Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Almin I. Lalani; Sining Zhu; Ping Xie

doi:10.3791/57843

Thymus 종속 및 독립 Thymus 면역 글로불린 Isotype 반응 효소 연결 된 Immunosorbent 분석 결과 사용 ...

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Immunology and Infection

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JoVE Journal Immunology and Infection

Characterization of Thymus-dependent and Thymus-independent Immunoglobulin Isotype Responses in Mice Using Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Thymus 종속 및 독립 Thymus 면역 글로불린 Isotype 반응 효소 연결 된 Immunosorbent 분석 결과 사용 하 여 마우스의 특성

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06:15 min

September 7, 2018

DOI: 10.3791/57843-v

Almin I. Lalani¹, Sining Zhu¹, Ping Xie^2,3

¹Department of Cell Biology and Neuroscience and Graduate Program in Cellular and Molecular Pharmacology,Rutgers University, ²Department of Cell Biology and Neuroscience,Rutgers University, ³Rutgers Cancer Institute of New Jersey

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

이 종이에 우리는 ELISA를 사용 하 여 마우스에서 T-종속 및 T-독립 면역 글로불린 (Ig) isotype 응답 하는 프로토콜을 설명 합니다. 이 방법은 단독으로 사용 하거나 흐름 함께에서 cytometry 쥐 T-종속 및 T 독립적인 항 원 면역 다음에 Ig 중재 하는 B 세포 isotype 응답 차이 식별 하는 연구를 수 있게 됩니다.

이 방법은 항원 면역 유도 의존성 및 독립 항체 반응뿐만 아니라 B 세포 활성화 및 생식 중심 반응에 대한 면역학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 마우스의 B 세포 활성화와 체액성 면역을 직접 비교하여 신뢰할 수 있고 정량적인 Ig isotype 응답 측정을 제공한다는 것입니다. TNP-다당류 면역의 경우, 생쥐 한 마리당 1밀리리터의 인슐린 주사기에 100마이크로리터의 갓 준비된 항원 용액을 넣고 바늘을 각 동물의 오른쪽 하단 사분면에 약 30도 각도로 삽입하여 하부 장기 주입을 피합니다.

모든 쥐에게 주사를 맞았을 때, 동물들을 우리로 돌려보내 특정 병원체가 없는 시설에 수용한다. 적절한 실험 시점에서, 역안와 출혈로 면역된 각 동물로부터 150-200마이크로리터의 혈액을 채취하고, 샘플이 실온에서 1-2시간 동안 응고되도록 합니다. 배양이 끝나면 응고된 혈액 샘플을 원심분리하고 각 혈전 상단의 투명한 혈청을 멸균 1.5ml 마이크로 원심분리기 튜브로 옮깁니다.

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