Name: 질병 억제의 빠른 예비 평가로 격판덮개 경쟁 분석 결과 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-10-28T15:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 23 s
Description: 학습하세요 토양 기반 식물 병원균 Rhizoctonia solani의 생물학적 방제를 위한 격판덮개 경쟁 분석법. 이 신속한 선별 방법은 퇴비의 병 억제 효과를 2-3일 내에 평가하여 농업용 퇴비 인증에 활용됩니다.

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버몬트 농업 실험 역 경쟁 해치 프로그램 VT-HO1609 연구 자금. 린 팡 버몬트 대학6에서 그녀의 석사 학위 논문의 일환으로 방법을 사용.

1. 사전에 준비
<ol><li>마스터 곰 팡이 문화 (시험 체)<ol>
<li>미국 유형 문화 수집, 미생물학 컬렉션9, teleomorph Thanatephorus cucumeris (프랭크) (ATCC 10154) 또는 MYA 4031에서에서 주문.</li>
		<li>또는: 저자에 의해 수행으로 지역 격리를 수집 합니다. 빨간 무 (Raphanus sativus)의 모 종 잘 작동 미끼 식물; R. solani에 의해 발생 하는 댐핑-오프 또는 루트 썩 어의 역사를가지고 알려진 위치에서 토양을 수집 합니다. 묘는 3 ~ 4 주 오래 될 때 루트 병 변에서 분리와 토양에 씨앗을 뿌리 다.<ol>
<li>모 종 토양에서 제거 하 고 수돗물으로 씻어. 나뭇잎과 루트 (그림 1) 사이 hypocotyl 지역에서 갈색 조직 찾습니다.</li>
			<li>단일 날카로운된 면도칼 블레이드를 사용 하 여 hypocotyl 또는 루트의 1 cm 세그먼트를 갈색 색상을. 화 염 소독 집게를 사용 하 여 가정용 표 백제 살 균 물에 10 s 씻어 다음 1 분 동안 10% 해결책에서 세그먼트를 찍어. 참고: 위쪽 및 멸 균 페 트리 접시의 아래쪽은이 단계에 대 한 유용한 컨테이너입니다.</li>
			<li>공장을 전송 사용 화 염 소독 집게 팻 건조 후 물 한 천 (1 리터에 15 g)와 페 트리 접시의 표면에 배치 하는 종이 타월의 안쪽에 조각.</li>
			<li>뚜껑을 가진 플라스틱 용기 안에 페 트리 접시를 놓고 실내 온도 (대략 20 ° C)에서 품 어. 10% 표 백제 또는 75% 에탄올과 컨테이너의 내부를 닦아 하 고 그것은 접시를 삽입 하기 전에 건조 한 공기 보자.</li>
			<li>유지는 격리 옥수수 식사 agar의 최소한의 미디어에 장기 보관 (17 g 1 L에) 글씨의 기울기 (5 ° C)에서.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58767/58767fig1.jpg"> 그림 1: 질병 증상. 토양을 포함 하는 R. solani 결과 누 덕 누 덕 발 아와 설립 (왼쪽). 무 묘 종에 증상 (오른쪽) hypocotyl에서 갈색 병 변으로 발생합니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58767/58767fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<ol start="2"><li>감자 포도 당 한 천 배지 (39 g L 1에서)를 사용 하 여 inoculum이 플레이트 분석 결과 대 한 대 한.<ol>
<li>감자 포도 당 한 천 하나에 Rhizoctonia 문화의 딸 문화 확립 또는 이틀 전에 분석 결과, 그것을 확실히 하기 위하여 잘 설립 분석 결과 전에 문화 접시에. 신선한 감자 포도 당 한 천 (그림 2) 접시의 중앙에 마스터 문화에서 R. solani 의 작은 조각 (직경 10 m m)를 전송 하 여 딸 문화를 시작 합니다. 참고: 층 류 후드에서 나 오염 위험을 최소화 하기 위해 10% 표 백제 또는 75% 에탄올과 실험실 벤치 아래 닦으십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>10 mL 증류수 (샘플 2 x 수)의 aliquots와 압력솥 25 mL 테스트 튜브.</li>
</ol>2입니다. 테스트 샘플의 준비
<ol><li>25 mL 테스트 튜브에 압력가 물 10 mL를 각 퇴 비 테스트 샘플의 두 개의 독립적인 0.5 g 샘플 추가 합니다. 밤새 테스트 튜브를 흔들어.<ol>
<li>테스트 튜브 독특한 샘플 숫자와 (참조) 또는 B (샘플) 쌍의 각 구성원 레이블을.</li>
	</ol>
</li>
	<li>24 시간 후 일반 agar의 1.5 g 2 125 mLconical 플라스 크에 증류수 90 mL을 추가 합니다.</li>
	<li>압력솥, agar와 느린 배기 설정 20 분에 대 한 각 쌍의 A 샘플 모두 원뿔 플라스 크.</li>
	<li>평형 (약 30 분)를 도달할 때까지 오토 클레이 브, 후 45 ° C 물 목욕으로 agar와 원뿔 플라스 크를 놓습니다. 그것은 45 ° c.에 냉각 될 때까지 물 목욕에 모든 샘플 슬러리를 넣지 마십시오</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58767/58767fig2.jpg"> 그림 2: 프로토콜의 그림. R. solani 의 플러그는 퇴 비 물 추출 물을 포함 하는 배양 접시에 배치 됩니다. 해상도 및 대비 향상 스테레오 현미경의 도움으로 1-2 일 후 바로 성장의 직경 측정 됩니다. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58767/58767fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<ol start="5"><li>A 한 플라스 크의 녹은 한 천에 A 샘플 (압력가 참조) 퇴 비 슬러리를 붓으십시오. 퇴 비는 agar에 분산 소용돌이 친다.</li>
	<li>B 한 플라스 크의 녹은 한 천에 B 샘플 (생활 샘플) 퇴 비 슬러리를 붓으십시오. 퇴 비는 agar에 분산 소용돌이 친다.</li>
	<li>5 플라스틱 접시를 직경에서 100 m m으로 각 플라스 크의 혼합물을 붓는 다.</li>
	<li>그래서는 agar 견고 접시 멋진 하룻밤을 하자.</li>
</ol>3. 추가 Rhizoctonia 도전
<ol><li>샘플 한 천 격판덮개의 각 쌍에 동등한 크기의 조각 R. solani 의 전송 무 균 기술을 사용 하 여, (3 ~ 5 mm corkborer 동등한 크기의 조각을 설치 하는 게 작동). 균 사체는 적극적으로 성장 하 고 보장 하기 위하여 식민지의 외부 여백에서 식민지의 조각 가져가 라. 참고: 층 류 두건에 나 10% 표 백제 또는 70% 에탄올과 실험실 벤치 아래 닦으십시오.</li>
	<li>식민지 성장 A 접시의 가장자리에 약 절반 방법에 도달할 때까지 1-2 일 동안 실내 온도에 번호판을 품 어.</li>
</ol>4. R. solani 성장 측정
<ol><li>스테레오 현미경을 사용 하 여 전송 된 조명으로 명확한 플랫 통치자와 가까운 1 mm 각 접시에 균 사체의 반지름을 측정 합니다. 참고: 경사 또는 어두운 조명이 하게된다 쉽게 보고 투명 균 측정. 퇴 비는 진압 하는 경우이 시점에서, 억제의 영역 B 플레이트에 퇴 비 조각 주위 표시 됩니다.</li>
	<li>접시 당 3 개의 장소에서 반지름을 기록 하 고 대표적인 측정으로 3의 평균을 계산.</li>
	<li>A 접시에서 B 플레이트의 평균을 뺍니다. 경우 B &lt; 다음 거기는 R. solani 병원 체를 진압는 B 플레이트에 미생물.</li>
	<li>속도, 하루 mm 사체로 상대 억제의 단위를 표현 하는 도전 일 수로 평균 반지름을 나눕니다.</li>
</ol>

<ol><li>Gonzalez Garcia, G., Onco, M. A. P., Susan, V. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review.+Biology+and+systematics+of+the+form+genus+Rhizoctonia%5BTitle%5D)+AND+%22Spanish+Journal+of+Agricultural+Research%22%5BJournal%5D)">Review. Biology and systematics of the form genus Rhizoctonia.</a> Spanish Journal of Agricultural Research. 4 (1), 55-79 (2006).</li>
<li>Bonanomi, G., Antignani, V., Pane, C., Scala, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+soilborne+fungal+diseases+with+organic+amendments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Plant+Pathology%22%5BJournal%5D)">Suppression of soilborne fungal diseases with organic amendments.</a> Journal of Plant Pathology. 89, 311-324 (2007).</li>
<li>Noble, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risks+and+benefits+of+soil+amendment+with+composts+in+relation+to+plant+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Australasian+Plant+Pathology%22%5BJournal%5D)">Risks and benefits of soil amendment with composts in relation to plant pathogens.</a> Australasian Plant Pathology. 40, 157-167 (2011).</li>
<li>Wichuk, K. M., McCartney, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compost+stability+and+maturity+evaluation+-+a+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Civil+Engineering%22%5BJournal%5D)">Compost stability and maturity evaluation - a literature review.</a> Canadian Journal of Civil Engineering. 37, 1505-1523 (2010).</li>
<li>Alfano, G., Lustrato, G., Lima, G., Vitullo, D., Ranalli, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+composted+olive+mill+wastes+to+predict+potential+plant+disease+suppressiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Characterization of composted olive mill wastes to predict potential plant disease suppressiveness.</a> Biological Control. 3, 199-207 (2011).</li>
<li>Fang, L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Biological+indicators+of+compost-mediated+disease+suppression+against+the+soilborne+plant+pathogen+Rhizoctonia+solani%22">Biological indicators of compost-mediated disease suppression against the soilborne plant pathogen Rhizoctonia solani</a>. , University of Vermont. M.S. Thesis (2015).</li>
<li>Bonanomi, G., Antignani, V., Capodilupo, M., Scala, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identifying+the+characteristics+of+organic+soil+amendments+that+suppress+soilborne+plant+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Soil+Biology+and+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Identifying the characteristics of organic soil amendments that suppress soilborne plant diseases.</a> Soil Biology and Biochemistry. 42, 136-144 (2010).</li>
<li>Neher, D. A., Fang, L., Weicht, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ecoenzymes+as+indicators+of+compost+to+suppress+Rhizoctonia+solani%5BTitle%5D)+AND+%22Compost+Science+and+Utilization%22%5BJournal%5D)">Ecoenzymes as indicators of compost to suppress Rhizoctonia solani.</a> Compost Science and Utilization. 25 (4), 251-261 (2017).</li>
<li>American Type Culture Collection. ATCC® Mycology Culture Guide. , Available from:
 <a target="_blank" href="https://www.atcc.org/~/media/PDFs/Culture%20Guides/Mycology_Guide.ashx">https://www.atcc.org/~/media/PDFs/Culture%20Guides/Mycology_Guide.ashx</a> (2018).</li>
<li>Berns, A. E., Phillip, H., Narres, H. -D., Burauel, P., Vereecken, H., Tappe, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+gamma-sterilization+and+autoclaving+on+soil+organic+matter+structure+as+studied+by+solid+state+NMR%2C+UV+and+fluorescence+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Soil+Science%22%5BJournal%5D)">Effect of gamma-sterilization and autoclaving on soil organic matter structure as studied by solid state NMR, UV and fluorescence spectroscopy.</a> European Journal of Soil Science. 59, (2008).</li>
</ol>

저자는 공개 없다.

우리 알고 이전 연구에서 특정 퇴 비는 R. solani 억제에 효과적 진압 효과 퇴 비에 살고 있는 미생물 퇴 비6,8의 비 생물 적인 속성이 아닌 때문입니다. ' 죽 일 ' microbiota 수단으로 압력가 마로 소독의 사용 미디어10의 탄소 화학에 영향을 받아왔다. 우리는 압력가 마로 소독 Whatman No. 1 종이 통해 진공 여과를 사용 비교. 필터링도 압력가 되었다 트리 트 먼 트 R. solani 성장6의 가장 큰 억제를 보였다. 여과 분명히 가능성이 은닉 항생제를 생산 하는 미생물에 의해 질병 억제에 중요 한 더 큰, 고체 입자를 제거.
방법의 장점은 단순 하 고 저렴 한입니다. 결론 및 권고 Alfano 외 의 비슷한 <su...

Rhizoctonia 나타냅니다는 Thanatephorus cucumeris (프랭크) Donk의 버섯의 광범위 한 복잡 한 (anamorph Rhizoctonia solani Kühn =) 루트 썩 음 및 감쇠 떨어져1을 일으키는 병원 체 이다. Rhizoctonia solani 적극적인 병원 체 이며 sclerotia 불리 한 환경 조건1로 살아남을 수 있는 saprophyte. 그 결과, 글로벌 유통 있으며 Solanaceae, 등 Fabaceae, 국화과, 심각한 경제적 손실을 인 십자화과 식물 호스트의 넓은 범위에 질병을 일으킬 수 있습니다.
퇴 비는 특정 식물 병원 체2biocontrol 대리인 항구 용량이. 그러나, 모든 퇴 비는 모두도 할 그들은 모든 병원 균을 영향을 마찬가지로3. 나무 기반 탄소는 건초 또는 밀 짚-탄소 근거한 퇴 비 보다는 셀 루 로스 비율에 더 높은 리그 닌. R. solani 밀 짚에서 쉽게 사용할 수 있는 탄소를 좋아한다. 반면, Trichoderma 종 등 생물 학적 제어 버섯 탄소 덜 쉽게 사용할 수 있을 때 더 효과적입니다. 유익한 균 류 및 박테리아 퇴 비로 경쟁, 적개심 또는 식물 성장3규제를 통해 식물 질병을 억제 수 있습니다. 제안 된 분석 결과 주로 항생제, ecoenzymes 또는 병원 체에 해로운 chelators의 생산에 의해 만들어진 적개심을 감지 합니다.
식물 생물 검정 composts 부탁 또는 식물 성장4억제 여부를 결정 하는 황금 표준입니다. 그러나, 식물 생물 검정 개월 소요 (주)는 보다 더 많은 노동 루트 시스템의 척도를 뿌리로 식물을 추출 하며 원하는 수 있는 완료. 대 등 하 게 강력 하 고, 그러나 빨리 (일) 분석 품질 관리 프로그램에 대 한 이상적인 것입니다. 이 문서의 목표는 퇴 비의 진압 가능성을 예측 하는 상대적으로 신속 하 고 정확한 테스트를 보여 줍니다. 메서드가는 Alfano 외. 후에 모방 되었다 두 개의 예외, 퇴 비 추출 물 5 희석 했다 그리고 물 천 감자 포도 당 한 천 (PDA) 대신 사용 되었다. R. solani PDA 승진 박테리아와 오염 문화6다른 곰 팡이의 성장을 하는 반면 간단한 물 한 미디어에 급속 하 게 성장.
이 플레이트 분석 결과 무기물 R. solani7, 강했다 초기 blights, Fusarium 윌 트, Phytophthora 뿌리 썩 음, Pythium 루트 부패 등으로 토양에서 생존 하는 식물 병원 균의 범위에 적용 되는 억제의 지표 역할을 합니다. 격판덮개 경쟁 분석 결과 토양 병원 균의 생물학 통제 대리인으로 봉사 하는 미생물의 포함을 위해 퇴 비 제품의 범위에 유용 합니다. 분석 결과 상업 퇴 비 제품6,8에서 질병 억제의 가장 일관 된 지표 중 하나 였다. 제품은 조리법, 성숙, 그리고 생산 과정에서 그들의 변이 대 한 선정 됐다.

<table><tbody><tr><td>오토클레이브 가능한 좁은 목 유리 원뿔형 플라스크</td><td>Fisher Scientific</td><td>10-040D</td><td>125mL</td></tr><tr><td>오토클레이브 유리 시험관</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-925J</td><td>25mL</td></tr><tr><td>탈수 과립 한천</td><td>Fisher Scientific</td><td>DF0145-17-0</td><td>500g 수량</td></tr><tr><td>내열 장갑</td><td>Fisher Scientific</td><td>MEMGG1314WL</td><td>여러 브랜드 사용 가능</td></tr><tr><td>파라필름(2-3cm 너비의 스트립)</td><td>Fisher Scientific</td><td>PM992 13-374-16</td><td>5cm 또는 10cm 너비 작업</td></tr><tr><td>일회용 폴리스티렌 페트리 접시</td><td>Fisher Scientific</td><td>R80116</td>은 <td>20/ea 슬리브 또는 500</td></tr>개의 <tr><td>탈수 감자 포도당 한천</td> 케이스로 제공됩니다 <td>Fisher Scientific</td><td>DF0013-15-8</td>은 <td>100, 500 및 2000g</td></tr><tr><td>벤치탑 상호 셰이커</td><td>Thomas Scientific</td><td>1227Y31</td><td>다른 모델은</td></tr><tr><td>수조</td>를 작동합니다 <td>ThermoScientific</td><td>S37363</td><td>5L 범용</td></tr><tr><td>투명 눈금자, 평면, 최소 10cm</td><td>모든</td><td></td><td>사용 미터법 규칙</td></tr><tr><td>ATCC 문화</td><td>미국 유형 문화 컬렉션</td><td>ATCC 10154</td><td>teleomorph Thanatephorus cucumeris (Frank) (ATCC 10154) 또는 MYA 4031;</td></tr><tr><td>실험실 테이프</td><td>Fisher Scientific</td><td>15935</td><td>오토클레이브 및 탈착 가능, 1" 너비 선호</td></tr><tr><td>방수 마커</td><td>사무실 또는 과학 용품</td><td>Sharpie 미세 팁</td><td>테이프에 샘플 번호 쓰기</td></tr></tbody></table>

질병 억제의 빠른 예비 평가로 격판덮개 경쟁 분석 결과

A Plate Competition Assay As a Quick Preliminary Assessment of Disease Suppression

목표는 개발 하 고 최적화 solani Rhizoctoniasoilborne 균에 대 한 특정 퇴 비의 병 진압 능력을 감지 하는 간단 하 고, 저렴 하 고 효과적인 검정 이었다. R. solani 다양 한 식물 호스트 전세계의 병원 체 이다. 곰 팡이 saprophyte로 토양에서 살아 난다 그리고 간단한 물 한 천 매체에 급속 하 게 성장. 플레이트 분석 결과 R. solani의 성장을 느리게 하는 그들의 기능에 대 한 퇴 비를 비교 하는 빠른 방법입니다. 분석 결과 또한 강했다 초기 blights, Fusarium 윌 트, Phytophthora 뿌리 썩 음, 등 Pythium 루트 썩 어 토양에서 무기물으로 살아 나는 다른 soilborne 곰 팡이 병원 균의 억제와 잘 상관 한다.

완성 된 퇴 비 안정 되 고 성숙, 두 용어는 종종 혼용 하는, 그래서 수 있습니다 안전 하 게 포장, 수송 그리고 하지 원인 불리 한 효과는 최종 사용4동안 해야 합니다. 안정성 분해 저항 이며 일반적으로 미생물 활동의 인덱스를 사용 하 여 결정 됩니다. 미생물 호흡의 일반 조치는 적극적인 병원 체 및 saprophyte R. solani7등의 반드시 질병 억제 하지만 퇴 비 안정성을 측정할 수 있습니다. 이 연구 자료를 사용 하는 특정에 대 한 준비 이며, 목적을 위해 원 예, 식물 발 아 및 성장 분석 실험에 의해 결정 됩니다 유추 성숙 에 집중 했다.
생활 퇴 비 추출 물 억제 R. solani 성장을 크게 ...

제시는 특정 퇴 비 포함 박테리아와 균 류 Rhizoctonia solani의 성장을 억제 하는 것 인지를 식별 하는 접시 경쟁 분석 결과 대 한 프로토콜.

The goal was to develop and optimize a simple, affordable, and effective bioassay to detect disease suppressive ability of a specific compost against ...

이 방법은 토양 식물 병원체의 생물학적 통제와 관련된 주요 질문에 대답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 퇴비와 같은 시험 재료의 금 본위제는 식물에 독성이 있는지 여부를 테스트하기 위해 식물 바이오애세이가 있는 것입니다. 그러나, 그 3 주가 걸립니다.이 방법은 약 2 ~3 일 이내에 수행 할 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 간단하고 저렴하며 효과적이라는 것입니다. 이 분석은 리조토니아 솔라니의 성장을 억제하기 위해 특정 퇴비의 신속한 검사입니다.그러나, 이 분석은 또한 푸사리움, 피티움 및 피토프토라스와 같은 그밖 토양 식물 병원체에 대하여 이용될 수 있습니다. 이 방법의 시각적 데모는 오염을 피하면서 곰팡이의 순수한 문화를 분리하고 유지하는 데 주의를 기울이기 때문에 중요합니다. 격리 절차를 시연하는 것은 내 실험실에서 대학원생 인 테일러 레디호프가 될 것입니다.내 실험실에서 학부 생 엠마 라이트, 경쟁 분석시연할 것입니다. 먼저, R.solani에 의한 질병의 역사를 가진 것으로 알려진 토양에 붉은 무 씨앗을 뿌리는 것입니다. 3~4주 후에는 묘목을 토양에서 제거하고 수돗물로 헹구십시오.면도날을 사용하여 갈색이 있는 고체코틸과 뿌리의 1센티미터 세그먼트를 잘라냅니다. 그런 다음 화염 멸균 된 집게를 사용하여 세그먼트를 10 % 표백액용액으로 1 분 동안 담급하십시오. 그 후, 멸균 물에 세그먼트를 헹구는 다.다음으로, 화염 멸균 된 집게를 사용하여 세그먼트를 종이 타월로 옮김하십시오. 세그먼트를 말리고 물 한천으로 페트리 접시에 옮기십시오. 페트리 접시를 뚜껑이 달린 용기 안에 놓고 실온에서 세그먼트를 배양합니다.딸 문화를 확립하기 위해, 감자 덱스트로스 천의 신선한 접시의 중심으로 세그먼트 중 하나를 전송합니다. 그 후, 10 밀리리터의 물을 포함하는 25 밀리리터 테스트 튜브를 오토클레이브합니다. 각 테스트 샘플의 0.5그램 샘플 2개를 멸균수 10밀리리터가 있는 오토클레이브 테스트 튜브에 추가하고 밤새 테스트 튜브를 흔들어 줍니다.24시간 후, 일반 한천 1.5그램과 증류수 90밀리리터를 원추형 플라스크한 켤레에 넣습니다. 플라스크를 오토클레이브한 후 30분 동안 섭씨 45도의 수조에 넣습니다. 다음으로, 용융 된 한고에 오토 클레이브 참조 샘플과 살아있는 샘플을 붓습니다.각 플라스크의 혼합물을 5개의 페트리 요리에 붓습니다. 토착 미생물을 보호하기 위해, 한천이 너무 뜨거울 때 퇴비를 추가하지 않는 것이 중요합니다. 따라서 퇴비를 추가하기 전에 한천이 섭씨 45도까지 식힙니다.무균 기술을 사용하여 R.solani 조각을 각 샘플 플레이트로 옮길 수 있습니다. 그런 다음 실온에서 1 ~2 일 동안 플레이트를 배양합니다. 마지막으로, 명확하고 평평한 눈금자와 스테레오 현미경을 사용하여 각 플레이트의 균사체 반경을 가장 가까운 밀리미터로 측정합니다.이 프로토콜에서, 살아있는 퇴비에서 추출은 효과가 미생물이고 영양 기반이 아니라는 것을 보여주는, 자동 분해 견본 보다는 훨씬 더 많은 R.solani 성장을 억압했습니다. 억제는 오토클레이브 제어에 비해 성장의 감소로 측정된다. 성장은 퇴비의 성숙 또는 경화기간에 의해 영향을받지 않았다.성장은 특히 vermicompost, 바람 과정 및 나무 껍질 조리법, 퇴비 방법과 조리법 재료에 의해 크게 영향을 받았다. 개발 후,이 기술은 질병 억제 특성에 대한 퇴비의 상업적 인증 후보가 될 수 있습니다.

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Research

연구

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Biology

생물학

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이 원고에서 급성 골수성 백혈병 (AML) 세포 증식에 여러 후보 유전자의 역할의 간단 하 고 신속 하 게 조사에 대 한 클러스터 정기적으로 Interspaced 짧은 구조 반복 (CRISPR) CRISPR-Cas9-기반 방법을 설명 합니다. 병렬입니다. 이 기술은 확장성 이며 다른 암 세포 라인에 적용 될 수 있습니다.

CRISPR-Cas9-기반 경쟁 분석 실험을 사용 하 여 유전 종속성의 조사

이 opsonophagocytic 죽이 분석 결과 응답 하 고 다른 치료 조건에 기반 하는 박테리아를 죽 일 phagocytic 면역 세포의 기능을 비교 하는 데 사용 됩니다. 고아 하 게,이 분석 결과 opsonin로 박테리아에 대하여 제기 하는 항 체의 효과 기 기능을 평가 하기 위한 황금 표준 역할을 합니다.

Opsonophagocytic 살해 분석 결과 세균성 병원 체에 대 한 면역학 응답을 평가 하

GPCRs가 매력적인 약물 성 표적이라는 점을 감안할 때, GPCR 리간드 스크리닝은 따라서 납 화합물의 식별및 탈판화 연구에 필수적입니다. 이러한 노력에 대해, 우리는 PRESTO-탱고, TEV 기반 기자 분석기를 사용하여 약 300 GPCRs에서 과도 β arrestin2 모집의 동시 프로파일링에 사용되는 오픈 소스 자원 플랫폼을 설명합니다.

PRESTO-탱고 분석기를 사용하여 GPCR 전체 규모의 리간드 스크리닝을 위한 β-Arrestin2 모집의 병렬 심문

2리포터 판독값을 제공하는 비드계 멀티플렉스 분석분석을 위한 유량 분석 시스템은 SARS-CoV-2에 대한 중화 IgG 및 IgM 항체를 동시에 측정할 수 있는 멀티플렉스 세론및 항체 중화 분석분석의 개발에 사용되었다.

멀티플렉스 비드 기반 유량 분석 시스템을 위한 신속한 멀티플렉스 듀얼 리포터 IgG 및 IgM SARS-CoV-2 중화 분석

학습하세요 토양 기반 식물 병원균 Rhizoctonia solani의 생물학적 방제를 위한 격판덮개 경쟁 분석법. 이 신속한 선별 방법은 퇴비의 병 억제 효과를 2-3일 내에 평가하여 농업용 퇴비 인증에 활용됩니다.

질병 억제의 빠른 예비 평가로 격판덮개 경쟁 분석 결과

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