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소설 동물 모터 기능 추적 간단 하 고 쉽게 사용할 수 있는 소프트웨어를 사용 하 여 시스템
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JoVE Journal Behavior
A Novel Single Animal Motor Function Tracking System Using Simple, Readily Available Software

소설 동물 모터 기능 추적 간단 하 고 쉽게 사용할 수 있는 소프트웨어를 사용 하 여 시스템

Full Text
6,864 Views
08:22 min
August 31, 2018

DOI: 10.3791/57917-v

Keith R. Dona1,2, Monika Goss-Varley1,2, Andrew J. Shoffstall1,2, Jeffrey R. Capadona1,2

1Advanced Platform Technology Center, Rehabilitation Research and Development,Louis Stokes Cleveland Department of Veterans Affairs Medical Center, 2Department of Biomedical Engineering,Case Western Reserve University

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

현재의 연구는 쥐에 있는 모터 적자의 정량화를 자동화 목적입니다. 초기 평가 모델 모터 손해는 intracortical microelectrode 주입 모터 피 질에서 평가 합니다. 우리는 개발에 쉽게 적응할 수 있는 간단 하 고 쉽게 사용할 수 코딩 소프트웨어를 사용 하 여 추적 알고리즘의 사용을 보고 합니다.

이 방법은 객관적인 운동 기능 메트릭을 만들어 소동물 행동 테스트의 일관성을 개선하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 장점은 기존 방법과 달리 인적 오류, 노력 및 시간을 줄이는 컴퓨터 시스템에 의해 결과를 정량화한다는 것입니다. 이 절차를 시연하는 사람은 Capadona Lab의 학부 연구원인 Marina Yu와 Sydney Lindner입니다.

촬영을 시작하고 동물을 격자 중앙에 놓고 연구원과 반대쪽을 향하게 하여 격자 테스트를 시작합니다.동물이 3분 동안 자유롭게 뛰놀면서 위에서 비디오를 녹화하도록 합니다. 3분의 시간이 끝나면 촬영을 중단하고 동물을 집 우리로 되돌려 보냅니다.

이산화염소 기반 살균제로 그리드를 청소하고 테스트하기 전에 표면을 완전히 건조시키도록 주의하십시오. 다음으로, 사다리 테스트를 위해 동물을 깨끗한 임시 케이지에 넣습니다. 사다리 장치를 두 개의 케이지에 걸쳐 설정하며, 시작 케이지는 깨끗한 케이지이고 엔드 케이지는 동물의 살아있는 케이지로, 실행을 완료하기 위한 인센티브입니다.

사다리 길이를 기준으로 삼각대에 카메라를 놓습니다. 카메라의 렌즈가 사다리 가로대의 높이에 오도록 삼각대까지 확장합니다. 가로대가 렌즈와 정확히 정렬되도록 카메라를 배치하는 것은 BVAS 코드의 슬립 감지 알고리즘에 중요하므로 중요합니다.

비디오 녹화를 시작하고 동물이 사다리의 첫 번째 가로대 위에 앞발을 올려놓고 달리기를 시작하게 합니다. 동물이 도움 없이 사다리 위로 이동할 수 있도록 합니다. 촬영하는 동안 동물이 자신의 페이스에 맞춰 출발선에서 결승선까지 이동할 수 있도록 합니다.

마지막으로, 비디오 녹화를 끝내고 동물이 달리기를 완료하면 사다리에서 동물을 제거합니다. 먼저 모든 그리드 테스트 비디오에 대한 동물의 명칭으로 각 비디오의 이름을 지정합니다. 이제 각 동물의 이름을 딴 비디오를 가져 와서 파일을 자신의 저장 폴더에 넣으십시오.

그런 다음 각 연구 및 테스트 모드에 대한 데이터를 저장할 비어 있는 새 스프레드시트 파일을 만듭니다. 그런 다음 설치 프로그램 아이콘을 두 번 클릭하여 최신 BVAS 버전을 설치합니다. 설치가 완료되면 BVAS 프로그램 아이콘을 두 번 클릭하여 BVAS 메인 메뉴를 불러오면 그리드 분석, 래더 분석, 래더 검토 또는 종료 옵션을 사용할 수 있습니다.

BVAS 프로그램 내에서 상단 메뉴 화면에서 그리드 분석을 선택하여 시작합니다. 그런 다음 위쪽 입력 상자 옆에 있는 줄임표 버튼을 사용하여 파일 시스템을 탐색하고 분석할 비디오 파일을 찾습니다. 아래쪽 입력 상자 옆에 있는 줄임표 단추를 선택하여 파일 시스템을 탐색하고 데이터를 저장할 스프레드시트 파일을 선택합니다.

이동을 클릭하여 분석 프로세스를 시작합니다. 검토자 화면에서 각 비디오의 이미지를 검사합니다. 녹색 선이 없거나 녹색 선이 테스트 영역 주변의 올바른 사각형에 없는 것 같으면 편집 단추를 선택합니다.

모서리를 편집하려면 모서리 편집 버튼을 선택합니다. 대표 이미지 오른쪽에 있는 지침에 따라 테스트 영역을 선택하고 Enter 키를 눌러 선택 프로세스를 완료합니다. 마지막으로 완료를 선택하여 선택 항목을 저장하고 검토자 화면으로 돌아갑니다.

그런 다음 각 비디오의 그리드 영역이 올바르게 선택되면 중앙 완료 버튼을 선택하여 전체 분석 프로세스를 시작합니다. 프로그램을 실행하고 완료되면 성공 프롬프트가 나타납니다. 그런 다음 상단 메뉴에서 Ladder Analysis를 선택하여 Ladder Analysis 메뉴를 엽니다.

상단 입력 Ellipses 버튼을 선택하여 각 동물의 이름을 딴 Ladder Videos가 있는 폴더를 선택합니다. 그런 다음 아래쪽 줄임표 버튼을 선택하여 나중에 검토할 래더 비디오의 데이터가 있는 폴더를 저장할 디렉토리를 선택합니다. 이동을 선택하여 해석 프로세스를 시작하고 Open Field Test Analysis에 대해 동일한 단계를 반복합니다.

프로그램이 실행되도록 허용하고 경쟁 시 성공 프롬프트가 나타납니다. BVAS 프로그램 내의 상단 메뉴에서 래더 이미지 검토를 선택하여 래더 검토 파일 선택 화면을 불러옵니다. 맨 위 타원 버튼을 선택하여 데이터 파일의 폴더를 선택하고, 맨 아래 타원 버튼을 선택하여 스터디에 대해 작성된 스프레드시트 파일을 선택합니다.

그런 다음 Go를 눌러 Manual Review Process를 시작합니다. 다음으로, 자동으로 열린 래더 데이터 검토자 메뉴를 확인합니다. 슬립이 감지되면 다음 프레임 및 마지막 프레임 버튼을 사용하여 연속적으로 기록된 프레임(사용 가능한 경우)을 확인합니다.

Slip Toggle을 사용하여 쥐의 어느 발이 미끄러졌는지 표시하십시오. 감지가 거짓 긍정인 경우 No Slip의 토글을 그대로 둡니다. Save and Continue(저장 및 계속)를 클릭하여 다음 감지로 이동합니다.

실패의 경우 토글을 사용하여 실패가 Reversal 또는 Stagnation으로 인한 것인지 여부를 나타냅니다. 마지막으로 저장 및 계속을 클릭하여 다음 감지로 이동합니다. 마지막 감지에서 Save and Continue(저장 및 계속)를 클릭하여 분석을 완료하고 이전에 선택한 스프레드시트 파일에 데이터를 저장합니다.

완료 알림을 해제합니다. 이 연구에서 Open Field Grid Test의 결과는 전문 검토자가 초보 검토자보다 더 일관성이 있는 것으로 나타났지만, BVAS를 사용할 때는 전문가 사용자와 초보 사용자 모두에게 분산이 없었습니다. 마찬가지로, 래더 테스트의 결과는 전문 리뷰어가 초보 리뷰어보다 더 일관성이 있는 것으로 나타났지만, BVAS를 사용할 때 전문가와 초보 사용자 모두에게 분산이 0이었습니다.

Open Field Grid Test의 경우, 연구 과정에서 달성된 최대 속도 증가, 총 이동 거리 증가, 교차하는 그리드라인 수 증가에 대한 추세가 관찰되었습니다. 우회전 비율은 대체로 40%에서 50% 사이를 맴돌았습니다.마지막으로 래더 테스트의 경우 래더를 통과하는 시간이 감소하는 추세가 보였으며 4주 차쯤부터 시간이 증가했습니다. 이 소프트웨어는 Ladder Crossing 중 Paw Slips의 수를 자동으로 감지하고 표로 만듭니다.

그리고 Video Review Process에서 사용자는 막대 그래프와 같이 감지된 슬립을 왼쪽 발 슬립과 오른쪽 발 슬립으로 정렬할 수 있습니다. 이 기술을 숙달하면 실험 세션당 동물 한 마리당 30-40분 안에 완료할 수 있습니다. 이 절차를 시도하는 동안 조명이 밝은 환경에서 올바른 평면에서 동물과 배경 사이의 대비가 높도록 촬영하는 것이 중요합니다.

이 절차에 따라 질병 또는 부상 모델의 특정 질문에 답하기 위해 추가 동작 작업을 수행할 수 있습니다. 우리는 이 방법을 사용하여 뇌에 장치 이식으로 인한 운동 결핍에 대한 통찰력을 제공하지만 이 분석 기술은 다른 많은 질병 또는 부상 모델에서도 사용할 수 있습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 반복 가능한 행동 정량화 기법을 제공하는 Capadona Lab의 BVAS 소프트웨어를 사용하여 행동 비디오를 촬영하고 분석하는 방법을 잘 이해하게 될 것입니다.

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