Name: 수 면 기간 설치류의 비 침범 성, 높은 처리량 결정 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-18T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 33 s
Description: 배우세요 설치류 수면 측정을 위한 비침범적 고처리량 방법을. 홈케이지 적외선 모니터링으로 EEG 대비 간편하게 수면 시간을 정확히 측정하여 질병 연구에 활용할 수 있습니다.

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저자 그들의 편집에 NIH 동료 편집 위원회를 인정 하 고 싶습니다. 이 연구는 NIMH (지아 MH00889)의 교내 연구 프로그램에 의해 투자 되었다. RMS는 FRAXA 박사 친교에 의해 또한 지원 되었다.

모든 절차는 국립 연구소의 정신 건강 동물 관리 및 사용 위원회에 의해 승인 되었고 국립 연구소의 건강 지침 서 관심과 동물의 사용에 따라 수행.
1. 수 면 탐지 단위 설정
<ol><li>원하는 수 단위 및 소프트웨어를 구입.</li>
	<li>모니터링 시스템을 설정 하는 지침을 따릅니다.<ol>
<li>미터 반대 검출기를 맞춥니다. 적외선 빔 안쪽에 직면 하 고 동일한 높이로 정렬 됩니다 있는지 확인 합니다.</li>
		<li>제공 된 나사를 사용 하 여 금속 스탠드에 원하는 높이에 미터와 검출기 위치. 있도록 장의 침구 적외선 광선의 수준 이지만 빔 동물의 활동을 검출 하기 위하여 적절 한 높이에서이 높이 조정 한다. 이 27 cm × 32cm의 내부 영역 생성 (10.625 ×에서 12.75에서).<ol>
<li>더 많은 나사를 필요한 경우는 하드웨어에 더 구매 저장 (팬 헤드 나사에 6-32 ¼).</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>각이 미터와 각 검출기를 연결 합니다. 이 미터 수신기에 연결 된 허브에 연결 합니다. X와 y 비행기에 이것을 수행 합니다. 모든 설정에 대해이 단계를 반복 합니다.</li>
	<li>제공 된 USB 허브는 컴퓨터에 수신기를 연결 합니다.</li>
</ol>2. 소프트웨어 설치
<ol><li>분석 소프트웨어를 설치 하 고 기본 제공된 하드웨어 구성 파일을 선택 합니다. 하드웨어 구성 파일 회사에 의해 바뀌어야만 한다.</li>
	<li>파일을 클릭 | 실험 구성. 기본 실험 구성을 엽니다.</li>
	<li>실험을 클릭 | 속성.</li>
	<li>클릭 스캔 탭 변경 속도 스캔 10 s.</li>
	<li>10 활동 샘플링 속도 변경 하는 클릭 활동 탭 s.</li>
	<li>파일을 클릭 | 실험으로 저장 미래 실험을 위한 이러한 구성 설정을 저장 합니다.</li>
</ol>3. 동물 설정
<ol><li>단독으로 31 cm (12.25) 길이 16.5 c m (6.5 안으로) 넓은 깨끗 한 장에 쥐 집. 침구를 구축 하 고 광선을 방해에서 마우스를 방지 하려면 3 m m의 깊이에서 침구를 사용 합니다. 쥐에 대 한 추가적인 둥지 물자를 제공 하지 않습니다.</li>
	<li>광고 libitum 와이어 피더 광선 왜곡이 케이지의 상단에 달려있다에 의하여 물 및 음식에 대 한 액세스와 쥐를 제공 합니다. 필요한 경우 음식 리필 하 고 물 병 케이지 연구 기간에 걸쳐 3-5 일 마다 변경 되 면 변경.</li>
	<li>그것은 전체 범위에 대 한 광선의 약 중간에 달려있다 보장 설정, 적외선 빔 내부 마우스 케이지를 맞춥니다.</li>
	<li>라이트 룸의 어두운 주기는 마우스의 일반 주택 조건 빛 어두운 주기의 거울 또는 실험에 따라 원하는 대로 변경로 설정 되어 있는지 확인 합니다.</li>
</ol>4. 준비 및 주사 약
<ol><li>살 균 물과 살 균 cyclodextrin를 얻을.</li>
	<li>모든 주사 25.5 30.5 G 피하 주사와 1 mL 주사기를 사용 합니다. 각 마우스에 대 한 새로운 멸 균 바늘과 주사기를 사용 되어야 한다.</li>
	<li>주사 사이 시간을 줄이기 위해, 모든 주사기를 사전에 조립.</li>
	<li>Cyclodextrin 주사: cyclodextrin의 3 세대 30 %cyclodextrin 솔루션을 물 10 mL에 추가 하 여 cyclodextrin 솔루션을 준비.</li>
	<li>식 염 수 또는 IP 주입을 통해 cyclodextrin 0.3 mL를 관리 합니다.</li>
</ol>5입니다. 소프트웨어 기록 자
<ol><li>기본 하드웨어 구성 파일을 엽니다.</li>
	<li>파일을 클릭 | 실험 구성. 원하는 열거나 기본 구성 실험.</li>
	<li>실험을 클릭 | 설치.<ol>
<li>데이터 파일을 저장할 위치 뿐만 아니라 백업 파일을 저장할 위치를 지정 합니다. 소프트웨어는 데이터 파일 특정 프로그램 폴더에서 프로그램 파일 에 저장 됩니다 필요 합니다. 참고: 일부 컴퓨터는 민감한으로 프로그램 파일 을 볼, 그 데이터 파일에 액세스할 수 없습니다 가능한 실험 후. 따라서 로컬 컴퓨터에 백업 파일을 다른, 중요 하지 않은 영역을 저장 하는 것이 좋습니다.</li>
		<li>동물 지정 ID를 각 수 면 챔버 및 원하는 경우 동물의 무게를 입력 하십시오. 챔버는 실험에 사용 되 고 하지 않으면, 확인란을 선택 취소 하는 것 그 챔버를 비활성화 됩니다. Id 정보가 입력 되 면 완료를 클릭 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>파일을 클릭 | 실험으로 저장 원하는 파일 이름 아래 현재 실험 구성 하기.</li>
	<li>실험을 클릭 | 실행 또는 f 5를 눌러 녹음을 시작 하. 모든 실 활동을 따기는 되도록 10 s 신 기원에 대 한 잠깐. 동물 그냥 주입 했다, 그것은 매우 가능성이 그 동물 이동 됩니다 적외선 광선에 의해 감지 될 정도로.<ol>
<li>활동이 감지 되 면 광선 움직임을 데리 러 수 있도록 수동으로 마우스 케이지를 이동 하려고 합니다. 문제 해결을 계속 하거나 활동은 기록 되지 않는 경우 작업 실로 이동 합니다. 참고: 주사 완료 하자마자 실험을 실행.</li>
	</ol>
</li>
	<li>빛을 차단 하는 불투명 한 커버와 함께 컴퓨터 화면을 커버. 활동 수준에 깜박이 불빛을 커버.</li>
	<li>24 h에 대 한 실험을 실행 합니다. 참고: 주사를 수행 하는 데 필요한 시간 때문에 그것은 되지 않습니다 전체 24 h. 주사는 매일 같은 시간에 수행 되어야 한다. 수 면 주사 동안 하지 기록 합니다.</li>
	<li>다음 날, 주사, 시 클릭 실험 | 중지 녹음 종료. 파일을 클릭 | 수출 | 생성 제목 해당 각 마우스에 대 한 원시 데이터를 수집. 참고: 그것은, 그래서 이렇게 즉시 내보내고 컴퓨터 처리 하는 동안 다음 주사 진행 시간이 좀 걸릴 수 있습니다.</li>
	<li>파일을 클릭 | 수출 | 수 면 파일을 내보냅니다 잠 각 실험에 대 한 원시 여. 소프트웨어가 설치 되어 있는 컴퓨터에 CDTA 데이터 파일입니다.<ol>
<li>검색 매개 변수 활동 소스, x 축 및 y 축 상자 검사 됩니다 확인.</li>
		<li>임계값 Epochs 수 면, 아래 4 epochs 선택 되어 있는지 확인 합니다.</li>
		<li>자 임계값 활동 임계값, 0 건의 선택 되어 있는지 확인 합니다.</li>
		<li>명암 주기에서 명암 주기 위한 적절 한 시간을 선택 합니다.</li>
		<li>분석 창에서 분석을 위해 원하는 시간을 선택 합니다. 주사 연구의 경우 기본적으로 날 을 둡니다. ExpSTART로 시작 시간 을 설정 합니다. 24:00 24 h. 분석 사용 하 여 최대 72 h에 대 한 소프트웨어를 할 수 있는 기간 을 설정 합니다.</li>
		<li>구성 데이터 내보내기에 대 한 시간을 절약할 수를 저장 합니다.</li>
		<li>업데이트를 클릭 합니다.</li>
		<li>CSV 파일 생성 을 클릭 하 고 원하는 위치에 파일을 저장 합니다.</li>
	</ol>
</li>
</ol>6. 데이터 분석
<ol><li>각 녹음 세션에 대 한 수 면 파일을 엽니다. 주제 ID를 할당 하려면 대상 ID를 확인 하려면 각 챔버에 대 한 개별 CSV 파일을 열으십시오 어린 아이 잠 h:mm: ss로 모두 빛과 모든 동물에 대 한 어두운 단계를 기록 합니다.<ol>
<li>녹음의 실패를 나타내는 불일치에 대 한 개별 주제 CSV 파일을 확인 하십시오. 하이 빔 건의 한 평면에서 감지 하지만 아무 수 다른 비행기에 관찰 된다,이 빔 실패를 나타냅니다. 참고:은 빛과 어두운 단계 포함 총 녹음 기간 동안 계산 "% 자" 빛과 어둠의 단계에 대 한. 12 h 명암 주기 12 h 빛 또는 어두운 단계에 "% 자"를 2로이 수를 곱하면 됩니다. 그 주사 연구 계산된 전체 24 시간에 가지 않았다 "% 자"는 것은 정확 하지 않다. 올바른 생성 하로 더하다 "잠" h:mm: ss로 나눕니다 "% 자"는 "실험 경과 시간: h:mm: ss로," 2, 증식 그리고 다음 100%를 곱합니다. 주사 빛 단계에서 수행 했다, 빛 단계는 이러한 방식으로 조정 될 필요가 있다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>다른 일 및 단계 서로 비교 되 고, 이후 각 단계 및 각 하루에 대 한 백분율 수 면 기간을 분석 합니다.</li>
</ol>

<ol><li>Picchioni, D., Reith, R. M., Nadel, J. L., Smith, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep%2C+plasticity+and+the+pathophysiology+of+neurodevelopmental+disorders%3A+the+potential+roles+of+protein+synthesis+and+other+cellular+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+sciences%22%5BJournal%5D)">Sleep, plasticity and the pathophysiology of neurodevelopmental disorders: the potential roles of protein synthesis and other cellular processes.</a> Brain sciences. 4, 150-201 (2014).</li>
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<li>Kincheski, G. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+sleep+restriction+promotes+brain+inflammation+and+synapse+loss%2C+and+potentiates+memory+impairment+induced+by+amyloid-beta+oligomers+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+behavior%2C+and+immunity%22%5BJournal%5D)">Chronic sleep restriction promotes brain inflammation and synapse loss, and potentiates memory impairment induced by amyloid-beta oligomers in mice.</a> Brain, behavior, and immunity. 64, 140-151 (2017).</li>
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<li>Chen, L., Toth, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fragile+X+mice+develop+sensory+hyperreactivity+to+auditory+stimuli%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Fragile X mice develop sensory hyperreactivity to auditory stimuli.</a> Neuroscience. 103, 1043-1050 (2001).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

여기, 우리는 수 면 기간 홈 장에 모니터링 활동에 따라 결정 하는 비 침범 성, 높은 처리량 방법 제시. 총 수 면 시간에 대 한 평가의이 방법은 뇌 파 연구3에 대 한 검증 되었습니다. 활동 기반 홈 케이지 모니터링 하는 것이 간단 하 고, 비 침범 성, 동물의 많은 수에 인구 연구에 적용 합니다. 그것은 제한에 그것 (수 면 시 합 기간 및 수 면 단계) 등 수 면에 대 한 자세한 정보를 드릴 수 없습니다.
이 방법 분석의 함정은 검출 하기 매우 쉽다. 광선의 연구 기간 동안 방해는 중요 하다.입니다. 이 감 금 소의 지역에서 침구의 형성에 의해 발생할 수 있습니다. 이 침구 3 m m의 높이 제한 하 고 추가 중첩 물자를 제거 하 여 최소화할 수 있습니다. 침구의이 금액은 새 장 바닥을 커버 하기에 충분 하 고 낮은 침구 볼륨 하지 쥐 17에서 스트레스 수준에 영향을 발견 되었습니다. 추가 중첩 자료 또한 빔 ...

수 면 신체와 뇌 깨어1일일 부담을 다음의 복원에 대 한 중요 한 기능이 있다. 그것은 보였다 수 면 메모리 보존 및 일반적인 뇌가 소성1역할을 한다. 뇌 파 감지 수 면2골드 표준입니다. 설치류, 뇌 파 모니터링 후 동물 필요2복구 기간 머리 마운트에 부착 된 전극의 외과 이식을 합니다. 복구 후 동물 녹음 장치에 연결 하 고 다른 주어진 habituation2의 기간. 복구 및 습관 들 임이 필요한 기간 때문에 뇌 파 시간이 소모 하 고 힘 드는 하 고 큰 규모에서 합리적으로 수행할 수 없습니다. 또한, 전극 이식의 수술 동물에 내재 된 위험을 운반합니다. 마지막으로, 수 면 뇌 파 연구에서 득점을 위한 데이터 분석 또한 매우 힘 드는입니다. 대신, 비-침략 적, 높은 처리량 방법 수 면 모니터링의 설치류 수 면 연구를 원조 크게 것 이다.
활동 기반 홈 케이지 모니터링 시스템 절전을 검색 하는 데 사용 뇌 파 연구의 한계를 해결 합니다. 간단한 전제가 이다 비활성 동물 가능성이 자 동물. 그것은 보였다 그 40 연속 비활성 (10 s 신 기원에 있는 범주화)의 s 수 면 뇌 파 (88-94% 계약을 표시)3측정 된 신뢰할 수 있는 측정 이다. 홈-케이지 모니터링 시스템 공부 최소한의 설정 시간으로 동물의 큰 그룹을 사용할 수 있습니다. 우리는 동물 약 1 일 하는 데 걸리는 복구 뇌 파 연구2에 필요한 주 달리 홈 케이지 모니터링 시스템4 개별 주택에 길 들 나타났습니다. 또한, 일부 설정 또한 핵심 체온, 심장 박동, 활동, 및 먹이 등 생리 적 매개 변수를 검색할 수 있습니다. 온도 심장 박동 작은 송신기의 주입에서 결정 됩니다. 이 매개 변수는 마우스에 대 한 자세한 정보를 제공할 수 있습니다 그리고 수 면 및 그것 영향의 우리의 이해에 더 추가할 수 면 녹화와 동시에 사용할 수 있습니다.
그것은 강력한 도구, 홈-케이지 모니터링 활동 기반에서 취득 될 수 있는 데이터의 종류를 몇 가지 제한 사항이 있습니다. 뇌 파 연구 rem 수 면과 비-REM 수 면, 수 면 아키텍처의 깊은 이해에 대 한 중요 구별할 수 있습니다. 활동 기반 홈 케이지 모니터링 시스템만 총 수 면 시간에 대 한 데이터를 제공할 수 있습니다. 또한, 홈-케이지 모니터링 활동 기반에 대 한 출력 수 면 시 합 기간에 대 한 정보를 제공, 하지만 우리 수 없습니다 정확 하 게 평가 시 합 기간 40 s 간격3의 고유한 제한 때문에. 이러한 제한에도 불구 하 고 홈-케이지 수 면 기간 모니터링 동물의 건강과 행동5를 포함 하 여 많은 다운스트림 요소에 영향을 미칠 수 있는 중요 한 생물 측정을 제공 합니다.
홈-케이지 모니터링 활동 기반은 그것의 다양성을 나타내는 많은 연구에서 수 면을 감지 하 사용 되었습니다. 우리는 이러한 연구4,6,7,8,9,10,,1112의 샘플을 인용. 제시 하는 메서드와 검색 활동 기반 모니터링, 각 포함 하는 자체 제한13,14을 통해 수 면의 다른 방법이 있다. 이러한 연구의 일부 검사 중단된 자 (72 h)의 오랜 기간 동안 일부 수 면 검사 24 h에. 본이 연구에서는 우리 일상 복 (IP) 주사 하 고 허약한 X 증후군 (Fmr1 코 쥐)의 마우스 모델에서 정기적인 케이지 변화에 응답 후 각 24 시간 동안 수 면 분석을 제시. 그들은 수 면4 감소 때문에 하이퍼-반응 감각 정보15수 hypothesized Fmr1 코 마우스 선택 했습니다. 우리의 데이터는 스트레스 이벤트에 대 한 응답에서 수 면 패턴에 변화를 감지 하는 능력을 강조 표시 합니다. 이 메서드는 마우스의 큰 동료에서 수 면에 대 한 일반 정보를 얻기 위해 이상적. 메서드는 특정 유전 변경 수 면, 약물 치료, 또는 스트레스 등의 이벤트에 대 한 응답의 효과의 효과 이해 하는 데 유용할 수 있습니다. 또한, 메서드는 더 많은 연구를 시작 하기 전에 응답에 대 한 심사의 간단한 수단을 제공 합니다.

<table><tbody><tr><td>포괄적 인 실험실 동물 모니터링 시스템 (CLAMS)</td> <td>콜럼버스 기기</td><td></td><td>수면 시간 분석을 위한 장비 및 소프트웨어</td></tr><tr><td>Captisol Research Grade</td><td>Captisol</td><td>RC-0C7-100</td><td>소수성 화합물 용해용 Captisol</td></tr><tr><td>30 G BD 바늘 1/2 인치</td><td>BD</td><td>305106</td><td>주사용 바늘</td></tr><tr><td>BD 일회용 주사기</td><td>Fisher</td><td>14-823-30</td><td>주사기용 주사기</td></tr><tr><td>B6.129P2-Fmr1tm1Cgr/J</td><td>Jackson Labs</td><td>3025</td><td>Fmr1 KO 마우스</td></tr><tr><td>슈퍼 마우스 750 마우스 케이지</td><td>랩 제품, Inc.&nbsp;</td><td></td><td>생쥐를 위한 홈케이지</td></tr><tr><td>SANI-Chips 침구</td><td>PJ Murphys</td><td></td><td>쥐용 침구</td></tr></tbody></table>

수 면 기간 설치류의 비 침범 성, 높은 처리량 결정

Noninvasive, High-throughput Determination of Sleep Duration in Rodents

전통적으로, 수 면 뇌 파 (EEG)에 의해 모니터링 됩니다. 설치류에서 뇌 파 연구는 긴 회복 기간 다음에 전극의 외과 이식이 필요 합니다. 뇌 파 녹음을 수행 하려면 동물 머리 마운트 부자연 스러운 밧줄 만들기는 수신기에 연결 됩니다. 뇌 파 모니터링 하는 것은 시간이 걸리는, 캐리는 동물에 위험 및 수 면의 측정에 대 한 완전히 자연 설정 되지 않습니다. 높은 처리량 패션에 특히 수 면을 감지 하는 다른 방법 수 면 연구의 분야를 사전 크게 것 이다. 여기, 우리 집 케이지 모니터링 활동 기반을 통해 수 면을 탐지 하기 위한 검증된 방법 설명. 이전 연구는이 방법을 통해 평가 하는 수 면 수 면 뇌 파 기반 전통적인 측정에 의해 정의 된 계약의 높은 학위를가지고 나타났습니다. 이 메서드는 전체 수 면 시간에 대 한 유효성을 검사 하는 반면에, 그것은 수 면 시 합 기간 더 나은 시간 해상도 뇌 파에 의해 평가 되어야 한다 주의 하는 것이 중요. 빠른 안구 운동 (REM)과 비-REM 수 면, 수 면의 정확한 본질에 대 한 더 많은 세부 정보를 제공에 뇌 파 차별화할 수 있습니다. 그럼에도 불구 하 고, 활동 기반 수 면 결정 그대로 수 면의 여러 일을 분석 하 고 (스트레스) 같은 급성 이벤트에 대 한 응답으로 수 면을 평가 하기 위해 사용할 수 있습니다. 여기, 우리가 매일 복 주사에 대 한 마우스의 응답을 검출 하기 위하여이 시스템의 힘을 보여줍니다.

수 면과 여부 동물 주사 하 길 들에 매일 주사의 효과 확인 하려면 우리는 오전 9시 (오전 6 시 시작 하는 가벼운 주기)에서 14 일 연속 매일 IP 주사를 수행 12 Fmr1 코 C57Bl/6J 쥐에 있는 잠 기간을 기록. 우리는 주제 디자인, 내 주입 각 동물 정상적인 염 분 4 일 연속 (일 1-4)와 다음에 대 한 30 %cyclodextrin 다음 10 일 연속 (5-14 일). 약국에 대 한 소수 성 화합물을 분해 하는 데 사용 수 수 있기 때문에 우리 자동차 사출 마우스 수 면 영향을 미칠 수 어떻게에 관심이 있었다 Cyclodextrin 선정 됐다. 녹음의 긴 기간을 감안할 때, 우리 또한 연구 내내 일주일에 두 번 감 금 소를 변경. 케이지 변경 일에 주사와 동시에 수행 했다 표시. 우리는 주사 및 케이지 변화 (그림 1)의 14 일에 걸쳐 빛과 어두운 단계에 대 한 평균 % 수 면...

활동 기반 홈 케이지 모니터링 통해 수 면을 측정 하는 높은 처리량 방법을 설명 합니다. 이 방법은 전통적인 뇌 파 기반 방법에 비해 이점이 있습니다. 그것은 잘 총 수 면 기간 결정에 대 한 유효성을 검사 하 고 인간 질병의 설치류 모델에서 수 면을 모니터링 하는 강력한 도구가 될 수 있습니다.

Traditionally, sleep is monitored by an electroencephalogram (EEG). EEG studies in rodents require surgical implantation of the electrodes followed by a ...

이 실험의 전반적인 목표는 높은 처리량과 비침습적 방식으로 총 수면 시간을 기록하는 것입니다. 이 방법은 총 수면 시간과 같은 수면 필드의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 처리량이 많고 비침습적이며 쉽게 실행할 수 있다는 것입니다.이 절차를 시연하는 것은 실험실의 학사 후 연구원인 Abigail Lemons입니다. 절차를 시작하려면 감지기를 이미터 반대편에 정렬합니다. 적외선 빔이 안쪽을 향하고 같은 높이에 정렬되어 있는지 확인하십시오.그런 다음 제공된 나사를 사용하여 감지기와 이미터를 금속 스탠드의 원하는 높이에 배치합니다. 이 높이는 케이지의 침구가 적외선 빔 수준보다 낮도록 조정해야 하지만 빔은 동물의 활동을 감지하기에 적절한 높이에 있습니다. 이렇게 하면 27cm x 32cm의 내부 영역이 만들어집니다.그런 다음 각 이미터와 함께 각 감지기에 연결합니다. 수신기에 연결된 제공된 허브에 이미터를 연결합니다. X 평면과 Y 평면 모두에 대해 이 작업을 수행합니다.모든 설정에 대해 이 작업을 반복합니다. 그런 다음 제공된 USB 허브가 있는 컴퓨터에 수신기를 연결합니다. 소프트웨어를 설정하려면 파일을 클릭한 다음 실험 구성을 열어 기본 실험 구성을 엽니다.그런 다음 실험, 속성을 클릭합니다. 그런 다음 스캔 탭을 클릭합니다. 스캔 속도를 10초로 변경합니다.그런 다음 활동 탭을 클릭합니다. 활동 샘플링 속도를 10초로 변경합니다. 그런 다음 파일, 다른 이름으로 실험 구성 저장을 클릭하여 향후 실험을 위해 이러한 구성 설정을 저장합니다.이 단계에서는 길이 31cm, 너비 16.5cm의 깨끗한 우리에 쥐를 단독으로 수용합니다. 생쥐가 침구를 쌓아 올리고 빔을 방해하는 것을 방지하려면 3mm 깊이의 침구를 사용하고 추가 중첩 재료를 제공하지 마십시오. 빔을 방해하지 않도록 케이지 상단에 있는 와이어 피더를 통해 마우스가 음식과 물에 자유롭게 접근할 수 있도록 합니다.필요한 경우 연구 기간 동안 3-5일마다 케이지를 교체할 때 음식을 다시 채우고 물병을 교체하십시오. 그런 다음 마우스 케이지를 적외선 빔 설정 내부에 정렬하여 전체 커버리지를 위해 콩의 대략 중앙에 놓이도록 합니다. 이제 기본 구성 파일을 엽니다.파일, 실험 구성 열기를 클릭하여 원하는 실험 구성 또는 기본 실험 구성을 엽니다. 그런 다음 실험을 클릭한 다음 설정을 클릭합니다. 데이터 파일을 저장할 위치와 백업

noninvasive-high-throughput-determination-of-sleep-duration-in-rodents

Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

절차는 뇌파, electromyogram, 그리고 뇌성 젖산 농도를 모니터링하는 동안 optogenetically 뇌성 대뇌 피질의 피라미드 뉴런의 활동을 조작하기위한 설명되어 있습니다. 사람들이 자연 수면 / 웨이크주기를 받아야 동안 실험 녹음 케이블 테 더링 마우스에 수행됩니다. Optogenetic 장비는 우리의 실험실에서 조립, 녹화 장비는 상업적으로 사용할 수 있습니다.

동시 Electroencephalography, 설치류 대뇌 피질의 젖산 농도와 Neuronal 활동 Optogenetic 조작의 실시간 측정

출처: Kodani, S., et.al. 마우스의 수면/각성 상태를 모니터링하는 동안 신경 회로의 광유전학적 조작. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 생쥐의 수면에서 각성으로의 전환에 관여하는 신경 회로의 광유전학적 조작을 보여줍니다. 이 절차에는 광섬유와 전극을 뇌와 근육에 외과적으로 이식하여 빛 자극과 전기생리학적 기록을 가능하게 하는 것이 포함됩니다. 말단 줄조선(BNST)의 침대 핵에서 빛에 민감한 양이온 채널을 활성화하기 위해 빛을 전달함으로써 신경 활동이 조절되어 연구자들은 각성 유도와 관련된 뇌 및 근육 신호를 분석할 수 있습니다.

마우스의 수면에서 각성으로의 전환을 위한 신경 회로의 광유전학적 조작

이 비디오는 마취된 마우스에 뇌파(EEG) 및 근전도(EMG) 전극 어셈블리를 이식하는 프로토콜을 보여줍니다. 이 프로세스에는 입체 프레임에 마우스를 고정하고, 두개골의 정중선을 절개하고, 전극을 위한 구멍을 뚫고, 신호 기록을 위해 전극 장치를 고정하는 작업이 포함됩니다. 복구 후 기록된 신호를 사용하여 마우스의 수면-절전 모드 해제 동작을 분석합니다.

뇌파 및 근전도 기록을 통한 마우스의 수면 행동 분석

자유롭게 행동하는 쥐에서 뇌파(EEG)와 근전도(EMG)를 기록하는 것은 행동 및 생리학을 수면 및 각성과 연관시키는 중요한 단계입니다. 본 명세서에 기술된 실험 프로토콜은 마우스에서 EEG 및 EMG 기록을 획득하기 위한 케이블-기반 시스템을 제공한다.

마우스 절전 모드를 측정 등사 기록 절차

인간의 심리 운동 경계 테스트 (PVT)의 쥐 버전은 관심의 조기 응답 등 성능 정확도, 모터 속도, 인간 경계의 측면, 및 경과 포함한 인간 PVT, 측정 된 것과 유사한 관심의 양상을 측정하고 그 설명된다.

설치류 심리 운동 경계 시험 (rPVT) : 쥐에서 신경 행동 학적 성능을 평가하는 방법

여기, 음향 자극에 수면 반응을 조절하는 생쥐의 비 REM 수면의 신경 및 심장 변수의 시간적 역학을 설명하기위한 실험 및 분석 절차를 제시합니다.

수면 마우스의 스펙트럼 파워 및 심박수의 저속 역학 정량화

여기에서, 우리는 마우스에 있는 잠/각성 상태의 감시 도중 뉴런의 특정 모형의 광유전학 조작의 방법을 기술합니다, 예를 들면 stria 말단의 침대 핵에 우리의 최근 일을 제시하.

마우스에서 수면/각성 상태를 모니터링하는 동안 신경 회로의 광유전학 적 조작

본 프로토콜은 마우스에서 수면 박탈을 유도하기 위해 사용되는 비용 효율적인 로커 플랫폼 기반 장치를 설정하는 방법을 개략적으로 설명합니다. 이 장치는 뇌전도(EEG)로 입증된 수면 패턴에 혼란을 일으키고 수면 부족과 관련된 대사 및 분자 변화를 유도하는 데 효과적인 것으로 입증되었습니다.

생쥐의 수면 박탈에 대한 장치 설정

제시된 것은 노인 초파리 모델에서 초파리 의 수면 행동을 모니터링하여 수면을 개선하기 위한 고처리량 약물 스크리닝을 위한 프로토콜입니다.

Drosophila melanogaster를 사용하여 나이 관련 수면 장애를 위한 High-throughput 작은 분자 약 검열

코딩 경험이 없는 연구자가 간단한 다운로드 및 조작으로 마우스의 수면 단계를 점수화할 수 있도록 그래픽 사용자 인터페이스가 포함된 소프트웨어 패키지를 제공합니다.

IntelliSleepScorer, 마우스용 그래픽 사용자 인터페이스가 포함된 소프트웨어 패키지 자동 수면 단계 점수 매기기

배우세요 설치류 수면 측정을 위한 비침범적 고처리량 방법을. 홈케이지 적외선 모니터링으로 EEG 대비 간편하게 수면 시간을 정확히 측정하여 질병 연구에 활용할 수 있습니다.

수 면 기간 설치류의 비 침범 성, 높은 처리량 결정

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