 않아 외상이 최소화된다는 것입니다. 공간과 일회 호흡량은 체중에 맞게 조정되기 때문에 이 프로토콜은 다양한 크기의 마우스에 사용할 수 있습니다. 또한 수술 외상을 줄이고 측정 값의 편차를 줄입니다.

마우스 마취 후 텍스트 프로토콜에 따라 마우스를 온도 조절이 가능한 수술대로 옮기고 마취 유도 상자에 연결된 노즈콘을 분리하여 마취 상태를 유지합니다. 나일론 봉합사로 마우스의 위쪽 앞니를 고정합니다. 반사가 없는지 확인하기 위해 꼬리를 꼬집습니다.

접착 테이프를 사용하여 사지를 고정합니다. 직장 프로브를 삽입한 후 제조업체의 지침에 따라 목구멍과 가슴 위쪽에 제모 크림을 바르고 1분 동안 그대로 두십시오. 그런 다음 크림을 닦아내고 필요한 경우 반복합니다.

인공호흡기 설정을 생리학적 매개변수에 맞게 조정하고 동물을 수술용 현미경으로 관찰한 상태에서 하악 아래 약 3mm 정중선의 피부를 두 번째 갈비뼈까지 절개합니다. 턱밑샘의 정중선과 결합 조직을 확인합니다. 그런 다음 두 개의 각진 집게를 사용하여 정중선에서 분비선을 부드럽고 뭉툭하게 나누고 기관 근육을 탐색합니다.

기관주위 근육을 무뚝뚝하게 당겨 기관을 부드럽게 준비합니다. 삽관이 더 쉬워질 수 있도록 집게를 사용하여 혀를 당겨 목을 곧게 펴고 기관 내부에 삽관 캐뉼라를 부드럽게 삽입합니다. 기관 내부의 튜브를 직접 시각화하고 흉부가 제대로 움직이는지 확인하여 삽관을 확인합니다.

기관에 부속되어 있는 양쪽 경동맥을 겸자로 하여 결합 조직을 부드럽게 잡아당겨 준비합니다. 20헤르츠 도플러 프로브 끝에 초음파 젤을 바르고 프로브 끝을 45도 미만의 각도로 오른쪽 및 왼쪽 경동맥에 놓습니다. 프로브를 천천히 회전하여 측면 및 내측으로 이동하여 도플러 신호를 찾은 다음 프로브를 기울여 신호를 최적화합니다.

새 멸균 장갑과 가위를 사용하여 피부 절개 부위를 두 번째 늑간 공간까지 확장합니다. 그런 다음 집게 끝으로 두 번째 늑간 공간을 열고 견인기를 삽입합니다. 200% 배율에서 정중선 및 결합 조직을 식별합니다.

그런 다음 각진 집게를 사용하여 흉선을 부드럽게 나눕니다. 대동맥궁이 명확하게 보일 때까지 지방 조직을 제거합니다. 각진 엄지 손가락 집게를 사용하여 횡 대동맥 아래, 상완 두동맥과 왼쪽 총경동맥 사이의 터널을 준비합니다.

그런 다음 가는 집게를 사용하여 6-0 봉합사를 잡고 실을 대동맥궁 아래로 통과시킵니다. 두 번째 집게로 아치의 반대쪽에서 실을 가져옵니다. 스페이서를 횡 대동맥과 평행하게 조심스럽게 놓습니다.

스페이서에 느슨한 이중 매듭을 준비하고 대동맥과 평행하게 스페이서의 최적 배치를 보장합니다. 그런 다음 첫 번째 매듭을 묶고 빠르게 두 번째 반대 매듭을 만든 다음 스페이서를 즉시 제거합니다. 전체 절차에서 가장 중요한 단계는 두 매듭을 빠르고 단단히 묶고 스페이서를 즉시 제거하는 것입니다.

6-0 폴리프로필렌 봉합사로 두 번째 늑간 공간을 닫고 결찰할 때 쇄골하 혈관에 특히 주의하십시오. 그런 다음 6-0 폴리프로필렌 봉합사를 사용하여 피부를 연속 봉합사 패턴으로 꿰매십시오. 결찰을 확인하고 텍스트 프로토콜에 따라 수술 후 관리를 수행합니다.

이러한 도플러 유속 측정은 좌심실과 대동맥의 압력 상승으로 인해 우측 경동맥의 혈액 속도를 증가시키는 동시에 좌측 경동맥에서 협착 후 혈류 속도를 유발하는 성공적인 TAC를 검증합니다. 이 그래프에서 볼 수 있듯이, 심장 체중과 체중 비율은 수술 6일 후에 밴드가 없는 마우스에 비해 TAC 마우스에서 유의하게 증가했습니다. 이 비율은 21일 후에도 거의 일정했습니다.

심박수는 좌심실 수축성과 심박출량에 상당한 영향을 미칩니다. 이 그래프는 21일 후 대동맥 띠 마우스와 비 대동맥 띠 마우스의 심박수에 차이가 없음을 보여줍니다. 여기에서 입증된 바와 같이, 대동맥의 지속적인 밴딩은 21일 후 좌심실 카테터를 통해 측정된 수축기 혈압 증가에 의해 입증되었습니다.

C57 블랙 식스 마우스는 일반적으로 TAC 후 수축기 기능 장애를 동반한 편심 비대가 발생하는 것으로 알려져 있습니다. 좌심실 직경의 증가가 발견되었으며, 이는 압력 부피 측정에서도 중요한 것으로 보입니다. 그 결과, 수축기 말기 및 이완기 용적이 크게 증가했습니다.

이 기술을 마스터하면 제대로 수행한다면 10분 이내에 수행할 수 있습니다. 마지막으로, 이 절차는 최소한의 외과적 외상이 면역 체계의 비특이적 유도를 제한하기 때문에 좌심실 비대에서 면역 반응에 대한 최적화된 분석을 제공합니다. 이 비디오를 시청한 후에는 표준화된 최소 침습적 횡방향 대동맥 수축을 수행하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.