Name: 글리신/D-떠들고와 조미료에 감도와 NMDA 수용 체를 공부 하는 높은 처리량 칼슘-플럭스 분석 결과 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-07-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 48 s
Description: 학습하세요 HEK 293 세포를 이용한 고처리량 칼슘-플럭스 분석법으로 NMDA 수용체 활성을 연구하는 방법을. 이 기술은 신경계 질환 치료제 개발에 활용될 수 있습니다.

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저자는이 연구 자금에 대 한 전체 게시물 학위 학자 프로그램 사무실과 노바 티 스 연구소 생물 의학 연구에 대 한 감사 하 고 싶습니다.

1입니다. 셀의 준비
참고:이 프로토콜을 데이터 생성을 포함 하 여 잠재 인코딩 NR1 및 NR2A 세포로 불리고 HEK293 세포를 사용 합니다.
<ol><li>HEK293 세포의 적절 한 수 씨 하 고 적절 한 최종 농도 (1.00 µ L 각)에서 NR1 / NR2A 바이러스를 추가 합니다. 384-잘 접시를 사용 하 여 10, 000 셀/잘 30 µ L의 최종 볼륨.</li>
	<li>또는 적절 한 휴대폰 번호와 (384-잘 접시, 10, 000 사용 하 여 셀/잘 30 µ L의 최종 볼륨에서)에 대 한 볼륨 HEK293 NR1 NR2A 셀 씨. NR2A 식 유도 및 복합 보호 추가 2 µ g/mL의 농도에서 항생물질을 추가 (100 µ M MDL105, 519 또는 5 µ M CGP07066724).</li>
	<li>참고: 인코딩 NR1, NR2 잠재 5 x 109 -10 x 109 밀리24당 감염 단위 사이 대략 titer가 있어야 합니다.</li>
</ol>2입니다. NMDA 수용 체 활동의 측정
<ol><li>HEK293 세포 중 보호 화합물 존재 NR1/NR2 또는 HEK293 NR1 NR2A 세포 transduced 384-잘 접시를 준비 합니다. 사용 하 여 명확한 바닥, 블랙 프레임, 폴 리-D-리 코팅된 판. 참고: 보호 100 µ M와 MDL105, 519 글리신, 5 µ M 동안에 감도 수 여 하는 CGP070667은 조미료에 감도 부여 하는 데 사용 됩니다.</li>
	<li>16 시간 (하룻밤) 37 ° C, 5% CO2 접시를 품 어.</li>
	<li>인큐베이터에서 접시를 제거 하 고 부드럽게 호환 유기화학 컨테이너 접시를 뒤집어 감속에 의해 셀 미디어를 삭제. 부드럽게 접시의 가장자리에서 미디어를 청소 하 고 나머지 미디어 배수를 종이 타월에 접시를 누릅니다.</li>
	<li>인큐베이션 버퍼 (HBSS pH 7.5, 20 mM HEPES, 1 mM MgCl2, 1mm probenecid) 10 mL에 calcium6 염료 (1 접시 크기)의 한 유리병 solubilizing로 calcium6-염료를 준비 합니다. 37 ° C, 5% CO2에서 2 시간 동안 접시를 품 어.</li>
	<li>인큐베이터에서 접시를 제거 하 고 10 분 동안 실내 온도에 조정 하는 셀을 하자.</li>
	<li>부드럽게 2.3 단계에서 설명한 대로 calcium6 염료를 쏟아 하 고 분석 결과 버퍼 (HBSS pH 7.5, 20 mM HEPES, 1.8 m m CaCl2, 1mm probenecid)의 30 µ L를 추가 합니다.</li>
	<li>3 세척의 2.6 두 번 총에 대 한 단계를 반복 합니다. 마지막 세척 후 분석 결과 버퍼의 30 µ L 셀에 둡니다.</li>
	<li>실 온에서 5 분간 휴식 하는 셀을 하자.</li>
	<li>400 µ M 글리신 및 400 µ M 조미료 (100 µ M의 최종 농도, 아래 설명 된 대로 결정 되는 ligands의 최적 농도) 4-fold 재고 하 여 리간드 접시를 준비 합니다. V-아래 384-잘 접시에 ligand 주식의 25 µ L의 최소 전송.</li>
	<li>Ligand 접시와 셀 플레이트 FDSS (기능성 약물 검사 시스템)로 로드 합니다.</li>
	<li>30 초 동안 셀 플레이트의 기준선 형광 (Fo)를 측정 합니다. 5 분 동안 calcium6 염료 형광을 기록 하 여 FDSS 분배 기능과 측정 칼슘 플럭스를 사용 하 여 셀 접시에 ligand의 10 µ L를 전송 합니다.</li>
	<li>기준선 형광 (F최대/Fo)에 의해 얻은 최대 형광을 나누어 최대한 형광 비율을 계산 합니다.</li>
</ol>3입니다. NMDAR 식 레벨의 최적화
<ol><li>사용 하 여 잠재의 최적 크기를 결정, NR1 및 NR2A 바이러스의 적정을 수행 합니다. HEK293 세포 (10, 000 셀/잘의 추천, 미디어의 30 µ L) 384-잘 접시를 준비 하 고 단계 2.1에에서 설명 된 대로 보호 화합물 포함.</li>
	<li>접시의 다른 행에 있는 NR1 바이러스의 다양 한 금액을 추가 (예: 행 A-E 0 µ L, 2 µ L, 1 µ L, 0.5 µ L, 0.25 µ L를 각각 추가). 데이터의 정확성에 대 한 중복을 추가 합니다.</li>
	<li>접시의 다른 열에 NR2A 바이러스의 다양 한 금액을 추가 (예: 행 A-E 0 µ L, 2 µ L, 1 µ L, 0.5 µ L, 0.25 µ L를 각각 추가). 데이터의 정확성에 대 한 중복을 추가 합니다.</li>
	<li>16 시간 (하룻밤) 37 ° C, 5% CO2 접시를 품 어.</li>
	<li>FDSS (위 참조)에 칼슘 플럭스 측정을 수행 하 여 최적의 비율과 NR1 및 NR2A 바이러스의 금액을 결정 합니다.</li>
</ol>4. 리간드 적정
<ol><li>2.3 단계에서 설명한 대로 셀을 준비 합니다.</li>
	<li>4-fold 재고 솔루션으로 다른 ligand의 농도 (100 µ M)를 흠뻑 젖 게 하는 면 전에 서 각 ligand의 희석을 준비 합니다. 예: 글리신의 10 µ M 최종 테스트 농도, 글리신 400 µ M 조미료 등의 40 µ M 재고 솔루션을 준비.</li>
	<li>FDSS 측정 단계 2.11에에서 설명 된 대로 진행 합니다.</li>
</ol>5. 복합 테스트
<ol><li>1 단계에서 설명한 대로 셀을 준비 합니다.</li>
	<li>분석 결과 버퍼에서 최종 ligand 농도의 5 재고 ligand 접시를 준비 합니다.</li>
	<li>4-fold 재고 분석 결과 버퍼에서 화합물의 원하는 최종 농도의 화합물 접시를 준비 합니다. 분석 결과 버퍼에 10 µ M의 최종 화합물 농도, 40 µ M 재고 솔루션을 준비 합니다.<ol>
<li>계속 디 메 틸 sulfoxide (DMSO)의 농도 상수 모든 샘플에서 분석 결과 버퍼에 더 희석 하기 전에 DMSO에 화합물의 사전 희석을 준비 하 여.</li>
		<li>최종 분석 결과 3 그리고 30 µ M 사이에서 화합물의 복용량 응답, 1에서 10 m m까지 DMSO에 화합물의 사전 희석을 준비 합니다. 4-fold 재고 농도 분석 결과 버퍼에 희석. DMSO의 최종 농도 0.5%를 넘지 말아야 한다. 참고: 그것은 triplicates에 각 샘플을 테스트 하 고 좋습니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>FDSS에 ligand, 화합물, 및 셀 접시를 로드 합니다.</li>
	<li>30 초 동안 기준선 형광을 측정 합니다.</li>
	<li>복합 주식의 10 µ L을 추가 하 고 5 분 동안 형광을 측정.</li>
	<li>Ligand 주식의 10 µ L을 추가 하 고 5 분 동안 형광을 측정.</li>
	<li>측정의 마지막 5 분 동안 형광 비율의 곡선 아래의 영역을 계산 하 여 형광 비율의 전체를 확인 합니다. 참고: 또는, ligand 추가 후 형광의 비율을 최대한 사용할 수 있습니다 분석을 위해.</li>
</ol>

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</ol>

저자는 충돌의 관심 및 공개 아무것도 있습니다.

이 분석 결과의 성공 사용 HEK 세포의 건강에 따라 달라 집니다. 지 수 성장을 겪고 세포와 낮은 통로 번호와 함께 사용 해야 합니다. 이 분석 결과 많은 전송 고 추가 그렇게 주의 사용 하 여 솔루션의 결과에 더 높은 정확도 보장 합니다. 화합물 및 다른 모든 시 약의 농도 또한 오류를 최소화 하기 위해 크로스 체크 해야 합니다. 칼슘 유출 분석 결과 대 한 분석 결과 버퍼와 셀 미디어를 교체할 때 접시 해야 될 기울어져 부드럽게 되도록 셀을 분리 하지 않습니다. 마지막으로,이 프로토콜에 폴 리-D-리 코팅된 접시를 사용 하 여 접시에 셀 첨부 파일을 증가합니다.
NMDAR 식에 차이 변환 시 통로 번호와 HEK293 세포의 적합성에 따라 소 단위 식에 필요한 바이러스 양의 수 있습니다. 또한,는 잠재 짧은 수명 6 개월에서 1 년까지 있다. 따라서, 바이러스의 품질이 분석이 결과 대 한 중요 한 매개 변수입니다. 표준 면역 형광 분석 결과 감지 하 여 식 수준 및 지역화 추...

현재 의학의 발전, 수명 크게; 증가 했다 그러나, 그래서 나이 관련 된 질병의 유행이 하고있다. 질병 중앙 신경 조직 (CNS) 정신 분열 증, 루 경화 증 (ALS), 알 츠 하이 머 병, 파 킨 슨 병, 다른 사람, 사이 등의 예외가 있으며 향후 10 년간1, 증가 예상 2 , 3. N-메 틸-D-aspartate 수용 체 (NMDAR)로 알려진 ionotropic 글루타민 산 염 수용 체의 고장 Alzheimer의 질병, 정신 분열 증, 외상 성 뇌 손상, 뇌졸중, 당뇨병, 및 보증, 녹 내장에 연결 되어있다는 효과적인, 질병 수정 요법4,5,,67의 개발에 대 한 그들의 생물학을 공부 해야 합니다.
NMDARs는 4 개의 단위체 또는 소 단위4,,89의 구성 됩니다. NMDAR의 구조 구성 뇌7,10발달 및 지역 다양성을 보여줍니다. NMDARs는 시 냅 스가 소성, 인식, 그리고 리듬의 세대에서 호흡, 운동11,,1213에서 포함 된다. 주로 휴식 막 잠재력에 비 전도성은 전압-개폐 통로 (-70 mV) 마그네슘 이온의 투과 방지에 의해 차단 됩니다. 채널 두 ligands, 조미료 및 글리신/D-떠들고의 바인딩에 의해 활성화 되 고 시 냅 스 막에 동시 도발은 AMPA 수용 체, ionotropic 글루타민 산 염 수용 체의 다른 서브 클래스에 의해 중재. 도발은 양이온, 특히 칼슘14,,1516의 유입 활성화 NMDAR의 마그네슘 막힘을 제거 합니다. NMDAR 활성화 세포 생존을 위해 필수적 이다, 비록 과도 한 활성화 세포 죽음17,,1819 excitotoxicity 통해 발생할 수 있습니다. 수용 체의 복잡 한 자연 뿐만 아니라 게 연구를 수행 하기 위해 도전 효과적인 치료 개발에 필요한.
다른 메서드는 NMDAR 연구 개발 되었습니다. 그러나, 각자 주의 동반 했다. 예를 들어 하나의 널리 사용 기법 항생물질을 유도할 수 있는 발기인 (Tet에)20의 통제 안정적인 셀 라인에서 세포내 칼슘에서 NMDAR 중재 변화를 측정 하는 형광 기반 분석 결과 이다. 그러나이 시스템에 필요한 ligands의 supramaximal 농도 NMDAR 억제제는 측정 중에 존재 하는 요구는 그것 경쟁 길 항 근의 활동을 검출 하기 거의 불가능. 다른 유사한 시스템에서 기능 수용 체의 식이 발생 독성, 셀 문화를 보존 하기 위해 마 취 제21,22 같은 채널 차단제를 요구 합니다. 이러한 채널 차단제는 수용 체의 코어에 앉아서 그들은 수용 체의 기능 연구 방해 플레이트 기반 포맷에 (서) 특히, 밖으로 세척 하기 어려운. 마지막으로, 패치 죄 같은 electrophysiological 측정에서 제한 된 처리량, 그리고 대규모 연구는 매우 비싼23. 도 불구 하 고, 위의 시스템은 민감한 글리신 자극; 따라서, 글리신 종속 활동은 NMDAR의 공부는 도전 된다.
여기, 우리가 NMDAR 논의 한계를 극복 하는 공부에 대 한 새로운 접근 방식을 설명 합니다. 우리의 기술은 작은 16 시간에는 소 단위의 최적의 비율로 기능 수준에서 수용 체를 표현 하는 잠재 식 시스템에 대문자로 바꿉니다. 또한, 잠재를 사용 하 여 고유 재조합 NMDAR의 광범위 한 특성을 제공 하는 간단 하 고 조합 접근 수 있습니다. 다른 분석 실험, 달리이 프로토콜은 약한 길 항 제를 사용 하는 채널 차단제를 필요 하지 않습니다. 방법의 가장 강한 장점은 약한 길 항 근의 그 후 유실, 수용 체는 글리신/D-떠들고와 조미료의 듀얼 변조 뿐만 아니라 개별 글리신 및 글루타민 산 염 바인딩 사이트의 ligand 바인딩 사이트입니다. 분석 결과 NMDAR 수용 체의 알려진된 약리학 및 그것의 알려진된 양수와 음수 변조기의 효과. 마지막으로,이 체 외에서 세포 분석 결과의 발생 과도 한 칼슘 유입으로 인 한 세포 독성을 극복 하 고 NMDAR 변조기의 발견을 가속 수 있습니다 높은 처리량 패션에 수용 체의 기능 연구에 대 한 허용 에 질병 상태.

<table><tbody><tr><td>HEK-293</td><td>ATCC</td><td>CRL-1573</td><td></td></tr><tr><td>인간 NMDA(NR1/NR2A) 수용체 세포주</td><td>ChanTest Corporation</td><td>CT6120</td><td></td></tr><tr><td>pFastBac 이중 발현 벡터</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>10712-024</td><td></td></tr><tr><td>Corning 384-well Clear Flat Bottom Microplate</td><td>Corning Life Sciences</td><td>3844</td><td></td></tr><tr><td>FLIPR Calcium 6-QF Assay Kit</td><td>Molecular 장치</td>: <td>R8192</td><td></td></tr>, <tr><td>글리신</td><td>, 시그마-알드리치</td>, <td>G7126</td><td></td></tr>, <tr><td>글루타메이트</td>, <td>시그마-알드리치</td>, <td>49621</td><td></td></tr>, <tr><td>D-세린</td><td>, 시그마-알드리치</td>, <td>S4250</td><td></td></tr>, <tr><td>L701,324</td>, <td>토크리스,</td><td>907</td><td></td></tr>, <tr><td>HEPES 완충액</td>, <td>보스턴, 바이오 제품</td>, <td>BB-103</td><td></td></tr>, <tr><td>염화마그네슘 용액</td><td>, 시그마-알드리치</td><td>63069</td><td></td></tr><tr><td>염화칼슘</td><td>VWR</td><td>E506</td><td></td></tr><tr><td>HBSS</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14025-092</td><td></td></tr><tr><td>Probenecid</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>P36400</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12, GlutaMAX 매체</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>10565018</td><td></td></tr><tr><td>MDL105,519</td><td>NIBR</td><td>집에서</td><td></td></tr> <tr><td>합성NVP-AAM077</td><td>NIBR</td><td>사내에서</td><td></td>합성</tr><tr><td>CGP070667</td><td>NIBR</td><td>사내에서 합성</td><td></td></tr></tbody></table>

글리신/d-떠들고와 조미료에 감도와 nmda 수용 체를 공부 하는 높은 처리량 칼슘-플럭스 분석 결과

A High-throughput Calcium-flux Assay to Study NMDA-receptors with Sensitivity to Glycine/D-serine and Glutamate

N-메 틸-D-aspartate (NMDA) 수용 체 (NMDAR) ionotropic 글루타민 산 염 수용 체로 분류 됩니다 있고 학습과 기억에 중요 한 역할. NMDAR 오작동, 표현으로 어느 이상-또는 아래-activity 돌연변이, 변경된 식, 인신 매매, 또는 지역화로 인 한 수많은 질병, 특히 중앙 신경 조직에에서 기여할 수 있다. 따라서, 화합물 및 작은 분자의 발견을 촉진 뿐만 아니라 이해 하는 수용 체의 생물학 신경 질환에 대처 하기 위해 지속적인 노력에서 결정적 이다. 수용 체를 공부 하 고 현재 접근 제한이 낮은 처리량, 높은 비용과 excitotoxicity NMDAR 중재를 방지 하기 위해 채널 차단제의 필요한 존재로 인해 그것의 기능적인 능력을 공부 하는 무 능력을 포함 하 여. 또한, 기존의 분석 결과 시스템만 조미료에 의해 자극에 민감한 고 글리신은 NMDAR의 다른 공동 ligand에 의해 자극 감도 부족. 여기, 선물이 공동 ligands, 조미료와 D-떠들고/글리신에 감도 NMDA 수용 체를 높은 처리량 힘을 가진 첫 번째 접시 기반 분석 결과. 이 이렇게 다른 NMDAR 소 단위 구성의 연구를 허용 하 고 글리신-또는 조미료에 민감한 모드에서 수용 체의 기능 연구를 허용. 또한, 방법 측정 동안 억제제의 존재를 필요 하지 않습니다. 이 분석 결과 함께 긍정적이 고 부정적인 allosteric 변조기의 효과 검출 될 수 있다 고 NMDAR의 알려진된 약리학 우리의 시스템에 복제 되었습니다. 이 기술은 기존 방법의 한계를 극복 하 고 비용 효율적입니다. 우리는이 새로운 기술은 NMDAR 중재 병 리에 대 한 치료의 발견을 가속화 될 것을 믿습니다.

작은 분자의 효과 테스트 하기 전에 하나 NMDARs 최적의 ligand 농도의 최적의 식 수준을 결정 해야 합니다. 설명, HEK293 세포 384-잘 접시에 잘 당 10000 셀에서 시드 했다 5 µ M의 CGP060667, 다음 불리고 NR1 및 NR2A의 다양 한 양의 바이러스. 인큐베이션 하룻밤, ligand 유도 된 칼슘 후 유량 측정 되었다 (그림 1). 이러한 실험의 결과 공개 최고의 수량 및 각 소 단위 (그림 1, 노란색 상자)를 사용 하는 바이러스의 비율.
일단 최적의 양과 NR1와 NR2A 변환에 대 한 비율 결정 했다, ligand 적정 NMDARs의 활성화를 위한 최적의 ligand 농도 결정 하기 위해 수행 되었다. 이 위해 공동 ...

이 프로토콜의 목표는 더 큰 규모에 NMDA 수용 체 (NMDAR)의 연구를 촉진 하기 위하여 작은 분자의 modulatory 효력의 검사 및 치료 응용 프로그램입니다.

글리신/D-떠들고와 조미료에 감도와 NMDA 수용 체를 공부 하는 높은 처리량 칼슘-플럭스 분석 결과

N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptors (NMDAR) are classified as ionotropic glutamate receptors and have critical roles in learning and memory. NMDAR ...

이 방법은 신경 질환을 치료하기 위한 NMDA 조절제의 발견에 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 방어 농도 또는 화합물의 리간드 조합에 대한 응답으로 NMDA 수용체 활성의 fissum 연구를 할 수 있다는 것입니다. 따라서 이 방법은 NMDA 수용체의 일반적인 기능에 대한 통찰력을 제공할 수 있습니다.또한 리간드 또는 화합물에 대한 반응으로 생물학에 특이적인 아형과 NMDA 수용체의 민감도를 연구하는 데 적용할 수 있습니다. NMDA 수용체의 활성을 측정하기 위해 보호 화합물이 있는 상태에서 NR1, NR2 또는 HEK 293, NR1, NR2A 세포로 형질주입된 HEK 293 세포가 있는 384웰 플레이트를 준비합니다. 그런 다음 섭씨 37도에서 접시를 16시간 동안 5%의 이산화탄소로 배양합니다.다음 날, 인큐베이터에서 플레이트를 제거하고 호환 가능한 바이오 폐기물 용기 위로 플레이트를 천천히 뒤집어 세포 배지를 부드럽게 버립니다. 종이 타월로 플레이트를 가볍게 두드려 플레이트 가장자리에서 미디어를 청소하고 남아 있는 미디어를 배수합니다. 그 후, 칼슘 6 염료 한 바이알 하나를 10ml의 배양 완충액에 용해시켜 칼슘 6 염료를 준비합니다.384 웰 플레이트의 세포에 30마이크로리터의 염료를 추가합니다. 접시를 섭씨 37도에서 2시간 동안 배양하고 이산화탄소 5%를 섭취합니다. 2시간 후 인큐베이터에서 플레이트를 제거하고 세포를 10분 동안 실온에 적응시킵니다.다음으로 칼슘 6 염료를 부드럽게 붓고 30마이크로리터의 분석 버퍼를 추가합니다. 총 3회 세척을 반복하고 마지막 세척 후 세포에 30마이크로리터의 분석 버퍼를 남겨둡니다. 그런 다음 실온에서 세포를 5분 동안 그대로 둡니다.리간드 플레이트를 준비하려면 400 마이크로몰 글리신과 400 마이크로몰 글루타메이트의 4배 스톡을 만듭니다. 최소 25마이크로리터의 리간드 스톡을 V Bottom 384 웰 플레이트로 옮깁니다. 그런 다음 리간드 플레이트와 세포 플레이트를 FDSS로 옮깁니다.그 후, 30초 동안 세포판의 기준선 형광을 측정합니다. FDSS 디스펜싱 기능을 사용하여 10마이크로리터의 리간드 스톡을 세포판으로 옮기고 5분 동안 칼슘 6 염료 형광을 기록하여 칼슘 플럭스를 측정합니다. 그런 다음 baseline 형광으로 얻은 최대 형광을 나누어 최대 형광 비율을 계산합니다.화합물을 테스트하려면 세포, 리간드 및 화합물 플레이트를 준비

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이 동영상은 FlexStation 3을 사용 인간 TRPA1 채널의 약리 프로필을 공부에 대한 자세한 프로토콜을 제공합니다. 프로토콜은 세포 준비, 염료 로딩과 microplate 리더 FlexStation 3 작업의 세부 사항을 다룹니다.

FlexStation 3을 사용 TRP 채널 기능의 높은 처리량 검사하는 매체를위한 셀 기반의 칼슘 분석

여기에서 우리는 성상 교세포 G 단백질 결합 수용체의 가소성 연구를위한 신경 세포의 항상성 가소성을 유도하기 위해 사용되는 프로토콜의 적응을 설명합니다. 최근 성상 세포 그룹 청소년 생쥐 내가 mGluRs의 변화를 검사하는 데 사용되는 방법은 현장에서 생체 성인 마우스의 조직에서, 다양한 성상 세포의 GPCR의 확장을 측정하고, 성상 세포 수용체의 감도의 더 나은 인식을 얻기 위해 적용 할 수있는 신경 활동의 변화에​​.

신경 발사 환율의 조작에 의해 성상 세포 수용체의 가소성을 유도

여기에 설명하는 세포 부착 된 패치 클램프 기술로 하나의 이온 채널에서 현재 기록의 장기 복역을 얻기위한 절차입니다. 이 방법은 실시간으로 관찰을 허용, 생물학적 신호를 기초 개폐 채널 입체 형태의 패턴. 이 데이터는 그대로 생체막의 채널 특성에 대해 알려 드리겠습니다.

1 채널의 세포 부착 된 패치 클램프 녹음

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다중 광자 세포 내 나트륨 이미징 CA1 피라미드 뉴런의 글루타메이트의 UV 매개 초점 Uncaging과 결합

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효소 기반의 바이오 센서를 사용하면 알츠하이머 병 마우스 모델에서 토닉과 Phasic이 품목을 측정하는

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재조합 G 단백질 결합 수용체의 고처리량 스크리닝을 위한 "이중 첨가" 칼슘 형광 분석

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