Name: 독 독 소 암살자 버그와 다른 Heteropteran 곤충에서 수확 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-21T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 45 s
Description: 배우세요 독 독 소 암살자 버그와 다른 Heteropteran 곤충에서 독을 수확하는 방법을. 전기 자극과 방어 반응 유도 기술을 사용하여 연구자들이 곤충 독의 구성과 생물학적 활성을 연구할 수 있게 합니다.

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우리 금융 인정 호주 국가 건강 및 의료 연구 위원회 (주 연구 친교 (보조금 DP130103813와 G.F.K., EABU DECRA 친교 DE160101142를 LP140100832), 호주 연구 협의회에서 지원 G.F.K. APP1044414), 그리고 퀸즐랜드의 대학 (박사 후 친목을 A.A.W.).

이 프로토콜와 책임 관리 하 고 교육 및 연구에 있는 동물의 사용 (PPL 4.20.11)으로 국민 건강 및 의료 연구 위원회의 치료에 대 한 호주 코드 및의 사용에서 밖으로 설정 하는 퀸즐랜드 대학 정책 준수 과학적 목적을 위해 동물 (8일 에디션 2013).
주의: 하지 되도록 envenomated 암살자 버그를 처리할 때 처리. 방어 독 침 종 처리 때 눈을 보호 하는 것을 주의. 통해 처리 실험 동물을 다치게 하 하지. 고무 밴드 같은 지지대에 압력의 모니터링 및 코 깨진 하지 않음을 보장 포함 됩니다.
참고: 필요에 따라 0.5-2 CO2 에 노출에 의해 동물을 anaesthetize 분 또는 독에 수확 전에 4-10 ° C에 냉각 안전 전송 및 구속 1-3를 목표로. Anaesthetization는 엄격 하 게 필요 하지 않습니다 하지만 민첩 한 또는 강한 표본의 안전 규제를 촉진 수 있습니다. 그러나, 동물 독 수확 수 있도록 깨어 있어야 합니다. 프로 테아 제 억제제를 추가 여부를 결정할 때 다운스트림 응용 프로그램 하십시오.
1. 독 독 소 통해에 의해 수확
<ol><li>독 소를 수확 하는 라이브 표본의 얻을.</li>
	<li>긍정적이 고 부정적인 전극으로 사용 하 여 미리 준비 된 플라스틱 핀셋 어느 팁에 장착. 전기 족집게는 electrostimulator 또는 전압의 조정을 허용 하는 일정 한 전압 소스를 연결 합니다.<ol>
<li>작은 (~ 10 m m)와 큰 (25 mm) 암살자 버그, 15, 25 V의 피크 전압을 각각 사용 합니다.</li>
		<li>거 대 한 물 버그 등 더 큰 heteropterans에 대 한 최대 40 V를 사용 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>흉부에 고무 밴드를 사용 하 여 플랫폼에 달아서 여 라이브 버그를 제 지.</li>
	<li>적합 한 수집 팁에는 코의 끝을 놓습니다. 암살자 버그, P200 피 펫 팁을 사용 합니다. 거 대 한 물 버그에 대 한 조리개의 크기를 늘리기 위해 P200 끝에서 끝을 잘라.<ol>
<li>부드럽게 깨끗 한 핀셋의 닫힌 쌍 코를 리프트와 코의 끝 컬렉션 팁의 개방 조리개를 밀어.</li>
		<li>원하는 경우, 수집에 코를 배치 하기 전에 이해 ~ 5 µ L 초순 팁. 비록 수확된 독이 희석 될 것입니다 팁, 안에 남아 있는 독의 손실이 줄어듭니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>통해 적용 됩니다. 2.5 M NaCl/50% 글리세롤 등 전도성 젤에 자극 전극을 담근 다. 가슴에 전극을 적용 됩니다. Belostomatids, 2 개의 전극은 머리의 등 쪽 후부 표면에 적용 됩니다.</li>
	<li>Autodegradation를 방지 하기 위해 독을 저장 합니다. 독 압출 후-20 ° C 또는-60 ° C, 튜브 또는 튜브 프로 테아 제 억제 물 칵테일 포함 된 전송 신속 하 게.</li>
	<li>때까지 충분 한 독 인수 또는 아무 더 독은 1.5-1.6 단계를 반복 합니다.</li>
</ol>2. 성희롱으로 독 독 소의 수확
<ol><li>독이 수확에 대 한 동물을 준비 하 고 1.1 및 1.3-1.4 하위 섹션에 설명 된 대로 컬렉션 현관에는 코 끝을 배치.</li>
	<li>독이 저절로 돌출 되 면 2.3 단계로 이동 합니다. 그렇지 않은 경우에 만져 부드럽게 그것은 다리, 복 부 및 안테나에 핀셋으로 독이 생성 될 때까지 동물을 괴 롭 히.</li>
	<li>신속 하 게 원하는 경우 독-20 ° C 또는-60 ° C, 또는 튜브 포함 프로 테아 제 억제 물 칵테일, 튜브에 전송.</li>
</ol>3. 독 독 독 "침" 종에서에서 괴롭힘에 의해의 수확
<ol><li>Anaesthetize, 또는 부분적으로 anaesthetize, 어떤 조 수 비 침 방지 하기 위해 그것의 케이스에서 그것을 제거 하기 전에 곤충.</li>
	<li>독 침을 뱉는 행동을 자극 합니다. 포함 하 고 표준 90 x 16 mm 페 트리 접시의 깊은 뚜껑을 사용 하 여 곤충을 재배치. 잡고 약간 후부 뚜껑과 곤충 비행을 방지 하기 위해 위의 1-4 cm. 대부분의 곤충은 뱉 어 여러 번 자주 빠른 승계에서. 모든 독은 접시의 아래쪽에서 수집 된 확인 하십시오.</li>
	<li>초순의 10 µ L로 헹 궈 서 페 트리 접시의 아래쪽에서 독을 수집 합니다. 신속 하 게 전송 그것은-20 ° C 또는-60 ° C, 튜브 또는 튜브를 포함 하는 프로 테아 제 억제 물 칵테일.</li>
</ol>4. 수확 동맥 해 부에 의해 독 독
<ol><li>동물을 희생. 무 겁 게 anaesthetize 또는 사용 하 여 동물을 죽 일 > 5 분 노출 CO2. 동물의 주택 첨부물의 공기 구멍에 직접 순수 CO2 를 파이프 합니다.</li>
	<li>해 부 트레이 핀 곤충. 암살자 버그에 대 한 복 부 표면 (4.3)을 통해 해 부. 거 대 한 물 버그, 등 쪽 표면 (4.4)을 통해 해 부.</li>
	<li>복 부 절 개<ol>
<li>독 샘을 puncturing 없이 벌레를 후부 복 부에 3 개의 핀을 삽입 합니다.</li>
		<li>미니어처 메스를 사용 하 여 복 부의 복 부 표면에는 짧은 중간 절 개를 잘라. 미니어처가 위를 사용 하 여 확장 외 골격만을 잘라내어 내부 구조를 손상 하지 돌 머리에 anteriorly 중간 절 개.</li>
		<li>내부 구조를 노출 하려면 여러 측면 컷 곤충의 측에 중간 절 개에서 확장을 확인 합니다. 그런 다음, 다시 내부 구조를 나타내기 위해 복 부 외 골격의 각 플랩 핀.</li>
		<li>큰 암살자 버그에 대 한 중간 복 부, 이전 복 부, 첫 번째와 두 번째 다리 사이 첫 번째 다리 앞에 4 개의 옆 절 개를 확인 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>지 해 부<ol>
<li>기지 근처에 날개를 제거 합니다. 독 샘을 puncturing 없이 벌레를 후부 복 부에 3 개의 핀을 삽입 합니다.</li>
		<li>미니어처가 위 및 외 골격만을 잘라내어 내부 구조를 손상 하지 돌보는 메스를 사용 하 여 복 부에 머리에서 중간 절 개를 잘라.</li>
		<li>힘 떨어져는 곤충의 두 반쪽. 여러 핀 노출 내부 구멍을 떠나 벌레의 길이 따라 옆으로 놓습니다.</li>
		<li>핀셋을 사용 하 여 비행 근육을 제거 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>해 부 트레이 홍수. 더 쉽게 시각 버그 내부 구조를 플 로트 및 수 있도록 빠져들 때까지 PBS를 추가 합니다.</li>
	<li>핀셋과 마이크로-가 위를 사용 하면, 신중 하 게 결합 하 고 신경 조직 및 기관 제거할. 독 샘 길쭉한, 반투명 구조 영양 운하의 각 면을 따라 확장으로 나타납니다.<ol>
<li>앞쪽 및 후부 엽와 2 개의 덕트는 hilus에서 특성의 외관에 의해 주요 동맥을 식별 합니다.</li>
		<li>원하는 경우는 hilus에서 덕트를 추적 하 여 부속 동맥을 식별 합니다. 주요 동맥은 hilus에서 나오는 2 개의 덕트를 절단 하 여 무료.</li>
	</ol>
</li>
	<li>원하는 선 루멘을 수확. 전송 선 얼음 PBS 또는 PBS의 30 µ L을 포함 하는 microcentrifuge 프로 테아 제 억제 물 칵테일 플러스. 깨끗 한 날카로운 핀 선 창<ol>
<li>10 s 및 원심 분리기 (1 분, 5000 × g, 4 ° C) 동맥 루멘을 소용돌이. 선의 조직 핀셋을 사용 하 여 제거 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>독 소 추출 명확히. 원심 분리기 (5 분, 17000 × g, 4 ° C) 유지 하는 상쾌한 펠 릿 삭제 모든 고체 입자를 제거 하 -20 ° C 또는 autoproteolytic 저하를 방지 하기 위해-60 ° C에 저장 합니다.</li>
</ol>

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저자는 공개 없다.

자 객 벌레 독을 수확 하는 가장 중요 한 단계는 연구의 목적에 따라 적절 한 방법을 선택 하 고 있다. 각 heteropteran venoms 수확에 대 한 제시 하는 세 가지 메서드는 다운스트림 응용 프로그램에 따라 장단점이 있습니다.
코 (프로토콜 1-3)에서 독을 추방 하는 버그를 유도 선 조직에 의해 독의 오염을 방지 합니다. 또한, 이러한 메서드는 비-치명적인 있으며 버그의 생활의 과정 동안 여러 번 반복 될 수 있다. 통해 보통 독의 가장 큰 수량을 제공 하 고 여러 연구5,8에 따라 곤충을 먹이로 강력한 독성과 독을 생성 합니다. 방어적 인 응답을 자극, 코를 통해8다른 단백질 함량의 독을 얻을 수 있습니다 하나 독을 유도 하는 또 다른 방법은 이다. 그러나, 통해 및 도발에 많은 종족에 대 한 작동 하지 않습니다 하 ...

Heteropteran venoms potently 생리 활성 물질1있습니다. 예를 들어 키스 버그 (Triatominae) 등 침대 버그 (Cimicidae) Heteroptera 혈액 공급의 독/타 액 분 비 hemostasis2를 방해 하 여 수 유를 촉진 한다. 이러한 venoms 독 소는 응고, 혈소판 vasoconstriction, 뿐만 아니라 통증을 포함 하 여 여러 개의 경로 대상 하 고 경로가 렵 게. 대부분 다른 heteropteran 종에서 venoms는 혈액을 먹이 것 보다는 포식을 용이 하 게 적응. 그들의 venoms 마비, 죽음 및 조직 액 무척 추 동물3,4에 주입 하는 경우 발생할. 척추 동물에 주입 했을 때 그들의 독 또한 과감 한 효과 있을 수 있습니다. 예를 들어 척추로 암살자 버그 Holotrichius innesi 에서 독의 주입 하면 근육 마비 통증과 출혈; 이 버그에 의해 쥐 envenomated 호흡 마비5인해 신속 하 게 죽어.
Transcriptomic 및 proteomic 연구 일부 heteropteran venoms의 단백질 구성을 밝혀 있다. Predaceous 종 venoms는 프로 테아 제, 다른 효소, 펩 티 드 및 알 수 없는 구조와 기능6,,78의 단백질 풍부 합니다. 키스 버그 독 회원 뿌리깊은 영향을 응고, 혈소판, vasoconstriction2,9triabin 단백질 가족에 풍부 하다. 그러나, 그것은 어떤 독 소 기초 독의 대부분 bioactivities 알 수 없습니다. 예를 들어 키스 버그 Triatoma infestans 의 독은 진통 및 나트륨 채널10, 억제 알려졌다 하지만 책임 구성 요소 해명 될 남아 있다. 마찬가지로, 그것은 암살자 버그 독의 어떤 컴포넌트 마비 또는 통증 원인이 알려져 있지 않다. 특정 독 bioactivities과 특성화 구조와 기능, 소설 독 독 소의 독 소를 식별 하는 데 필수 독을 얻는 이다.
독을 통해5,6,7,8,11,,1213, 방어의 도발에 의해 heteropterans에서 얻은 되었습니다. 응답4,8, 기계적으로 흉부12,,1415,16, 독 샘8,17 개 해 부를 당기고 ,18,19,20,,2122및23muscarinic 아 세 틸 콜린 수용 체 촉진제의 응용 프로그램. 두 개의 별도 루멘, 앞쪽 주요 동맥 (AMG) 및 후부 주요 동맥 (PMG), 주요 동맥을 이루어져 있는 heteropteran 독 샘의 형태에 의해 복잡 잠재적인 장단점 어떤 방법의 판단으로 부속 선 (AG) 관련. 이러한 다른 선 구획 생산 다른 단백질 분 비 물, 먹이 캡처, 여분 구두 소화8,17, 국방 등 다양 한 생물 학적 기능에 대 한 전문화 될 수 있습니다. Peiratine 및 ectrichodiine 자 객 버그는 AMG 먹이 캡처 및 여분 구두 소화17PMG와 연결 되었습니다. 그러나,는 harpactorine에서 버그 Pristhesancus plagipennis 는 PMG는 전문 먹이 캡처 및 소화는 AMG 방어 독8분 비 가설 하는 반면. AG은 암살자 버그8 에서 약간 분 비 기능을가지고 또는 거 대 한 물 버그23protease 스토리지의 주요 사이트 설명 하고있다. 명확 하 게, 추가 작업은 다양 한 heteropteran 하위 그룹 중 각 선 구획의 기능을 명확히 하 고 대부분 독이 독 소의 기능을 결정 하는 데 필요한. 이 보고서에서 우리는 독 독이이 목표를 향해 heteropterans에서 수확에 대 한 프로토콜을 설명 합니다.

<table><tbody><tr><td>Electostimulator</td><td>Grass Technologies</td><td>S48 Square Pulse Stimulator</td><td>펄스 전기 자극을 허용하는 전기 자극기</td></tr><tr><td>Featherlight 핀셋</td><td>호주 곤충학 용품</td><td>E122B</td><td>살아있는 독 곤충 취급용</td></tr><tr><td>프로테아제 억제제 칵테일</td><td>시그마</td><td>4693124001</td><td>독의 자가 단백질 분해 소화 방지용</td></tr><tr><td> 장비</td><td>호주 곤충학 용품</td><td>E152Micro</td><td>미세 해부용</td></tr><tr><td>곤충 핀</td><td>호주 곤충 용품</td><td>E162</td><td>미세 해부용</td></tr></tbody></table>

독 독 소 암살자 버그와 다른 heteropteran 곤충에서 수확

Harvesting Venom Toxins from Assassin Bugs and Other Heteropteran Insects

Heteropteran 곤충 암살자 버그 (침노린재과) 등 거 대 한 물 버그 (물장군과) predaceous 및 악의 찬 공통 조상에서 후손 그리고 현존 heteropterans의 대다수가 영양 전략을 유지 합니다. 일부 heteropterans 척추 혈액에 먹이 기에 전환 해야 (Triatominae; 키스 버그 등 및 침대 버그, Cimicidae) 동안 다른 사람 식물 (대부분 Pentatomomorpha)에 먹이로 되 돌. 그러나, 키스 버그에 의해 혈액 공급, 작은 촉진 하는 데 사용 하는 타 액을 제외 하 고 heteropteran venoms venoms 거미, 전갈과 뱀의 비교에 대 한 알려져 있다.
Heteropteran 독 독 소의 특성화에 1 개의 장애는 구조와 기능 둘 다 형태학 상으로 복잡 한 되 고 수행 하는 여러 생물 학적 역할 (방어, 먹이 캡처 및 여분 구두 소화)는 독/양순 분 비의. 이 문서에서 우리는 우리가 성공적으로 heteropteran venoms 수집을 사용 하는 세 가지 방법을 설명 합니다. 첫째, 우리 제시 통해는 종종로 주사 될 때 치명적인 독을 수집 하는 편리한 방법을 먹이 동물, 그리고 어떤 선 직물에 의해 오염 obviates. 둘째, 우리는 동물의 부드러운 성희롱 코 또는 heteropterans의 일부 그룹에 침 독 독 압출 생산 충분 한지 보여줍니다. 셋째, 독 독 독 샘을 얻으려면 anaesthetized 동물의 해 부에 의해 수확 하는 방법을 설명 합니다. 이 메서드는 다른 방법에 보완으로 그것을 통해 및 성희롱 효과가 있다 taxa에서 독 소의 수확 수 있습니다. 이 프로토콜에는 의학 및 농업 구조-기능 특성 및 가능한 heteropteran 곤충에서 독 소를 수확 연구원 수 있게 된다.

Harpactorine P. plagipennis , Platymeris rhadamanthus, reduviine 등 일부 heteropteran 종 안정적으로 독을 통해 (표 1)에 대 한 응답의 대량 (5-20 µ L) 얻을 수 있습니다. 일반적으로, 대부분 peiratine, reduviine, 및 harpactorine 버그 독이이 방법에 대 한 응답에서을 얻을. Stenopodaine 버그 통해 sp. Oncocephalus 하지 Thodelmus sp에서 독을 elicited. 샘플 holoptiline 및 emesine 버그 상당한 독 (예: 충분히 질량 분석에 의해 분석을 위해) 통해에 대 한 응답에서을 생성 하지 않았다. 통해 수확 belostomatid 버그와 약탈 stinkbugs에서 독을 사용할 수 있습니다. 그러나, 통해 물 전갈 (Ne...

비록 Heteroptera suborder에 많은 곤충 (Insecta: Hemiptera)는 악의 찬, 그들의 독 성분 및 그들의 독 독 소의 기능 대부분 알려지지 않은. 이 프로토콜에는 더 특성화를 통해, 성희롱, 동맥 해 부를 사용 하 여에 대 한 heteropteran venoms 수확 하는 방법을 설명 합니다.

독 독 소 암살자 버그와 다른 Heteropteran 곤충에서 수확

Heteropteran insects such as assassin bugs (Reduviidae) and giant water bugs (Belostomatidae) descended from a common predaceous and venomous ancestor, ...

암살자 벌레는 독을 사용하여 먹이를 마비시키고 미리 소화시키는 곤충 그룹입니다. 그러나 동물의 독이 새로운 의약품, 살충제 및 과학 도구로 관심을 끌고 있음에도 불구하고 동물의 독이 생산하는 독소는 거의 완전히 규명되지 않았습니다. 그 이유 중 하나는 암살자 벌레가 거미와 전갈과 같은 상징적인 독이 있는 절지동물에 비해 덜 알려져 있기 때문입니다.또 다른 이유는 최근까지도 독소를 채취하는 방법에 대한 정보가 거의 없었기 때문입니다. 이 영상에서는 연구자들이 암살벌레의 독독 독소와 거대 물고기를 죽이는 물벌레와 같은 관련 곤충을 성공적으로 채취할 수 있는 방법을 제시합니다. 프로토콜 1은 전기 자극으로 독을 채취하는 방법을 설명합니다.먼저 적절한 곤충을 수집합니다. 성충과 큰 애벌레는 함께 일하기 가장 쉽습니다. 먹이를 먹은 후 2일에서 7일 후에 벌레를 사용하는 것이 이상적이며, 곤충이 독을 축적했지만 굶주리지 않도록 하는 것이 좋습니다.끝에 전극이 있는 집게를 준비하고 전기 공급 장치에 연결합니다. 이상적으로 이 공급 장치는 5Hz에서 5밀리초 펄스를 전달할 수 있는 전기 자극기여야 합니다. 작거나 큰 버그에 대해 각각 15볼트와 25볼트 사이의 피크 전압을 사용합니다.전기 자극기를 사용할 수 없는 경우 5-12볼트의 정전압을 사용하십시오. 고무 밴드와 폼 플랫폼을 사용하여 곤충을 제지하십시오. 곤충의 주둥이를 수집 튜브에 넣습니다.P200 피펫 튜브는 대부분의 암살자 벌레에 이상적입니다. 선택적으로, 독을 최대한 회수하기 위해 수확하기 전에 팁에 소량의 물을 추가할 수 있습니다. 전극에 전도성 젤을 바르고 전원 공급 장치를 켠 다음 전기 핀셋을 곤충에 적용합니다.주둥이에서 독 배출을 모니터링하면서 다양한 접촉점을 실험해 보십시오. 자가 단백질 분해 소화를 피하기 위해 독을 영하의 온도에 보관하십시오. 더 이상 독이 나오지 않을 때까지 새 피펫 튜브로 전기 자극을 반복합니다.프로토콜 2는 방어 반응을 유발하여 독을 채취하는 방법을 설명합니다. 위에서 설명한 대로 버그를 준비하고 억제하여 주둥이를 수집 팁에 삽입합니다. 동물을 다치게 하지 않고 방어 반응을 유발하기 위해 벌레를 부드럽게 괴롭힙니다.때로는 단순히 동물을 제지하거나 주둥이를 채취 튜브에 삽입하는 것만으로도 주둥이에서 독이 배출되는 방어 반응을 유발할 수 있습니다. 그렇지 않은 경우 동물의 흉부, 다리, 복부, 특히 더듬이를 부드럽게 만져 독을 끌어냅니다. 프로토콜 3에서는 이 기사의 서면 형식으로, 방어적으로 독을 뱉는 종으로부터 독을 채취하는 방법도 설명합니다.프로토콜 4는 해부를 통해 독샘에서 직접 독을 채취하는 방법을 설명합니다. 10분 동안 이산화탄소에 노출시켜 동물을 마취시킵니다. 독샘에 구멍을 뚫지 않고 곤충을 억제하기 위해 뒤쪽 복부에 세 개의 핀을 삽입하십시오.미니어처 메스를 사용하여 복부 복부 표면의 짧은 정중선 절개를 자릅니다. 소형 가위를 사용하여 전방 방향의 정중선을 머리까지 연장하고 외골격만 절단하고 내부 구조를 손상시키지 않도록 주의하십시오. 내부 구조를 노출시키려면 정중선 절개부에서 곤충 측면까지 여러 개의 측면 절단을 만듭니다.그런 다음 각 두 절단 사이의 복부 외골격을 다시 고정하여 내부 구조를 드러낼 수 있습니다. 벌레가 잠길 때까지 식염수를 사용하여 해부 트레이를 범람시켜 내부 구조가 떠오르고 더 쉽게 시각화할 수 있도록 합니다. 독샘은 소화관의 양쪽으로 뻗어 있는 반투명하고 길쭉한 구조로 나타납니다.핀셋과 마이크로 가위를 사용하여 결합 및 신경 조직과 기관을 조심스럽게 제거하고 소화관이나 독샘이 파열되지 않도록 합니다. 주샘은 전방 및 후방 엽이 있고 문턱에서 만나는 두 개의 관이 있는 특징적인 구조로 인해 알아볼 수 있습니다. 암살자 벌레와 아마도 다른 이배새의 경우, 거의 모든 독소는 주요 분비선의 두 엽의 내강에 저장됩니다.따라서 기관과 결합 조직에서 주샘을 분리한 후 문턱에서 이어지는 두 개의 관을 절단하고 주독샘을 채취할 수 있습니다. 부속샘도 필요한 경우, 일반적으로 장과 밀접하게 반대편에 있으며, 문턱에서 관을 추적하여 명확하게 식별할 수 있습니다. 어쨌든 땀샘을 조기에 부러뜨려 주변 식염수로 독을 잃지 않도록 주의하십시오.주샘의 엽을 분리해야 하는 경우, 식염수에서 제거한 후 신속하게 이 작업을 수행하고 서면 원고의 4.6 및 4.7 단계에 설명된 대로 샘 내강의 내용물을 즉시 수확하십시오. 결과는 사용된 곤충의 정확한 하위 프로토콜과 종에 따라 달라집니다. 이 비디오에 제시된 첫 번째 및 두 번째 하위 프로토콜은 각각 전기 자극과 괴롭힘으로 독 독소를 수확하는 방법을 보여주었습니다.이 두 가지 방법 모두 일반적으로 약 50-250밀리그램의 단백질과 효소, 기공 형성 독소 및 펩타이드를 포함한 100개 이상의 단백질 기반 성분을 포함하는 농축된 액체를 생성합니다. 이 두 프로토콜의 주요 장점은 빠르고 치명적이지 않으며 독이 선 조직에 의해 오염되지 않는다는 것입니다. 전기 자극 또는 괴롭힘에 의한 채취의 가장 큰 단점은 얻은 독의 선상 공급원을 알 수 없고 수확된 독의 단백질 함량이 프로토콜에 따라 다를 수 있다는 것입니다.또한 전기 자극과 괴롭힘이 모든 포식성 종의 이배엽에 효과적인 것은 아닙니다. 마지막 하위 프로토콜에서는 충혈된 독샘을 해부하여 독소를 직접 채취하는 방법을 보여주었습니다. 이 기술은 또한 다양한 단백질의 칵테일을 생성하지만, 이 경우 독 독소가 선 조직으로 인해 일부 오염되었을 수 있습니다.그러나 절개된 땀샘에서 독소를 채취하는 것의 장점은 기원의 선상(腸魘)칸막이가 정확히 알려져 있다는 것입니다. 결론적으로, 우리는 연구자들이 자신의 연구 질문에 적합한 채취 방법을 선택하도록 권장합니다. 예를 들어, 한 종 내에서 독 사용의 생물학에 대한 조사는 여러 채취 기술을 사용하는 것이 도움이 될 것입니다.생물 탐사 연구의 경우, 특정 실험 설계에 따라 여러 종의 독을 채취하는 단일 방법이 더 경제적일 수 있습니다. 우리는 이 비디오와 함께 작성된 기사가 연구자들이 암살벌레 및 기타 이배목(heteropteran) 곤충의 구성, 생체 활성 및 진화를 이해하는 데 필요한 전제 조건인 독을 채취하는 데 도움이 되기를 바랍니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Environment

환경

이 기사는 1 위해 전기 자극을 이용하여 거미의 독을 추출하기위한 프로토콜), 프로 테오 믹 특성을 수행 2) 독 선 유전자 발현을 자극, 3) 독의 기능 연구를 수행을 제공합니다. 이는 유전자 발현 연구를위한 독 그랜드 microdissections의 설명이 이어진다.

프로테옴 Transcriptomic 분석에 대한 거미의 독을 추출하고 독 그랜드 Microdissections

우리는 후속 분석을 위해 작은 절지동물에서 정량화 가능한 혈림프를 효율적으로 수집하는 방법을 설명합니다.

작은 절지동물에서 체림프를 수집하기 위한 정확하고 정량화 가능한 방법

이 프로토콜은 나비목 곤충 유충에 대한 식물 화학 물질의 잠재적 독성 효과를 평가하기 위한 의무 섭식 분석을 설명합니다. 이것은 확장성이 뛰어난 곤충 생물 검정으로 치사 및 치사 용량, 억제 활동 및 생리학적 효과를 쉽게 최적화할 수 있습니다. 이것은 친환경 살충제를 스크리닝하는 데 사용할 수 있습니다.

Helicoverpa armigera에 대한 Phytochemicals의 살충 효과를 평가하기 위한 공급 분석 시스템 개발

여기에서 우리는 브라질 보건 시스템의 수요를 충족시키기 위해 후속 전갈 해독제 생산을 위한 독을 제공하는 것을 목표로 대규모 Tityus serrulatus Lutz and Mello, 1922(브라질 황색 전갈) 사육을 위한 성공적인 유지 관리 및 독 추출 프로토콜을 제시합니다.

해독제 생산을 위한 Tityus serrulatus (브라질 황전갈)의 포로 유지 관리 및 독 추출

여기에서는 폴리에틸렌 필름과 아미노산 용액으로 만든 인공 숙주를 사용하여 Trichogramma dendrollimi 에서 독을 추출하는 프로토콜을 제시합니다.

인공 숙주를 사용하여 기생 말벌 Trichogramma dendrolimi 에서 독 추출

야생 동물은 일반적으로 다양한 기생충에 의해 기생합니다. 기생충의 네 가지 주요 유형은 "회충"(선충), "가시 머리 벌레"(acanthocephalans), "흡충"(trematodes) 및 "촌충"(cestodes)입니다. 여기에서는 척추 동물에서 기생충을 수집하는 방법과 그들이 어떻게 보존되고 분류학적으로 식별되는지에 대해 설명합니다.

야생 동물의 기생충 수집 및 식별

미세조류 배양과 산업용 연도 가스의 통합은 궁극적으로 중금속 및 기타 무기 화합물을 성장 배지에 도입할 것입니다. 이 연구는 광생물반응기에서 자란 Nannochloropsis salina의 성장에 대한 중금속 및 무기 오염 물질의 최종 운명과 영향을 결정하는 데 사용되는 절차를 제시합니다.

중금속과 미세 조류의 생산성에 다른 무기 오염 물질의 정량화

행동 분석은 뉴런 기능을 이해하기 위한 강력한 도구를 제공합니다. 여기에서는 모델 선충 Pristionchus pacificus와 그 친척에서 발견되는 포식적 섭식 행동을 정량화하기 위한 몇 가지 프로토콜을 제시합니다. 또한 입 구조와 치아를 포함한 포식적 섭식 적응을 분석하는 방법을 제공합니다.

에서 약탈 먹이 행동을 분석<em&gt; Pristionchus</em&gt; 및 기타 선충

마이크로 플라스틱은 잠재적으로 유독 한 유기 오염 물질의 벡터로 작용하여 예기치 않은 영향을 미칩니다. 이 프로토콜은 플라스틱 펠렛에 흡착 된 유기 염소 농약의 수준을 평가하고 중합체 화학 구조를 확인하는 대체 방법을 설명합니다. 초점은 가압 유체 추출 및 감쇠 된 총 반사율 푸리에 변환 적외선 분광법에 있습니다.

플라스틱 펠렛 및 플라스틱 유형 분석에서 유기 염소 농약의 추출

방법은 대기 에어로졸 본 활성제의 타겟 추출 및 그들의 임계 미셀 농도 (CMC)를 포함하여 물 절대 농도 및 표면 장력 곡선의 측정을 위해 제공된다.

대기 에어로졸의 추출 및 계면 활성제의 특성

배우세요 독 독 소 암살자 버그와 다른 Heteropteran 곤충에서 독을 수확하는 방법을. 전기 자극과 방어 반응 유도 기술을 사용하여 연구자들이 곤충 독의 구성과 생물학적 활성을 연구할 수 있게 합니다.

독 독 소 암살자 버그와 다른 Heteropteran 곤충에서 수확

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