2019년 1월 7일
여기, 선물이 마우스 우울한 모델 설정, 만성 예측할 수 없는 가벼운 스트레스 (CUMS)와 관련 된 행동 변화를 관찰 하 고 Xiaoyaosan의 항 우울증 효과 평가 하는 프로토콜.
이 방법은 중국에서 수천 년 동안 심리질환에 널리 사용되는 공식인 Xiaoyaosan과 같은 중국 전통 의학을 사용하여 우울증, 예방 및 치료 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 우울증의 예방 및 치료에 샤오 야오산의 가용성에 대한 실험적 지원을 제공하는 것입니다. 이 기술의 의미는 전통적인 중국 의학을 사용하여 항우울제 효력을 감지하기 위한 표준화된 프로토콜을 제공하기 때문에 불경기의 처리에 전 진료소 연구로 확장합니다.
일반적으로 이 방법을 새로 사용하는 개인은 모델링 프로세스가 매우 복잡하고 우울한 행동에 대한 중요한 측정 매개 변수가 마스터하기 쉽지 않기 때문에 어려움을 겪게 됩니다. 우울증을 유도하기 위해, 21일 연속 7개의 스트레스자 중 2개에 매일 마우스를 노출한다. 참고 모델링 하기 전에 매일 두 개의 치료 그룹에서 마우스에 약을 관리 하 고 제어 및 모델 그룹에서 마우스에 증류수의 0.5 밀리 리터를 제공.
각 케이지의 사료를 비우면 쥐를 음식 박탈에 노출시다. 또는 물병을 24시간 동안 제거하여 물 부족. 마우스가 3시간 동안 작은 플라스틱 욕조에서 제지되는 구속 스트레스에 마우스를 노출시다.
또는 패딩이 제거된 빈 케이지. 또 다른 옵션으로, 각 케이지에 물을 붓고 24 시간 동안 젖은 유지하여 습하고 더러운 케이지에 마우스를 노출. 5마리의 마우스가 25시간 동안 한 케이지에 배치되는 혼잡한 케이지에 마우스를 노출시합니다.
마지막 옵션을 위해, 5 분 동안 얼음 물이있는 맑은 유리 수족관에서 수영각 마우스를 강제로 얼음 차가운 수영에 마우스를 노출. 마지막으로, 21일째모델링이 끝날 때까지 매주 코트 상태와 체중을 기록하고 코트 상태의 총 점수를 계산한다. 자당 특혜 테스트의 처음 이틀에, 수돗물로 채워진 두 병으로 개별적으로 마우스를 집.
다음 이틀 동안, 생쥐에게 1% 자당 용액으로 채워진 두 병을 준다. 마지막 날에는 생쥐에게 24시간 동안 두 병을 주고, 하나는 수돗물과 1% 자당용을 제공합니다. 음주 행동에 마우스의 측면 선호도를 제거하려면 12 시간 후에 두 병의 위치를 전환하십시오.
소비된 자당 용액과 수돗물의 부피를 기록합니다. 마지막으로, 자당 선호도를 계산합니다. 네 개의 양면 나무 검은 광택 상자의 바닥을 파란색 선으로 25 동등한 사각형으로 나누어 시작합니다.
각 마우스에 액세스하기 전에 5 %의 알코올로 열린 필드 상자를 청소하십시오. 그런 다음 마우스를 열린 필드의 중앙에 놓습니다. 필드 바로 위의 약 200cm 의 고화질 디지털 카메라를 일시 중단하고 각 마우스의 동작을 5 분 동안 기록합니다.
마지막으로, 비디오 추적 시스템 소프트웨어에 의해 마우스 행동 비디오를 평가하고 중앙 영역으로 의 총 실행 거리 및 항목 수의 데이터를 기록합니다. 마우스의 외투 상태는 모델 군에 비해 샤오야오산 또는 플루옥세틴으로 지속적인 치료 후 특히 개선되었다. 체중의 현저한 감소는 3주째에 나타났습니다.
기준선에서, 모든 군의 마우스는 유사한 자당 선호도가 있었습니다. 그러나, 모델 그룹에서 3주간의 스트레스 시술 이후에 자당 선호도가 현저한 하락을 관찰하였다. 추가, 모든 마우스는 기준선에서 응력 노출 전에 유사한 행동 상태를 나타냈다.
그러나, 3주 동안 응력 노출 후, 5분 만에 이동된 총 거리는 대조군보다 모델 그룹에서 현저히 낮았다. 모델 그룹의 중앙 영역에 대한 항목 수는 대조군에 비해 현저히 감소하였다. 이 절차를 시도하는 동안, 이 행동 시험을 수행하고 두 가지 약을 관리하는 것을 기억하는 것이 중요합니다, 1 받는 번째 약, 1 받는 시간 전에 매일 모델링 하기 전에 의학 자체에 의해 효과 확인 하기 위해.
이 절차에 따라, 강제 수영 테스트 와 같은 다른 방법은 Xiaoyaosan 강제 수영 테스트에서 우울한 마우스의 필사적 인 행동을 향상시킬 수있는 것과 같은 추가 질문에 대답하기 위해 수행 될 수있다? 개발 후, 이 기술은 우울증의 예방 및 치료 분야에서 중국 의학의 효과와 기본 메커니즘의 탐구에 있는 연구원을 위한 길을 열었습니다.
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본 논문은 만성 예측 불가능 가벼운 스트레스(CUMS)를 통해 우울증 마우스 모델을 구축하는 프로토콜을 제시하며, 전통 중약인 Xiaoyaosan의 항우울 효과를 평가합니다.
마우스의 만성 예측 불가능 가벼운 스트레스(CUMS)와 같은 표준화된 행동 모델은 새로운 항우울제 후보 물질을 평가하고 초기 단계의 신경정신과적 자산의 리스크를 줄이는 데 매우 중요합니다. 정량적 행동 종점과 통제된 그룹 비교를 통해 표적 결합 및 기능적 결과 평가에 대한 예측적 신뢰도를 확보할 수 있습니다. 본 프로토콜은 전통 의학 후보 물질을 포함하여 신경 활성 화합물의 발견부터 전임상 평가까지의 중개 연구 연속성을 지원합니다.
본 프로토콜은 CUMS 기반 행동 테스트를 신경정신과 약물 개발의 초기 발견 단계에서 전임상 선도물질 평가 단계로 이어주는 가교로 배치합니다.