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DOI: 10.3791/58041-v
Jennifer M. Brazill1, Yi Zhu1, Chong Li1, R. Grace Zhai1,2
1Department of Molecular and Cellular Pharmacology,University of Miami Miller School of Medicine, 2School of Pharmacy, Key Laboratory of Molecular Pharmacology and Drug Evaluation (Yantai University), Ministry of Education, Collaborative Innovation Center of Advanced Drug Delivery System and Biotech Drugs in Universities of Shandong,Yantai University
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a versatile workflow for extracting quantitative data from fluorescence imaging in Drosophila models of neurodegeneration. It focuses on protein aggregation and autophagic flux to enhance the understanding of cellular mechanisms involved in neurodegenerative diseases.
단백질 집계 및 autophagic 플럭스의 초파리 모델의 중앙 신 경계에서의 형광 이미징-기반 세포 생물학 연구에서 양적 데이터를 추출 하는 간단 하 고 융통성 있는 워크플로 개발 했습니다. neurodegeneration입니다.
우리는 신경 퇴행의 초파리 모델에서 복잡하고 역동적인 세포 생물학적 과정을 추출하기 위해 형광 기반 이미징 연구에서 정량적 데이터를 추출하기 위해 이 방법을 개발했습니다. 이 기술의 주요 장점은 선택 편향을 최소화하고 샘플링 파워를 극대화하며 필드 전체에서 재현성을 달성하기 위한 적응형 반자동 이미지 분석 워크플로우입니다. 이 접근 방식은 신경 퇴행과 관련된 다른 단백질 반점 및 막 결합 구획의 분석을 위해 확장될 수 있으며, 이는 궁극적으로 신경 퇴행성 질환에 대한 기계론적 이해를 향상시킬 것입니다.
실체 현미경으로 해부하는 동안 얇은 판을 그대로 유지하려면 두 개의 집게를 망막 아래로 밀어 넣고 눈 중앙을 부드럽게 찢어 망막을 제거합니다. 겸자를 얇은 판 표면과 평행하게 유지하면 얇은 판에 붙어 있는 남아 있는 망막 조직이 모두 당겨집니다. 각 그룹별로 3-5개의 뇌를 해부하고 뇌를 적절한 고정제가 들어 있는 마이크로 원심분리기 튜브로 실온에서 15분 동안 부드럽게 흔들어 놓습니다.
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