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세포내 칼슘과 갓 고립과 그대로 마우스 대뇌 피에 막 잠재력의 동시 측정
세포내 칼슘과 갓 고립과 그대로 마우스 대뇌 피에 막 잠재력의 동시 측정
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JoVE Journal Biology
Simultaneous Measurements of Intracellular Calcium and Membrane Potential in Freshly Isolated and Intact Mouse Cerebral Endothelium

세포내 칼슘과 갓 고립과 그대로 마우스 대뇌 피에 막 잠재력의 동시 측정

Full Text
8,721 Views
09:45 min
January 20, 2019

DOI: 10.3791/58832-v

Md A. Hakim1, Erik J. Behringer1

1Department of Basic Sciences,Loma Linda University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study details protocols for isolating intact cerebral endothelial tubes and measuring endothelial calcium and membrane potential during endothelium-derived hyperpolarization. The ability to manipulate calcium and electrical signaling pharmacologically provides insights into cerebral vascular physiology, particularly in the context of cerebral blood flow regulation.

Key Study Components

Research Area

  • Cerebral vascular physiology
  • Cerebral blood flow regulation
  • Endothelial cell signaling

Background

  • This research focuses on the interplay between endothelial calcium signaling and membrane potential.
  • Understanding these mechanisms is crucial for addressing issues related to aging and chronic diseases.
  • The methods developed allow observation under physiological conditions.

Methods Used

  • Isolation of cerebral arteries and preparation of endothelial tubes
  • Mouse model for in vivo experimentation
  • Simultaneous intracellular calcium and membrane potential measurement

Main Results

  • Successful isolation of endothelial tubes while retaining function.
  • Capability to monitor intracellular signaling under physiological conditions.
  • Insights into endothelial responses to pharmacological agents.

Conclusions

  • This study demonstrates a novel technique for studying endothelial function in cerebral arteries.
  • The findings contribute to a deeper understanding of factors influencing cerebral blood flow, relevant to aging and disease processes.

Frequently Asked Questions

What is the primary goal of this study?
The study aims to develop techniques for isolating endothelial cells and measuring their signaling properties.
How are endothelial tubes isolated?
Endothelial tubes are isolated through careful dissection and enzymatic digestion of cerebral arteries.
What measurements are taken during the experiments?
Intracellular calcium levels and membrane potential of endothelial cells are measured simultaneously.
What are the implications of this research?
The findings could improve understanding of cerebral blood flow regulation and its alterations in diseases.
What experimental conditions are used for the measurements?
The experiments are conducted under physiological conditions to mimic natural environments.
What technical devices are used in the procedures?
Microscopes, micromanipulators, and photometric equipment are employed in the techniques.
Is this method applicable to other types of research?
While focused on cerebral physiology, the methods could be adapted for other vascular research areas.

여기 설명 (1) 갓 그대로 뇌 내 피 "튜브" 및 내 피 칼슘과 막 내 피 파생 hyperpolarization 동안 잠재적인의 (2) 동시 측정을 분리에 대 한 프로토콜이 있습니다. 또한, 이러한 메서드는 내 피 세포 칼슘 및 개별 또는 대화형 실험 변수로 전기 신호의 약리 튜닝 수 있습니다.

이 방법은 만성 질환의 노화 및 발달 중 뇌혈 흐름 조절과 관련이 있기 때문에 뇌혈관 생리학 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 생리적 조건하에서 본체 형태인 대뇌 동맥 내피의 세포내 칼슘과 막 전위의 동시 측정을 허용한다는 것입니다. 마우스 뇌를 격리하려면 현미경으로 두개골 위에 피부와 머리카락을 제거합니다.

차가운 칼슘이 없는 PSS로 과도한 혈액을 제거합니다. 다음으로 표준 해부 가위의 팁만 사용하여 절개를 합니다. 후두 뼈에서 시작하여 두개골의 비강 뼈를 통해 확장.

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