An <em>In Vitro</em> Assay to Detect tRNA-Isopentenyl Transferase Activity

Antonio E. Chambers; Adam E. Richardson; David F. Read; Thomas J. Waller; Douglas A. Bernstein; Philip J. Smaldino

doi:10.3791/58100

TRNA Isopentenyl 전이 효소 활동을 감지 하는 체 외에서 분석 결과

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Biochemistry

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An In Vitro Assay to Detect tRNA-Isopentenyl Transferase Activity

TRNA Isopentenyl 전이 효소 활동을 감지 하는 체 외에서 분석 결과

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07:46 min

October 8, 2018

DOI: 10.3791/58100-v

Antonio E. Chambers*¹, Adam E. Richardson*¹, David F. Read², Thomas J. Waller³, Douglas A. Bernstein¹, Philip J. Smaldino¹

¹Department of Biology,Ball State University, ²Department of Genome Sciences,University of Washington, ³Department of Molecular, Cellular, and Developmental Biology,University of Michigan

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

우리가 효 모 RNA 수정 효소, Mod5, 생 화 확 적인 특성에 대 한 프로토콜을 설명 하는 여기,이 프로토콜 다른 RNA 수정 효소 적용할 수 토론.

이 프로토콜의 전반적인 목표는 생체 외에서 tRNA-Isopentenyl Transferase 활동을 생화학적으로 특성화하는 것입니다. 이 방법은 정제된 재조합 효소의 tRNA-isopentenyl 전달 활성의 체외 검출 및 특성화에 유용하다. 이 기술의 주요 장점은 공유 RNA 수정을 검출하는 데 사용되는 간단하고 직접적인 분석이라는 것입니다.

이 방법은 tRNA-isopentenyl 전달 효소 활동에 대한 통찰력을 제공하지만, 넓은 범위 또는 RNA 변형 효소의 생화학적 특성화에 잠재적으로 적응할 수 있습니다. 이 절차의 첫 번째 단계는 젤을 주조하는 데 사용되는 유리 판을 철저히 청소하는 것입니다. 접시를 비누와 물로 씻고, 탈이온화된 물로 잘 헹구고, 이소프로파놀과 보풀이 없는 물티슈로 접시를 청소합니다.

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