2019년 4월 12일
여기, 선물이 polyacrylate/nanosilica의 intratracheal 주입에 의해 쥐에서 흉 막 유출 모델을 구성 하는 프로토콜.
이 방법은 나노 물질의 독성에 대한 통찰력을 제공 할 수 있으며 폐 독성연구에 적용 될 수있다. 이 기술은 폴리아크릴레이트/나노실리카 유도 흉막 유출의 효과를 연구하기 위해 유래되었다. 주입을 시작하기 전에, 20~30분 동안 정상 식염수에 10밀리리터, 폴리아크릴레이트/나노실리카 서스펜션을 초음파 처리한 다음 10분간 의소용돌이를 한 후 서스펜션을 3.125, 6.25, 밀리리터 농도당 12.5밀리그램으로 희석합니다.
다음으로, 마취 된 쥐에 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인하고, 나일론 문자열의 조각으로 보드에 동물의 앞니를 고정합니다. 집게와 정면 수로, 부드럽게 입에 열고 글로티스의 균열을 시각화하고, 양측 기관지에 미세 튜브를 삽입합니다. 이어서, 폐내로 튜브를 통해 폴리아크릴레이트/나노실리카 입자의 0.5 밀리리터를 주입하고, 완전한 회복이 끝날 때까지 모니터링하여 쥐를 척추 위치에 놓는다.
착유 후 1일, 3, 7, 14일에는 전기 면도기를 사용하여 각 마취쥐의 가슴과 상부 복부에서 머리카락을 제거하고, 쥐를 초음파 시스템의 장착 플레이트에 배치하여 손핀 위치에 선형 어레이 트랜스듀서를 배치한다. 노출된 피부에 초음파 젤을 바르고, 간 공간 및 서브 코스트 영역에 트랜스듀서를 배치하여 흉막 액을 검출한다. 삼출액을 정확하게 검출하기 위해 왼쪽 및 오른쪽 측면 위치를 선택하여 초음파 검사를 수행하십시오.
7일째에는 밀리리터 주입군당 킬로그램당 6.25밀리그램에서 흉막 삼출과 심근 삼혈이 모두 검출된다. 7일과 14일, 밀리리터 주입동물당 킬로그램당 12.5밀리그램의 CT 흉부 스캔은 소량의 흉막 유출을 암시하는 무딘 후방 코스토레닉 각도에서 비정상적이다. 흉막 삼혈 샘플의 전송 전자 현미경 검사는 나노 실리카 나노 입자를 개별적으로 그리고 제조 된 현탁액 내에서 나노 입자에 대해 관찰된 형태와 일치하는 모법을 가진 클러스터에서 밝혀냅니다.
가장 중요한 것은 글로티스의 균열을 시각화하고 양자 기관지에 미세 튜브를 삽입하는 것을 기억하는 것입니다. 나노 입자는 또한 흡입 또는 정맥 주사에 의해 주입 될 수 있습니다., 두 가지 방법은 이전 연구에서 수행 되었습니다. 이 기술은 흉막 삼출의 발달을 연구하는 데 유용합니다.
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본 논문은 기관 내 점적을 통해 폴리아크릴레이트/나노실리카를 이용하여 쥐의 흉수 모델을 구축하는 프로토콜을 제시합니다. 이 방법은 나노 물질의 독성과 폐 건강에 미치는 영향에 대한 통찰을 제공하는 것을 목표로 합니다.
이 흉수 모델은 용량 의존적 염증 반응을 평가할 수 있는 재현 가능한 in vivo 시스템을 제공함으로써 나노물질로 인한 폐 독성의 기전적 위험 제거를 가능하게 합니다. 또한 나노입자 노출을 임상적으로 유의미한 지표인 흉수 축적과 연결함으로써 나노독성학의 표적 검증을 지원합니다. 본 모델은 질병 관련 시스템 내에서 나노입자의 생체 내 분포와 병리적 진행에 대한 정량적 평가를 가능하게 하여 조기 발견 단계의 예측 신뢰도를 높여줍니다.
이 모델은 초기 타겟 검증부터 전임상 안전성 평가에 이르는 발견 연속체에 통합되어, 리드 화합물 식별 및 전임상 후보 물질 선택의 근거가 되는 정량적 독성 데이터를 제공합니다.