거꾸로 방향 가압된 주머니 안에 전체 인간의 마음의 decellularization

이 방법은 실제로 조직 공학 분야의 성배인 혈관 비계 생성에 대한 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 반전된 방향으로 가압 된 주머니가 이식 할 수없는 인간의 장기의 탈세포화를 개선하고 적절한 시간 프레임에 걸쳐 멸균 방식으로 그렇게 할 수 있다는 것입니다. 세포 제거를 위해 심장을 준비하려면 먼저 가능한 결함에 대한 내부 검사를 수행하십시오.

중격 결함이 있는 경우 적절한 봉합사로 결함을 수정합니다. 다음으로, 2-0 실크 봉합사로 우수하고 열등한 베나 카바를 장식합니다. 오른쪽 아트리움 벽을 5-0 PROLENE로 봉합하고, 후속 수통을 위해 주요 폐 동맥에서 대동맥을 해부합니다.

선박의 직경에 따라 커넥터를 대동맥과 폐 동맥에 삽입하고 2-0 실크 봉합사로 커넥터를 고정합니다. 폐 정맥 오리피스 중 하나를 사용하여 왼쪽 심실을 통해 튜브 라인을 삽입하고 대동맥의 커넥터에 주입 라인을 연결하고 폐 동맥의 커넥터에 유출 선을 연결합니다. 준비된 심장을 반전 된 방향으로 폴리 에스테르 파우치에 넣고 파우치를 관류 용기에 넣습니다.

용기의 직경에 따라 고무 스토퍼의 각 라인에 각각의 선을 연결하고, 폴리에스테르 파우치를 밀봉하기 위해 관류 용기의 뚜껑에 스토퍼를 삽입한다. 이어서, 고무 스토퍼의 주입 포트를 통해 PBS를 침투하여 폐 동맥에서 유출되는 것을 확인하고 왼쪽 심실에 삽입된 라인에서, 이 흐름을 이용하여 혈관 내의 혈액의 잔류 흔적의 장기를 청소한다. 심장이 준비되면 조립된 생물 반응기를 똑바로 방향으로 배치하고 주입 라인, 압력 헤드 라인, 폐 동맥 유출 라인 및 생물 반응기 배수 선을 관류 생물 반응기 위에 있는 고무 캡 표면 포트에 연결합니다.

그런 다음, 고독용액으로 4시간 동안 심장을 탈세포화하고, 저혈압용액으로 2시간, 도데킬 황산나트륨120시간, PBS 120리터를 함유한 최종 세척, 대동맥 뿌리에서 측정되는 수은 압력120밀리미터 의 최종 세척을 한다. PBS 워시의 마지막 10리터 동안, 비계를 살균하기 위해 10개의 일반 수산화나트륨으로 중화된 멸균 2.1%의 멸균산 용액 500밀리리터를 첨가한다. 전형적으로, 세포제거 과정에서 대어로의 유량은 과혈용에서 저혈압으로 변함에 따라 점차 감소한다.

대조적으로, 유류율은 포혈 용액이 저혈압 용액에서 SDS로 변경될 때 증가하며, 이 시점에서 주입 유량은 변동을 보여줍니다. 폐 동맥의 유출 속도는 하이퍼 및 저혈압 솔루션과 유사한 추세를 보여줍니다. 그러나, SDS 관류 중 유출속도는 전반적인 감소를 나타낸다.

관상 동맥 관류 효율은 또한 다른 시약이 혈관을 통해 퍼짐으로 시간이 지남에 따라 감소합니다. 폐 동맥과 좌심실의 유출이 동시에 수집됨에 따라 분광기에 의해 파편 함량을 비교할 수 있습니다. 폐 동맥의 탁도는 초기 관류 기간 동안 좌심실에서 관찰된 것과 비교하여 더 갑작스러운 색 변화를 나타내지만, 두 혈관모두에서 유출물의 탁도는 관류 기간 동안 시간이 지남에 따라 감소한다.

6개의 탈세포 인간 심혼에서 비신천산 단백질 분석에 의한 유출 탁도와 세포 파편 사이의 상관관계에 대한 평가는 단백질 농도와 유출 탁도 사이의 선형 상관관계를 나타낸다. 이 절차를 시도하는 동안 유량을 모니터링하고 회두 공정을 실제로 모니터링하기 위해 주기적으로 perfusate를 수집하는 것이 중요합니다. 이 절차에 따라 기계적 평가 또는 불임 테스트와 같은 다른 기술을 사용하여 스캐폴드의 충실도 및 기능성 심장 조직을 생성하기 위한 재세포화에 대한 잠재적 사용을 평가할 수 있습니다.

개발 후, 이 기술은 재생 의학 및 조직 공학 분야의 연구원들이 말 그대로 고체 장기 이식 분야를 변화시키는 전체 혈관 화 기관의 생성을 탐구할 수 있는 길을 열었습니다. SDS와 같은 인간의 장기 및 조직 및 화학 물질과 함께 일하는 것은 매우 위험할 수 있으며 이 절차를 수행 할 때 항상 적절한 개인 보호 장비를 착용한다는 것을 잊지 마십시오.