Name: 셀 회전 타원 체 형성을 유발 하는 모델 시스템에 3D 생체 외에서 Bioprintable Alginate/젤라틴 하이드로 겔 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-07-02T14:30:00.000+00:00
Duration: 16 min 20 s
Description: 배우세요 3D 바이오프린팅으로 유방암 종양 미세환경을 모사하는 알지네이트/젤라틴 하이드로겔 제조법을. MDA-MB-231-GFP 세포와 섬유아세포를 공배양하여 다세포 종양 구형체 형성을 연구할 수 있습니다.

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타오 장 그들의 장학금 지원에 대 한 중국 장학금 위원회 (201403170354)와 맥 길 엔지니어링 박사 수상 (90025) 감사합니다. 호세 G. Munguia-로페즈 CONACYT (250279와 290936 291168) 및 FRQNT (258421) 그들의 장학금 지원에 대 한 감사. 살바도르 플로레스-토레스 CONACYT을 자금 (751540) 그들의 장학금 감사 합니다. 조셉 M. Kinsella 주셔서 국가 과학 및 공학 연구 위원회, 캐나다 재단 혁신, 타운센드 Lamarre 가족 재단, 그리고 맥 길 대학에 대 한 자신의 자금. 우리는 Allen Ehrlicher 그의 고분자, 우리 우리에 게 붙일 레이블된 셀 라인에 대 한 액세스를 부여에 대 한 그의 confocal 현미경, Morag 공원 사용 하 수 있도록 댄 Nicolau 사용 하 수 있도록 하는 것을 감사 하 고 싶습니다.

<ol><li>Cui, X., Hartanto, Y., Zhang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+multicellular+spheroids+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Royal+Society+Interface%22%5BJournal%5D)">Advances in multicellular spheroids formation.</a> Journal of the Royal Society Interface. 14 (127), (2017).</li>
<li>Yip, D., Cho, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multicellular+3D+heterospheroid+model+of+liver+tumor+and+stromal+cells+in+collagen+gel+for+anti-cancer+drug+testing%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+and+Biophysical+Research+Communications%22%5BJournal%5D)">A multicellular 3D heterospheroid model of liver tumor and stromal cells in collagen gel for anti-cancer drug testing.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 433 (3), 327-332 (2013).</li>
<li>Breslin, S., O'Driscoll, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relevance+of+using+3D+cell+cultures%2C+in+addition+to+2D+monolayer+cultures%2C+when+evaluating+breast+cancer+drug+sensitivity+and+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">The relevance of using 3D cell cultures, in addition to 2D monolayer cultures, when evaluating breast cancer drug sensitivity and resistance.</a> Oncotarget. 7 (29), 45745-45756 (2016).</li>
<li>Yue, X., Lukowski, J. K., Weaver, E. M., Skube, S. B., Hummon, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+proteomic+and+phosphoproteomic+comparison+of+2D+and+3D+colon+cancer+cell+culture+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Proteome+Research%22%5BJournal%5D)">Quantitative proteomic and phosphoproteomic comparison of 2D and 3D colon cancer cell culture models.</a> Journal of Proteome Research. 15 (12), 4265-4276 (2016).</li>
<li>Priwitaningrum, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+stroma-containing+3D+spheroid+arrays%3A+a+tool+to+study+nanoparticle+penetration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">Tumor stroma-containing 3D spheroid arrays: a tool to study nanoparticle penetration.</a> Journal of Controlled Release. 244 (Pt B), 257-268 (2016).</li>
<li>Hong, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+behavior+in+micropatterned+hydrogels+by+bioprinting+system+depended+on+the+cell+types+and+cellular+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bioscience+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Cellular behavior in micropatterned hydrogels by bioprinting system depended on the cell types and cellular interaction.</a> Journal of Bioscience and Bioengineering. 116 (2), 224-230 (2013).</li>
<li>Dolati, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+evaluation+of+carbon-nanotube-reinforced+bioprintable+vascular+conduits%5BTitle%5D)+AND+%22Nanotechnology%22%5BJournal%5D)">In vitro evaluation of carbon-nanotube-reinforced bioprintable vascular conduits.</a> Nanotechnology. 25 (14), 145101(2014).</li>
<li>Murphy, S. V., Atala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+bioprinting+of+tissues+and+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">3D bioprinting of tissues and organs.</a> Nature Biotechnology. 32 (8), 773-785 (2014).</li>
<li>Kang, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+3D+bioprinting+system+to+produce+human-scale+tissue+constructs+with+structural+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">A 3D bioprinting system to produce human-scale tissue constructs with structural integrity.</a> Nature Biotechnology. 34 (3), 312-319 (2016).</li>
<li>Miller, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+casting+of+patterned+vascular+networks+for+perfusable+engineered+three-dimensional+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Materials%22%5BJournal%5D)">Rapid casting of patterned vascular networks for perfusable engineered three-dimensional tissues.</a> Nature Materials. 11 (9), 768-774 (2012).</li>
<li>Jia, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+3D+bioprinting+of+perfusable+vascular+constructs+using+a+blend+bioink%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Direct 3D bioprinting of perfusable vascular constructs using a blend bioink.</a> Biomaterials. 106, 58-68 (2016).</li>
<li>Kolesky, D. B., Homan, K. A., Skylar-Scott, M. A., Lewis, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+bioprinting+of+thick+vascularized+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional bioprinting of thick vascularized tissues.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 113 (12), 3179-3184 (2016).</li>
<li>Lee, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+fabrication+of+human+skin+by+three-dimensional+bioprinting%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+C%3A+Methods%22%5BJournal%5D)">Design and fabrication of human skin by three-dimensional bioprinting.</a> Tissue Engineering Part C: Methods. 20 (6), 473-484 (2014).</li>
<li>Jiang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directing+the+self-assembly+of+tumour+spheroids+by+bioprinting+cellular+heterogeneous+models+within+alginate%2Fgelatin+hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Directing the self-assembly of tumour spheroids by bioprinting cellular heterogeneous models within alginate/gelatin hydrogels.</a> Scientific Reports. 7 (1), 4575(2017).</li>
<li>Knowlton, S., Onal, S., Yu, C. H., Zhao, J. J., Tasoglu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioprinting+for+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Bioprinting for cancer research.</a> Trends in Biotechnology. 33 (9), 504-513 (2015).</li>
<li>Derby, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Printing+and+prototyping+of+tissues+and+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Printing and prototyping of tissues and scaffolds.</a> Science. 338 (6109), 921-926 (2012).</li>
<li>Nair, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+cell+viability+during+bioprinting+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Journal%22%5BJournal%5D)">Characterization of cell viability during bioprinting processes.</a> Biotechnology Journal. 4 (8), 1168-1177 (2009).</li>
<li>Costa, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+tumor+spheroids%3A+an+overview+on+the+tools+and+techniques+used+for+their+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Advances%22%5BJournal%5D)">3D tumor spheroids: an overview on the tools and techniques used for their analysis.</a> Biotechnology Advances. 34 (8), 1427-1441 (2016).</li>
<li>Zhao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+printing+of+Hela+cells+for+cervical+tumor+model+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional printing of Hela cells for cervical tumor model in vitro.</a> Biofabrication. 6 (3), 035001(2014).</li>
<li>Ling, K., et al. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2095809916300728">Bioprinting-based high-throughput fabrication of three-dimensional MCF-7 human breast cancer cellular spheroids.</a> Engineering. 1 (2), 269-274 (2015).</li>
<li>Liang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+cell-instructive+hydrogel+to+regulate+malignancy+of+3D+tumor+spheroids+with+matrix+rigidity%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">A cell-instructive hydrogel to regulate malignancy of 3D tumor spheroids with matrix rigidity.</a> Biomaterials. 32 (35), 9308-9315 (2011).</li>
<li>Szot, C. S., Buchanan, C. F., Freeman, J. W., Rylander, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((3D+in+vitro+bioengineered+tumors+based+on+collagen+I+hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">3D in vitro bioengineered tumors based on collagen I hydrogels.</a> Biomaterials. 32 (31), 7905-7912 (2011).</li>
<li>Carey, S. P., Kraning-Rush, C. M., Williams, R. M., Reinhart-King, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biophysical+control+of+invasive+tumor+cell+behavior+by+extracellular+matrix+microarchitecture%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Biophysical control of invasive tumor cell behavior by extracellular matrix microarchitecture.</a> Biomaterials. 33 (16), 4157-4165 (2012).</li>
<li>Hospodiuk, M., Dey, M., Sosnoski, D., Ozbolat, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+bioink%3A+a+comprehensive+review+on+bioprintable+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Advances%22%5BJournal%5D)">The bioink: a comprehensive review on bioprintable materials.</a> Biotechnology Advances. 35 (2), 217-239 (2017).</li>
<li>Caliari, S. R., Burdick, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+guide+to+hydrogels+for+cell+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">A practical guide to hydrogels for cell culture.</a> Nature Methods. 13 (5), 405-414 (2016).</li>
<li>Bhutani, U., Laha, A., Mitra, K., Majumdar, S. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0167577X1530762X">Sodium alginate and gelatin hydrogels: viscosity effect on hydrophobic drug release.</a> Materials Letters. 164, 76-79 (2016).</li>
<li>Biswal, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+mechanical+and+electrical+behavior+of+gelatin+hydrogels+on+drug+release+and+cell+proliferation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Mechanical+Behavior+of+Biomedical+Materials%22%5BJournal%5D)">Effect of mechanical and electrical behavior of gelatin hydrogels on drug release and cell proliferation.</a> Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 53, 174-186 (2016).</li>
<li>Rowley, J. A., Madlambayan, G., Mooney, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alginate+hydrogels+as+synthetic+extracellular+matrix+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Alginate hydrogels as synthetic extracellular matrix materials.</a> Biomaterials. 20 (1), 45-53 (1999).</li>
<li>Djabourov, M., Leblond, J., Papon, P. <a target="_blank" href="https://jphys.journaldephysique.org/articles/jphys/abs/1988/02/jphys_1988__49_2_319_0/jphys_1988__49_2_319_0.html">Gelation of aqueous gelatin solutions. I. Structural investigation.</a> Journal de Physique (France). 49 (2), 319-332 (1988).</li>
<li>Djabourov, M., Leblond, J., Papon, P. <a target="_blank" href="https://hal.archives-ouvertes.fr/jpa-00210700">Gelation of aqueous gelatin solutions. II. Rheology of the sol-gel transition.</a> Journal de Physique (France). 49 (2), 333-343 (1988).</li>
<li>Coussot, P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCoussot%2C+P+%22Rheometry+of+Pastes%2C+Suspensions%2C+and+Granular+Materials%3A+Applications+in+Industry+and+Environment%22">Rheometry of Pastes, Suspensions, and Granular Materials: Applications in Industry and Environment</a>. , Wiley-Interscience. Hoboken, NJ. (2005).</li>
<li>Ouyang, L., Yao, R., Zhao, Y., Sun, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+bioink+properties+on+printability+and+cell+viability+for+3D+bioplotting+of+embryonic+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Effect of bioink properties on printability and cell viability for 3D bioplotting of embryonic stem cells.</a> Biofabrication. 8 (3), 035020(2016).</li>
<li>Michon, C., Cuvelier, G., Launay, B. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/BF00396681">Concentration dependence of the critical viscoelastic properties of gelatin at the gel point.</a> Rheologica Acta Rheologica Acta: An International Journal of Rheology. 32 (1), 94-103 (1993).</li>
<li>Mouser, V. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Yield+stress+determines+bioprintability+of+hydrogels+based+on+gelatin-methacryloyl+and+gellan+gum+for+cartilage+bioprinting%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Yield stress determines bioprintability of hydrogels based on gelatin-methacryloyl and gellan gum for cartilage bioprinting.</a> Biofabrication. 8 (3), 035003(2016).</li>
<li>Benbow, J. J., Oxley, E. W., Bridgwater, J. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0009250987850364">The extrusion mechanics of pastes-the influence of paste formulation on extrusion parameters.</a> Chemical Engineering Science. 42 (9), 2151-2162 (1987).</li>
<li>Bingham, E. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBingham%2C+EC+%22Fluidity+and+plasticity%22">Fluidity and plasticity</a>. , McGraw-Hill. New York, NY. (1922).</li>
<li>Horrobin, D. J., Nedderman, R. M. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0009250998001055">Die entry pressure drops in paste extrusion.</a> Chemical Engineering Science. 53 (18), 3215-3225 (1998).</li>
<li>Soman, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+cell+migration+within+3D+layer-by-layer+microfabricated+photocrosslinked+PEG+scaffolds+with+tunable+stiffness%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Cancer cell migration within 3D layer-by-layer microfabricated photocrosslinked PEG scaffolds with tunable stiffness.</a> Biomaterials. 33 (29), 7064-7070 (2012).</li>
<li>Asghar, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+cancer+microenvironments+for+in+vitro+3-D+tumor+models%5BTitle%5D)+AND+%22Materials+Today%22%5BJournal%5D)">Engineering cancer microenvironments for in vitro 3-D tumor models.</a> Materials Today. 18 (10), 539-553 (2015).</li>
<li>Lin, R. Z., Chang, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+three-dimensional+multicellular+spheroid+culture+for+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Journal%22%5BJournal%5D)">Recent advances in three-dimensional multicellular spheroid culture for biomedical research.</a> Biotechnology Journal. 3 (9-10), 1172-1184 (2008).</li>
<li>Akasov, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formation+of+multicellular+tumor+spheroids+induced+by+cyclic+RGD-peptides+and+use+for+anticancer+drug+testing+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Formation of multicellular tumor spheroids induced by cyclic RGD-peptides and use for anticancer drug testing in vitro.</a> International Journal of Pharmaceutics. 506 (1-2), 148-157 (2016).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

셀-라덴 구조 오염 (생물학 또는 화학) 과정에서 어느 시점에 발생 하는 경우 손상 될 수 있습니다. 일반적으로, 생물 학적 오염 2 후 본 또는 색 문화의 3 일 문화 미디어 또는 bioprinted 구조 변경. 따라서, 살 균 (물리적, 화학적 소독) 모든 셀 관련 프로세스에 대 한 중요 한 단계 이다. 주목할 만한, 압력가 마로 소독 젤라틴 우리가 실시 하는 시험에서 느리게 젤 만든 고 속성을 변경 합니다. 따라서, 우리는 노출을 통해 UV alginate와 젤라틴 전원 살 균. UV 빛의 아주 한정 된 침투 능력으로 인해 매우 얇은 층 (< 0.5 m m)를 사용 해야 합니다. 32기계 및 생물 학적 속성 조정 하 alginate과 젤라틴의 농도 임의로 바뀔 수 있다. 현재 작업에서 우리 A3G7, 및 30 일 실험을 통해 높은 안정성을 제공 하는 가교 된 하이드로 겔의 인쇄 창 동안 바람직한 전이성 제공 하므로 선택. 젤라틴의 liquefication를 강화 하...

2 차원 세포 배양은 암 연구에서 널리 이용 된다, 비록 제한 영양분과 산소의 동일한 농도로 단층 형태로 재배 되 고 세포 존재 합니다. 이러한 문화는 중요 한 셀 부족과 상호 작용 세포-매트릭스 네이티브 종양 microenvironment (TME)에 제시. 따라서, 이러한 모델 제대로 탈 셀 동작, 등 부자연 스러운 형태학, 불규칙 한 수용 체 조직, 막 분극, 다른 비정상적인 유전자 발현의 결과로 생리 조건 정리 조건1,2,,34. 다른 한편으로, 3 차원 세포 배양, 어디 집계, spheroids, 또는 organoids로 체적 공간에서 세포를 확장 수 더 정확한 생체 외에서 근본적인 세포 생물학과 생리학을 공부 하는 대안 기술을 제공 합니다. 3D 세포 배양 모델 수 또한 네이티브 TME 생체 외에서1,,45의 중요 한 생리 적 특성은 세포-ECM 상호 작용을 격려 한다. 신흥 3D bioprinting 기술은 이기종 TME를 모방 하는 모델을 만들 가능성을 제공 합니다.
3D bioprinting 신속한 프로토 타입에서 파생 되 고 생활의 복잡 한의 일부를 흉내 낸 수 있는 3 차원 마이크로 구조 제조 조직 샘플6,7. 현재 bioprinting 방법 등 잉크젯, 압출 성형, 레이저를 이용한 인쇄8. 그 중, 압출 메서드는 정확 하 게 다른 초기 위치에서 다른 유형의 자료를 배치 하 여 인쇄 된 매트릭스 내에서 제어 하려면이 수 있습니다. 따라서, 모델 유형이 다른 시험관에 관련 된 여러 종류의 셀 이나 행렬 조작 하 가장 좋은 접근 이다. 압출 bioprinting는 성공적으로 구축 하는 귀의 모양된 건설 기계9, 혈관 구조10,,1112, 및 조직13, 높은 인쇄 충실도 셀에 결과 피부 사용 되었습니다. 생존 능력입니다. 기술 또한 다양 한 소재 선택, 알려진된 밀도와 높은 재현성14,,1516,17 포함 하는 셀 자료를 예금 하는 능력을 갖추고 . 천연 및 합성 hydrogels 자주 그들의 생체 적합성, bioactivity, 및 그들의 친수성 네트워크 ECM7,18 를 구조적으로 설계 될 수 있다 3D bioprinting bioinks로 사용 된다 19,20,21,,2223. 이후 그들은 셀, 구조 요소, 영양소 및 가스, 침투성 접착 사이트를 포함할 수 있습니다 및 장려 하기 위해 적절 한 기계적 속성 셀 개발24Hydrogels 유리한도 있습니다. 예를 들어, 콜라겐 hydrogels 세포를 연결 하는 데 사용할 수 있는 앵커리지 사이트 integrin를 제공 합니다. 젤라틴, 변성된 콜라겐, 유사한 세포 접착 사이트를 유지합니다. 반면, alginate bioinert 이지만 divalent 이온25,26,,2728와 crosslinks를 형성 하 여 기계적 무결성을 제공 합니다.
이 작품에서는, 우리는 bioink, alginate과 젤라틴, 네이티브 종양 stroma의 미세한 구조 유사성으로 이루어진 복합 하이드로 겔 개발. 유방암 세포 및 섬유 아 세포는 hydrogels에 포함 했다 그리고 vivo에서 microenvironment을 모방 하는 3D 모델을 만드는 입체 기반 bioprinter 통해 인쇄. 설계 된 3D 환경 세포 배양 (> 30 일)의 오랜 기간 동안 높은 생존 능력으로 다세포 종양 spheroids (MCTS)를 암 세포 수 있습니다. 이 프로토콜에서는 복합 hydrogels 합성, 재료의 미세 및 전이성, bioprinting 세포 유형이 다른 모델, 특성화 고 MCTS 형성 관찰의 방법론을 보여 줍니다. 이러한 방법론은 약물 검사, 셀 마이그레이션 분석 실험, 및 기본적인 셀에 집중 하는 연구에서 잠재적인 응용 프로그램 뿐만 아니라 다른 유형의 조직 모델의 다른 디자인으로 압출 bioprinting에 다른 bioinks에 적용 될 수 있습니다. 생리 적 기능입니다.

<table><tbody><tr><td>알긴산 나트륨</td><td>FMC 바이오폴리머</td><td>CAS-No: 9005-38-3</td><td>Protanal LF 10/60 FT</td></tr><tr><td>젤라틴</td><td>시그마-알드리치</td><td>G9391</td><td>소 가죽에서 추출한 B형 젤라틴</td></tr><tr><td>Dubelcco의 인산염 완충 식염수(DPBS 1X)</td><td>Gibco</td><td>LS14190136</td><td>1&times;, 칼슘 없음, 마그네슘</td></tr><tr><td>없음 마그네틱 핫플레이트</td><td>Corning&nbsp;</td><td>N/A</td><td>교반기/핫 플레이트 모델 PC-420</td></tr><tr><td>50 mL 원심분리기 튜브</td><td>Corning</td><td>352098</td><td>Falcon®reg; 50mL 고선명도 PP 원심분리기 튜브, 원뿔형 바닥, 멸균</td></tr><tr><td>원심분리기</td><td>GMI</td><td>N/A</td><td>Sorvall RT6000D, GMI, USA</td></tr><tr><td>염화칼슘 무수</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C1016</td><td></td></tr><tr><td>MilliQ water</td><td>Millipore</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>밀리포어 0.22 &마이크로; m 필터</td><td>Millipore</td><td>SLGS033SB</td><td>Millex-GS 주사기 필터 유닛, 0.22&nbsp; &마이크로; M, 혼합 셀룰로오스 에스테르, 33&nbsp; mm, 에틸렌 옥사이드 멸균</td></tr><tr><td>진동 유변계 MCR 302</td><td>Anton Paar</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>유변계 측정 도구 CP25</td><td>Anton Paar</td><td>79038</td><td>유변계용 원추형 플레이트 형상</td></tr><tr><td>RheoCompass</td><td>Anton Paar</td><td>해당 없음</td><td>유변계 제어 소프트웨어 MCR 302</td></tr><tr><td>주사 전자 현미경</td><td>Hitachi</td><td>N/A</td><td>SEM, 히타치 SU-3500 가변 압력</td></tr><tr><td>파라포름알데히드, 96%, 엑스트라 퓨어</td><td>Acros Organics</td><td>416785000</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco modified eagle medium (DMEM)</td><td>Gibco</td><td>11965092</td><td></td></tr><tr><td>항생제/항진균 용액(100X) 안정화</td><td>Sigma</td><td>A5955</td><td></td></tr><tr><td>Fetal bovine serum</td><td>Wisent Bioproducts</td><td>080-150</td><td></td></tr><tr><td>세포 배양 T-75 플라스크</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>CLS430641</td><td>75 cm2 TC 처리 표면 처리</td></tr><tr><td>3D 바이오프린터 BioScaffolder 3.1</td><td>GeSiM</td><td>해당 사항 없음</td><td></td></tr><tr><td>GeSim 소프트웨어 GeSiM</td><td></td><td>해당 사항 없음</td><td>BioScaffolder 3.1</td></tr><tr><td>10cc 카트리지 UV 레지</td>스트 <td>제어 소프트웨어 EFD Nordson</td><td>7012126</td><td></td></tr><tr><td>엔드 캡</td><td>EFD Nordson</td><td>7014472</td><td></td></tr><tr><td>팁 캡</td><td>EFD Nordson</td><td></td><td></td>7014469</tr><tr><td>피스톤&nbsp;</td><td>EFD Nordson</td><td>7012182</td><td></td></tr><tr><td>스테인리스 노즐 G25</td><td>EFD Nordson</td><td>7018345</td><td></td></tr><tr><td>수조</td><td>VWR</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9539</td><td>바이오시약, 분자생물학</td></tr><tr><td>Costar 6-웰 플레이트&nbsp;</td><td>Corning</td><td>3516</td><td>TC 처리된 다중 웰 플레이트, 개별 포장, 멸균&nbsp;</td></tr><tr><td>컨포칼 회전 디스크 도립 현미경</td><td>Olympus Life Science</td><td>N/A</td><td>Olympus IX83</td></tr><tr><td>MTS 분석 키트</td><td>Promega</td><td>G3582</td><td>CellTiter 96&reg; Q어우러운&nbsp; One Solution 세포 증식 분석&nbsp;</td></tr><tr><td>Live/Dead viability cytotoxicity kit</td><td>Molecular Probes,ThermoFisher Scientific</td><td>L3224</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin 0.25/EDTA 1X</td><td>Gibco</td><td>25200-072</td><td></td></tr><tr><td>Corning 96-well plate</td><td>Corning</td><td>3595</td><td>Clear Flat Bottom 폴리스티렌 TC-Treated Microplate, 개별 포장, 저증발 뚜껑, Sterile</td></tr><tr><td>Autoclave Tuttnauer</td><td>Heidolph Brinkmann</td><td>N/A</td><td>Heidolph Tuttnauer 2540E 오토클레이브 살균기 전자 모델, 4개의 스테인레스 스틸 트레이, 23L 용량</td></tr><tr><td>Trypan blue</td><td>Invitrogen&nbsp;</td><td>T10282</td><td>0.4% 용액</td></tr><tr><td>에탄올</td><td>상업용 알코올</td><td>P016EA95</td><td>그린필드 특수 알코올</td></tr><tr><td>CO2 인큐베이터</td><td>Panasonic</td><td>N/A</td><td>MCO 19AIC-PA</td></tr><tr><td>동결건조기&nbsp;</td><td>SP Scientific</td><td>해당 없음</td><td>Virtis Sentry 2.0</td></tr><tr><td>SolidWorks</td><td>Dassault Systems</td><td>해당 없음</td><td>데모스트러티브 프로펠러와 같은 모델을 만드는 데 사용되는 CAD 소프트웨어</td></tr><tr><td>MATLAB</td><td>The MathWorks</td><td>해당 없음</td><td>BioScaffolder 3.1의 G-코드를 생성하는 데 사용되는 프로그래밍 소프트웨어</td></tr></tbody></table>

셀 회전 타원 체 형성을 유발 하는 모델 시스템에 3d 생체 외에서 bioprintable alginate/젤라틴 하이드로 겔

Bioprintable Alginate/Gelatin Hydrogel 3D In Vitro Model Systems Induce Cell Spheroid Formation

기본 종양 microenvironment의, 생화학, 세포 및 생물이 하지 성장 불멸 하 게 암 세포 선을 사용 하 여 기존의 2 차원 (2D) 세포 배양 하 여 지는. 다른 종류의 세포에 의하여 포함 된 다른 유형의 3 차원 (3D) 종양 모델을 만들 bioprinting 기술을 사용 하 여 이러한 문제를 극복할 수 있습니다. Alginate와 젤라틴은 bioprinting 그들의 생체 적합성, biomimicry, 및 기계적 특성 때문에 가장 일반적인 생체 재료의 두. 두 고분자를 결합해 서, 우리는 네이티브 종양 stroma의 미세한 구조 유사성과 bioprintable 복합 하이드로 겔을 달성. 우리는 유동성을 통해 복합 하이드로 겔의 전이성 공부 하 고 얻은 최적의 인쇄 창. 유방암 세포 및 섬유 아 세포는 hydrogels에 포함 되었고 vivo에서 microenvironment를 흉내 낸 3D 모델을 형성 하. Bioprinted 이종 모델 장기 세포 배양 (> 30 일)에 대 한 높은 생존 능력을 달성 하 고 추진 하 고 있는 다세포 종양 spheroids (MCTS)으로 유방암 세포의 자기 조립. 마이그레이션 및 암 관련 fibroblast 세포 (CAFs)의이 모델에는 MCTS 상호 작용 관찰합니다. Bioprinted 셀 문화 플랫폼, 공동 문화 시스템을 사용 하 여 기질 구성 tumorigenesis의 의존도 공부 하는 독특한 도구를 제공 합니다. 이 기술은 높은 처리량, 저렴 한 비용, 및 높은 재현성, 기능 그리고 그것은 또한 기존의 세포 단층 배양을 다른 모델 및 암 생물학 연구를 동물 종양 모델을 제공할 수 있습니다.

온도 스윕 25 ° C와 37 ° C에서 A3G7 전조의 뚜렷한 차이 보여줍니다. 전조는 37 ° C에 액체 있으며 1938.1 ± 84.0 mPa의 복잡 한 점도 큰 G에 의해 유효성이 검사 되는 s, x "G 이상 '. 으로 온도 감소, 전조 트라이-나선 형성29,30에 젤라틴 분자의 자발적인 물리적 녹 채 인해 실제 겔 화를 겪 습. 모두 G'는 g "증가 하 고 솔-젤 전환을 나타내는 30.6 ° C에 수렴. 계수 468.5 ± 34.2 도달 감소 온도 증가를 계속 Pa의 G'와 140.7 ± 9.3 G의 Pa "25 ° C (그림 1a)에서. 우리는 인쇄 온도 25 ° C를 선택 온도 청소의 결과에 따라. 겔 화 속도 론 실험 시뮬레이션 샘플 준비 및 처리 하는 동안 발생 하는 온도 변화 (즉</e...

우리 불멸 하 게 종양 및 섬유 세포 bioprintable alginate/젤라틴 bioink에 포함 된 구성 된 이기종 유 방 암 모델 개발. 모델이 비보에 종양 microenvironment tumorigenesis 운전 메커니즘에 대 한 통찰력을 양보 하는 다세포 종양 spheroids의 형성을 촉진 한다.

셀 회전 타원 체 형성을 유발 하는 모델 시스템에 3D 생체 외에서 Bioprintable Alginate/젤라틴 하이드로 겔

The cellular, biochemical, and biophysical heterogeneity of the native tumor microenvironment is not recapitulated by growing immortalized cancer cell ...

이 방법은 종양 형성, 세포 이동 추적, 암 및 건강한 세포 신호와 같은 암 생물학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 가장 큰 장점은 섬유아세포와 같은 기질 세포와 함께 3D 환경에서 저비용과 높은 재현성으로 종양 형성을 연구할 수 있다는 것입니다. 재료가 생물 인쇄가 가능하고 생체 기능적인지 확인하는 것이 중요하며, 이를 위해서는 유변학적 특성과 세포 호환성에 대한 정량적 연구가 필요합니다.하이드로겔 준비 및 셀 하이드로겔 혼합 단계는 기포 형성이 인쇄된 모델의 충실도를 방해하기 때문에 배우기 어렵기 때문에 이 방법을 시각적으로 시연하는 것이 중요합니다. 생물 안전 캐비닛에서 250ml 비커에 알긴산 3g과 젤라틴 분말 7g을 섞습니다. 자석 교반기와 100ml의 DPBS를 추가합니다.오염을 방지하기 위해 비커를 멸균 파라핀 필름과 알루미늄 호일로 밀봉하십시오. 그런 다음 참가자에게 근전도 또는 EMG 패턴에 해당하는 독특하고 구체적인 극성 플롯을 보여줍니다. 그 후, 실온에서 2 시간 동안 교반을 계속하십시오.겔이 액체 상태로 상전이를 거칠 때까지 용액을 섭씨 37도에서 가열합니다. 그런 다음 용액을 멸균 50ml 원추형 원심분리기 튜브에 옮기고 밀봉합니다. 가스 기포를 제거하기 위해 834회 g에서 5분 동안 튜브를 원심분리하십시오.다음으로, 하이드로겔 전구체를 10ml 주사기로 흡인합니다. 캡과 파라핀 필름으로 주사기를 밀봉합니다. 사용할 준비가 될 때까지 섭씨 4도에서 보관하십시오.테스트를 시작할 준비가 되면 준비된 하이드로겔 전구체의 주사기를 섭씨 37도의 수조에 1시간 동안 놓습니다. 주사기가 예열되는 동안 레오미터를 켜고 초기화합니다. 한 시간 후 수조에서 주사기를 제거합니다.약 0.5 ml의 프리케이터를 레오미터 플랫폼으로 압출합니다. 제어판에서 아래쪽 삼각형 버튼을 클릭합니다. 측정 도구가 트리밍 위치로 내려갈 때까지 기다립니다.주걱을 사용하여 측정 도구의 가장자리에서 벗어난 과도한 전구체를 제거하고 불필요한 물질을 버립니다. 그런 다음 측정 도구의 가장자리에 미네랄 오일을 피펫으로 넣습니다. 오일이 경계를 완전히 밀봉할 때까지 기다립니다.제어판에서 Continue(계속)를 클릭합니다. 그런 다음 시작 버튼을 클릭합니다. 테스트가 완료되면 측정 도구에서 손을 떼고 위쪽 삼각형 버튼을 클릭합니다.측정 도구를 제거하십시오. 측정 도구와 플랫폼을 모두 70% 에탄올로 청소하십시오. 먼저, 텍스트 프로토콜에 설명된 대로 완전한 진폭 및 온도 스윕입니다.등온 시간 스윕을 시작하려면 My Apps(내 앱)를 클릭하고 등온 시간-온도 테스트용 템플릿을 클릭합니다. 워크플로에서 측정 단계를 클릭합니다. 그런 다음 가변 진동 변형률을 클릭하고 설정 창을 불러옵니다.진동 변형률을 0.1%로 설정하고 진동 주파수를 1헤르츠로 설정합니다. 풀업 창에서 데이터 점의 수를 120으로 설정합니다. 데이터 수집 빈도를 분당 1포인트로 설정합니다.추가 버튼을 클릭하여 온도 변수를 추가합니다. 변수 온도를 클릭하고 섭씨 25도로 설정합니다. 워크플로에서 Device, Move to measuring point 단계를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭합니다.삭제를 클릭합니다. 그런 다음 장치, 값 설정 단계를 클릭합니다. 값에 도달할 때까지 대기 상자를 선택 취소하고 값을 섭씨 25도로 설정합니다.하단 화면에서 사진, 제목, 버튼을 클릭합니다. 계속 확인란의 선택을 취소합니다. 그런 다음 시작 단계를 클릭하고 프로젝트 이름을 지정한 다음 저장합니다.이제 샘플을 레오미터 플랫폼에 로드하고 앞서 설명한 일반 테스트 프로토콜에 따라 테스트를 시작합니다. 그런 다음 시간 대비 G 소수와 G 이중 소수를 관찰합니다. G 소수와 G 이중 소수의 교차 지점을 구하고 교차 지점에서 시간을 결정합니다.그런 다음 테이블을 클릭하고 모든 데이터를 복사하여 텍스트 파일에 붙여넣습니다. 다양한 겔화 시간에서 항복 강도를 측정하려면 My Apps(내 앱)를 클릭합니다. Yield and flow stress, Gel-like(젤 모양)에 대한 템플릿을 클릭합니다.프로젝트 이름을 지정합니다. 그런 다음 워크플로에서 시작 단계를 클릭합니다. 상단 메뉴에서 Insert(삽입)를 클릭합니다.그런 다음 드롭다운 메뉴에서 대기를 선택합니다. 설정 창을 열고 대기 시간을 50분으로 설정합니다. 시작을 클릭한 다음 삽입을 다시 클릭합니다.드롭다운 메뉴에서 장치를 선택합니다. 설정 창을 당겨 온도를 선택하고 섭씨 25도로 설정합니다. 값에 도달할 때까지 대기 상자를 선택 취소합니다.워크플로에서 측정 단계를 선택합니다. 변수 전단 응력을 선택하고 설정 창을 불러옵니다. 초기 및 최종 전단 응력을 각각 0과 10, 000파스칼로 설정합니다.그런 다음 계산기를 클릭하고 포인트 밀도를 파스칼당 0.2포인트로 설정합니다. 왼쪽의 데이터 포인트 탭에서 초당 1개의 포인트를 설정합니다. 풀업 창 하단에서 Event Control(이벤트 제어) 탭을 선택하고 전단 속도가 초당 100보다 큰 경우 측정 중지 기준을 설정합니다.샘플을 레오미터 플랫폼에 로드하고 앞서 설명한 일반 테스트 프로토콜에 따라 테스트를 시작합니다. 테스트가 완료되면 다이어그램을 클릭하여 변형-응력 곡선을 관찰합니다. 30분, 40분 및 50분의 대기 시간에 대해 이 테스트를 반복합니다.다음 단계는 멸균 상태에서 수행해야 합니다. 시작하려면 바이오프린터에 70% 에탄올을 철저히 분사한 다음 밤새 자외선에 노출시켜 살균합니다. 보관에서 하이드로겔 전구체 주사기를 제거하고 섭씨 37도의 수조에서 1시간 동안 데웁니다.이전에 배양된 세포의 T-플라스크를 CO2 인큐베이터에서 생물 안전 캐비닛으로 옮깁니다. 배양 배지를 버리고 DPBS로 세포를 두 번 헹굽니다. 데워진 트립신-EDTA 용액을 세포에 추가합니다.섭씨 37도에서 6분 동안 배양합니다. 그런 다음 동일한 부피의 FBS를 추가하여 트립신을 비활성화합니다. 수조에서 하이드로겔 전구체의 주사기를 제거하고 청소하십시오.주사기를 생물 안전 캐비닛으로 옮기기 전에 70% 에탄올로 주사기를 살균하십시오. 약 3ml의 하이드로겔 프리코체를 10ml 인쇄 카트리지로 압출합니다. 기포 생성을 피하기 위해 천천히 피펫팅하여 MDA-MB-231-GFP 세포와 전구체를 밀리리터당 100만 세포 농도로 혼합합니다.카트리지를 끝 캡과 상단 캡으로 덮고 파라핀 필름으로 밀봉합니다. 그런 다음 834 회 g에서 1 분 동안 원심 분리하여 가스 기포를 제거합니다. 다른 선구자에 대해 이 전체 프로세스를 반복합니다.그런 다음 세 개의 카트리지를 모두 70% 에탄올로 살균하십시오. 멸균된 카트리지를 바이오프린터의 챔버에 로드합니다. 프린터의 제어 소프트웨어에서 manual(수동)을 클릭합니다.그런 다음 프린터의 제어 소프트웨어에서 도구 헤드 탭을 확장합니다. 왼쪽의 그래픽 인터페이스에서 카트리지 하나를 클릭하고, 카트리지 온도를 섭씨 25도로 설정하고, 프리컨더가 인쇄 가능한 조건에 도달할 때까지 35분 동안 기다립니다. 다른 두 카트리지에 대해 이 작업을 반복합니다.프린터의 제어 소프트웨어에서 Tool head 탭을 확장합니다. 그래픽 인터페이스에서 하나의 카트리지를 클릭한 다음 measure short(짧은 측정) 버튼을 클릭하여 노즐 팁의 위치를 측정합니다. 다른 두 카트리지에 대해 이 작업을 반복합니다.그런 다음 프린터 스테이지에 투명 폴리스티렌 마이크로플레이트를 놓습니다. G 코드 파일을 열고 모든 카트리지에 대해 압력을 200킬로파스칼로 변경합니다. 제어 소프트웨어로 돌아가서 Scaffolder Generator 탭을 클릭합니다.인쇄를 시작할 지점을 선택하고 실행(Run) 버튼을 클릭합니다. 이 과정을 반복하여 3개의 반복실험을 얻습니다. 그런 다음 100밀리몰의 염화칼슘 용액을 1분 동안 첨가하여 모델을 가교합니다.DPBS로 두 번 헹굽니다. 그런 다음 주걱을 사용하여 모델을 아가로스 코팅된 6웰 플레이트에 조심스럽게 옮깁니다. 각 웰에 5ml의 DMEM을 첨가하고 섭씨 37도에서 배양하고 이산화탄소를 5%씩 배양하여 3일마다 세포 배양 배지를 교체합니다.이 연구에서는 3차원 하이드로겔 시스템을 제작하여 생체 내 종양 미세환경을 재현하고 다세포 종양 스페로이드의 형성을 촉진합니다. A3G7 전구체의 온도 스윕은 G 더블 프라임이 섭씨 37도에서 G 프라임보다 큰 것으로 나타나며, 이는 전구체의 알려진 특성을 검증합니다. 온도가 낮아짐에 따라 전구체는 젤라틴 분자가 삼중 나선 형성으로 자발적으로 물리적으로 얽히기 때문에 물리적 겔화를 겪습니다.G 프라임과 G 더블 프라임은 모두 온도를 증가시키고 섭씨 30.6도에서 수렴하여 졸-겔 전이를 나타냅니다. 인쇄된 프로펠러 모델의 컨포칼 현미경 검사는 MDA-MB-231-GFP 세포가 배양 기간 15일 동안 스페로이드를 발달시키기 시작하고 스페로이드는 30일까지 크기와 수가 계속 증가하는 것을 보여줍니다. IMR-90-mCherry 세포 중 일부는 응집체를 형성하는 것도 보입니다.배양 30일 후, IMR-90-mCherry 세포는 MDA-MB-231-GFP 세포가 초기에 점유했던 영역에서 관찰될 수 있었고, MDA-MB-231-GFP 세포는 IMR-90-mCherry 우세 영역에서 관찰될 수 있었습니다. 이는 모델에서 가능한 마이그레이션 이벤트를 의미합니다. 디스크 모델의 컨포칼 현미경 검사는 MDA-MB-231-GFP 세포가 프로펠러 모델에서와 유사하게 행동하여 21일의 배양 후 스페로이드가 함유된 하이드로겔을 생성한다는 것을 보여줍니다.일단 마스터하면 모델을 인쇄하는 이 기술을 제대로 수행하면 2시간 안에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 하이드로겔과 세포를 가능한 한 최신 상태로 유지하고, 오래된 하이드로겔 배치를 새 배치와 혼합하지 않으며, 오해의 소지가 있는 결과를 피하기 위해 멸균 상태에서 작업해야 한다는 점을 기억하는 것이 중요합니다. 이 절차에 따라 주사 전자 및 타임 랩스 현미경과 같은 다른 방법을 수행하여 재료 다공성, 세포 이동 속도 및 매트릭스 리모델링과 같은 추가 질문에 답할 수 있습니다.이 기술의 의미는 암 치료로 확장되는데, 그 이유는 이 시험관 내 모델을 통해 공동 배양 시스템에서 종양 형성 및 행동에 대한 체계적으로 통제된 연구를 수행할 수 있기 때문입니다. 유방암 세포 외에도 이 모델은 다양한 초기 위치에서 다른 유형의 세포를 사용하는 시스템에도 쉽게 적용할 수 있습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 하이드로겔을 적절하게 준비하고, 세포를 내장하고, 최적의 인쇄 창 내에서 재료를 인쇄하여 3D 이종 질병 모델을 만드는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.생물학적 샘플로 작업하는 것은 매우 위험할 수 있으며 이 절차를 수행하는 동안 장갑, 실험실 가운 및 보안경과 같은 개인 보호 장비를 착용하는 것과 같은 예방 조치를 잊지 마십시오.

bioprintable-alginategelatin-hydrogel-3d-vitro-model-systems-induce

Research

연구

JoVE Journal

Bioengineering

생명공학

다음 프로토콜은 thiol - 에너지 사진을 클릭 반응에 의해 형성 단계 성장 PEG-펩타이드 hydrogels에서 췌장 β-세포를 캡슐화에 대한 기술을 제공합니다. 이 물질 플랫폼은 세포 캡슐화에 대한 cytocompatible microenvironment를 제공뿐만 아니라 hydrogels 내에 형성된 세포 구조의 사용자 관리 빠른 복구를 허용합니다뿐만 아니라.

단계 성장 PEG-펩타이드 Hydrogels에서 β-세포 Spheroids의 생성 및 복구

bioprinter는 희생 형에 따라 패턴 하이드로 겔을 만드는 데 사용되었다. 폴록 사머 형은 두 번째 히드로 겔로 채워질 그리고 세 번째 하이드로 겔로 채워졌다 빈 공간을 남겨 용출되었다. 이 방법은 생체 고분자의 복잡한 구조를 생성하는 빠른 용출과 폴록 사머의 좋은 인쇄 적성을 사용합니다.

모방의 창조 3D 세포 배양을위한 두 구성 요소 히드로 겔에 대한 Thermoresponsive 역 금형 인쇄

여기에서는 세포 응집을 통해 3D 세포 스페로이드를 형성하기 위한 빠르고 유연한 프로토콜에 대해 설명합니다. 이는 여러 세포 유형에 쉽게 적용할 수 있으며 세포 이동, 침습 또는 아노이키스 분석을 포함한 다양한 응용 분야와 세포-매트릭스 상호 작용의 이미징 및 정량화에 적합합니다.

3D 회전 타원체 생산을위한 효율적이고 유연한 셀 집계 방법

이 프로토콜 cryogelation 기술로 제작을 통합 하 여 탄력 있는 3D macroporous microcryogels의 제작을 설명 합니다. 재생 치료를 촉진 하기 위하여 쉽게 주입된 비보 수 또는 생체 외에서 높은 처리량 마약 검사에 대 한 배열로 조립 셀 로딩 시 3D microtissues 생성 됩니다.

주 사용 재생 치료와 높은 처리량 마약 검사에 대 한 3D Microtissues

여기에 제시된 젤라틴 메타크릴로일의 3D 바이오프린팅을 위한 방법이다.

젤라틴 메타크릴 하이드로겔 기반 바이오잉크의 3D 바이오프린팅 프로토콜

이 프로토콜의 목표는 약물 선별 연구에 사용될 수 있는 3D 유방 내피 상양 모델을 빠르게 만들기 위해 사전 형성된 내피 네트워크에 다세포 스페로이드로서 유방 상피 세포를 직접 바이오프린트하는 것입니다.

내피 네트워크에 3D 다세포 유방 스페로이드의 직접 생체 인쇄

본 프로토콜은 3D 프린팅된 스탬프와 같은 장치를 사용하여 비용 효율적으로 조직 스페로이드를 대규모로 생산하는 기술을 설명합니다.

3D 프린팅된 스탬프와 같은 장치를 통한 조직 스페로이드 생성

하이드로겔 형성 중 전단 처리는 전단력이 제거된 후 전단이 얇지만 빠르게 재구성되는 마이크로겔 현탁액의 생성을 초래합니다. 이러한 물질은 바이오프린팅 복합체, 세포 함유 구조의 지지 매트릭스로 사용되었습니다. 여기서는지지 베드 및 호환 가능한 바이오 잉크를 제조하는 데 사용되는 방법을 설명합니다.

부유 된 3D 바이오 프린팅을위한 겔화 동안 전단 처리에 의해 형성된 Agarose 유체 겔

여기에서는 종양 스페로이드를 빠르고 강력하며 저렴하게 제조한 후 하이드로겔 캡슐화를 수행할 수 있는 프로토콜을 제시합니다. 특수 장비가 필요하지 않기 때문에 널리 적용 가능합니다. 스페로이드 매트릭스 상호 작용을 탐색하고 체외 조직 생리학 또는 병리학 모델을 구축하는 데 특히 유용할 것입니다.

스페로이드-매트릭스 상호 작용 연구를 위한 폴리에틸렌 글리콜 하이드로겔의 종양 스페로이드 제조 및 캡슐화

이 연구는 스탬프 기반 시스템을 사용하여 아가로스 주형에 마이크로웰을 생성함으로써 3D 세포 구조를 생성하는 비용 효율적이고 효율적인 방법론을 제시합니다. 이 시스템은 균일한 스페로이드/오가노이드의 형성을 촉진하여 세포 상호 작용을 개선합니다. 이 접근 방식은 실험 변동성을 줄이고 약물 테스트 및 조직 공학의 응용 분야를 지원합니다.

Novel Stamp Device를 사용한 2차원 세포 배양에서 3차원 스페로이드/오가노이드 생성

배우세요 3D 바이오프린팅으로 유방암 종양 미세환경을 모사하는 알지네이트/젤라틴 하이드로겔 제조법을. MDA-MB-231-GFP 세포와 섬유아세포를 공배양하여 다세포 종양 구형체 형성을 연구할 수 있습니다.

셀 회전 타원 체 형성을 유발 하는 모델 시스템에 3D 생체 외에서 Bioprintable Alginate/젤라틴 하이드로 겔

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