Name: 에탄올을 이용한 자 궁 경부 교감 신경 절 블록 응용 프로그램 사용 하 여 인공 신경 개 열 등 한 치조 신경 재생 촉진을 위한 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-11-30T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: 학습하세요 경추 교감 신경절 차단을 이용한 인공 신경 도관을 활용한 치조 신경 재생 촉진 기법을 비글 모델에서. 이 방법은 말초 신경 손상 치료에 혈관화 개선을 통한 재생 효과를 입증합니다.

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이 작품 교토에서 Bioartificial 기관 부서에 의해 지원 되었다 국경 의료 과학 대학 연구소. 우리는 프론티어 의료 과학 연구소의 수의 직원에 게 감사 하 고 싶습니다.

이 연구는 관심과 동물의 사용에 대 한 원칙에 따라 실시 되었고 교토 대학교의 동물 연구를 위한 위원회에 의해 승인 (교토, 일본; 승인 번호: R-16-16). 동물의 고통을 최소화 하기 위해 모든 노력 했다 그리고이 보고서의 모든 섹션에 도착을 준수 (동물 연구: Vivo에서 실험의 보고) 지침.
1. PGA C 튜브의 제조
<ol><li>48 스핀 들 및 26 필 라 멘 트 (그림 1)18의 번들으로 구성 된 5 개의 PGA 섬유 관 끈 기계를 사용 하 여 흡수 polyglycolic 산 (PGA) 튜브에 의하여 인공적인 신경 도관을 조작.</li>
	<li>PGA 튜브 표면 친수성 렌더링, 플라즈마 방전에 노출.</li>
	<li>1 %v / w atelocollagen를 사용 하 여 염 산 염 솔루션7. 참고: Atelocollagen 효소 처리를 통해 돼지 피부에서 추출 하 고 바이러스 검사를 받게 됩니다. 그것은 주로 이루어져 있다 유형 I (70-80%) 하 고 유형 III 교원 질,이 비율은 다른 곳에서 자세히 설명 되어7. 1 g 콜라겐 100 mL 염 산 용액에 용 해 하 여 콜라겐 솔루션 준비 (pH = 3.0). 염 산 해결책의 밀도 약 1.0 이므로, w/w 콜라겐 농도 거의 1%.</li>
	<li>반복 5 위한 1% 콜라겐 염 솔루션으로 그것을 찍기 하 여 콜라겐 레이어와 튜브 코트 s 각 시간.<ol>
<li>찍기, 후 실 온에서 깨끗 한 벤치에 튜브를 건조. 튜브가 완전히 건조 (약 6 공기에 대 한 h)를 확인 한 후 다음 찍기 수행 합니다.</li>
		<li>코팅 과정 10 회 반복 한다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>바이오-흡수와 콜라겐 분자의 가교를 제어 하기 위해 진공 (dehydrothermal 치료)에서 24 시간 동안 140 ° C에 PGA C 튜브를 주제. 무 균 조건 하에서 전체 프로세스를 수행 합니다. 참고:이 절차는 마지막 길이 14 m m, 내경 3 m m, 및 50 μ m 벽 두께의 튜브를 생성합니다.</li>
</ol>2. 수술 절차 설정
<ol><li>성인 남성 beagles 9.0 13.0 k g를 사용 합니다.<ol>
<li>제어 개 집 조건 (12-h 빛과 어둠의 사이클)에서 별도 장에서 집 동물.</li>
		<li>단단한 음식을 제공 하 고 광고 libitum물.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Beagles 무게.</li>
	<li>오토 클레이 브 모든 수술 기구.</li>
	<li>멸 균된 장갑 하 고 80% 에탄올 솔루션 운영의 모든 표면 소독. 삭제 사용된 장갑.</li>
	<li>외과 손 씻기를 수행 합니다.</li>
	<li>신선한 마스크, 가운, 멸 균 장갑에 넣어.</li>
</ol>3. 마 취와 피부 준비
<ol><li>근육 주사 하 여 5 mg/kg 케 타 민 염 산 염과 1 mg/kg xylazine의 혼합물으로 개를 anesthetize.</li>
	<li>7.5 m m 직경 및 25 cm 길이의 tracheal 튜브로 넣어야.</li>
	<li>오른쪽 측면 위치에 개를 놓습니다. 3.2 %sevoflurane 산소 (1.0 L/min)와 전신 마 취를 유지 합니다.</li>
	<li>37 ° c.에 온도 유지 하기 위해가 열 패드를 사용 하 여</li>
	<li>각 막 찰과상을 피하기 위해 눈의 앞쪽 표면에 안과 젤을 적용 합니다.</li>
	<li>조심 스럽게 면도 수술가 위를 사용 하 여 수술 필드 (왼쪽 가슴 영역). 요원 사이트를 통해 상당한 양의 알코올 솔루션 스프레이. 3 번 반복 응용 프로그램이 최소 15 초를 기다립니다.</li>
	<li>심장 박동 및 수술 중 산소 포화를 기록 합니다.</li>
</ol>4. 열 등 한 치조 신경 재건을 사용 하 여 PGA-C 튜브: 재건 전용 모델의 개발
<ol><li>1 %lidocaine 왼쪽된 악의 gingiva에 27g 바늘을 사용 하 여 로컬 마 취 및 진통제로 서의 3 mL를 주사.</li>
	<li>동물의 mandibles 노출 왼쪽된 악의 gingiva에 번호 15 메스 블레이드 5 cm 가로 절 개를 수행 합니다.</li>
	<li>압 전 초음파 진동 후부 정신 구멍을 통해 3 c m × 8 m m 사각형으로는 mandible의 근 위 부분을 사용 합니다. 참고: 진동 주파수는 28 \u2012 32 kHz.</li>
	<li>(치수, 3 cm × 8 m m) 왼쪽된이 안 (그림 2A)18노출 하 악의 뼈 격판덮개의 정면 부분을 제거 합니다. 참고: 첫 번째 어 금 니의 뿌리 정점에 해당 하는 개조 사이트</li>
	<li>10 m m 세그먼트를 제거 하는 메스와 IAN transect</li>
	<li>2 m m의 깊이에 신경 관에 절단된 신경의 근 위 및 원심 젊고 아름 다운 여자를 삽입 합니다.</li>
	<li>8-0 나일론 봉합 하 고 수술 현미경 8 배 확대에 인접 하 고 말 초 신경 끝 (그림 2B)18에 튜브를 봉합을 사용 합니다.</li>
	<li>뼈 격판덮개는 mandible에서 원래 사이트에 반환 합니다.</li>
	<li>4-0 나일론 봉합 상처를 닫습니다.</li>
	<li>수술 후 어느 날 악의 뼈 격판덮개의 적절 한 위치에 제공 하는지 확인 합니다.<ol>
<li>4.10.1 마 취 얼굴 뼈의 단층 촬영 (CT) 영상을 수행 합니다. CT 매개 변수를 다음과 같이 설정: 120 kVp, mAs 200, 0.5 m m/s, 0.5 m m 슬라이스 두께.<ol>
<li>5 mg/kg 케 타 민 염 산 염과 1 mg/kg xylazine (그림 3)의 혼합물을 사용 하 여 마 취를 관리 합니다.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>수술 후 일주일 동안 진통제로 항생제 및 아 세트 아미노 펜 (100 mg/day)로 서 암 피 실린 (100 밀리 그램/일)를 관리 합니다.</li>
</ol>5. 에탄올 유발 CSGB: 개조 + CSGB 모델의 개발
<ol><li>섹션 4에서에서 설명한 대로 안 재구성을 수행 하 고 복구에 대 한 주를 허용 합니다.</li>
	<li>산소 (4 L/min)과 공기 (6 L/min)에서 1.5 %sevoflurane 동물 anesthetize 면도 하 고 섹션 3에에서 설명 된 대로 원하는 수술 필드를 청소.</li>
	<li>왼쪽 가슴 위치에 선을 그려 절 개 라인 피부 표시와 함께 표시 (그림 4, 절 개 라인은 길이 20 cm).</li>
	<li>1 %lidocaine 왼쪽 가슴 지역에 21 G 바늘을 사용 하 여 로컬 마 취 및 진통제로 서의 5 mL를 주사.</li>
	<li>번호 10 메스 블레이드와 왼쪽 가슴 피부를 incise.</li>
	<li>근육 근 막 폭로 하는 전기 메스로 지방 레이어 incise</li>
	<li>Serratus ventralis 근육 및 scalenus 근육을 노출 합니다.</li>
	<li>Serratus ventralis 근육 및 scalenus 근육: 복 부를 두 번째 및 세 번째 갈비뼈 (그림 5) 노출 등을 올립니다.</li>
	<li>두 번째 및 세 번째 있는 공간 왼쪽된 자 궁 경부 교감 신경 절 (그림 6) 노출에 왼쪽된 측면 thoracotomy를 수행 합니다.</li>
	<li>직접 시각화 (그림 7)에서 30 G 바늘을 사용 하 여 자 궁 경부 교감 신경 절에 99.5% 에탄올의 0.2 mL를 주사.</li>
	<li>중단 된 1-0 흡수 바늘 있는 공간을 닫습니다.</li>
	<li>중단 된 3-0 나일론 바늘으로 피부를 닫습니다.</li>
	<li>수술 후 일주일 동안 진통제로 항생제 및 아 세트 아미노 펜 (100 mg/day)로 서 암 피 실린 (100 밀리 그램/일)를 관리 합니다.</li>
	<li>CSGB 후 1 주에는 CSGB 것인지 적외선 thermography로 얼굴 피부 온도 측정 합니다.</li>
</ol>6. electrophysiological 녹음
<ol><li>감각 신경 활동 전위 (SNAP) 및 감각 신경 전도 속도 (SCV)은 IAN의 재건 후 3 개월 측정, 섹션 3에에서 설명 된 대로 동물을 anesthetize. 참고: 스냅 및 SCV는 실험 하 고 일반 컨트롤 양쪽에 두 처리 그룹에 있는 각 개에 대 한 측정 되어야 한다.</li>
	<li>번호 10 메스 칼 날 왼쪽된 악의 gingiva에 절 개를 확인 합니다.</li>
	<li>신중 하 게 물리적으로 재생성 된 신경의 손상을 방지 하려면 악의 뼈 플레이트를 제거 합니다.</li>
	<li>스냅 및 SCV 기록 바늘 전극의 쌍을 사용 하 여이 자극.<ol>
<li>신경 도관에 proximally 전극 삽입 합니다.</li>
		<li>20 번 10 kHz 전기 자극을 적용 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>결과 분석 합니다.<ol>
<li>전기 자극에 평균 응답 진폭을 계산 하 여 스냅인을 결정 합니다.</li>
		<li>최대 대기 시간 및 차트 녹음에서 피크 진폭을 측정 합니다.</li>
		<li>다음 방정식으로 복구 인덱스 계산: 재건 전용의 왼쪽된이 안의 피크 진폭 또는 개조 + CSGB 정상적인 제어 (재건 전용 그룹에 오른쪽이의 중앙 세그먼트)의 그룹 / 피크 진폭19 ,20.</li>
	</ol>
</li>
</ol>7. 조직학 분석
<ol><li>
섹션 준비
	<ol>
<li>3 개월 후에 재건, 왼쪽된이 안, 재건축된 사이트의 어느 한쪽에 신경의 1 cm를 포함 하 여 수확.</li>
		<li>수확 수확 사이트 왼쪽에 해당 하는 수준에서 오른쪽이 안.</li>
		<li>2.5%도 0.1 m M cacodylate 버퍼 솔루션 (pH 7.4, 48 ° C, 24 h)에 있는 침수에 의해 수확된 신경의 접두사.</li>
		<li>2% 오스뮴 tetroxide 솔루션 (48 ° C, 4 h)와 칼륨 ferrocyanide 0.1 M 인산 염 버퍼 솔루션 (pH 7.4, 2 시간) 후 위.</li>
		<li>탈수의 등급된 에탄올 솔루션 시리즈와 함께 신경.</li>
		<li>에폭시 수 지 (파라핀)에 포함 합니다.</li>
		<li>섹션 두께 0.5 \u2012 1.0 μ m의 표본.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
톨루이 블루 얼룩 및 형태소 분석
	<ol>
<li>톨루이 블루 솔루션 섹션을 얼룩.</li>
		<li>현미경 이미지는 샘플에 따라 다음 지역에 400 배 확대에 광학 현미경을 사용 하 여 얻을: 왼쪽이 안, 재생성된 세그먼트와 distally를 뽑았; 2 mm의 센터 오른쪽이 안, 수확 사이트 왼쪽에 해당이 안 세그먼트의 중심</li>
		<li>재생성 된 신경 섬유와 모든 영역의 이미지를 선택 합니다.<ol>
<li>임의로 선택 8 \u2012 10 영역 100 μ m × 100 μ m를 포함 하는 신경 섬유를 생성.</li>
			<li>다음 매개 변수를 측정 하는 적절 한 소프트웨어를 사용 하 여 형태소 분석을 수행: myelinated 신경 섬유 직경 (μ m) 및 밀도 (수/지역), 신경 조직, 비율과 G 비율 (myelinated 축 삭 직경/myelinated 신경 섬유 직경 ).</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Immunostaining
	<ol>
<li>파라핀 섹션 얼룩에 대 한 표준 프로토콜을 따릅니다.</li>
		<li>25 ° c.에 30 분 동안 1 차 항 체로 품 어</li>
		<li>25 ° c.에 3 회 인산 염 버퍼 식 염 수로 세척</li>
		<li>25 ° c.에 30 분 동안 양 고추냉이 과산화 효소와 함께 표시 하는 2 차 항 체로 품 어</li>
		<li>가벼운 현미경을 사용 하 여 이미지를 얻을.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
전송 전자 현미경 (TEM)
	<ol>
<li>7.1 단계에서 설명한 대로 신경 준비.</li>
		<li>70 \u2012 90 μ m는 ultramicrotome를 사용 하 여 두께 섹션 신경</li>
		<li>Reynold의 리드 시트르산과 uranyl 섹션을 얼룩.</li>
		<li>검토 하 고 전송 전자 현미경 이미지.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

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저자는 공개 없다.

우리 함께 에탄올 유발 CSGB bioabsorbable 신경 튜브를 사용 하 여이 안 중생에 대 한 효율적인 방법 제시. 이 연구에 대 한 우리 개, 이후 사용 다른 동물 모델 같은 쥐, 쥐, 토끼, 짧은 수명과 작은 바디 크기, 있고 따라서 정확한 수술 절차를 수행 하는 데 사용할 수 없습니다. 로이 안은 뼈로 둘러싸인 악의 운하, 수술 기법 신경 재건을 수행할 때 신경 및 혈관의 손상을 방지 하는 데 필요한입니다. 절차에 대 한 중요 한 기술 팁 신중 하 게 신경 및 혈관 손상의 위험을 최소화 하기 위해 악의 뼈 플레이트를 제거 하는 것입니다. 전통적인 burs 및 마이크로 톱 하드와 소프트 조직21을 구분할 수 없습니다. 또한,이 도구는 실수로 연락처22인접 조직, 특히이 안, 손상 원인 슬립 경향이 있다. 우리는 따라서 뼈 처리 단계에 대 한 압 전 수술 도구를 사용. 이것은 전문된 scalpels의 초음파 microvibrations...

많은 경우에, 열 등 한 치조 신경 (이 안)의 외상 성 상해가 이다 의원 성, 세 번째 어 금 니의 추출 또는 치과 임 플 란 트1,2,3의 배치에 의해 자주 발생 되 고. 이의 부상 열에 적자 이어질 하 고 감각으로 감각 이상, dysesthesia, hypoesthesia, 및 용어인 터치 수 있습니다. 신경 손상 뿐만 아니라 보수적인 치료로 뿐만 아니라 다른 방법, 봉합 등 autograft 배치에 의해 처리 됩니다. 그러나, 이러한 방법은 종종 증상 개선 및 기증자 사이트4,,56신경 결함의 부족을 포함 하는 단점이 있다.
인공 신경-polyglycolic 산-콜라겐 (PGA-C) 튜브 원래 일본에서 개발 되었다. 그것은 그것의 내부 루멘 가득 해 콜라겐7과 바이오 흡수 관입니다. 동물 실험에서이 관 그리고 비 골 신경 결함, 비글 개에 있는 신경 재생을 향상 시키기 위해 사용 홍보 헌 신경 이식8보다 복구의 높은 수준을 표시 했다. PGA-C 튜브의 임상 응용 주변 신경 상해 환자에서 2002 년에 시작 했다. 또한, 유리한 임상 결과 trigeminal 신경 장 해 (이 안 및 언어 신경)9,,1011의 치료에 달성 되었습니다. PGA-C 튜브를 사용 하 여 성공적인 신경 재생에 대 한 중요 한 요인은8주변 조직 혈액 공급 이다. 자 궁 경부 교감 신경 절 블록 (CSGB) 머리와 목 지역에 공감 봉쇄를 생성 하 고 각각 innervated 지역12; 혈액 흐름을 증가 따라서, 그것은 복잡 한 지역 통증 증후군 및 순환 불충분13,,1415의 치료에 사용 되었습니다. 그러나, 증가 혈액 흐름16,17에 몇 가지 실험에 대 한 조사 효능 CSGB의 되었습니다. 적절 한 CSGB 효율성을 보장 하기 위해 봉쇄 적용 되어야 한다 현지 마 취약 한 두 번 함께 매일 몇 주 동안이 기술을 조사 하기 위해 동물 모델을 생성할 때 따라서 도전 포즈. 이전 연구에서이 한계를 해결 하기 위해 우리는 장기 증가 혈액의 흐름이 orofacial 지역18개 모델을 개발 했다. 모델 한 CSGB 주입 하 여 수행 하 여 생성 된 에탄올 99.5%. 우리는 구강 점 막 혈 류 및 레이저 도플러 flowmetry 및 12 주 동안 일주일에 한 번씩 적외선 온도 기록에 의해 비 강 피부 온도 평가합니다. 우리는이 모델에서 7-10 주 동안 orofacial 영역의 혈액 흐름 증가 했다 발견.
현재 연구에서 우리는 신경 재생에 에탄올 유발 CSGB의 효과 평가. PGA-C 튜브 왼쪽된이 안에 10 m m 간격에 걸쳐 비글 개에 이식 했다. 1 주일 후, CSGB 에탄올을 주입 하 여 수행 되었다. 수술 후 3 개월 우리 신경 재생에 CSGB의 효과 평가 하기 위해, 조직학, electrophysiological 및 형태학 연구의 다양 한을 수행 합니다. 우리는 PGA C 튜브 및 에탄올 유발 CSGB 사용 하 여이 재건에 대 한 상세한 프로토콜을 제공 합니다.

<table><tbody><tr><td>NMP Collagen PS</td><td>Nippon Meatpackers</td><td>301-84621</td><td>효소 처리로 어린 돼지 피부에서 추출한 Atelocollagen</td></tr><tr><td>Surgical clippers</td><td>Roboz Surgical Instrument Company</td><td>RC-5903</td><td></td></tr><tr><td>일회용 메스(No.15)</td><td>Kai medical</td><td>219ABBZX00073000</td><td></td></tr><tr><td>VarioSurg3</td><td>Nakanishi</td><td>VS3-LED-HPSC, E1133</td><td>뼈 압전 수술 </td></tr><tr><td>가공 4-0 나일론 봉합</td>사 <td>Ethicon</td><td>8881H</td><td></td></tr><tr><td>8-0 나일론 봉합</td>사 <td>Ethicon</td><td>2775G</td><td></td></tr><tr><td>이세파 마이신 황산</td><td>니치 이코</td><td>620005641</td><td></td></tr><tr><td>일회용 메스 (No.10)</td> <td>카이 메디컬</td><td>219ABBZX00073000</td><td></td></tr><tr><td>30 게이지 바늘</td><td>Nipro</td><td>1134</td><td></td></tr><tr><td>1-0 흡수 스티치</td><td>Ethicon</td><td>J347H</td><td></td></tr><tr><td>3-0 나일론 스티치</td><td>Ethicon</td><td>8872H</td><td></td></tr><tr><td>Neo Thermo</td><td>NEC Avio</td><td>TVS-700</td><td>적외선 열화상&nbsp;</td></tr><tr><td>뉴로팩 &시그마;</td><td>NIHON KOHDEN</td><td>MEB-5504</td><td>전기 생리학 기록용 정형 레코더</td></tr><tr><td>Toluidine Blue</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T3260-5G</td><td></td></tr><tr><td>광학 현미경</td><td>Keyence</td><td>BZ-9000</td><td></td></tr><tr><td>마우스 항인간 신경 필라멘트 단백질 단클론 항체</td><td>DAKO</td><td>N1591</td><td></td></tr><tr><td>Polyclonal rabbit anti-S100 항체</td><td>DAKO</td><td>Z0311</td><td></td></tr><tr><td>투과 전자 현미경</td><td>Hitachi High Technologies</td><td>Hitachi H-7000</td><td></td></tr><tr><td>Dynamic cell count</td><td>Keyence</td><td>BZ-H1C</td><td>형태 평가용 소프트웨어</td></tr></tbody></table>

에탄올을 이용한 자 궁 경부 교감 신경 절 블록 응용 프로그램 사용 하 여 인공 신경 개 열 등 한 치조 신경 재생 촉진을 위한

Ethanol-Induced Cervical Sympathetic Ganglion Block Applications for Promoting Canine Inferior Alveolar Nerve Regeneration Using an Artificial Nerve

Polyglycolic 산 콜라겐 (PGA-C) 튜브는 얇은 콜라겐 필름으로 구성 된 바이오 흡수 신경 튜브 멀티 챔버 구조의 콜라겐 가득 있습니다. 유리한 임상 결과 손상 된 열 등 한 치조 신경 (이 안)의 치료에 대 한 이러한 튜브를 사용 하 여 달성 되었습니다. PGA-C 튜브를 사용 하 여 성공적인 신경 재생에 대 한 중요 한 요인은 주변 조직에 혈액 공급 이다. 자 궁 경부 교감 신경 절 블록 (CSGB) 따라서 영역에 혈액 흐름을 증가 하는 머리와 목 지역에 동 정적인 봉쇄를 만듭니다. 적절 한 효과 보장 하기 위해 봉쇄 관리 되어야 합니다 현지 마 취약으로 여러 연속 주; 하루에 1 ~ 2 배 이것은이 기술 조사에 대 한 동물 모델을 만들 때 도전 포즈. 이 한계를 해결 하기 위해 우리는 장기 증가 orofacial 영역에 혈액 흐름에서의 개 모델에서 에탄올 유발 CSGB 개발. 우리 검사 여부 PGA C 튜브 주입을 통해이 안 중생이이 모델에 의해 강화 될 수 있다. 14 Beagles 했다 각 이식 PGA C 튜브 왼쪽된이 안에 10 m m 차이 걸쳐. 이 안은 뼈로 둘러싸인 악의 운하, 따라서 우리가 선택 압 전 수술, 초음파 뼈 처리, 신경 및 혈관 손상의 위험을 최소화 하기 위해 구성 된. 좋은 수술 결과이 방식으로 얻은 것입니다. 수술 후 1 주일이 개 7 에탄올의 주입에 의해 왼쪽된 CSGB를 받게 했다. 에탄올 유발 CSGB 결과 향상 된 신경 재생, 증가 혈액의 흐름 효과적으로 안 결함에 신경 재생을 촉진 하는 것을 건의. 이 개 모델 CSGB의 장기 효과 대 한 더 연구에 기여할 수 있다.

우리는 왼쪽된 CSGB (그림 8) 후 1 주 차단된 측면의 얼굴 피부 온도 있는 증가 관찰 했다.
3 개월 후 재건에서 재건에 PGA C 튜브 흡수 되었다 하 고 열 등 한 치조 신경의 재생 재건 전용에서 관찰 되었다 개조 + CSGB 그룹 (그림 9A, B)18.
스냅 개조 + CSGB와 재건 전용 그룹의 재건 양쪽에서 측정 했다. Electrophysiological 평가 결과 표 118에서 요약 된다...

우리는 신경 수리 인공적인 신경 도관을 사용 하 여 자 궁 경부 교감 신경 절 차단의 효과 평가 합니다. 남성 비글 개 했다 각 이식 한 인공 신경 왼쪽 열 등 한 치조 신경; 10 m m 간격에 걸쳐 왼쪽된 자 궁 경부 교감 신경 절의 주입에 의해 차단 되었다 측면 thoracotomy 통해 99.5% 에탄올.

Polyglycolic acid collagen (PGA-C) tubes are bio-absorbable nerve tubes filled with collagen of multi-chamber structure, which consist of thin collagen ...

이 방법은 인공 신경 도관을 사용하여 인공 장기 분야에서 신경 재생에 대한 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 압전 수술이 신경 및 혈관 손상을 피하기 위해 열등한 폐포 신경 재건에 사용될 수 있다는 것입니다. 이 기술의 의미는 신경 재생을 촉진 할 수있는 잠재력을 가지고, 구안면 신경 병증의 치료로 확장.페달 반사에 대한 반응부족으로 마취를 확인한 후, 각막 마모를 피하기 위해 눈의 전방 표면에 젤을 발라주세요. 개를 오른쪽 측면 위치에 놓습니다. 27 게이지 바늘을 사용하여 왼쪽 하악 진지바에 1 %리도카인 3 밀리리터를 주입하십시오.다음으로, 숫자 15 메스 블레이드를 사용하여 하악골을 노출시키기 위해 왼쪽 하악 진기에서 5센티미터 횡단 절개를 합니다. 28-32킬로미터 헤르츠 주파수에서 압전 초음파 진동을 사용하여 하악의 근위 면을 후방 정신 포맨을 통해 8 밀리미터 직사각형으로 3 센티미터로 갈아 넣습니다. 열등한 폐포 신경이 하악관 내에 위치하고 뼈로 둘러싸여 있기 때문에, 우리는 신경과 혈관 손상의 위험을 최소화하기 위해 뼈 처리를위한 초음파로 구성된 압전 수술을 사용합니다.하악 골판의 정면 부분을 제거하여 왼쪽 열등한 폐포 신경을 노출시합니다. 메스를 사용하여 열등한 폐포 신경을 트랜스핑하여 10mm 세그먼트를 제거할 수 있습니다. 절단된 신경의 근위및 말단 그루터기를 신경관에 2밀리미터 깊이로 삽입합니다.8-0 사용 나일론 봉합사 및 8X 배율에서 수술 현미경으로 튜브를 근위 및 탈경 신경 끝에 봉합합니다. 그런 다음 뼈 판을 하악의 원래 부위로 되돌리고 4-0 나일론 봉합사로 상처를 닫습니다. 수술 후 하루, 하악 골판이 적절한 위치에 있는지 확인하기 위해 마취 하에 얼굴 뼈의 컴퓨터 단층 촬영 영상을 수행합니다.재건 수술 후 1 주일, 수술 필드를 면도. 그런 다음, 수술 영역의 왼쪽에 절개 선을 그리고 21 게이지 바늘을 사용하여 국소 마취 및 진통으로 면도 된 가슴에 1 %의 리도카인 5 밀리리터를 주입합니다. 숫자 10 메스 블레이드를 사용하여 표시된 선 에 절개를하고 전기 메스를 사용하여 지방 층을 절개하여 근육 근막을 노출시합니다.세라투스 복부를 노출하고 비늘 근육을 비늘누를 합니다. 두 번째와 세 번째 갈비뼈를 노출하는 복부에서 등갈로 근육을 올립니다. 왼쪽 자궁 경부 동정 신경절을 노출하는 두 번째 와 세 번째 늑간 공간에서 왼쪽 측면 thoracotomy를 수행합니다.30 게이지 바늘을 사용하여 자궁 경부 교감 신경절에 99.5 %의 에탄올 2 밀리리터를 주입하십시오. 자궁 경부 교감 신경절은 에탄올에 의해 퇴행성 으로 변경됩니다. 그런 다음 1-0 흡수성 스티치로 늑간 공간을 닫습니다.3-0 나일론 바늘이 중단된 피부를 닫고 자궁 경부 교감 신경절 블록 또는 CSGB 후 1 주일 후 적외선 테르모그래피로 얼굴 피부 온도를 측정합니다. 재건 후 3개월 동안, 재건 구역의 폴리글리콜산 콜라겐 튜브가 흡수되고, 열등한 폐포 신경의 재생은 재건 전용 및 재건-플러스-CSGB 군 모두에서 관찰된다. 감각 신경 작용 잠재력은 또한 재건 플러스 CSGB 및 신경 재건 그룹의 양 재건 측면에서 측정할 수 있으며, 재건 전용 군보다 재건-플러스-CSGB 동물에서 관찰된 상당히 높은 회복 지수및 감각 신경 전도 속도.골수화된 신경섬유는 재건 전용 및 재건-플러스-CSGB 군에서 재생된 열등한 폐포 신경의 중앙 및 탈경 세그먼트에서 관찰되지만, 두 그룹은 정상 대조군에 비해 더 작은 재생된 골수신경 직경을 입증하였다. 재생축기와 슈완 세포의 존재는 각각 항 신경필라멘트 및 항S100 항체로 염색함으로써 재건 플러스 CSGB 군의 중앙 및 탈구 세그먼트에서 더욱 확인된다. 형태학적 분석은 CSGB 절차로 관찰된 상당히 작은 G비율을 가진 CSGB 군에서 재생된 좌완폐포 신경의 중심 및 탈세그먼트 모두에서 상당히 높은 골수화된 신경 섬유 밀도 및 신경 조직 비율을 나타낸다.자궁 경부 교감 신경절 블록 향상 된 신경 재생 결과, 증가 혈액 흐름 효과적으로 신경 재생을 촉진 제안. 이 기술은 인공 신경을 사용하여 구면 신경 병증에 대한 외과 적 치료를 탐구하기위한 현장 조직 공학 분야의 연구 개발에 기여합니다.

ethanol-induced-cervical-sympathetic-ganglion-block-applications-for

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

출처: Shionoya, Y., et al. 인공 신경을 사용하여 송곳니 하치조 신경 재생을 촉진하기 위한 에탄올 유도 경추 교감 신경절 차단 적용. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 생분해성 스캐폴드와 에탄올 유도 교감신경 차단을 사용하여 하치조신경(IAN) 재생을 위한 송곳니 모델을 보여줍니다. 이 절차에는 경추 교감 신경절에 외과적으로 접근하고 에탄올을 주입하여 혈관 확장을 유도하는 것이 포함됩니다. 결과적으로 손상 부위로의 혈류가 증가하고 Schwann 세포 유도 축삭 재생과 결합되어 신경 재생이 촉진됩니다.

에탄올 유도 교감신경절 차단이 개 모델에서 신경 재생에 미치는 영향

후각 ensheathing 세포 (OECs)는 기본 후각 신경 세포의 성장을 허용 신경 능선 세포입니다. 이 특정 속성은 세포 이식에 사용할 수 있습니다. 우리는 여기에서 후두 신경 손상 모델에서 OECs의 사용을 기반 셀룰러 이식 모델을 제시한다.

말초 신경 손상 후 기능 회복을 평가하기 위해 후각 Ensheathing 세포의 이식

구심성 미주신경 신호전달은 복부와 흉부의 장기에 위치한 수용체에서 중요한 정보를 중추신경계로 전달합니다. 미주신경의 신경절(nodose ganglia)에는 미주신경 활동을 조절하는 많은 유형의 수용체가 포함되어 있습니다. 이 프로토콜은 신경화학물질을 노도즈신경절(nodose ganglia)에 국소적으로 주입하는 방법을 설명합니다.

스프 라그 - 돌리 쥐에 Nodose 신경절 주입하는 방법

이 프로토콜은 감각 축삭 재생을 연구하기 위한 모델로 성체 쥐에서 바이러스 벡터와 동시 등쪽 뿌리 압착 손상과 함께 등뿌리 신경절(DRG) 주사를 사용하는 것을 제시합니다. 이 모델은 감각 축삭 재생을 촉진하기 위한 유전자 요법의 사용을 조사하는 데 적합합니다.

등쪽 뿌리 신경절 사출 및 지느러미 루트 감각 축삭의 재생을위한 모델로 부상 크러시

이 작품 당뇨병 neuropathic 신경의 활동 전위를 차단 하 고 강도 집중 된 초음파를 적용 한 방법론을 제공 합니다.

당뇨병 쥐 모델에서 신경 전도 대 한 초음파 도구 차단

Intraganglionic 주입에 대 한 요 추 느 루트 신경 절 (DRG)에 대 한 액세스를 제공 하는 돼지에서 laminotomy 하는 방법을 설명 합니다. 사출 진행 intraoperatively 그리고 조직학 수술 후 21 일까지 확인 모니터링 합니다. 이 프로토콜 DRG 주입 관련 된 미래의 전 임상 연구 사용 될 수 있습니다.

Laminotomy 허리 지 루트 신경 절의 액세스 및 돼지에 주입

여기, 우리는 전기 신경 자극 기의 도움으로 회귀 후 두 신경에 근접에 있는 헌 근육 파생 된 줄기 세포를 주입 하는 프로토콜을 제시. 이 새로운 기술은 말 회귀 후 두 신경 병의 치료에 유용 될 수 있습니다.

말 왼쪽된 회귀 후 두 신경 근처 헌 혈 줄기 세포의 신경 자극을 유도 주사

이 프로토콜은 부상의 다양한 유도 패턴의 설명을 포함하여 쥐 모델에서 안면 신경 수술에 대한 재현 가능한 접근 방식을 설명합니다.

축축한 억제 및 재생을 연구하는 쥐 모델의 안면 신경 수술

본 프로토콜은 상부 경추 신경절을 식별하고 절제함으로써 아드레날린성 신경 분포를 절제하는 마우스 모델을 설명합니다.

쥐 모델에서 우수한 자궁경부 신경절 절제술을 위한 수술 기법

이 프로토콜은 표재성 하복부 동맥 근막(SIEF) 플랩을 채취하여 토끼의 재건된 비골 신경 결손을 감싸기 위한 단계별 지침을 제공합니다. 신경 이식편의 조직 층에 혈관을 삽입하는 이 수술은 재생 결과를 개선하는 데 사용됩니다.

토끼의 신경 재건을 위한 표재성 하복부 동맥 근막 피판(The Superficial Inferior Epigastric Artery Fascia Flap for Nerve Reconstruction in Rabbits)

우리는 쥐에서 직접 미주신경 주사를 위한 프로토콜을 제시하여 주사 후 합병증 없이 신경으로 직접 약물을 전달할 수 있도록 합니다. 이 방법은 자율신경계 조작과 관련된 전임상 신경학적 연구에 적용됩니다. 필요한 수정을 통해 쥐 및 다른 종의 다른 신경에 대한 직접 신경 주입에 사용할 수 있습니다.

쥐를 위한 직접 미주신경 주사 프로토콜

학습하세요 경추 교감 신경절 차단을 이용한 인공 신경 도관을 활용한 치조 신경 재생 촉진 기법을 비글 모델에서. 이 방법은 말초 신경 손상 치료에 혈관화 개선을 통한 재생 효과를 입증합니다.

에탄올을 이용한 자 궁 경부 교감 신경 절 블록 응용 프로그램 사용 하 여 인공 신경 개 열 등 한 치조 신경 재생 촉진을 위한

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